Peptidy a bielkoviny vs. aminokyseliny: najdôležitejšie rozdiely

Aminokyseliny sú základnými molekulárnymi jednotkami, z ktorých vznikajú peptidy a bielkoviny. Peptidy sú reťazce aminokyselinových zvyškov spojených predovšetkým peptidovými väzbami, zatiaľ čo bielkoviny sa skladajú z jedného alebo viacerých polypeptidových reťazcov, ktorých sekvencia, štruktúra, vzájomné interakcie, biologické spracovanie a funkčný kontext ovplyvňujú ich identitu. Všetky tieto skupiny sú chemicky prepojené, ale tieto pojmy sa nedajú použiť zamenne.

Rozdiel medzi voľným aminokyselinou a peptidom sa dá pomerne ľahko definovať: spojenie aminokyselín prostredníctvom peptidových väzieb vedie k vzniku novej molekuly s určitou sekvenciou a spôsobom spojenia atómov. Hranica medzi medzi peptidom a bielkovinou je oveľa menej jednoznačná.

Dĺžka reťazca je užitočným orientačným kritériom. V vzdelávacích materiáloch alebo v niektorých klasifikačných systémoch sa možno stretnúť napríklad s dohodnutou hranicou približne 50 aminokyselinových zvyškov. Vedecká literatúra však nepoužíva jeden univerzálny limit. Reťazec pozostávajúci z desiatich zvyškov bol opísaný ako miniproteín, štrukturally usporiadanú molekulu pozostávajúcu z 29 zvyškov definovali ako polypeptid, a niektoré bielizny sa môžu nachádzať vo veľkej miere v neusporiadanom stave namiesto toho, aby prijali jednu trvalú, kompaktnú štruktúru. [1] [2] [3]

Tieto príklady ilustrujú dôležitý princíp: dĺžka sekvencie poskytuje dôležité informácie, ale sama o sebe nestačí na jednoznačnú klasifikáciu každého aminokyselinového reťazca.

Pre lepšie rozlíšenie peptidy, polypeptidy a bielkoviny, je vhodné zohľadniť hneď niekoľko vlastností naraz:

• počet aminokyselinových zvyškov;
• ich poradie;
• či je molekula lineárna, cyklická, rozvetvená alebo viacreťazcová;
• spôsob kovalentných väzieb;
• experimentálne potvrdenú štruktúru;
• posttranslačné alebo chemické modifikácie;
• spôsob biologického spracovania molekuly;
• terminológiu, ktorá sa v odbornej literatúre používa pre konkrétnu molekulu.

V tomto článku vysvetľujeme, aký vzťah majú medzi sebou aminokyseliny, peptidy, polypeptidy a bielkoviny, ako dĺžka reťazca ovplyvňuje používanú terminológiu, ako peptidové väzby vytvárajú reťazce a prečo je dôležité poznať sekvencie, molekulárnej štruktúry a experimentálne potvrdených vlastností je informatívnejšia než samotný názov kategórie.

Aké sú rozdiely medzi aminokyselinami, peptidmi a bielkovinami?

Aminokyseliny sú jednotlivé stavebné jednotky

Typický alfa-aminokyselina obsahuje centrálny atóm uhlíka spojený s aminoskupinou, karboxylovou skupinou, atómom vodíka a premenlivým postranným reťazcom.

Práve bočný reťazec odlišuje jednu aminokyselinu od druhej.

V podmienkach, ktoré prevládajú v mnohých biologických prostrediach, sa amínové a karboxylové skupiny často vyskytujú v nabitých formách. Populárny neutrálny štruktúrny vzorec používaný v základnej chémii je teda užitočným spôsobom znázornenia aminokyseliny, ale nemusí nevyhnutne reprezentovať jej prevládajúci iónový stav za všetkých biologických podmienok.

Bočné reťazce jednotlivých aminokyselín sa líšia okrem iného:

• veľkosťou;
• elektrickým nábojom;
• s polaritou;
• hydrofóbnosťou;
• schopnosťou vytvárať vodíkové väzby;
• priestorovými vlastnosťami;
• chemickou reaktivitou.

Napríklad glycín má ako postranný reťazec jediný atom vodíka, preto je štrukturalne menší ako ostatné štandardné aminokyseliny. Cysteín naproti tomu obsahuje postranný reťazec s atómom síry, ktorý sa môže účastniť tvorby disulfidových mostíkov.

Ostatné aminokyseliny môžu obsahovať aromatické, kyslé, zásadité, polárne alebo predovšetkým nepolárne bočné reťazce.

Tieto rozdiely pomáhajú pochopiť, prečo nahradenie jednej aminokyseliny inou môže zmeniť vlastnosti peptidu alebo bielkoviny. Kostra molekuly môže byť naďalej spojená rovnakým typom peptidových väzieb, ale chemické vlastnosti vyplývajúce z prítomnosti konkrétnych postranných reťazcov sa menia.

Aminokyselina sa môže vyskytovať a zúčastňovať na metabolizme aj nezávisle od peptidu alebo bielkoviny.

Voľné aminokyseliny sú samostatné molekuly.

Po začlenení do peptidového alebo bielkovinového reťazca sa jednotlivé jednotky presnejšie nazývajú aminokyselinové zvyšky.

V bežnej reči je tvrdenie, že bielkovina je „reťazec aminokyselín”, zrozumiteľné. Z hľadiska štrukturálnej chémie je však presnejší výraz „reťazec aminokyselinových zvyškov”, pretože zaradenie aminokyseliny do reťazca mení jej chemický kontext.

Peptidy obsahujú aminokyseliny spojené peptidovými väzbami

V typovej peptidovej kostre je uhlíkový atom karbonylovej skupiny pochádzajúcej z karboxylovej skupiny jedného zvyšku spojený s atomom dusíka viazaným na nasledujúci zvyšok.

Toto kovalentné amidové spojenie sa nazýva peptidovou vazbou.

Spojenie dvoch zvyškov vedie k vzniku dipeptidu.

Tri zvyšky tvoria tripeptid.

Štyri tvoria tetrapeptid, a ďalšie predlžovanie reťazca vedie k vzniku čoraz dlhších peptidov a polypeptidov založených na rovnakom všeobecnom type chemickej kostry.

Vznikajúca molekula je niečím viac než len súborom svojich zložiek.

Zmes obsahujúca samostatné molekuly glycínu a alanínu sa chemicky líši od dipeptidu glycylalaníny.

Spojená molekula má:

• určitú sekvenciu;
• definované kovalentné väzby;
• špecifické koncové skupiny;
• vlastnú molekulovú hmotnosť;
• možné konformácie;
• chemické vlastnosti iné ako vlastnosti jednotlivých aminokyselín.

Obrátenie poradia vedie k vzniku alanylglycín.

Glycylalanín a alanylglycín obsahujú rovnaké druhy aminokyselín, ale majú inú sekvenciu.

Tento jednoduchý príklad ukazuje jednu zo základných zásad chémie peptidov:

Aminokyselinové zloženie nie je to isté ako aminokyselinová sekvencia.

Peptidové väzby majú taktiež charakteristické štruktúrne vlastnosti. Ich elektrónové usporiadanie obmedzuje otáčanie okolo väzby uhlík – dusík v kostre, zatiaľ čo susedné väzby zodpovedajú za značnú časť konformačnej pružnosti reťazca.

