Peptider vs. proteiner vs. aminosyror: de viktigaste skillnaderna

Aminosyror är de grundläggande molekylära enheter som bygger upp peptider och proteiner. Peptider är kedjor av aminosyrarester som främst binds samman med peptidbindningar, medan proteiner består av en eller flera polypeptidkedjor vars sekvens, struktur, ömsesidiga interaktioner, biologiska bearbetning och funktionella kontext påverkar deras identitet. Alla dessa grupper är kemiskt relaterade till varandra, men begreppen kan inte användas om vartannat.

Skillnaden mellan en fri aminosyra och en peptid är relativt lätt att avgöra: en sammankoppling av aminosyror med hjälp av peptidbindningars leder till bildningen av en ny molekyl med en specifik sekvens och ett specifikt sätt att binda atomer. Gränsen mellan mellan peptid och protein är avsevärt mindre entydig.

Kedjelängden är ett användbart riktmärke. I utbildningsmaterial eller vissa klassificeringssystem kan man till exempel stöta på en konventionell gräns på omkring 50 aminosyrarester. Den vetenskapliga litteraturen tillämpar dock inte en enda universell gräns. En kedja bestående av tio rester har beskrivits som miniprotein, en strukturellt ordnad molekyl bestående av 29 restider identifierades som polypeptid, och vissa proteiner kan förekomma i ett i hög grad oordnat tillstånd i stället för att anta en enda stabil, kompakt struktur. [1] [2] [3]

Dessa exempel visar en viktig princip: sekvensens längd ger viktig information, men enbart den räcker inte för att entydigt klassificera varje aminosyrakedja.

För att bättre skilja peptider, polypeptider och proteiner, är det värt att inkludera flera egenskaper samtidigt:

• antalet aminosyrarester;
• deras sekvens;
• huruvida molekulen är linjär, cyklisk, förgrenad eller flerkedjad;
• kognitivt kovalenta bindningar; / sättet för kovalenta bindningar;
• experimentellt verifierad struktur;
• posttranslationella eller kemiska modifieringar;
• metod för biologisk bearbetning av en molekyl;
• den terminologi som antagits för en specifik molekyl i den vetenskapliga litteraturen.

I den här artikeln förklarar vi hur aminosyror, peptider, polypeptider och proteiner hänger ihop, hur kedjelängden påverkar den terminologi som används, hur peptidbindningar bildar kedjor samt varför kännedom sekvens, molekylär arkitektur och experimentellt verifierade egenskaper är mer informativ än själva kategorinamnet.

Vad är skillnaden mellan aminosyror, peptider och proteiner?

Aminosyror är de enskilda byggstenarna

Typisk alfa-aminosyra innehåller en central kolatom bunden till en aminogrupp, en karboxylgrupp, en väteatom och en variabel sidokedja.

Det är just sidokedjan som skiljer en aminosyra från en annan.

Under de förhållanden som förekommer i många biologiska miljöer förekommer aminogrupper och karboxylgrupper ofta i laddade former. Den populära, neutrala strukturformeln som används i grundläggande kemi är därför ett användbart sätt att representera en aminosyra, men den representerar inte nödvändigtvis dess dominerande jontillstånd under alla biologiska förhållanden.

Sidokedjorna hos enskilda aminosyror skiljer sig bland annat åt genom:

• storlek;
• med elektrisk laddning;
• polaritet;
• hydrofobicitet;
• förmåga att bilda vätebindningar;
• spatiala egenskaper;
• kemisk reaktivitet.

Till exempel har glycin en enskild väteatom som sidokedja, vilket gör den strukturellt mindre än de övriga standardaminosyrorna. Cystein innehåller däremot en sidokedja med en svavelatom, som kan delta i bildandet av disulfidbryggor.

Aminosyror kan innehålla aromatiska, sura, basiska, polära eller främst opolära sidokedjor.

Dessa skillnader hjälper till att förstå varför utbytet av en aminosyra mot en annan kan förändra egenskaperna hos en peptid eller ett protein. Molekylens ryggrad kan fortfarande vara sammankopplad med samma typ av peptidbindningar, men de kemiska egenskaper som beror på närvaron av specifika sidokedjor förändras.

En aminosyra kan också förekomma och delta i ämnesomsättningen oberoende av en peptid eller ett protein.

Fria aminosyror är separata molekyler.

Efter inkorporering i en peptid- eller proteinkedja kallas de enskilda enheterna mer exakt för aminosyrarester.

I vardagsspråket är det förståeligt att säga att ett protein är en „aminosyrakedja”. Ur strukturell kemisk synvinkel är det dock mer precist att använda termen „kedja av aminosyrarester”, eftersom införlivandet av en aminosyra i kedjan förändrar dess kemiska sammanhang.

Peptider innehåller aminosyror som är sammankopplade med peptidbindningar

I ett typiskt peptidskelett är kolatom i karbonylgruppen från karboxylgruppen hos en rest bunden till en kväveatom som är bundet till nästa rest.

Denna kovalent amibindning kallas peptidbindning.

Sammanslagningen av två resthalter leder till uppkomsten av dipeptid.

Tre rester bildar tripeptid.

Fyra bildar tetrapeptid, och en ytterligare förlängning av kedjan leder till bildandet av allt längre peptider och polypeptider baserade på samma allmänna typ av kemiska skelett.

Den växande molekylen är mer än bara en samling av sina beståndsdelar.

En blandning som innehåller separata molekyler av glycin och alanin skiljer sig kemiskt från dipeptiden glycylalanin.

Den sammansatta molekylen har:

• en viss sekvens;
• definierade kovalenta bindningar;
• specificerade ändgrupper;
• egen molekylvikt;
• möjliga konformationer;
• kemiska egenskaper som skiljer sig från de enskilda aminosyrornas egenskaper.

Om man byter ordningen uppstår alanyloglicyny.

Glycylalanin och alanylglycin innehåller samma typer av aminosyror, men har olika sekvens.

Detta enkla exempel illustrerar en av de grundläggande principerna inom peptidkemi:

aminosyrasammansättningen är inte samma sak som aminosyrasekvensen.

Peptidbindningarna har också karakteristiska strukturella egenskaper. Deras elektronkonfiguration begränsar rotationen kring kol–kvävebindningen i stommen, medan de intilliggande bindningarna står för en betydande del av kedjans konformationella elasticitet.

