Peptydy miedziowe (GHK-Cu) jest cz\u0119sto dostarczany w postaci liofilizowanego (suszonego sublimacyjnie) proszku, poniewa\u017c usuni\u0119cie wody pomaga zwi\u0119kszy\u0107 stabilno\u015b\u0107 chemiczn\u0105, ograniczy\u0107 degradacj\u0119, zachowa\u0107 jako\u015b\u0107 partii podczas przechowywania oraz daje badaczom wi\u0119ksz\u0105 kontrol\u0119 nad przygotowaniem peptydu do eksperyment\u00f3w. Jest to powszechna praktyka dla wielu peptyd\u00f3w badawczych, ale ma szczeg\u00f3lne znaczenie dla peptydu miedziowego, poniewa\u017c peptydy mog\u0105 by\u0107 wra\u017cliwe w roztworach wodnych. Z czasem mog\u0105 ulega\u0107 rozpadowi poprzez procesy takie jak hydroliza (rozpad wi\u0105za\u0144 pod wp\u0142ywem wody), utlenianie (uszkodzenia chemiczne zwi\u0105zane z tlenem), reakcje wymiany metali czy stopniowe zmiany strukturalne. W suchej, liofilizowanej formie te drogi degradacji s\u0105 znacznie spowolnione.<\/p>\n
W przypadku peptydu miedziowego ma to jeszcze wi\u0119ksze znaczenie, poniewa\u017c nie jest to tylko ma\u0142y peptyd, ale r\u00f3wnie\u017c kompleks zwi\u0105zany z miedzi\u0105. Badaczom cz\u0119sto zale\u017cy na zachowaniu zar\u00f3wno struktury peptydu, jak i sposobu koordynacji miedzi, czyli utrzymania jej zwi\u0105zania w obr\u0119bie cz\u0105steczki. Czynniki takie jak woda, rozpuszczony tlen, nieodpowiednie bufory czy \u015bladowe zanieczyszczenia mog\u0105 potencjalnie wp\u0142ywa\u0107 na t\u0119 chemi\u0119 wi\u0105zania miedzi lub przyczynia\u0107 si\u0119 do degradacji. Liofilizacja pomaga ograniczy\u0107 te zmienne do momentu, gdy badacz wybierze rozpuszczalnik i bufor najlepiej dopasowane do danego eksperymentu. To jeden z powod\u00f3w, dla kt\u00f3rych dostawcy klasy badawczej cz\u0119sto oferuj\u0105 peptyd miedziowy jako niebieski liofilizowany proszek, a nie gotowy roztw\u00f3r p\u0142ynny.<\/p>\n
Kolejnym wa\u017cnym powodem jest powtarzalno\u015b\u0107, czyli uzyskiwanie sp\u00f3jnych wynik\u00f3w mi\u0119dzy eksperymentami. Materia\u0142 liofilizowany pozwala badaczom odtworzy\u0107, czyli rozpu\u015bci\u0107 peptyd do dok\u0142adnych st\u0119\u017ce\u0144 potrzebnych w badaniach kom\u00f3rkowych, materia\u0142ach biomedycznych, modelach zwierz\u0119cych czy analizach laboratoryjnych. Zwi\u0119ksza to precyzj\u0119 dawkowania i ogranicza zmienno\u015b\u0107 eksperymentaln\u0105. Wiele bada\u0144 wykorzystuj\u0105cych technologie dostarczania, takie jak liposomy, hydro\u017cele, mikronak\u0142uwanie czy rusztowania tkankowe, rozpoczyna si\u0119 w\u0142a\u015bnie od suchego peptydu z tego powodu. Badania nad formulacj\u0105 i stabilno\u015bci\u0105 r\u00f3wnie\u017c podkre\u015blaj\u0105 praktyczne korzy\u015bci wynikaj\u0105ce z pracy z peptydem miedziowym w suchej postaci.<\/p>\n