Eperimentálne a výpočtové štúdie ukazujú, že peptidová skupina je približne plochá, hoci sú možné malé odchýlky od ideálnej planárnosti. [4]

Bielkoviny obsahujú jeden alebo viac polipeptidových reťazcov

Bielkovina sa zvyčajne chápe ako biologická makromolekula zložená z jedného alebo viacerých polypeptidových reťazcov.

Tieto reťazce môžu vytvárať:

• čierne globulárne štruktúry;
• predĺžené štruktúry;
• štruktúry súvisiace s membránami;
• flexibilné regióny;
• vnútorne neusporiadané regióny;
• komplexy zložené z viacerých reťazcov;
• kombinácie rôznych štruktúrnych prvkov.

Niektoré bielidlá obsahujú tiež pripojené sacharidy, lipidy, ióny kovov, protetické skupiny, kovalentné modifikácie alebo iné s nimi spojené zložky.

Označenie danej molekuly za bielkovinu preto zvyčajne poskytuje viac informácií než len konštatovanie prítomnosti peptidových väzieb.

Tento pojem umiestňuje molekulu do širšieho v štrukturálnom a biologickom kontexte.

To však neznamená, že každá molekula označená ako bielkovina musí mať:

• určitú minimálnu dĺžku;
• jednu trvalo pevnú štruktúru;
• iba jeden polypeptidový reťazec;
• enzymatickú aktivitu;
• jeden určitý druh biologickej funkcie.

Dobrým príkladom je bielkovina KISS1.

Vedci využili okrem iného nukleárnu magnetickú rezonanciu a malouhlhové röntgenové rozptyl, aby charakterizovali KISS1 ako vnútorne neusporiadaný proteín, ktorý je o niečo natiahnutejší ako typické štatistické polymérne vlnko. Jeho klasifikácia ako proteínu teda nezávisí od prítomnosti jednej kompaktnej a stálej štruktúry. [3]

Aminokyseliny, peptidy a bielidlá – porovnanie

Tabuľka uvádza konvenčné rozdiely a nestanovuje jednu oficiálnu hranicu platnú pre všetky molekuly.

Príklady krátkych usporiadaných molekúl a vnútorne neusporiadaných proteínov ukazujú, kde zjednodušené definície vyžadujú dodatočné vysvetlenie. [1] [2] [3]

Polipeptyd

Keď sa mnoho aminokyselinových zvyškov spojí opakujúcou sa kostrou obsahujúcou peptidové väzby, vzniká polypeptid.

Bielkovina môže obsahovať jeden polypeptidový reťazec alebo niekoľko reťazcov spojených do väčšej štruktúry.

Tieto pojmy teda zdôrazňujú trochu iné vlastnosti:

polypeptid vzťahuje sa predovšetkým na chemickú štruktúru reťazca;

bielkovina zvyčajne opisuje kompletnú biologickú molekulu alebo molekulárny komplex.

Toto rozlíšenie je užitočné pri čítaní vedeckých publikácií.

V jednej práci môžu autori opísať syntézu polypeptidu pred určením jeho priestorovej štruktúry alebo biologickej aktivity. V inej môžu analyzovať bielkovinu zloženú z niekoľkých polypeptidových reťazcov.

V žiadnom z týchto prípadov to neznamená zmenu základnej chémie aminokyselín.

V štúdii porovnávajúcej bakteriálnu expresiu so syntézou peptidov na pevnej fáze sa analyzovali 20- až 40-zvyškové „polypeptidy a minibielkoviny”. Použitá terminológia ukazuje, že sa tieto pojmy môžu čiastočne prekrývať v závislosti od dĺžky, štrukturálnych vlastností a vedeckého kontextu. [5]

Dĺžka reťaze verzus klasifikácia

Čo znamenajú dipeptid, tripeptid, oligopeptid a polypeptid?

Dipeptid obsahuje dva aminokyselinové zvyšky.

Tripeptid obsahuje tri.

Podobne tetrapeptid a pentapeptid obsahujú, resp., štyri a päť zvyškov.

Tieto názvy umožňujú presne určiť počet zvyškov, ak sa vzťahujú na celý analyzovaný reťazec.

Oligopeptid zvyčajne znamená pomerne krátky reťazec.

Polypeptid zdôrazňuje prítomnosť mnohých aminokyselinových zvyškov v jednom reťazci a často, aj keď nie vždy, sa používa v súvislosti s dlhšími sekvenciami.

Číselné hranice medzi termínmi ako oligopeptid, peptid a polypeptid sa líšia v závislosti od disciplíny a publikácie.

Preto je skutočná sekvencia alebo autormi uvedený počet rezíduí spoľahlivejší než predpoklad, že všetci výskumníci používajú rovnakú konvenciu.

V typickom nerozvetvenom, lineárnom reťazci obsahujúcom N Reszt účinkuje:

n − 1 peptidových väzieb v kostre.

Tripeptid teda obsahuje tri zvyšky, ale dve peptidové väzby.

Otvorený reťazec zložený z desiatich zvyškov má deväť takýchto väzieb.

Táto závislosť sa týka jedného otvoreného reťazca.

Cyklický peptid uzavretý spojením N- a C-konca má dodatočnú väzbu uzatvárajúcu kostru, preto pri n zvyškoch obsahuje n peptidových väzieb v kostre.

Vzťahy vyskytujúce sa medzi postrannými reťazcami sa musia analyzovať samostatne.

Predstavuje 50 aminokyselín hranicu medzi peptidom a bielkovinou?

Dĺžka približne 50 zvyškov aminokyselín využíva sa ako praktická vzdelávacia konvencia, ktorá umožňuje odlišovať peptidy od bielkovín.

Nie je to však univerzálny chemický zákon.

Prechod od 50 do 51 zvyškov nespôsobuje žiadnu náhlu chemickú premenu, ktorá by automaticky menila peptid na bielkovinu.

Jednotlivé vedné disciplíny aplikujú tieto pojmy mierne odlišným spôsobom a niektoré molekuly si zachovali historicky zaužívané názvy, ktoré nezodpovedajú jednoduchému číselnému limitu.

Dobrým príkladom je CLN025.

CLN025 obsahuje iba desať zvyškov, a napriek tomu ho vedci označili ako miniproteín a analyzovali jeho štruktúru beta-hairpin pomocou spektroskopie a molekulárnej dynamiky. Malá dĺžka mu nebránila v prijatí usporiadanej konformácie za skúmaných podmienok. [1]

To neznamená, že každý peptid zložený z desiatich zvyškov treba nazývať bielkovinou.

Ukazuje však, prečo príliš kategorické vyhlásenia, ako napríklad:

„Každé bielkovina obsahuje viac ako 50 aminokyselín”

alebo

„Každý reťazec kratší ako 50 aminokyselín je neusporiadaný peptid”

sú príliš veľkým zjednodušením.

Presnejším prístupom je považovať počet zvyškov za jednu z viacerých vlastností opísaných pre molekulu.

Krátky peptid možno označiť aj ako polypeptid

Ďalším dobrým príkladom je kalata B1.