Experimentella och beräkningsmässiga studier visar att peptidgruppen är ungefär plan, även om det kan förekomma små avvikelser från den ideala planheten. [4]

Proteiner består av en eller flera polypeptidkedjor

Protein förstås vanligtvis som en biologisk makromolekyl som består av av en eller flera polypeptidkedjor.

Dessa kedjor kan bilda:

• kompakta globulära strukturer;
• avlånga strukturer;
• membranrelaterade strukturer;
• flexibla regioner;
• regioner med interna oregelbundenheter;
• komplex som består av flera kedjor;
• kombinationer av olika strukturella element.

Vissa proteiner innehåller även bundna kolhydrater, lipider, metalljoner, prostetiska grupper, kovalenta modifieringar eller andra komponenter som är bundna till dem.

Att kalla en viss molekyl för ett protein förmedlar därför vanligen mer information än enbart konstaterandet av att det finns peptidbindningar.

Detta begrepp placerar molekylen i ett bredare i ett strukturellt och biologiskt sammanhang.

Det betyder dock inte att varje molekyl som betecknas som protein måste ha:

• en viss minimilängd;
• en enda permanent styv struktur;
• endast en polypeptidkedja;
• enzymatisk aktivitet;
• en viss typ av biologisk funktion.

Ett bra exempel är proteinet KISS1.

Forskarna använde bland annat magnetisk kärnresonans och småvinklig röntgenspridning för att karakterisera KISS1 som ett internt oordnat protein som är något mer utsträckt än en typisk statistisk polymerklump. Dess klassificering som protein beror alltså inte på förekomsten av en enda kompakt och beständig struktur. [3]

Aminosyror, peptider och proteiner – en jämförelse

Tabellen visar konventionella skillnader och fastställer inte en enda formell gräns som gäller för alla molekyler.

Exempel på korta ordnade molekyler och internt oordnade proteiner visar var förenklade definitioner kräver ytterligare förklaring. [1] [2] [3]

Vilken polymer bildas av aminosyror?

När många aminosyrarester binds samman av en upprepad ryggrad som innehåller peptidbindningar, bildas polypeptid.

Ett protein kan innehålla en enda polypeptidkedja eller flera kedjor som är sammankopplade till en större struktur.

Dessa begrepp framhäver därför något olika egenskaper:

polypeptid avser i första hand kedjans kemiska struktur;

protein beskriver vanligtvis en komplett biologisk molekyl eller ett molekylärt komplex.

Denna uppdelning är användbar när man läser vetenskapliga publikationer.

I ett arbete kan författarna beskriva syntesen av en polypeptid innan dess rymdstruktur eller biologiska aktivitet bestäms. I ett annat kan de analysera ett protein som består av flera polypeptidkedjor.

I inget av dessa fall innebär det en förändring av aminosyrornas grundläggande kemi.

I en studie som jämförde bakteriell uttryck med fastfaspeptidsyntes analyserades 20–40 rester långa „polypeptider och miniproteiner”. Den använda terminologin visar att dessa begrepp kan överlappa delvis beroende på längd, strukturella egenskaper och vetenskapligt sammanhang. [5]

Kedjelängd versus klassificering

Vad betyder dipeptid, tripeptid, oligopeptid och polypeptid?

Dipeptid innehåller två aminosyrarester.

Tripeptid innehåller tre.

Analogouslyter och pentapeptider innehåller respektive fyra och fem restgrupper.

Dessa namn gör det möjligt att noggrant bestämma antalet rester om de refererar till hela den analyserade kedjan.

Oligopeptid innebär vanligtvis en relativt kort kedja.

Polypeptid understryker närvaron av många aminosyrarestar i en enda kedja och används ofta, om än inte alltid, med hänvisning till längre sekvenser.

Numeriska gränser mellan termer som oligopeptid, peptid och polypeptid varierar beroende på disciplin och publikation.

Därför är den faktiska sekvensen eller antalet rester som anges av författarna mer tillförlitligt än att anta att alla forskare tillämpar samma konvention.

I en typisk ogrenad, linjär kedja som innehåller en rest förekommer:

n − 1 peptidbindningar i ryggraden.

Tripeptiden innehåller därför tre restgrupper, men två peptidbindningar.

En öppen kedja bestående av tio restriktioner har nio sådana bindningar.

Detta förhållande gäller för en enskild öppen kedja.

En cyklisk peptid som är sluten genom en sammankoppling av N- och C-änden har en extra bindning som sluter ryggraden, och därför innehåller den vid $n$ restgrupper $n$ peptidbindningar i ryggraden.

De bindningar som förekommer mellan sidokedjorna måste analyseras separat.

Utgör 50 aminosyror gränsen mellan en peptid och ett protein?

Längd cirka 50 aminosyrarester används ofta som en praktisk pedagogisk konvention för att skilja på peptider och proteiner.

Detta är dock inte en universell kemisk lag.

Övergången från 50 till 51 restprodukter orsakar ingen plötslig kemisk omvandling som automatiskt förvandlar peptiden till ett protein.

De enskilda vetenskapsgrenarna tillämpar dessa begrepp på ett något annorlunda sätt, och vissa molekyler har kvar historiskt etablerade namn som inte motsvarar den enkla numeriska gränsen.

Ett bra exempel är CLN025.

CLN025 innehåller endast tio rester, och ändå har forskarna beskrivit det som miniprotein och analyserade dess beta-hårbandsstruktur med spektroskopi och molekyldynamik. Den korta längden hindrade den inte från att inta en ordnad konformation under de undersökta förhållandena. [1]

Detta betyder inte att varje peptid som består av tio rester bör kallas ett protein.

Den visar däremot varför alltför kategoriska påståenden, som:

„Varje protein innehåller mer än 50 aminosyror”

eller

„Varje kedja kortare än 50 aminosyror är en oordnad peptid”

är alldeles för stora förenklingar.

Ett mer noggrant tillvägagångssätt är att behandla antalet restgrupper som en av flera egenskaper som beskriver molekylen.

En kort peptid kan också kallas för en polypeptid

Ett annat bra exempel är kalata B1.

I den ursprungliga strukturstudien beskrevs denna 29-resters växtmolekyl som polypeptid, dess cykliska skelett har bekräftats och dess tredimensionella struktur har undersökts. [2]

Den förenar därför:

• en förhållandevis kort sekvens;
• cyklisk skelettarkitektur;
• ytterligare kovalenta begränsningar;
• ordnad rumslig struktur.