Istniej\u0105 tak\u017ce dodatkowe zalety praktyczne. Liofilizowane proszki s\u0105 zazwyczaj \u0142atwiejsze w transporcie, cz\u0119sto maj\u0105 d\u0142u\u017cszy okres trwa\u0142o\u015bci przy odpowiednim przechowywaniu i mog\u0105 by\u0107 mniej podatne na degradacj\u0119 zwi\u0105zan\u0105 z temperatur\u0105 podczas magazynowania i wysy\u0142ki. W \u015brodowiskach badawczych, gdzie liczy si\u0119 sp\u00f3jno\u015b\u0107, czynniki te mog\u0105 mie\u0107 znaczenie.<\/p>\n
Z mechanistycznego punktu widzenia wa\u017cne jest zrozumienie, \u017ce liofilizacja nie sprawia, \u017ce peptyd staje si\u0119 \u201esilniejszy\u201d ani z natury bardziej aktywny biologicznie. Jej celem jest g\u0142\u00f3wnie ochrona integralno\u015bci materia\u0142u przed u\u017cyciem. Nie oznacza r\u00f3wnie\u017c automatycznie, \u017ce produkt ma jako\u015b\u0107 farmaceutyczn\u0105 lub jest sterylny, je\u015bli nie zosta\u0142o to potwierdzone oddzielnymi testami. Peptyd miedziowy wykorzystywany w badaniach jest powszechnie oferowany w formie liofilizowanej przez dostawc\u00f3w takich jak semaxpolska w\u0142a\u015bnie z powod\u00f3w zwi\u0105zanych ze stabilno\u015bci\u0105 i przygotowaniem. Forma liofilizowana powinna by\u0107 rozumiana jako praktyczny wyb\u00f3r dotycz\u0105cy przechowywania i przygotowania, a nie jako samodzielny dow\u00f3d wy\u017cszej skuteczno\u015bci biologicznej.<\/p>\n
Peptydy miedziowe (GHK-Cu) mo\u017ce by\u0107 stosunkowo stabilny w roztworze wodnym w kontrolowanych warunkach, jednak badania i chemia peptyd\u00f3w wskazuj\u0105, \u017ce po rozpuszczeniu jest zwykle mniej stabilny ni\u017c podczas przechowywania w postaci liofilizowanego (suszonego sublimacyjnie) proszku, szczeg\u00f3lnie w d\u0142u\u017cszej perspektywie. Jego stabilno\u015b\u0107 w roztworze zale\u017cy w du\u017cym stopniu od takich czynnik\u00f3w jak u\u017cyty rozpuszczalnik, pH (czyli kwasowo\u015b\u0107 lub zasadowo\u015b\u0107 roztworu), si\u0142a jonowa (zawarto\u015b\u0107 soli), temperatura, ekspozycja na \u015bwiat\u0142o oraz to, czy roztw\u00f3r jest przeznaczony do natychmiastowego u\u017cycia czy d\u0142u\u017cszego przechowywania.<\/p>\n
W kr\u00f3tkoterminowych zastosowaniach laboratoryjnych stabilno\u015b\u0107 w \u015brodowisku wodnym jest cz\u0119sto uznawana za wystarczaj\u0105c\u0105. Dlatego wiele bada\u0144 rozpuszcza peptyd miedziowy w sterylnej wodzie lub roztworach buforowych bezpo\u015brednio przed eksperymentami. Jednak po rozpuszczeniu z czasem mog\u0105 rozpocz\u0105\u0107 si\u0119 r\u00f3\u017cne procesy degradacyjne. Mog\u0105 obejmowa\u0107 hydroliz\u0119, w kt\u00f3rej wi\u0105zania peptydowe stopniowo rozpadaj\u0105 si\u0119 w wodzie; utlenianie, gdzie reaktywny tlen mo\u017ce uszkadza\u0107 cz\u0105steczk\u0119; adsorpcj\u0119, gdy bardzo niskie st\u0119\u017cenia peptydu przywieraj\u0105 do powierzchni takich jak prob\u00f3wki lub szk\u0142o; a w niekt\u00f3rych przypadkach r\u00f3wnie\u017c zmiany koordynacji miedzi, czyli sposobu, w jaki mied\u017a jest utrzymywana w kompleksie. Z tych powod\u00f3w wiele protoko\u0142\u00f3w badawczych zaleca przygotowywanie \u015bwie\u017cych roztwor\u00f3w, gdy to mo\u017cliwe, albo przechowywanie ma\u0142ych porcji po rekonstytucji jedynie przez ograniczony czas.<\/p>\n