V pôvodnej štrukturálnej štúdii bola táto 29-zvyšková rastlinná molekula opísaná ako polypeptid, potvrdila sa jej cyklická kostra a preskúmala sa jej trojrozmerná štruktúra. [2]

Spája teda:

• relatívne krátku sekvenciu;
• cyklickú architektúru kostry;
• dodatočné kovalentné obmedzenia;
• usporiadanú priestorovú štruktúru.

Termín polypeptid preto nemusí nutne označovať veľmi veľkú molekulu.

V závislosti od kontextu môže jednoducho zdôrazňovať, že analyzovaná molekula je reťazcom aminokyselinových zvyškov.

Preto sa pri interpretácii vedeckej literatúry oplatí preveriť skutočnú sekvenciu, počet zvyškov, molekulárnu architektúru a experimentálne výsledky namiesto pripisovania dodatočného významu výlučne použitému názvu.

Počet zvyškov a molekulová hmotnosť sú dve rôzne miery

Liczba reszt określa, ile jednostek aminokwasowych znajduje się w cząsteczce.

Masa cząsteczkowa opisuje natomiast masę całej cząsteczki na poziomie molekularnym.

Wartości te są ze sobą powiązane, ale nie są równoważne.

Poszczególne reszty aminokwasowe mają różne masy. Dwa łańcuchy zawierające tę samą liczbę reszt mogą więc mieć różną masę cząsteczkową, jeśli różnią się sekwencją.

Modyfikacje chemiczne również mogą wpływać na masę.

Przyłączenie węglowodanu, lipidu, grupy fosforanowej, modyfikacji końcowej lub innego składnika może zwiększyć masę cząsteczki bez zwiększenia liczby aminokwasów w jej szkielecie.

Białko może ponadto składać się z kilku łańcuchów.

Łączna liczba reszt w całym białku może więc różnić się od długości każdego pojedynczego łańcucha.

Precyzyjny opis naukowy powinien określać, czy podawana wartość dotyczy:

• długości jednego łańcucha;
• całkowitej liczby reszt w kompleksie;
• masy cząsteczkowej pojedynczego łańcucha;
• masy całego kompleksu molekularnego.

Żaden z tych parametrów sam w sobie nie określa aktywności biologicznej ani jakości dowodów dotyczących deklarowanego działania cząsteczki.

Należy liczyć rzeczywistą formę molekularną, której dotyczy analiza

Prekursora i jego produktów przetwarzania nie należy automatycznie traktować jako tej samej sekwencji molekularnej.

Przykładowo proinsulina jest przetwarzana poprzez formy pośrednie do insuliny i peptydu C.

Przegląd analityczny dotyczący produktów konwersji proinsuliny pokazuje, dlaczego rozróżnianie tych form ma znaczenie podczas interpretowania wyników pomiarów. [6]

Badania enzymu obecnego w ziarnistościach wydzielających insulinę wykazały ponadto selektywne usuwanie zasadowych reszt z substratów pochodzących z proinsuliny bez dalszej degradacji dojrzałej insuliny w zastosowanym teście. [7]

Był to eksperyment dotyczący przetwarzania biochemicznego, a nie dowód na to, że wszystkie peptydy podlegają takiemu samemu schematowi rozszczepiania.

Jeśli publikacja podaje długość, masę, stężenie lub aktywność peptydu, warto więc ustalić, czy badana wartość dotyczy:

• prekursora;
• formy pośredniej;
• dojrzałego peptydu;
• fragmentu powstałego w wyniku rozszczepienia;
• jednego łańcucha cząsteczki wielołańcuchowej;
• kompletnego kompleksu molekularnego.

Bez takiego rozróżnienia dwa poprawne naukowo opisy mogą pozornie sobie przeczyć, choć w rzeczywistości odnoszą się do różnych form tej samej lub powiązanej cząsteczki.

Struktura, fałdowanie i funkcja biologiczna

Struktura pierwszorzędowa: wszystko zaczyna się od sekwencji

Struktura pierwszorzędowa oznacza sekwencję aminokwasową, a w bardziej kompletnym opisie chemicznym również istotne połączenia kowalencyjne.

Rodzaj i kolejność reszt określają, jakie łańcuchy boczne są dostępne i w których miejscach szkieletu się znajdują.

Sekwencji nie można więc utożsamiać ze składem.

Dwa łańcuchy mogą zawierać dokładnie te same rodzaje i liczby aminokwasów, a jednocześnie mieć je ułożone w innej kolejności.

Zmiana kolejności może wpływać między innymi na:

• rozmieszczenie ładunku;
• rozmieszczenie regionów hydrofobowych;
• lokalną elastyczność;
• możliwe układy wiązań wodorowych;
• tendencję do tworzenia określonych struktur drugorzędowych;
• rozpoznawanie przez inne cząsteczki;
• aktywność biologiczną.

Pełna sekwencja zawiera więc znacznie więcej informacji niż zwykła lista aminokwasów obecnych w cząsteczce.

Zmiany sekwencji mogą również wpływać na relację pomiędzy wiązaniem cząsteczki a odpowiedzią biologiczną.

W badaniu roślinnego peptydu sygnałowego systeminy wykazano, że różne regiony sekwencji w odmienny sposób uczestniczyły w wiązaniu receptora i jego aktywacji. Pełna cząsteczka i jej krótsze fragmenty nie były funkcjonalnie równoważne. [8]

Struktura drugorzędowa, trzeciorzędowa i czwartorzędowa

Struktura drugorzędowa opisuje powtarzające się lokalne ułożenia szkieletu, takie jak alfa-helisy i beta-kartki.

Ich powstawaniu sprzyjają między innymi uporządkowane układy wiązań wodorowych w szkielecie.

Nie powstają one jednak poprzez zastąpienie wiązań peptydowych odpowiedzialnych za strukturę pierwszorzędową.

Struktura trzeciorzędowa opisuje szerszą, trójwymiarową organizację pojedynczego łańcucha polipeptydowego.

Struktura czwartorzędowa odnosi się do sposobu organizacji kilku łańcuchów polipeptydowych w większym kompleksie molekularnym.

Białko zbudowane z jednego łańcucha nie musi więc posiadać struktury czwartorzędowej.

Podobnie krótki peptyd nie musi wykazywać wszystkich poziomów organizacji strukturalnej, aby posiadać określone właściwości biologiczne.

Do organizacji struktury molekularnej mogą przyczyniać się między innymi:

• wiązania wodorowe;
• oddziaływania elektrostatyczne;
• oddziaływania van der Waalsa;
• efekt hydrofobowy;
• oddziaływania aromatyczne;
• koordynacja jonów metali w niektórych cząsteczkach;
• kowalencyjne połączenia poprzeczne, takie jak mostki disiarczkowe.

Mostki disiarczkowe, jeśli występują, łączą atomy siarki pochodzące z reszt cysteiny.

Są chemicznie inne niż wiązania peptydowe tworzące szkielet łańcucha.

Badania syntetycznego bydlęcego trzustkowego inhibitora trypsyny (BPTI) dobrze pokazują różnicę pomiędzy zbudowaniem łańcucha a uzyskaniem jego prawidłowo pofałdowanej i aktywnej formy.

Badacze chemicznie zsyntetyzowali liniową sekwencję, a następnie przeprowadzili proces utleniania i fałdowania, uzyskując materiał odpowiadający naturalnemu białku w opisanych analizach strukturalnych i funkcjonalnych. [9]

Czy peptydy mogą mieć stabilną strukturę trójwymiarową?