Terminen polypeptid behöver därför inte betyda en mycket stor molekyl.

Beroende på kontext kan det helt enkelt betona att molekylen som analyseras är en kedja av aminosyrarester.

Därför är det vid tolkning av vetenskaplig litteratur värt att kontrollera den faktiska sekvensen, antalet rester, molekylära arkitekturen och experimentella resultat, istället för att tillskriva ytterligare betydelse enbart baserat på det använda namnet.

Antalet rester och molekylvikt är två olika mått

Antalet resttermer avgör, hur många aminosyraenheter finns det i molekylen.

Molekylmassan beskriver däremot massan av hela molekylen på molekylär nivå.

Dessa värden är sammankopplade, men de är inte ekvivalenta.

De enskilda aminosyrasidokedjorna har olika massor. Två kedjor som innehåller samma antal restgrupper kan därför ha skild molekylmassa om de skiljer sig åt i sekvens.

Kemiska modifieringar kan också påverka massan.

Tillsatsen av en kolhydrat, lipid, fosfatgrupp, terminal modifiering eller annan beståndsdel kan öka molekylens massa utan att öka antalet aminosyror i dess ryggrad.

Ett protein kan dessutom bestå av flera kedjor.

Den totala mängden restpartier i hela proteinet kan alltså variera beroende på längden på varje enskilt proteinkedja.

En noggrann vetenskaplig beskrivning bör ange om det angivna värdet avser:

• längden på en kedja;
• den totala mängden rester i komplexet;
• massan av en enskild kedja av partiklar;
• massan av hela molekylsystemet.

Ingen av dessa parametrar i sig själv utgör en specifik bestämd biologisk aktivitet eller kvalitet på bevisen för den deklarerade effekten av substansen.

Man bör räkna den verkliga molekylformen som analysen avser.

Förkandidaten och dess bearbetningsprodukter bör inte automatiskt betraktas som samma molekylär sekvens.

Till exempel proinsulina Det bearbetas genom mellanprodukter till insulin och peptidhormon C.

En analytisk översikt av proinsulins konverteringsprodukter visar varför skillnaderna mellan dessa former är viktiga vid tolkningen av mätresultaten. [6]

Studier av enzymet som finns i insulinproducerande celler visade dessutom att det selektivt rensade ur sura rester från substrat som härrör från proinsulinet utan ytterligare nedbrytning av den mogna insulinet i den använda testmetoden. [7]

Det var ett experiment om biokemisk bearbetning, och inte bevis på att alla peptider följer samma uppdelningsschema.

Om publikationen anger längden, massan, koncentrationen eller aktiviteten för ett peptid är det därför värt att ta reda på om den undersökta värdena gäller:

• förstadgaren;
• medelform;
• en mogen peptid;
• en del som uppstått genom splittring;
• en kedja av multikjediga molekyler;
• en komplett molekylär komplex.

Utan en sådan distinktion kan två vetenskapligt korrekta beskrivningar till synes motsäga varandra, även om de i själva verket avser olika former av samma eller en relaterad substans.

Struktur, flöjtning och biologisk funktion

Primärstruktur: Allt börjar med en sekvens

Den primära strukturen innebär en aminosyresekvens, och i en mer fullständig kemisk beskrivning ingår även relevanta koherenta bindningar.

Typen och ordningen av resterna bestämmer vilka sidorör som är tillgängliga och var i skelettet de finns.

Sekvenserna kan därför inte identifieras med sammansättningen.

Två kedjor kan innehålla exakt samma typer och antal aminosyror och samtidigt ha dem ordnade i en annan ordning.

En ändring av ordningsföljden kan påverka bland annat:

• lastens fördelning;
• fördelningen av hydrofoba regioner;
• lokal flexibilitet;
• möjliga system för vätebindning;
• tendensen att skapa särskilda sekundära strukturer;
• erkännande av andra partiklar;
• biologisk aktivitet.

Den kompletta sekvensen innehåller alltså betydligt mer information än en vanlig lista över aminosyror som finns i en molekyl.

Ändringar i sekvensen kan också påverka förhållandet mellan molekylens bindning och den biologiska responsen.

I en studie av växtbaserad signalsubstans systeminy Det har visats att olika regioner av sekvensen deltar på olika sätt i receptornas bindning och aktivering. Den fullständiga molekylen och dess kortare fragment var inte funktionellt jämförbara. [8]

Sekundärstruktur, tertiärstruktur och kvartärstruktur

Sekundärstruktur Den beskriver återkommande lokala strukturer i skelettet, såsom alfa-heliser och beta-kartor.

Deras bildning främjas bland annat av ordnade system av vätebindningar i skelettet.

De bildas dock inte genom att peptidhållna band som är ansvariga för den primära strukturen ersätts.

Tredje nivån av struktur beskriver en bredare, tredimensionell organisation av en enskild polypeptidkedja.

Quartärstruktur Det hänvisar till hur flera polypeptidkedjor organiseras i en större molekylär komplexstruktur.

En proteinkedja som är byggd av en enda kedja behöver alltså inte ha en kvartärstruktur.

På samma sätt behöver en kort peptid inte visa alla nivåer av strukturell organisation för att ha vissa biologiska egenskaper.

Organisationen av den molekylära strukturen kan bland annat bidra genom:

• vätebindningar;
• elektrostatiska effekter;
• effekterna av van der Waals;
• hydrofob effekt;
• aromatiska effekter;
• koordinering av metalljoner i vissa molekyler;
• Kovalentiska sidokomplexer, såsom disiarckomplexer.

Disarskyddspolarna, om de förekommer, binder svavelföreningar som kommer från cysteinresterna.

De är kemiskt annorlunda än peptidhållningsbindningar som formar kedjans skelett.

Syntetiska studier livmoderslemhinnans trypsininhibitor (BPTI) De visar väl skillnaden mellan att bygga upp en kedja och att få den att ta den korrekt formade och aktiva formen.

Kemiska experter syntetiserade en linjär sekvens och genomförde sedan en oxidering- och flödingsprocess för att erhålla materialet som motsvarar det naturliga proteinet i de beskrivna strukturella och funktionella analyserna. [9]

Kan peptider ha en stabil tredimensionell struktur?

Tack.

En kort kedja behöver inte automatiskt betyda en molekyl som saknar en ordnad struktur.