Kilka bada\u0144 formulacyjnych sugeruje, \u017ce specjalistyczne systemy dostarczania mog\u0105 poprawia\u0107 stabilno\u015b\u0107 w \u015brodowisku wodnym. Nale\u017c\u0105 do nich liposomy, hydro\u017cele, no\u015bniki oparte na cieczach jonowych oraz matryce polimerowe, kt\u00f3re mog\u0105 chroni\u0107 peptyd przed stresem \u015brodowiskowym. Niekt\u00f3re badania pokazuj\u0105 tak\u017ce, \u017ce peptyd miedziowy zachowuje aktywno\u015b\u0107 biologiczn\u0105 przy bardzo niskich st\u0119\u017ceniach \u2014 na przyk\u0142ad w zakresie nanomolarnym do mikromolarnego \u2014 w uk\u0142adach buforowych w standardowych ramach czasowych eksperyment\u00f3w, co wspiera jego u\u017cyteczn\u0105 kr\u00f3tkoterminow\u0105 stabilno\u015b\u0107 w kontrolowanych warunkach.<\/p>\n
Badacze zazwyczaj interpretuj\u0105 to tak, \u017ce peptyd miedziowy jest \u201ewystarczaj\u0105co stabilny do zastosowa\u0144 eksperymentalnych\u201d, je\u015bli jest odpowiednio przygotowany i u\u017cywany, a nie \u017ce pozostaje stabilny bezterminowo po rozpuszczeniu. To wa\u017cne rozr\u00f3\u017cnienie. \u015awie\u017co przygotowany roztw\u00f3r u\u017cyty tego samego dnia to co\u015b zupe\u0142nie innego ni\u017c roztw\u00f3r przechowywany przez d\u0142u\u017cszy czas w postaci p\u0142ynnej.<\/p>\n
Samo wi\u0105zanie miedzi mo\u017ce przyczynia\u0107 si\u0119 do stabilno\u015bci funkcjonalnej, poniewa\u017c skoordynowana mied\u017a mo\u017ce pomaga\u0107 utrzymywa\u0107 pewne w\u0142a\u015bciwo\u015bci kompleksu. Nie eliminuje to jednak typowych ryzyk zwi\u0105zanych z przechowywaniem peptyd\u00f3w w roztworze. Stabilno\u015b\u0107 nadal w du\u017cej mierze zale\u017cy od sposobu przygotowania i obchodzenia si\u0119 z roztworem.<\/p>\n
Znaczenie mog\u0105 mie\u0107 r\u00f3wnie\u017c dodatkowe czynniki praktyczne. Na przyk\u0142ad ch\u0142odzenie, cykle zamra\u017cania i rozmra\u017cania, wielokrotne otwieranie pojemnika oraz sk\u0142ad buforu mog\u0105 wp\u0142ywa\u0107 na to, jak dobrze roztw\u00f3r zachowuje integralno\u015b\u0107 w czasie. W badaniach szczeg\u00f3\u0142y te mog\u0105 wp\u0142ywa\u0107 na powtarzalno\u015b\u0107 wynik\u00f3w, dlatego stabilno\u015b\u0107 cz\u0119sto traktuje si\u0119 jako element projektu eksperymentu, a nie sta\u0142\u0105 cech\u0119.<\/p>\n
Peptyd miedziowy stosowany w badaniach jest cz\u0119sto dostarczany jako suchy proszek przez dostawc\u00f3w takich jak semaxpolska, cz\u0119\u015bciowo dlatego, \u017ce stabilno\u015b\u0107 w roztworze silnie zale\u017cy od sposobu przygotowania i przechowywania przez u\u017cytkownika. Stabilno\u015b\u0107 roztworu nale\u017cy ocenia\u0107 w kontek\u015bcie konkretnego buforu, st\u0119\u017cenia i warunk\u00f3w przechowywania stosowanych w danym eksperymencie, a nie zak\u0142ada\u0107, \u017ce jest uniwersalna.<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n