Tak.

Krótki łańcuch nie musi automatycznie oznaczać cząsteczki pozbawionej uporządkowanej struktury.

CLN025 tworzył strukturę beta-hairpin w badanych środowiskach, natomiast cykliczna kalata B1 wykazywała uporządkowaną architekturę pomimo obecności zaledwie 29 reszt. [1] [2]

Są to jednak obserwacje dotyczące konkretnych cząsteczek.

Nie oznaczają, że każdy krótki peptyd tworzy równie stabilną strukturę.

To, czy konkretny peptyd przyjmuje uporządkowaną konformację, zależy między innymi od:

• sekwencji;
• oddziaływań pomiędzy resztami;
• ograniczeń wynikających z cykliczności;
• mostków disiarczkowych;
• rozpúšťadla;
• teploty;
• koncentrácie;
• obecności partnerów wiążących;
• modyfikacji chemicznych.

Szczególnie istotne może być środowisko.

W badaniu syntetycznego neuropeptydu Y, zawierającego 36 reszt, analizowano konformację w mieszaninie rozpuszczalników zawierającej głównie trifluoroetanol. Zaobserwowano region helikalny w pobliżu C-końca, podczas gdy część N-końcowa nie wykazywała porównywalnie regularnej struktury. [10]

Obserwacji dokonanej w takim środowisku nie należy przedstawiać jako dowodu, że peptyd przyjmuje dokładnie tę samą strukturę we wszystkich warunkach biologicznych.

Dlatego podczas interpretacji badań strukturalnych należy zwracać uwagę na warunki eksperymentalne.

Vyhlásenie:

„Peptyd tworzył helisę w badanych warunkach”

jest naukowo bardziej precyzyjne niż:

„Peptyd zawsze ma strukturę helikalną”.

Czy wszystkie białka mają jedną stałą strukturę?

Nie.

Wiele białek zawiera stabilnie pofałdowane domeny, ale inne posiadają rozległe regiony wewnętrznie nieuporządkowane, a niektóre mogą być w dużym stopniu nieuporządkowane.

Takie cząsteczki występują jako dynamiczne zespoły różnych konformacji, zamiast pozostawać przez cały czas w jednej sztywnej strukturze trójwymiarowej.

Badania KISS1 stanowią bezpośredni przykład takiej sytuacji.

Wyniki uzyskane za pomocą kilku metod eksperymentalnych potwierdzały jego wewnętrznie nieuporządkowany charakter. [3]

Pokazuje to ograniczenie uproszczonego modelu edukacyjnego, w którym każde białko przedstawiane jest jako zwarta i nieruchoma cząsteczka.

Nie oznacza to jednak, że białko wewnętrznie nieuporządkowane nie może wykazywać organizacji, swoistości oddziaływań czy znaczenia biologicznego.

Wewnętrzne nieuporządkowanie należy również odróżnić od denaturacji.

Może ono stanowić naturalną właściwość danej sekwencji w określonych warunkach.

Denaturacja oznacza natomiast zaburzenie istniejącej organizacji strukturalnej cząsteczki.

Żadne z tych zjawisk samo w sobie nie oznacza hydrolizy wiązań peptydowych ani rozpadu cząsteczki do wolnych aminokwasów.

Funkcja zależy od konkretnej cząsteczki

Aminokwasy, peptydy i białka uczestniczą w wielu nakładających się procesach biologicznych, ale przynależność do jednej z tych kategorii nie oznacza wspólnego działania.

Peptyd sygnałowy, wewnątrzkomórkowy tripeptyd, enzym i białko strukturalne mogą być zbudowane z reszt aminokwasowych, a jednocześnie pełnić zupełnie odmienne funkcje.

Przykładowo w badaniu fizjologicznym z udziałem ludzi analizowano GLP-1(7–36) jako inkretynę i mierzono odpowiedzi podczas infuzji u siedmiu ochotników. [11]

Badanie dotyczyło określonej cząsteczki sygnałowej i konkretnego protokołu eksperymentalnego.

Nie pozwala ono wnioskować, że inne peptydy wywołują takie same efekty dotyczące wydzielania insuliny.

Innym przykładem jest glutatión.

Jest to tripeptyd uczestniczący w biologii komórkowych procesów redoks. W jednym z badań wykorzystano znakowaną izotopowo wodę do oszacowania syntezy glutationu u królików, pokazując, że nawet bardzo mały peptyd może być badany jako regulowana metabolicznie cząsteczka. [12]

Było to badanie dotyczące biosyntezy, a nie badanie suplementacji u ludzi.

Z naukowego punktu widzenia właściwe pytanie brzmi więc:

Co robi ta konkretna cząsteczka lub sekwencja, w jakich warunkach i na podstawie jakich dowodów?

Określenia „peptyd” i „białko” pomagają opisać tożsamość molekularną.

Nie określają uniwersalnej funkcji biologicznej.

Rozerwanie łańcucha może zmienić jego tożsamość i aktywność

Hydroliza prowadzi do rozszczepienia wiązań peptydowych.

Pojedyncze rozszczepienie może prowadzić do powstania krótszych łańcuchów peptydowych, natomiast odpowiednio rozległa hydroliza może ostatecznie uwolnić pojedyncze aminokwasy.

Jedno przecięcie długiego łańcucha zazwyczaj nie powoduje natychmiastowego uwolnienia wszystkich jego reszt.

Biologiczne przetwarzanie cząsteczek może wykorzystywać selektywne rozszczepianie między innymi do:

• aktywowania prekursorów;
• usuwania sekwencji sygnałowych;
• oddzielania regionów funkcjonalnych;
• tworzenia dojrzałych peptydów;
• kończenia aktywności;
• powstawania cząsteczek o odmiennych funkcjach biologicznych.

Badanie systeminy pokazuje, dlaczego nie należy zakładać, że fragment automatycznie zachowuje aktywność cząsteczki macierzystej.

Region N-końcowy uczestniczył w wiązaniu receptora, natomiast region C-końcowy był potrzebny do jego aktywacji. Badane fragmenty nie zachowywały się po prostu jak krótsze wersje pełnej cząsteczki sygnałowej. [8]

Trawienie jest kolejnym procesem, w którym zmienia się tożsamość molekularna.

W badaniu z udziałem ludzi wykryto we krwi określone peptydy pochodzące z kolagenu po spożyciu hydrolizatów żelatyny. [13]

Potwierdza to obecność konkretnych fragmentów w warunkach tego badania.

To však neznamená, že:

• każdy peptyd pochodzący z żywności jest wchłaniany w niezmienionej formie;
• każdy fragment peptydowy przeżywa proces trawienia;
• wszystkie hydrolizaty białkowe zachowują się identycznie;
• samo wykrycie fragmentu peptydowego potwierdza określoną korzyść zdrowotną.

Dlaczego granica między peptydem a białkiem nie jest jednoznaczna?

Różne terminy odpowiadają na różne pytania

Określenia peptyd, polipeptyd i białko częściowo się pokrywają, ponieważ często podkreślają inne właściwości cząsteczki.

Peptid najczęściej sugeruje stosunkowo krótki łańcuch.