CLN025 skapade en beta-hairpin-struktur i de undersökta miljöerna, medan den cykliska kalata B1 visade en ordnad struktur trots att endast 29 restripar fanns kvar. [1] [2]

Detta är dock observationer av specifika molekyler.

Det betyder inte att varje kort peptid bildar en lika stabil struktur.

Huruvida en specifik peptid upptar en ordnad konformation beror bland annat på:

• sekvenser;
• effekter mellan rester;
• begränsningar som beror på cykliskheten;
• moster av disiarczkiska typ;
• lösningsmedels;
• temperaturer;
• koncentrationer;
• närvaron av bindande partner;
• kemiska modifieringar.

Miljön kan vara särskilt viktig.

I den syntetiska studien neuropeptidet Y, En studie som omfattade 36 rester analyserade konformationen i en lösningsmedelsblandning som huvudsakligen innehöll trifluoroetanol. En helisk region observerades nära C-änden, medan den N-änden inte visade någon jämförbart regelbunden struktur. [10]

Observationer som gjorts i en sådan miljö bör inte presenteras som bevis på att peptidet har samma struktur under alla biologiska förhållanden.

Därför bör man vid tolkning av strukturella studier vara uppmärksam på de experimentella förhållandena.

Uttalande:

„Peptidet skapade en helis i de undersökta förhållandena”

Det är vetenskapligt mer exakt än:

„Peptidet har alltid en helikal struktur.”.

Har alla proteiner en fast struktur?

Nej.

Många proteiner innehåller stabilt formade domäner, men andra har omfattande regioner som är inordningslöst, och vissa kan vara i hög grad oordnade.

Sådana molekyler förekommer som dynamiska grupper av olika konformationer, i stället för att förbli i en fast, tredimensionell struktur hela tiden.

KISS1-studien är ett direkt exempel på en sådan situation.

Resultaten som erhållits med hjälp av flera experimentella metoder bekräftade dess inre oordning. [3]

Det visar på begränsningarna i den förenklade utbildningsmodellen där varje protein presenteras som en kompakt och stillastående partikel.

Detta betyder dock inte att inorganiskt protein inte kan visa organisering, egenart av effekter eller biologiskt värde.

Interna oordningar måste också särskiljas från denaturering.

Det kan utgöra den naturliga egenskapen hos en viss sekvens under vissa förhållanden.

Denaturering innebär däremot en störning av den befintliga strukturella organisationen hos en molekyl.

Ingen av dessa fenomen i sig innebär per se hydrolys av peptidhållna bindningar eller nedbrytning av molekylen till fria aminosyror.

Funktionen beror på den specifika partikeln.

Aminosyror, peptider och proteiner deltar i många sammanhängande biologiska processer, men att tillhöra någon av dessa kategorier betyder inte att de verkar tillsammans.

En signalpeptid, ett intracellulärt tripeptid, ett enzym och ett strukturellt protein kan vara byggda av aminosyraresterna och samtidigt ha helt andra funktioner.

Till exempel analyserades i en fysiologisk studie deltagare GLP-1(7–36) Som inkretin mättes svaren under infusionen hos sju frivilliga [11].

Studien gällde en viss signalmolekyl och en specifik experimentprotokoll.

Det gör det inte möjligt att dra slutsatsen att andra peptider ger samma effekter när det gäller insulinutskiljning.

En annan exempel är glutation.

Det är ett tripeptid som deltar i redoxprocesser i cellbiologi. I en av studierna användes vatten med isotopmarkörer för att bedöma glutationsyntesen hos kaniner, vilket visar att även en mycket liten peptid kan studeras som en metaboliskt reglerad substans. [12]

Detta var en studie om biosyntes, inte en studie om tillskott till människor.

Från ett vetenskapligt perspektiv är den rätta frågan alltså:

Vad gör den specifika molekylen eller sekvensen under vilka förhållanden och på grundval av vilka bevis?

Termerna „peptid” och „protein” hjälper till att beskriva molekylens identitet.

De definierar inte en universell biologisk funktion.

Att riva loss kedjan kan förändra dess identitet och aktivitet

Hydrolysen leder till sönderdelning av peptidhållna bindningar.

Enstaka splittring kan leda till att kortare peptidkedjor bildas, medan en korrekt omfattande hydrolyt kan i slutändan frigöra enskilda aminosyror.

En snittning av en lång kedja leder vanligtvis inte till en omedelbar frigörelse av alla rester.

Biologisk bearbetning av molekyler kan använda selektiv spaltning, bland annat för att:

• aktivering av prekursorer;
• avlägsnande av signalsekvenser;
• avskiljande av funktionella regioner;
• framställning av mogna peptider;
• avslutande av aktiviteten;
• uppkomsten av molekyler med olika biologiska funktioner.

Studien av systemin visar varför man inte bör anta att en fragment inte automatiskt behåller aktiviteten hos den ursprungliga molekylen.

Den N-terminala regionen deltog i receptornätverket, medan den C-terminala regionen var nödvändig för dess aktivering. De undersökta fragmenten uppförde sig inte helt enkelt som kortare versioner av den fullständiga signalmolekylen. [8]

Matsmältningen är en annan process där molekylär identitet förändras.

I en studie med deltagare upptäcktes vissa peptider i blodet som härrör från kollagen efter intag av gelatinhydrolysat.[13]

Det bekräftar närvaron av specifika fragment i de här forskningsförhållandena.

Betyder dock inte att:

• Alla peptider som kommer från livsmedel absorberas i oförändrad form;
• varje peptidhuvud upplever en process av matsmältning;
• alla proteolyserat protein uppträder på samma sätt;
• Endast detektionen av peptidspliten bekräftar den angivna hälsofördelen.

Varför är gränsen mellan ett peptid och ett protein inte entydig?

Olika tidsramar svarar på olika frågor

Begreppen peptid, polypeptid och protein täcker varandra delvis, eftersom de ofta betonar andra egenskaper hos en molekyl.

Peptid Det föreslår oftast en relativt kort kedja.

Polypeptid betonar den kemiska naturen hos aminosyran.

Protein Det hänvisar vanligtvis till en specifik biologisk substans, ett molekylärt komplex eller en enhet med en fastställd strukturell och funktionell sammanhang.

Eftersom dessa begrepp svarar på något andra typer av beskrivande frågor, kan deras betydelser delvis överlappa varandra.

Detta betyder dock inte att alla skillnader försvinner.

Den fria aminosyran förblir kemiskt en annan molekyl än den sammanbundna kedjan.