Jakie warunki przechowywania s\u0105 zalecane w protoko\u0142ach badawczych?<\/strong><\/p>\n Protoko\u0142y badawcze zazwyczaj zalecaj\u0105 przechowywanie peptydy miedziowe (GHK-Cu) \u00a0w postaci liofilizowanej w ch\u0142odnych i suchych warunkach, chronionego przed \u015bwiat\u0142em oraz szczelnie zabezpieczonego przed wilgoci\u0105. Ni\u017csze temperatury s\u0105 zwykle preferowane dla d\u0142ugoterminowej stabilno\u015bci. Ch\u0142odzenie jest cz\u0119sto stosowane przy kr\u00f3tszym przechowywaniu, natomiast zamra\u017canie, cz\u0119sto oko\u0142o \u221220\u00b0C, jest powszechnie rekomendowane do d\u0142u\u017cszego zabezpieczenia peptyd\u00f3w badawczych. G\u0142\u00f3wnym celem jest ograniczenie ekspozycji na ciep\u0142o, wilgotno\u015b\u0107, utlenianie oraz powtarzaj\u0105ce si\u0119 zmiany temperatury, poniewa\u017c wszystkie te czynniki mog\u0105 z czasem zwi\u0119ksza\u0107 degradacj\u0119.<\/p>\n W przypadku zrekonstytuowanego peptydu miedziowego, czyli po rozpuszczeniu go w roztworze, protoko\u0142y cz\u0119sto zalecaj\u0105 przygotowywanie wy\u0142\u0105cznie ilo\u015bci potrzebnej do natychmiastowego u\u017cycia albo podzielenie roztworu na ma\u0142e aliquoty do przechowywania. Pomaga to unika\u0107 wielokrotnych cykli zamra\u017cania i rozmra\u017cania, czyli powtarzanego mro\u017cenia i ogrzewania tej samej pr\u00f3bki. Takie cykle mog\u0105 wp\u0142ywa\u0107 na integralno\u015b\u0107 peptydu i wprowadza\u0107 zmienno\u015b\u0107 do eksperyment\u00f3w. W zale\u017cno\u015bci od u\u017cytego rozpuszczalnika i projektu badania zrekonstytuowane roztwory mog\u0105 by\u0107 ch\u0142odzone do kr\u00f3tkoterminowego u\u017cycia, natomiast zamro\u017cone aliquoty s\u0105 cz\u0119sto preferowane przy d\u0142u\u017cszym przechowywaniu. Badacze zwykle unikaj\u0105 wielokrotnego rozmra\u017cania i ponownego u\u017cywania jednego roztworu macierzystego, poniewa\u017c mo\u017ce to zwi\u0119ksza\u0107 ryzyko rozpadu.<\/p>\n Cz\u0119sto podkre\u015bla si\u0119 r\u00f3wnie\u017c ochron\u0119 przed \u015bwiat\u0142em. Jest to szczeg\u00f3lnie istotne dla kompleks\u00f3w zawieraj\u0105cych mied\u017a, takich jak peptyd miedziowy, poniewa\u017c ekspozycja na \u015bwiat\u0142o w pewnych warunkach mo\u017ce sprzyja\u0107 utlenianiu lub stresowi fotochemicznemu, co z czasem mo\u017ce zmienia\u0107 struktur\u0119 cz\u0105steczki. Dob\u00f3r buforu to kolejny wa\u017cny czynnik. Wiele protoko\u0142\u00f3w badawczych wykorzystuje bufory o neutralnym lub zbli\u017conym do fizjologicznego pH \u2014 czyli warunkach podobnych do wyst\u0119puj\u0105cych w organizmie \u2014 chyba \u017ce dana formulacja wymaga innych parametr\u00f3w.<\/p>\n W praktyce te zalecenia wynikaj\u0105 z og\u00f3lnych zasad post\u0119powania z peptydami, cz\u0119sto \u0142\u0105czonych z instrukcjami zawartymi w certyfikacie analizy dostawcy lub dokumentacji produktu. Badania nad stabilno\u015bci\u0105 peptyd\u00f3w i produkt\u00f3w liofilizowanych generalnie wspieraj\u0105 takie praktyki post\u0119powania.