Polypeptid podkreśla chemiczną naturę łańcucha aminokwasowego.

Białko zwykle odnosi się do określonej biologicznej cząsteczki, kompleksu molekularnego albo jednostki o ustalonym kontekście strukturalnym i funkcjonalnym.

Ponieważ pojęcia te odpowiadają na nieco inne pytania opisowe, ich znaczenia mogą się częściowo nakładać.

Nie oznacza to jednak, że wszystkie różnice znikają.

Wolny aminokwas pozostaje chemicznie inną cząsteczką niż połączony łańcuch.

Dipeptyd złożony z dwóch reszt jest znacznie mniejszy i strukturalnie prostszy od dużego kompleksu białkowego złożonego z wielu łańcuchów.

Niepewność pojawia się przede wszystkim wtedy, gdy próbuje się ustanowić jedną uniwersalną granicę liczbową oddzielającą wszystkie peptydy od wszystkich białek.

Przykłady naukowe pokazujące ograniczenia prostych reguł

Przykłady te pochodzą z badań strukturalnych, syntetycznych i biochemicznych, a nie z publikacji ustanawiającej jeden oficjalny próg klasyfikacyjny.

Ich znaczenie polega przede wszystkim na pokazaniu ograniczeń zbyt uproszczonych definicji. [1] [2] [3] [7] [9]

Naturalne czy syntetyczne pochodzenie nie rozstrzyga klasyfikacji

Peptyd nie jest definiowany przez to, że został wytworzony w laboratorium.

Podobnie białko nie jest definiowane przez to, że zostało wyizolowane z żywego organizmu.

Komórki naturalnie syntetyzują peptydy i białka, natomiast naukowcy mogą otrzymywać wiele łańcuchów aminokwasowych poprzez:

• chemickú syntézu;
• ekspresję rekombinowaną;
• syntezę bezkomórkową;
• inne kontrolowane systemy produkcji.

Badanie porównujące ekspresję bakteryjną z syntezą na fazie stałej dla sekwencji zawierających 20–40 reszt pokazało, że wybór metody produkcji zależy między innymi od konkretnej sekwencji i wymagań badawczych. [5]

Cząsteczka nie przechodzi do innej kategorii chemicznej tylko dlatego, że zmieniono sposób jej produkcji.

Podobnie badania syntetycznego BPTI pokazują, że synteza chemiczna może prowadzić do otrzymania cząsteczki klasyfikowanej jako białko. [9]

Samo określenie syntetyczny nie potwierdza pełnej równoważności molekularnej, ale syntetyczne pochodzenie również nie wyklucza klasyfikacji jako białko.

Jak dokładnie opisywać cząsteczkę?

Przydatny opis naukowy powinien podawać nazwę cząsteczki, a w odpowiednich przypadkach również:

• sekwencję aminokwasową;
• liczbę reszt;
• masę cząsteczkową;
• informację, czy struktura jest liniowa czy cykliczna;
• liczbę łańcuchów;
• istotne kowalencyjne połączenia poprzeczne;
• modyfikacje chemiczne lub potranslacyjne;
• właściwości strukturalne potwierdzone eksperymentalnie;
• potwierdzoną funkcję biologiczną.

Przykładowo określenie:

„dziesięcioresztowy peptyd badany jako minibiałko o strukturze beta-hairpin”

przekazuje znacznie więcej informacji niż spór o to, czy cząsteczka musi należeć wyłącznie do kategorii peptydów albo białek.

Podobnie określenie:

„białko wewnętrznie nieuporządkowane”

jest naukowo poprawnym opisem, a nie sprzecznością. [1] [3]

Rozróżnienie to ma szczególne znaczenie podczas interpretowania twierdzeń dotyczących działania biologicznego.

Dowodów dotyczących jednego peptydu nie można automatycznie przenosić na inny tylko dlatego, że obie cząsteczki są krótkimi łańcuchami reszt aminokwasowych.

Klasyfikacja mówi nam, z jakiego rodzaju cząsteczką mamy do czynienia. Do ustalenia, co konkretnie robi dana cząsteczka, potrzebne są natomiast badania dotyczące właśnie tej sekwencji i tej formy molekularnej.

Často kladené otázky

1. Czy wszystkie peptydy są białkami?

Nie. Peptydy i białka mają wspólną podstawę chemiczną w postaci łańcuchów aminokwasowych, ale nie każdy peptyd jest klasyfikowany jako białko. Krótkie łańcuchy zazwyczaj określa się jako peptydy, natomiast termin „białko” uwzględnia również kontekst biologiczny, strukturalny i historyczny. CLN025 pokazuje, dlaczego ścisła granica jest trudna do ustalenia: badacze opisali tę dziesięcioresztową sekwencję jako minibiałko o uporządkowanej strukturze beta-hairpin. Nie oznacza to jednak, że każdy krótki peptyd jest białkiem. Pokazuje jedynie, że pojęcia częściowo się pokrywają i żadna pojedyncza liczba reszt nie rozwiązuje wszystkich przypadków klasyfikacyjnych. [1]

2. Czy peptydy są tym samym co aminokwasy?

Nie. Aminokwasy są pojedynczymi jednostkami molekularnymi, natomiast peptydy zawierają reszty aminokwasowe połączone wiązaniami peptydowymi. Połączenie aminokwasów prowadzi do powstania cząsteczki mającej własną sekwencję, końce łańcucha, połączenia kowalencyjne i właściwości chemiczne. Nie jest to więc jedynie mieszanina pierwotnych aminokwasów. Badania systeminy pokazują znaczenie określonej sekwencji: różne części połączonego peptydu odmiennie uczestniczyły w wiązaniu i aktywacji receptora. Wyniki dotyczą konkretnego układu roślinnego, ale dobrze ilustrują ogólną zasadę, że tożsamość peptydu zależy od jego połączonej struktury molekularnej. [8]

3. Jaki polimer powstaje z aminokwasów?

Łańcuch powstały poprzez połączenie reszt aminokwasowych wiązaniami peptydowymi określa się jako polypeptid. Jeden lub więcej łańcuchów polipeptydowych może tworzyć białko, choć samo określenie polipeptyd nie wskazuje konkretnej struktury przestrzennej ani funkcji biologicznej. W literaturze termin ten stosowano również wobec stosunkowo krótkich sekwencji zawierających 20–40 reszt. Najbardziej precyzyjna ogólna odpowiedź brzmi więc „polipeptyd”, natomiast termin „białko” stosuje się, gdy odpowiada on szerszej tożsamości biologicznej danej cząsteczki lub kompleksu. [5]

4. Czym różni się aminokwas od reszty aminokwasowej?

Aminokwas jest pojedynczą cząsteczką stanowiącą jednostkę budulcową, natomiast reszta aminokwasowa to odpowiadająca jej jednostka po włączeniu do łańcucha peptydowego lub białkowego. Różnica wynika z udziału tej jednostki w połączeniach szkieletu oraz jej określonej pozycji w sekwencji. W badaniach strukturalnych peptydów często mówi się o pozycjach poszczególnych reszt, ponieważ wpływają one na lokalną geometrię i oddziaływania molekularne. W języku potocznym określenie „aminokwasy w białku” jest zrozumiałe, ale termin „reszta aminokwasowa” jest dokładniejszy chemicznie w odniesieniu do gotowego łańcucha. [4]