En peptid som består av två rester är betydligt mindre och strukturellt enklare än en stor proteinkomplex som består av många kedjor.

Osäkerheten uppstår framför allt när man försöker skapa en standard. en universell gräns för antalet som separerar alla peptider från alla proteiner.

Vetenskapliga exempel som visar begränsningarna av enkla regler

Dessa exempel kommer från strukturella, syntetiska och biokemiska studier, och inte från publikationer som fastställer en officiell klassificeringsgräns.

Deras betydelse ligger framför allt i att visa begränsningarna hos alltför förenklade definitioner. [1] [2] [3] [7] [9]

Naturlig eller syntetisk härkomst avgör inte klassificeringen

En peptid definieras inte bara av att den har producerats i ett laboratorium.

På samma sätt definieras protein inte bara av att det har isolerats från en levande organism.

Cellerna syntetiserar naturligt peptider och proteiner, medan forskare kan erhålla många kedjor av aminosyror genom:

• kemisk syntes;
• rekonstituerad expression;
• syntes utan celler;
• andra kontrollerade produktionssystem.

En studie som jämförde bakteriell expresion med syntes på fast fas för sekvenser som innehöll 20–40 restprodukter visade att valet av produktionsmetod beror bland annat på den specifika sekvensen och forskningskraven. [5]

En molekyl går inte över i en annan kemisk kategori bara för att tillverkningsmetoden har ändrats.

På samma sätt visar studier av syntetiskt BPTI att kemisk syntes kan leda till att en molekyl klassificeras som ett protein. [9]

Enbart beteckningen syntetisk Det bekräftar inte fullständig molekylär likhet, men dess syntetiska ursprung utesluter inte heller klassificeringen som ett protein.

Hur beskriver man en molekyl exakt?

En användbar vetenskaplig beskrivning bör ange molekylens namn, samt i lämpliga fall:

• aminosyresekvensen;
• antalet återstående delar;
• massan per enhet;
• uppgift om huruvida strukturen är linjär eller cyklisk;
• antalet kedjor;
• Viktiga koherenta sidokompositioner;
• kemiska modifieringar eller eftertranslateringsprocesser;
• strukturella egenskaper bekräftade experimentellt;
• en bekräftad biologisk funktion.

Till exempel:

„decenniumistående peptid som studerats som en minibild med en beta-hairpin-struktur”

Det ger mycket mer information än diskussionen om huruvida en molekyl bara måste tillhöra kategorin peptider eller proteiner.

På samma sätt används uttrycket:

„interna proteiner som inte är ordnade”

Det är en vetenskapligt korrekt beskrivning, inte en motsägelse [1] [3]

Denna distinktion är särskilt viktig vid tolkningen av påståenden om biologisk aktivitet.

Bevisen för ett enda protein kan inte automatiskt överföras till ett annat bara för att de båda molekylerna är kortkedjiga aminosyrakedjor.

Klassificeringen berättar för oss vilken typ av molekyl vi har att göra med. För att kunna fastslå exakt vad den aktuella molekylen gör krävs däremot studier av just den sekvensen och den molekylformen.

Vanliga frågor och svar

1. Är alla peptider proteiner?

Nej. Aminosyror och proteiner har en gemensam kemisk grund i form av kedjor av aminosyror, men inte alla aminosyror klassificeras som proteiner. Korta kedjor betraktas vanligtvis som aminosyror, medan termen „protein” även tar hänsyn till den biologiska, strukturella och historiska kontexten. CLN025 visar varför den precisa gränsen är svår att fastslå: Forskarna beskrev den tioresidiga sekvensen som en mini-protein med en organiserad beta-hairpin-struktur. Det betyder dock inte att varje kort aminosyre är en protein. Det visar bara att begreppen delvis täcker över varandra och att ingen enskild restantal inte löser alla klassificeringsfall. [1]

2. Är peptider samma sak som aminosyror?

Nej. Aminosyror är enskilda molekylära enheter, medan peptider innehåller aminosyrekedjor som är sammanbundna genom peptidbindningar. Kombinationen av aminosyror leder till att en molekyl bildas med en egen sekvens, sammanlänkade ändar, kovalenta bindningar och kemiska egenskaper. Det är alltså inte bara en blandning av ursprungliga aminosyror. Studien av systemin visar vikten av en viss sekvens: olika delar av den sammanbundna peptiden deltar olika i bindningen och aktiveringen av receptorn. Resultaten gäller en specifik växtsystematik, men de illustrerar väl den allmänna principen att peptidens identitet beror på dess sammanbundna molekylära struktur. [8]

3. Vilken polymer bildas av aminosyror?

En kedja som bildas genom sammanfogning av aminosyror genom peptidbindning kallas en polypeptid. En eller flera polypeptidkedjor kan bilda ett protein, även om begreppet polypeptid i sig inte anger någon specifik rumslig struktur eller biologisk funktion. I litteraturen har termen också använts för relativt korta sekvenser som innehåller 20–40 aminosyror. Den mest exakta allmänna definitionen är alltså „polypeptid”, medan termen „protein” används när den motsvarar en bredare biologisk identitet för en given molekyl eller komplex. [5]

4. Vad skiljer aminosyran från andra aminosyror?

En aminosyra är en enskild molekyl som utgör en byggsten, medan den resterande aminosyran är den enhet som svarar för den när den inkluderas i en peptid- eller proteinkedja. Skillnaden beror på hur den enheten ingår i strukturen och dess specifika position i sekvensen. I strukturella studier av peptider talas ofta om positionerna för de enskilda resterna, eftersom de påverkar den lokala geometrin och molekylära interaktioner. I det vardagliga språket är termen „aminosyror i proteinet” begriplig, men termen „resten av aminosyran” är mer exakt kemiskt sett när det gäller den färdiga kedjan. [4]

5. Är polypeptidet alltid ett protein?