<\/p>\n Uwzgl\u0119dnia si\u0119 r\u00f3wnie\u017c dodatkowe kwestie praktyczne. Na przyk\u0142ad badacze mog\u0105 przechowywa\u0107 peptydy w szczelnych pojemnikach, stosowa\u0107 prob\u00f3wki low-binding, aby ograniczy\u0107 straty peptydu przez adsorpcj\u0119 do powierzchni, oraz minimalizowa\u0107 ekspozycj\u0119 na temperatur\u0119 pokojow\u0105 podczas pracy. Nawet drobne czynniki, takie jak dostawanie si\u0119 wilgoci do fiolki podczas wielokrotnego otwierania, mog\u0105 wp\u0142ywa\u0107 na d\u0142ugoterminow\u0105 stabilno\u015b\u0107, dlatego ostro\u017cne obchodzenie si\u0119 z materia\u0142em ma znaczenie.<\/p>\n Z mechanistycznego punktu widzenia te praktyki przechowywania maj\u0105 na celu zachowanie chemicznej to\u017csamo\u015bci i integralno\u015bci peptydu. Nie sprawiaj\u0105, \u017ce peptyd staje si\u0119 biologicznie bardziej aktywny, lecz pomagaj\u0105 utrzyma\u0107 go w stanie przewidzianym do zastosowa\u0144 badawczych. Peptyd miedziowy<\/strong> stosowany w badaniach jest dost\u0119pny u dostawc\u00f3w takich jak semaxpolska, kt\u00f3rzy cz\u0119sto dostarczaj\u0105 wytyczne dotycz\u0105ce przechowywania zgodne z tymi standardowymi praktykami. Wa\u017cne jest, aby warunki przechowywania by\u0142y zgodne z dokumentacj\u0105 konkretnej partii i wymaganiami eksperymentu, a nie opiera\u0142y si\u0119 wy\u0142\u0105cznie na og\u00f3lnych zasadach obchodzenia si\u0119 z peptydami.<\/p>\n Jak temperatura i pH wp\u0142ywaj\u0105 na stabilno\u015b\u0107 peptydu miedziowego?<\/strong><\/p>\n Temperatura i pH mog\u0105 znacz\u0105co wp\u0142ywa\u0107 na stabilno\u015b\u0107 peptydy miedziowe (GHK-Cu) , poniewa\u017c oddzia\u0142uj\u0105 zar\u00f3wno na sam peptyd, jak i na spos\u00f3b, w jaki mied\u017a pozostaje zwi\u0105zana w kompleksie. Wy\u017csze temperatury zazwyczaj przyspieszaj\u0105 procesy chemicznego rozpadu, w tym hydroliz\u0119 (czyli stopniowe rozrywanie wi\u0105za\u0144 peptydowych w obecno\u015bci wody) oraz utlenianie (uszkodzenia chemiczne zwi\u0105zane z tlenem). Z tego powodu zwykle preferowane s\u0105 ch\u0142odniejsze warunki przechowywania. Jest to zgodne ze standardowymi zasadami stabilno\u015bci peptyd\u00f3w i stanowi jeden z powod\u00f3w, dla kt\u00f3rych powszechnie stosuje si\u0119 przechowywanie liofilizowane w niskich temperaturach.<\/p>\n pH, czyli miara kwasowo\u015bci lub zasadowo\u015bci roztworu, r\u00f3wnie\u017c mo\u017ce wp\u0142ywa\u0107 na stabilno\u015b\u0107. Oddzia\u0142uje na \u0142adunek elektryczny peptydu, spos\u00f3b wi\u0105zania miedzi oraz prawdopodobie\u0144stwo wyst\u0119powania okre\u015blonych dr\u00f3g degradacji. Peptyd miedziowy<\/strong> wi\u0105\u017ce mied\u017a poprzez specyficzne interakcje koordynacyjne, co oznacza, \u017ce jon miedzi utrzymywany jest przez okre\u015blone wi\u0105zania chemiczne. Interakcje te mog\u0105 zmienia\u0107 si\u0119 zale\u017cnie od pH. Silnie kwa\u015bne lub mocno zasadowe warunki mog\u0105 zwi\u0119ksza\u0107 ryzyko zaburze\u0144 wi\u0105zania miedzi, obni\u017cenia stabilno\u015bci lub rozpadu peptydu, natomiast warunki zbli\u017cone do neutralnego pH s\u0105 og\u00f3lnie uznawane za bardziej sprzyjaj\u0105ce utrzymaniu integralno\u015bci strukturalnej. Badania dotycz\u0105ce struktury i termodynamiki peptydu miedziowego potwierdzaj\u0105 znaczenie warunk\u00f3w \u015brodowiskowych dla zachowania tej stabilno\u015bci.