5. Czy polipeptyd zawsze jest białkiem?

Nie. Polipeptyd opisuje przede wszystkim łańcuch aminokwasowy i nie musi automatycznie oznaczać, że cząsteczka jest klasyfikowana jako białko. Termin ten pojawia się w badaniach stosunkowo krótkich cząsteczek, takich jak 29-resztowa kalata B1, a także w pracach dotyczących sekwencji zawierających 20–40 reszt. Sposób użycia pojęcia zależy od dziedziny, dlatego samo słowo „polipeptyd” nie określa stałej długości, potwierdzonego pofałdowania ani funkcji biologicznej. Najlepiej traktować je jako opis chemicznej natury łańcucha, a pozostałe cechy określać na podstawie badań konkretnej cząsteczki. [2] [5]

6. Ile aminokwasów musi zawierać białko?

Nie istnieje jedna minimalna liczba reszt, która sprawdzałaby się we wszystkich przypadkach. Konwencje oparte na długości są przydatne w edukacji i klasyfikacji, ale istnieją uznane wyjątki. CLN025 zawiera na przykład dziesięć reszt, a mimo to badano go jako uporządkowane minibiałko o strukturze beta-hairpin. Nie oznacza to, że praktyczne rozróżnienie pomiędzy krótkimi peptydami a większymi białkami jest bezwartościowe. Pokazuje jedynie, że najlepiej podawać rzeczywistą liczbę reszt zamiast przedstawiać jeden próg jako uniwersalną zasadę nazewnictwa. [1]

7. Czy granica 50 aminokwasów jest ścisłą zasadą naukową?

Nie. Granica około 50 reszt jest praktyczną konwencją stosowaną w niektórych kontekstach, a nie uniwersalnym prawem chemicznym. Chemia wiązań peptydowych nie zmienia się nagle w chwili przejścia od 50 do 51 reszt. Badania opisujące krótkie łańcuchy jako minibiałka lub polipeptydy pokazują, że terminologia może zależeć również od struktury, kontekstu biologicznego i tradycji badawczej. Różne dziedziny mogą stosować odmienne definicje operacyjne, dlatego próg liczbowy powinien być przedstawiany jako konwencja, a nie bezwzględna zasada. [1] [5]

8. Czy krótki peptyd może tworzyć stabilną strukturę?

Tak. Niektóre krótkie peptydy mogą przyjmować uporządkowane struktury w odpowiednich warunkach. CLN025 badano jako dziesięcioresztową strukturę beta-hairpin, natomiast cykliczna kalata B1 wykazywała uporządkowaną architekturę pomimo obecności tylko 29 reszt. Wyniki te pokazują możliwości konkretnych sekwencji, a nie wszystkich krótkich peptydów. Fałdowanie zależy między innymi od sekwencji, ograniczeń molekularnych, rozpuszczalnika, temperatury, stężenia i modyfikacji. Stabilność strukturalną należy więc oceniać w odniesieniu do konkretnej cząsteczki i środowiska eksperymentalnego. [1] [2]

9. Czy wszystkie białka mają stały trójwymiarowy kształt?

Nie. Niektóre białka lub ich regiony są wewnętrznie nieuporządkowane i występują jako dynamiczne zespoły różnych konformacji zamiast jednej trwałej, zwartej struktury. Badania KISS1 potwierdziły właśnie taki stan. Nie oznacza to, że wszystkie białka są nieuporządkowane ani że nieuporządkowanie jest równoznaczne z uszkodzeniem. Struktura białek obejmuje spektrum od stabilnych domen pofałdowanych po elastyczne regiony i dynamiczne zespoły konformacyjne. Właściwy opis zależy od konkretnej cząsteczki i warunków eksperymentalnych. [3]

10. Czy dwa peptydy o tej samej długości mogą działać inaczej?

Tak. Taka sama liczba reszt nie oznacza takiej samej sekwencji, struktury, chemii ani aktywności biologicznej. Rodzaj łańcuchów bocznych i kolejność aminokwasów wpływają na oddziaływania molekularne. Badania systeminy wykazały, że różne fragmenty sekwencji odmiennie uczestniczyły w wiązaniu i aktywacji receptora. Nie jest to porównanie wszystkich możliwych peptydów o tej samej długości, ale pokazuje, dlaczego sama liczba reszt nie pozwala przewidywać funkcji. Porównując dwa peptydy, należy analizować ich sekwencję, strukturę oraz bezpośrednie dane eksperymentalne. [8]

11. Czy cięższa cząsteczka zawsze zawiera więcej aminokwasów?

Nie. Masa cząsteczkowa zależy od liczby i rodzaju reszt aminokwasowych oraz od obecności dodatkowych grup chemicznych. Dwa peptydy zawierające tę samą liczbę reszt mogą mieć różną masę, ponieważ poszczególne aminokwasy różnią się masą. Modyfikacje chemiczne mogą dodatkowo zwiększać masę bez zwiększania liczby reszt w szkielecie. Liczba reszt i masa cząsteczkowa opisują więc różne właściwości i żadna z nich sama nie wyznacza uniwersalnej granicy pomiędzy peptydem a białkiem.

12. Czy każde białko składa się tylko z jednego łańcucha?

Nie. Białka mogą zawierać jeden lub kilka powiązanych ze sobą łańcuchów polipeptydowych. Długość pojedynczego łańcucha i skład kompletnego białka są więc odrębnymi informacjami. Dobrym przykładem biologicznego przetwarzania jest insulina: jej dojrzała postać zawiera dwa łańcuchy połączone mostkami disiarczkowymi, powstające w wyniku przetwarzania proinsuliny i usunięcia peptydu C. Badania produktów konwersji rozróżniają te formy zamiast traktować prekursor i dojrzały hormon jako identyczne cząsteczki. Podając liczbę reszt, należy więc określić, czy dotyczy ona jednego łańcucha, wszystkich łańcuchów, prekursora czy dojrzałej postaci. [6] [7]

13. Czy peptydy i białka pełnią takie same funkcje?

Mogą uczestniczyć w podobnych obszarach biologii, ale poszczególne cząsteczki pełnią różne funkcje. W badaniach GLP-1 analizowano określony peptyd pod kątem aktywności inkretynowej u ludzi, natomiast badania glutationu dotyczyły syntezy tripeptydu uczestniczącego w biologii komórkowych procesów redoks. Nie oznacza to, że wszystkie peptydy wykazują którekolwiek z tych działań, podobnie jak wszystkie białka nie mają jednej wspólnej funkcji. Naukowo uzasadnione porównanie powinno dotyczyć konkretnych cząsteczek, ich sekwencji i eksperymentalnie potwierdzonych właściwości. [11] [12]

14. Czy fragment peptydu zachowuje funkcję cząsteczki macierzystej?

Niekoniecznie. Rozszczepienie może usunąć region odpowiedzialny za wiązanie, region potrzebny do aktywacji, odsłonić nowy fragment lub doprowadzić do powstania produktu o zupełnie innej funkcji biologicznej. W badaniu systeminy fragmenty nie odtwarzały po prostu pełnego połączenia właściwości związanych z wiązaniem i aktywacją receptora obserwowanych dla całej cząsteczki. Wynik zależy od konkretnej sekwencji i nie można go automatycznie przenosić na wszystkie produkty rozszczepienia. Fragment należy traktować jako odrębną formę molekularną wymagającą własnych danych dotyczących struktury i aktywności. [8]