Nej. En polypeptid beskriver främst en aminosyrakedja och behöver inte automatiskt betyda att partikeln klassificeras som ett protein. Termen förekommer i studier av relativt korta molekyler som 29-resten B1-kalat och även i arbeten som rör sekvenser som innehåller 20–40 rester. Användningen av begreppet beror på forskningsområdet, därför definierar själva ordet „polypeptid” inte en bestämd längd, en bekräftad form eller en biologisk funktion. Det är bäst att behandla dem som en beskrivning av kedjans kemiska natur och andra egenskaper definieras utifrån studier av den specifika molekylen. [2] [5]

6. Hur många aminosyror måste ett protein innehålla?

Det finns ingen miniminivå av resterna som skulle fungera i alla situationer. Konventioner baserade på längden är användbara inom utbildning och klassificering, men det finns erkända undantag. CLN025 innehåller till exempel tio restserier, men det har ändå studerats som en ordnad miniballong med en beta-hairpinstruktur. Det betyder inte att en praktisk skillnad mellan korta peptider och större proteiner är värdelös. Det visar bara att det är bäst att ange det verkliga antalet restserier i stället för att presentera en gräns som en universell reglering av namnbestämmelser. [1]

7. Är gränsen på 50 aminosyror en strikt vetenskaplig regel?

Nej. Gränsen på cirka 50 aminosyror är en praktisk konvention som används i vissa sammanhang och inte en universell kemisk regel. Kemisk struktur hos peptidhållna bindningar förändras inte plötsligt vid övergången från 50 till 51 aminosyror. Forskningar som beskriver korta kedjor som minibollar eller polypeptider visar att terminologin också kan bero på struktur, biologiskt sammanhang och forskningstraditioner. Forskning inom olika discipliner kan använda olika operativa definitioner, därför bör gränsvärdet presenteras som en konvention och inte som en absolut regel. [1] [5]

8. Kan en kort peptidstruktur bilda en stabil struktur?

Ja. Vissa korta peptider kan ta emot ordnade strukturer under lämpliga förhållanden. CLN025 studerades som en tio-kedjig beta-hairpin-struktur, medan den cykliska kalata B1 visade en ordnad struktur trots att endast 29 aminosyror fanns kvar. Dessa resultat visar möjligheterna med specifika sekvenser, inte alla korta peptider. Vikning beror bland annat på sekvenser, molekylära begränsningar, lösningsmedel, temperatur, koncentration och modifieringar. Strukturell stabilitet bör därför bedömas med avseende på den specifika molekylen och det experimentella miljön. [1] [2]

9. Har alla proteiner en konstant tredimensionell form?

Nej. Vissa proteiner eller deras regioner är inre oordnade och förekommer som dynamiska sammansättningar av olika konformationer snarare än som en fast, sammanhängande struktur. Studien KISS1 bekräftade just denna situation. Det betyder inte att alla proteiner är oordnade eller att oordning är synonymt med skada. Proteinstrukturen omfattar en spännvidd från stabila, formade domäner till flexibla regioner och dynamiska konformationssammanhang. Den rätta beskrivningen beror på den specifika molekylen och de experimentella förhållandena [3].

10. Kan två peptider med samma längd fungera annorlunda?

Ja. En liknande mängd av resterna betyder inte samma sekvens, struktur, kemi eller biologisk aktivitet. Arten av sidorande kedjor och ordningen av aminosyror påverkar molekylära interaktioner. Studien av systemin visade att olika fragment av sekvensen deltog olika i bindningen och aktiveringen av receptorn. Det är inte en jämförelse av alla möjliga peptider med samma längd, men det visar varför själva mängden av resterna inte gör det möjligt att förutsäga funktioner. För att jämföra två peptider måste man analysera deras sekvens, struktur och direkta experimentella data. [8]

11. Innehåller en tyngre molekyl alltid fler aminosyror?

Nej. Molekylvikten beror på antalet och typen av aminosyregenerer och på närvaron av ytterligare kemiska grupper. Två peptider med samma antal aminosyregenerer kan ha olika molekylvikt, eftersom de olika aminosyrorna skiljer sig åt i massa. Kemiska modifieringar kan dessutom öka massan utan att öka antalet aminosyregenerer i skelettet. Molekylvikten och molekylmassa beskriver därför olika egenskaper och ingen av dem själv definierar en universell gräns mellan ett peptid och ett protein.

12. Består varje protein av bara en kedja?

Nej. Beljerna kan innehålla en eller flera sammanlänkade polypeptidkedjor. Längden på en enskild kedja och sammansättningen av ett komplett protein är alltså olika uppgifter. En bra exempel på biologisk bearbetning är insulin: dess mogna form innehåller två kedjor som är sammanbundna med disakiskt länke som uppstår genom bearbetning av proinsulinsubstansen och avlägsnande av peptidet C. Studien av konverteringsprodukter skiljer dessa former åt i stället för att betrakta föregångaren och den mogna hormonet som identiska molekyler. Genom att ange antalet resterna måste man därför fastslå om det gäller en kedja, alla kedjorna, föregångaren eller den mogna formen. [6] [7]

13. Utför peptider och proteiner samma funktioner?

De kan delta i liknande områden inom biologi, men de enskilda molekylerna har olika funktioner. I GLP-1-studierna analyserades en specifik peptid för dess inkretyngande aktivitet hos människor, medan studierna av glutation handlade om syntesen av tripeptidet som är involverat i redoxprocesser i celler. Detta betyder inte att alla peptider uppvisar någon av dessa funktioner, liksom inte alla proteiner har en gemensam funktion. En vetenskapligt motiverad jämförelse bör gälla specifika molekyler, deras sekvenser och experimentellt bekräftade egenskaper [11] [12].

14. Bevarar peptidsubstansen sin funktion som stamcell?

Inte nödvändigtvis. Separering kan avlägsna den region som är ansvarig för bindningen, regionen som behövs för aktivering, avslöja en ny del eller leda till att en produkt med en helt annan biologisk funktion uppstår. I studien av systemin replikade fragmenten inte helt enkelt den fullständiga kombinationen av bindnings- och aktiveringsegenskaper som observerades för hela molekylen. Resultatet beror på den specifika sekvensen och kan inte automatiskt extrapoleras till alla separeringsprodukter. Fragmentet bör betraktas som en separat molekylär form som kräver sina egna data om struktur och aktivitet. [8]

15. Förändrar denaturering proteinet till aminosyror?

Nej. Denaturering stör de högre nivåerna av strukturellt proteininnehåll, men enligt definitionen kräver det inte att dess peptidstruktur bryts ned. Att bilda kortare peptider eller fria aminosyror kräver hydrolys av peptidsammanbindningar, vilket är en annan kemisk process. Strukturella oordningar i sig behöver inte heller betyda nedbrytning, vilket exemplifieras av det oförändrade, internt oordnade proteinet KISS1. Under mycket aggressiva förhållanden kan både denaturering och kemisk nedbrytning äga rum samtidigt, men de är fortfarande separata processer: förlusten av strukturer inte är detsamma som sönderdelning av en kovalent kedja. [3]