<\/p>\n Temperatura i pH mog\u0105 r\u00f3wnie\u017c dzia\u0142a\u0107 \u0142\u0105cznie. Na przyk\u0142ad wy\u017csza temperatura po\u0142\u0105czona z niekorzystnym pH mo\u017ce powodowa\u0107 wi\u0119ksz\u0105 niestabilno\u015b\u0107 ni\u017c ka\u017cdy z tych czynnik\u00f3w osobno. Staje si\u0119 to szczeg\u00f3lnie wa\u017cne w formulacjach wodnych, zrekonstytuowanych roztworach peptydowych oraz systemach kontrolowanego uwalniania, gdzie peptyd mo\u017ce przez d\u0142u\u017cszy czas pozostawa\u0107 nara\u017cony na takie warunki. Dlatego badania nad formulacjami cz\u0119sto k\u0142ad\u0105 du\u017cy nacisk na projektowanie bufor\u00f3w, \u015brodowisko uwalniania oraz systemy dostarczania reaguj\u0105ce na pH.<\/p>\n Czynniki te mog\u0105 r\u00f3wnie\u017c wp\u0142ywa\u0107 na praktyczne wyniki bada\u0144. Na przyk\u0142ad zmiany pH mog\u0105 oddzia\u0142ywa\u0107 nie tylko na stabilno\u015b\u0107 chemiczn\u0105, ale tak\u017ce na rozpuszczalno\u015b\u0107, czyli zdolno\u015b\u0107 peptydu do pozostawania w roztworze. Wahania temperatury mog\u0105 wp\u0142ywa\u0107 na trwa\u0142o\u015b\u0107 podczas przechowywania, natomiast nieodpowiednie warunki pH mog\u0105 zmienia\u0107 powtarzalno\u015b\u0107 dzia\u0142ania peptydu pomi\u0119dzy eksperymentami. Z tego wzgl\u0119du stabilno\u015b\u0107 jest cz\u0119sto traktowana jako element rozwoju metod, a nie wy\u0142\u0105cznie kwestia przechowywania.<\/p>\n Z mechanistycznego punktu widzenia nie oznacza to, \u017ce peptyd miedziowy<\/strong> jest wyj\u0105tkowo delikatny. Raczej, podobnie jak wiele biologicznie aktywnych peptyd\u00f3w, ma okre\u015blone warunki \u015brodowiskowe, w kt\u00f3rych jego stabilno\u015b\u0107 jest lepiej zachowana. Peptyd miedziowy<\/strong> stosowany w badaniach jest dost\u0119pny u dostawc\u00f3w takich jak semaxpolska, kt\u00f3rzy cz\u0119sto podaj\u0105 zalecenia dotycz\u0105ce post\u0119powania oparte na tych zasadach. Warto pami\u0119ta\u0107, \u017ce wp\u0142yw temperatury i pH zale\u017cy od konkretnego uk\u0142adu eksperymentalnego i najlepiej potwierdza\u0107 go w rzeczywistych warunkach danego badania, zamiast zak\u0142ada\u0107 jego uniwersalne zastosowanie.