15. Czy denaturacja zmienia białko w aminokwasy?

Nie. Denaturacja zaburza wyższe poziomy organizacji strukturalnej białka, ale z definicji nie wymaga rozerwania jego szkieletu peptydowego. Powstanie krótszych peptydów lub wolnych aminokwasów wymaga hydrolizy wiązań peptydowych, czyli innego procesu chemicznego. Samo nieuporządkowanie strukturalne również nie musi oznaczać degradacji, czego przykładem jest nienaruszone, wewnętrznie nieuporządkowane białko KISS1. W bardzo agresywnych warunkach denaturacja i degradacja chemiczna mogą zachodzić jednocześnie, ale nadal są to odrębne procesy: utrata pofałdowania nie jest tym samym co rozerwanie kowalencyjnego łańcucha. [3]

16. Czy syntetyczna cząsteczka nadal może być białkiem?

Tak. Synteza chemiczna nie wyklucza klasyfikacji cząsteczki jako białka. Badacze chemicznie zsyntetyzowali bydlęcy trzustkowy inhibitor trypsyny, a po odpowiednim utlenieniu i fałdowaniu uzyskali materiał odpowiadający naturalnemu białku w opisanych porównaniach analitycznych i funkcjonalnych, w tym pod względem aktywności hamującej. Wynik zależał od prawidłowego zbudowania sekwencji, fałdowania i charakterystyki i nie oznacza, że każdy syntetyczny polipeptyd automatycznie przyjmuje właściwą strukturę. O klasyfikacji decyduje tożsamość molekularna i kontekst, natomiast sposób produkcji jest odrębną cechą. [9]

17. Czy białka spożywcze, hydrolizaty białkowe i wolne aminokwasy są tym samym?

Nie. Białka spożywcze są większymi połączonymi cząsteczkami, hydrolizaty białkowe zawierają mieszaniny produktów rozszczepienia, natomiast wolne aminokwasy są pojedynczymi jednostkami molekularnymi. Ich skład i formy molekularne są więc różne. W badaniu z udziałem ludzi wykryto we krwi określone peptydy pochodzące z kolagenu po spożyciu hydrolizatów żelatyny, pokazując, że w procesie trawienia i wchłaniania mogą występować możliwe do zidentyfikowania fragmenty peptydowe. Badanie nie potwierdziło jednak uniwersalnego wchłaniania wszystkich peptydów w niezmienionej formie ani równoważnego działania wszystkich produktów białkowych. [13]

18. Czym różni się peptyd od polipeptydu?

Oba terminy opisują łańcuchy reszt aminokwasowych połączonych wiązaniami peptydowymi. Określenie „peptyd” jest często stosowane wobec stosunkowo krótkich łańcuchów, natomiast „polipeptyd” podkreśla rozbudowany łańcuch aminokwasowy i bywa używane wobec dłuższych sekwencji. Nie istnieje jednak uniwersalny punkt liczbowy, po którego przekroczeniu jeden termin musi zostać zastąpiony drugim. Badania opisujące 29-resztową kalatę B1 jako polipeptyd oraz prace dotyczące 20–40-resztowych polipeptydów pokazują nakładanie się tej terminologii. Rzeczywista liczba reszt i architektura molekularna są więc bardziej informacyjne niż założenie sztywnej granicy. [2] [5]

19. Czy te same aminokwasy mogą tworzyć różne peptydy?

Tak. Ten sam zestaw rodzajów aminokwasów może prowadzić do powstania różnych peptydów, jeśli zmieni się ich kolejność. Przykładowo glicyloalanina i alanyloglicyna zawierają glicynę oraz alaninę, ale odwrócenie ich kolejności prowadzi do powstania innej sekwencji molekularnej. W dłuższych peptydach zmiana sekwencji może wpływać na rozmieszczenie ładunku, regionów hydrofobowych, powierzchni wiążących i tendencji strukturalnych. Dlatego tożsamość peptydu zależy nie tylko od tego, jakie aminokwasy zawiera, ale również od ich kolejności i sposobu połączenia.

20. Dlaczego sekwencja jest ważniejsza niż samo określenie „peptyd”?

Termin „peptyd” opisuje szeroką kategorię chemiczną, a nie jeden rodzaj aktywności biologicznej. Dwa peptydy mogą całkowicie różnić się sekwencją, długością, strukturą, lokalizacją, sposobem przetwarzania i celami molekularnymi. Badania systeminy pokazują eksperymentalnie, że nawet różne regiony jednej cząsteczki mogą odgrywać odmienne role w wiązaniu i aktywacji receptora. [8] Z tego powodu wyników dotyczących jednego peptydu nie można przenosić na inny tylko dlatego, że obie cząsteczki należą do tej samej kategorii. Do ustalenia funkcji biologicznej potrzebne są dane dotyczące konkretnej sekwencji i konkretnej cząsteczki.

Ograniczenia klasyfikacji peptydów i białek

Podczas stosowania określeń aminokwas, peptyd, polipeptyd i białko należy pamiętać o kilku ograniczeniach.

Po pierwsze, nie istnieje uniwersalna liczbowa granica między peptydem a białkiem. Próg taki jak 50 reszt może być przydatną konwencją, ale literatura naukowa zawiera wyraźne wyjątki. [1] [2] [5]

Po drugie, struktura również nie tworzy prostej granicy. Niektóre krótkie peptydy przyjmują uporządkowane struktury, podczas gdy niektóre uznane białka pozostają w znacznym stopniu wewnętrznie nieuporządkowane. [1] [2] [3]

Po trzecie, masa cząsteczkowa i liczba reszt są powiązanymi, ale odrębnymi parametrami. Modyfikacje, różne rodzaje reszt oraz obecność kilku łańcuchów mogą zmieniać masę bez prostego przełożenia na długość pojedynczego łańcucha.

Po czwarte, należy rozróżniać formy prekursorowe i dojrzałe. Biologiczne przetwarzanie może zmieniać długość łańcucha, sposób połączeń i tożsamość molekularną, czego przykładem jest przetwarzanie proinsuliny. [6] [7]

Po piąte, metoda produkcji nie określa klasyfikacji. Cząsteczki wytwarzane naturalnie i syntetyzowane chemicznie mogą mieć tę samą podstawową tożsamość molekularną, jeśli potwierdzono ich sekwencję, strukturę i inne istotne właściwości. [5] [9]

Po szóste, przynależność do kategorii nie pozwala przewidzieć działania biologicznego. Peptydy nie mają jednego wspólnego efektu fizjologicznego tylko dlatego, że są peptydami, podobnie jak wszystkie białka nie pełnią jednej funkcji. [8] [11] [12]

Wreszcie obserwacje strukturalne należy interpretować w warunkach, w których zostały uzyskane. Peptyd przyjmujący określoną konformację w jednym rozpuszczalniku lub środowisku eksperymentalnym może zachowywać się inaczej w innych warunkach. [10]

Ograniczenia te nie oznaczają, że terminologia jest bezużyteczna. Pokazują natomiast, dlaczego najlepiej stosować ją razem z dokładniejszym opisem właściwości molekularnych.