16. Kan en syntetisk molekyl fortfarande vara ett protein?

Ja. Kemisk syntes utesluter inte klassificering av en molekyl som ett protein. Kemiska forskare syntetiserade en bovin pankreatisk trypsininhibitor och efter korrekt oxidation och folding uppnådde de ett material som motsvarar det naturliga proteinet i de beskrivna analytiska och funktionella jämförelserna, inklusive i fråga om hämmande aktivitet. Resultatet berodde på en korrekt konstruktion av sekvensen, foldingen och karaktäriseringen och innebär inte att varje syntetiskt polypeptid automatiskt får den rätta strukturen. Klassificeringen avgörs av molekylär identitet och sammanhang, medan tillverkningsmetoden är en separat egenskap. [9]

17. Är livsmedelsproteiner, proteinhydrolysat och fria aminosyror samma sak?

Nej. Spannmålsproteiner är större sammanhängande molekyler; hydrolysatproteiner innehåller en blandning av nedbrytningsprodukter, medan fria aminosyror är enskilda molekylära enheter. Deras sammansättning och molekylform är därför olika. I en studie med deltagare upptäcktes vissa peptider i blodet som härrör från kollagen efter intag av gelatinhydrolysat, vilket visar att det kan förekomma identifierbara peptidsubstanser under matsmältningsprocessen och absorptionen. Studien bekräftade dock inte att alla peptider absorberas universellt i oförändrad form eller att alla proteintillskotten har samma verkan. [13]

18. Vad är skillnaden mellan ett peptid och ett polypeptid?

Begreppen beskriver båda kedjor av aminosyraresterna som sammanfogats genom peptidbindningar. Uttrycket „peptid” används ofta för relativt korta kedjor, medan „polipeptid” betonar en långkedjad aminosyra och används för längre sekvenser. Det finns dock ingen universell numerisk punkt där ett begrepp måste bytas ut mot ett annat. Studien som beskriver B1-kalatens 29-restkedja som ett polypeptid samt arbeten med 20–40-restpolypeptider visar på överlappning av dessa termer. Den faktiska mängden av resterna och molekylstrukturen är därför mer informativa än en fastgränsad uppsättning kriterier. [2] [5]

19. Kan samma aminosyror skapa olika peptider?

Ja. Denna samling av aminosyror kan leda till att olika peptider bildas om sekvensen ändras. Till exempel innehåller glycyloalanin och alanloglicin glycin och alanin, men om sekvenserna byts om leder det till att en annan molekylär sekvens uppstår. I längre peptider kan ändringen av sekvensen påverka placeringen av laddning, hydrofoba regioner, bindningsytor och strukturella tendenser. Därför är aminosyrens identitet inte bara beroende av vilka aminosyror den innehåller, utan också av deras sekvens och bindningsmetod.

20. Varför är sekvensen viktigare än själva beteckningen „peptid”?

Begreppet „peptid” beskriver en bred kemisk kategori och inte enbart en typ av biologisk aktivitet. Två peptider kan helt skilja sig åt i sekvens, längd, struktur, lokalisering, bearbetningsmetod och molekylära syften. Studien av systemin visar experimentellt att även olika regioner av en och samma molekyl kan spela olika roller i bindningen och aktiveringen av receptorn. [8] Därför kan resultaten för ett enda peptid inte extrapoleras till ett annat bara på grund av att båda molekylerna tillhör samma kategori. För att fastslå den biologiska funktionen krävs data om en specifik sekvens och en specifik molekyl.

Begränsningar av klassificering av peptider och proteiner

Vid användning av termerna aminosyra, peptid, polypeptid och protein bör man vara medveten om några begränsningar.

Först och främst, Det finns ingen universell numerisk gräns mellan ett peptid och ett protein.. En gräns som 50 % kan vara en användbar konvention, men den vetenskapliga litteraturen innehåller tydliga undantag. [1] [2] [5]

För det andra, strukturen skapar inte heller en enkel gräns. Vissa korta peptider tar upp ordnade strukturer, medan vissa erkända proteiner i stor utsträckning förblir inrelementerade [1] [2] [3]

För det tredje, Molekylmassa och restantal är relaterade, men separata parametrar. Modifikationer, olika typer av rester samt närvaron av flera kedjor kan ändra massan utan att det ger en enkel överlappning med längden på den enskilda kedjan.

Fjärde, Det är nödvändigt att skilja mellan prekursoriska former och fullt utvecklade former.. Biologisk bearbetning kan förändra kedjans längd, bindningssättet och molekylär identitet, vilket är fallet med proinsulins bearbetning [6] [7].

Femte, Produktionsmetoden fastställer inte klassificeringen. Partiklar som bildas naturligt och kemiskt syntetiseras kan ha samma grundläggande molekylära identitet om deras sekvens, struktur och andra relevanta egenskaper bekräftas. [5] [9]

Po sjätte, Att tillhöra en kategori gör det omöjligt att förutse biologisk aktivitet. Peptider har inte samma fysiska effekt, bara för att de är peptider; liksom alla proteiner utför inte alla peptider samma funktion. [8] [11] [12]

Slutligen måste strukturella observationer tolkas i de förhållanden där de gjordes. En peptid som tar sig en viss konformation i ett visst lösningsmedel eller experimentellt miljö kan bete sig annorlunda under andra förhållanden. [10]

Dessa begränsningar betyder inte att terminologin är oanvändbar. De visar dock varför den är bäst att använda tillsammans med en mer exakt beskrivning av molekylernas egenskaper.

Sammanfattning

Aminosyror, peptider, polypeptider och proteiner hör till samma breda kemiska hierarki, men de beskriver olika nivåer av molekylär organisation.

Aminosyror De är enskilda byggenheter.

När de återstående aminosyrorna blir kovalentbundna genom peptidbindningar, bildas Peptider och polypeptidkedjor.

Proteiner De består av en eller flera sådana kedjor som behandlas inom en bredare strukturell och biologisk kontext.

Övergången från ett aminosyra till ett peptid är kemiskt tydlig eftersom bildandet av ett peptidbindningsförhållande leder till bildandet av en ny, sammanhängande molekyl.

Gränsen mellan ett peptid och ett protein är betydligt mindre entydig.