<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n Badenhorst, T., Svirskis, D., & Wu, Z. (2016). Physicochemical characterization of native glycyl-L-histidyl-L-lysine tripeptide for wound healing and anti-aging: A preformulation study for dermal delivery. Pharmaceutical Development and Technology, 21<\/em>(2), 152\u2013160. https:\/\/doi.org\/10.3109\/10837450.2014.979944<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Dymek, M., Olechowska, K., H\u0105c-Wydro, K., & Sikora, E. (2023). Liposomes as carriers of GHK-Cu tripeptide for cosmetic application. Pharmaceutics, 15<\/em>(10), 2485. https:\/\/doi.org\/10.3390\/pharmaceutics15102485<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Alshammari, N., & Platts, J. A. (2020). Theoretical study of copper binding to GHK peptide. Computational Biology and Chemistry, 86<\/em>, 107265. https:\/\/doi.org\/10.1016\/j.compbiolchem.2020.107265<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Pickart, L., Vasquez-Soltero, J. M., & Margolina, A. (2015). GHK peptide as a natural modulator of multiple cellular pathways in skin regeneration. BioMed Research International, 2015<\/em>, 648108. https:\/\/doi.org\/10.1155\/2015\/648108<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Hureau, C., Eury, H., Guillot, R., Bijani, C., Sayen, S., Solari, P. L., Guillon, E., Faller, P., & Dorlet, P. (2011). X-ray and solution structures of Cu(II) GHK and Cu(II) DAHK complexes: Influence on their redox properties. Chemistry \u2013 A European Journal, 17<\/em>(36), 10151\u201310160. https:\/\/doi.org\/10.1002\/chem.201100751<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Trapaidze, A., Hureau, C., Bal, W., Winterhalter, M., & Faller, P. (2012). Thermodynamic study of Cu2+ binding to the DAHK and GHK peptides by isothermal titration calorimetry (ITC) with the weaker competitor glycine. Journal of Biological Inorganic Chemistry, 17<\/em>(1), 37\u201347. https:\/\/doi.org\/10.1007\/s00775-011-0824-5<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Liu, T., Liu, Y., Zhao, X., Zhang, L., Wang, W., Bai, D., Liao, Y., Wang, Z., Wang, M., & Zhang, J. (2024). Thermodynamically stable ionic liquid microemulsions pioneer pathways for topical delivery and peptide application. Bioactive Materials, 32<\/em>, 502\u2013513. https:\/\/doi.org\/10.1016\/j.bioactmat.2023.10.002<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Og\u00f3rek, K., Nowak, K., Wadych, E., Ruzik, L., Timerbaev, A. R., & Matczuk, M. (2025). Are we ready to measure skin permeation of modern antiaging GHK-Cu tripeptide encapsulated in liposomes? Molecules, 30<\/em>(1), 136. https:\/\/doi.org\/10.3390\/molecules30010136<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Li, H., Low, Y. S., Chong, H. P., Zin, M. T., Lee, C. Y., Li, B., Leolukman, M., & Kang, L. (2015). Microneedle-mediated delivery of copper peptide through skin. Pharmaceutical Research, 32<\/em>(8), 2678\u20132689. https:\/\/doi.org\/10.1007\/s11095-015-1652-z<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\n Freedman, J. H., Pickart, L., Weinstein, B., Mims, W. B., & Peisach, J. (1982). Structure of the glycyl-L-histidyl-L-lysine-copper(II) complex in solution. Biochemistry, 21<\/em>(19), 4540\u20134544. https:\/\/doi.org\/10.1021\/bi00262a004<\/a><\/span><\/p>\n<\/li>\nReferences<\/h4>\n
\n