Zhrnutie

Aminokwasy, peptydy, polipeptydy i białka należą do tej samej szerokiej hierarchii chemicznej, ale opisują różne poziomy organizacji molekularnej.

Aminokyseliny są pojedynczymi jednostkami budulcowymi.

Gdy reszty aminokwasowe zostają kowalencyjnie połączone wiązaniami peptydowymi, powstają peptydy i łańcuchy polipeptydowe.

Bielkoviny składają się z jednego lub kilku takich łańcuchów rozpatrywanych w szerszym kontekście strukturalnym i biologicznym.

Przejście od aminokwasu do peptydu jest chemicznie wyraźne, ponieważ utworzenie wiązania peptydowego prowadzi do powstania nowej, połączonej cząsteczki.

Granica pomiędzy peptydem a białkiem jest znacznie mniej jednoznaczna.

Długość łańcucha dostarcza użytecznych informacji opisowych, ale nie istnieje jeden uniwersalny próg liczby reszt, który prawidłowo klasyfikowałby każdą cząsteczkę. Badania dziesięcioresztowego minibiałka CLN025, 29-resztowej cyklicznej kalaty B1 oraz wewnętrznie nieuporządkowanego białka KISS1 pokazują, dlaczego proste reguły wymagają dodatkowego kontekstu. [1] [2] [3]

Struktura również nie wyznacza uniwersalnej granicy. Krótkie peptydy mogą przyjmować uporządkowane konformacje, natomiast niektóre białka mogą zawierać znaczny stopień nieuporządkowania.

Podobnie masa cząsteczkowa, naturalne lub syntetyczne pochodzenie oraz funkcja biologiczna nie wystarczają samodzielnie do określenia, czy każdy łańcuch aminokwasowy należy nazwać peptydem czy białkiem.

Dlatego w komunikacji naukowej najbardziej informacyjne jest dokładne opisanie konkretnej cząsteczki:

jej sekwencji, liczby reszt, architektury, modyfikacji, eksperymentalnie obserwowanej struktury, stanu przetworzenia oraz potwierdzonych właściwości biologicznych.

Najważniejszą różnicę można podsumować następująco:

aminokwasy są jednostkami budulcowymi; wiązania peptydowe łączą te jednostki w peptydy i łańcuchy polipeptydowe; białka są natomiast biologicznymi cząsteczkami zbudowanymi z jednego lub kilku takich łańcuchów. Granica między peptydem a białkiem wynika jednak z konwencji naukowej i kontekstu molekularnego, a nie z jednej uniwersalnej liczby aminokwasów.

Zrieknutie sa zodpovednosti

Artykuł ma wyłącznie charakter edukacyjny i naukowo-informacyjny. Wyjaśnia terminologię, budowę molekularną, klasyfikację peptydów i białek, biologiczne przetwarzanie cząsteczek oraz przykłady pochodzące z opublikowanych badań. Nie stanowi porady medycznej, żywieniowej, wskazówki dotyczącej leczenia, rekomendacji produktu ani porady dotyczącej stosowania peptydów, białek, produktów aminokwasowych, suplementów lub powiązanych substancji. Wyniki badań strukturalnych, biochemicznych, badań na zwierzętach i badań z udziałem ludzi należy interpretować w kontekście metod, warunków i ograniczeń poszczególnych prac.

Odkazy

1. Hatfield, M. P. D., Murphy, R. F., & Lovas, S. (2010). VCD spectroscopic properties of the beta-hairpin forming miniprotein CLN025 in various solvents. Biopolymers, 93(5), 442–450. https://doi.org/10.1002/bip.21356
2. Saether, O., Craik, D. J., Campbell, I. D., Sletten, K., Juul, J., & Norman, D. G. (1995). Elucidation of the primary and three-dimensional structure of the uterotonic polypeptide kalata B1. Biochemistry, 34(13), 4147–4158. https://doi.org/10.1021/bi00013a002
3. Ibanez de Opakua, A., Merino, N., Villate, M., Cordeiro, T. N., Ormaza, G., Sanchez-Carbayo, M., Diercks, T., Bernado, P., & Blanco, F. J. (2017). The metastasis suppressor KISS1 is an intrinsically disordered protein slightly more extended than a random coil. PLOS ONE, 12(2), Article e0172507. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0172507
4. Improta, R., Vitagliano, L., & Esposito, L. (2011). Peptide bond distortions from planarity: New insights from quantum mechanical calculations and peptide/protein crystal structures. PLOS ONE, 6(9), Article e24533. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0024533
5. Straner, P., Taricska, N., Szabo, M., Toth, G. K., & Perczel, A. (2016). Bacterial expression and/or solid phase peptide synthesis of 20-40 amino acid long polypeptides and miniproteins, the case study of Class B GPCR ligands. Current Protein & Peptide Science, 17(2), 147–155. https://doi.org/10.2174/1389203716666151102105215
6. Linde, S., Welinder, B. S., & Nielsen, J. H. (1993). Analysis of proinsulin and its conversion products by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography, 614(2), 185–204. https://doi.org/10.1016/0378-4347(93)80309-r
7. Davidson, H. W., & Hutton, J. C. (1987). The insulin-secretory-granule carboxypeptidase H. Purification and demonstration of involvement in proinsulin processing. Biochemical Journal, 245(2), 575–582. https://doi.org/10.1042/bj2450575
8. Meindl, T., Boller, T., & Felix, G. (1998). The plant wound hormone systemin binds with the N-terminal part to its receptor but needs the C-terminal part to activate it. The Plant Cell, 10(9), 1561–1570. https://doi.org/10.1105/tpc.10.9.1561
9. Ferrer, M., Woodward, C., & Barany, G. (1992). Solid-phase synthesis of bovine pancreatic trypsin inhibitor (BPTI) and two analogues. A chemical approach for evaluating the role of disulfide bridges in protein folding and stability. International Journal of Peptide and Protein Research, 40(3–4), 194–207. PubMed record
10. Mierke, D. F., Durr, H., Kessler, H., & Jung, G. (1992). Neuropeptide Y. Optimized solid-phase synthesis and conformational analysis in trifluoroethanol. European Journal of Biochemistry, 206(1), 39–48. https://doi.org/10.1111/j.1432-1033.1992.tb16899.x
11. Kreymann, B., Williams, G., Ghatei, M. A., & Bloom, S. R. (1987). Glucagon-like peptide-1 7-36: A physiological incretin in man. The Lancet, 2(8571), 1300–1304. https://doi.org/10.1016/s0140-6736(87)91194-9
12. Cabral, C. B., Bullock, K. H., Bischoff, D. J., Tompkins, R. G., Yu, Y. M., & Kelleher, J. K. (2008). Estimating glutathione synthesis with deuterated water: A model for peptide biosynthesis. Analytical Biochemistry, 379(1), 40–44. https://doi.org/10.1016/j.ab.2008.04.042
13. Iwai, K., Hasegawa, T., Taguchi, Y., Morimatsu, F., Sato, K., Nakamura, Y., Higashi, A., Kido, Y., Nakabo, Y., & Ohtsuki, K. (2005). Identification of food-derived collagen peptides in human blood after oral ingestion of gelatin hydrolysates. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 53(16), 6531–6536. https://doi.org/10.1021/jf050206p