Längden på kedjan ger användbar beskrivande information, men det finns ingen universell gräns för antalet resterna som korrekt skulle klassificera varje molekyl. Studien av tioresten mini-ball CLN025, den 29-restiga cykliska kalaten B1 och det internt oordnade proteinet KISS1 visar varför enkla regler kräver ytterligare kontext. [1] [2] [3]

Strukturen anger inte heller någon universell gräns. Korta peptider kan anta ordnade konformationer, medan vissa proteiner kan innehålla en betydande grad av oordning.

På samma sätt räcker inte massa, naturlig eller syntetisk, och biologisk funktion ensam för att avgöra om varje aminosyrakedja ska betecknas som ett peptid eller ett protein.

Därför är det mest informativa i vetenskaplig kommunikation att beskriva detaljerna noggrant. en specifik molekyl:

sin sekvens, restmängder, arkitektur, modifieringar, experimentellt observerad struktur, bearbetningsstatus och bekräftade biologiska egenskaper.

Den viktigaste skillnaden kan sammanfattas enligt följande:

Aminosyror är byggstenarna; peptidbindningar sammanfogar dessa enheter till peptider och polypeptidkedjor; proteiner däremot är biologiska molekyler som består av en eller flera sådana kedjor. Gränsen mellan ett peptid och ett protein är dock resultatet av vetenskapliga konventioner och molekylära sammanhang, inte av en universell mängd aminosyror.

Varning

Artikelns syfte är endast utbildningsrelaterat och vetenskapligt informativt. Den förklarar terminologi, molekylär struktur, klassificering av peptider och proteiner, biologisk bearbetning av molekyler samt exempel som härrör från publicerade studier. Den utgör inte medicinsk rådgivning, kostrådgivning, rekommendationer om behandling, rekommendationer av produkter eller råd om användning av peptider, proteiner, aminosyraer, kosttillskott eller relaterade substanser. Resultaten av strukturella, biokemiska, djurstudier och studier med deltagande av människor måste tolkas inom ramen för metoderna, förhållandena och begränsningarna för de enskilda arbetena.

Referenser

1. Hatfield, M. P. D., Murphy, R. F., & Lovas, S. (2010). Spektralegenskaper för VCD:et hos beta-hårknutande miniproteinet CLN025 i olika lösningsmedel. Biopolymerer, 93(5), 442–450. https://doi.org/10.1002/bip.21356
2. Saether, O., Craik, D. J., Campbell, I. D., Sletten, K., Juul, J., & Norman, D. G. (1995). Utlärning av den primära och tredimensionella strukturen hos det uterotontiska polypeptidet kalata B1. Biokemi, 34(13), 4147–4158. https://doi.org/10.1021/bi00013a002
3. Ibanez de Opakua, A., Merino, N., Villate, M., Cordeiro, T. N., Ormaza, G., Sanchez-Carbayo, M., Diercks, T., Bernado, P., & Blanco, F. J. (2017). Metastasismottagaren KISS1 är ett protein med inre ordning som är något längre än en slumpmässig spiral. PLOS ONE, 12(2), Artikel e0172507. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0172507
4. Improta, R., Vitagliano, L., & Esposito, L. (2011). Peptidbindningsförvrängningar på grund av planäritet: Nya insikter från kvantmekaniska beräkningar och peptids/proteinkristallstrukturer. PLOS ONE, 6(9), Artikel e24533. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0024533
5. Straner, P., Taricska, N., Szabo, M., Toth, G. K., & Perczel, A. (2016). Bakterieuttryck och/eller peptidsyntes i fast fas av långa polypeptider och miniproteiner på upp till 20–40 aminosyror, fallstudien med klass B-GPCR-ligander. Current Protein & Peptide Science, 17(2), 147–155. https://doi.org/10.2174/1389203716666151102105215
6. Linde, S., Welinder, B. S., & Nielsen, J. H. (1993). Analys av proinsulin och dess omvandlingsprodukter genom reversfasekromatografi med högytande vätskekromatografi. Journal of Chromatography, 614(2), 185–204. https://doi.org/10.1016/0378-4347(93)80309-r
7. Davidson, H. W., & Hutton, J. C. (1987). Insulinförening-granulära carboxypeptidase H. Reningsprocessen och bevisning för dess delaktighet i proinsulinförädlingen. Biokemisk tidskrift, 245(2), 575–582. https://doi.org/10.1042/bj2450575
8. Meindl, T., Boller, T., & Felix, G. (1998). Växtens sårhormonsystem binder sig till den N-terminala delen av sin receptor, men behöver den C-terminala delen för att aktivera den. The Plant Cell, 10(9), 1561–1570. https://doi.org/10.1105/tpc.10.9.1561
9. Ferrer, M., Woodward, C., & Barany, G. (1992). Solid-phase syntes av bovin pankreatisk trypsininhibitor (BPTI) och två analoger. En kemisk metod för att utvärdera rollen av disulfidbroar i proteinspackning och stabilitet. International Journal of Peptide and Protein Research, 40(3–4), 194–207. PubMed-post
10. Mierke, D. F., Durr, H., Kessler, H., & Jung, G. (1992). Neuropeptid Y. Optimerad fastfasysyntes och konformationsanalys i trifluoretanol. European Journal of Biochemistry, 206(1), 39–48. https://doi.org/10.1111/j.1432-1033.1992.tb16899.x
11. Kreymann, B., Williams, G., Ghatei, M. A., & Bloom, S. R. (1987). Glucagon-like peptide-1 7-36: En fysiologisk incretin hos människa. The Lancet, 2(8571), 1300–1304. https://doi.org/10.1016/s0140-6736(87)91194-9
12. Cabral, C. B., Bullock, K. H., Bischoff, D. J., Tompkins, R. G., Yu, Y. M., & Kelleher, J. K. (2008). Estimering av glutationsyntesen med deutererad vatten: En modell för peptidbiosyntes. Analytisk biokemi, 379(1), 40–44. https://doi.org/10.1016/j.ab.2008.04.042
13. Iwai, K., Hasegawa, T., Taguchi, Y., Morimatsu, F., Sato, K., Nakamura, Y., Higashi, A., Kido, Y., Nakabo, Y., & Ohtsuki, K. (2005). Identifiering av livsmedelsuppkomna kollagenpeptider i mänskligt blod efter oral intagning av gelatinhydrolysat. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 53(16), 6531–6536. https://doi.org/10.1021/jf050206p