El enlace peptídico es un enlace amídico covalente que une los residuos de aminoácidos en péptidos y proteínas. Estos enlaces forman el esqueleto molecular continuo de las cadenas peptídicas, manteniendo un orden específico de aminoácidos y permitiendo al mismo tiempo que toda la cadena adopte diversas estructuras tridimensionales.
Los enlaces peptídicos son uno de los elementos básicos de la estructura péptidos. Comprender su química ayuda a explicar cómo los aminoácidos individuales pueden formar moléculas más grandes con una secuencia y estructura estrictamente definidas.
Aunque la definición básica es relativamente simple, la química del enlace peptídico tiene varias características importantes. Los electrones dentro del grupo amida están distribuidos de tal manera que el enlace carbono-nitrógeno se asemeja parcialmente a un doble enlace. Esto limita la posibilidad de rotación libre alrededor del enlace peptídico, pero no hace que todo el péptido o proteína se convierta en una molécula rígida. Otros enlaces en el esqueleto conservan una mayor libertad de rotación, lo que permite que las cadenas peptídicas se doblen y plieguen.
Los enlaces peptídicos se pueden analizar desde varias perspectivas científicas diferentes. Los químicos estudian su estructura electrónica y geometría. Los biólogos moleculares analizan la forma en que son creados por los ribosomas y otros sistemas biológicos. Los biólogos estructurales comprueban cómo la geometría de estos enlaces afecta a la arquitectura de las proteínas. Los bioquímicos, en cambio, estudian cómo las enzimas rompen selectivamente los enlaces peptídicos durante el procesamiento y la degradación de las proteínas.
Estas distinciones ayudan a comprender cómo las proteínas pueden conservar simultáneamente una secuencia específica de aminoácidos, adoptar estructuras complejas, producirse en procesos biológicos controlados y luego someterse a procesamiento o degradación. El estudio de la estructura electrónica, la geometría peptídica, la catálisis ribosómica, la síntesis de proteínas y la hidrólisis enzimática proporciona información complementaria sobre estos procesos. [1] [2] [3]
¿Qué es un enlace peptídico?
Definición química del enlace peptídico
El enlace peptídico es enlace amídico entre el grupo derivado del grupo carboxílico de un aminoácido y el grupo derivado del grupo amino de otro aminoácido. En la estructura típica de una proteína, se unen el átomo de carbono del grupo carbonílico y el átomo de nitrógeno del siguiente resto aminoácido.
El fragmento más representado tiene la forma de:
–C(=O)–NH–
El fragmento C=O es grupo carbonilo, mientras que el enlace C-N es el enlace al que solemos referirnos cuando hablamos específicamente del enlace peptídico. Juntos, estos átomos y su entorno inmediato forman el llamado grupo peptídico o grupo amida.
Esta distinción es importante, ya que la estructura completa del grupo peptídico contiene varios enlaces diferentes. El enlace carbono-oxígeno no es el que une entre sí dos restos de aminoácidos. Esa función la desempeña el enlace amida carbono-nitrógeno.
Cuando un aminoácido se une a otro, el átomo de carbono del grupo carbonilo unido a un residuo se une covalentemente al átomo de nitrógeno unido al siguiente residuo. La repetición de este patrón conduce a la formación del esqueleto de una cadena peptídica típica.
Los estudios de estructura electrónica analizan, entre otras cosas, la interacción del par de electrones libre del nitrógeno con el sistema carbonílico adyacente, lo que permite explicar por qué este enlace difiere de un enlace sencillo carbono-nitrógeno ordinario que gira libremente. [1]
¿Por qué el enlace peptídico es un enlace covalente?
El enlace peptídico es covalente, ya que los átomos unidos comparten electrones.
No se trata de una interacción iónica entre dos aminoácidos cargados separados, ni de un enlace de hidrógeno que mantenga próximas entre sí las distintas partes de la cadena ondulada.
Es precisamente este enlace covalente el que garantiza la continuidad química de la secuencia de aminoácidos. Los residuos siguen formando parte de la misma cadena hasta que una reacción química altere la forma en que están unidos.
Esta distinción se vuelve especialmente importante al hablar del plegamiento y despliegue de proteínas. La cadena peptídica puede doblarse, cambiar de conformación, perder parte de las interacciones que estabilizan su estructura e incluso sufrir un desdoblamiento significativo sin necesidad de romper los enlaces peptídicos que mantienen su secuencia primaria.
Sin embargo, «covalente» no significa «indestructible».
Las enzimas y las condiciones químicas adecuadas pueden provocar la escisión de los enlaces peptídicos. Sin embargo, dicha escisión es una reacción química que cambia la forma en que se conectan los átomos, y no solo un cambio en la forma de la molécula.
Los estudios estructurales de una de las proteasas aspartílicas muestran cómo la enzima puede organizar adecuadamente el sustrato, que contiene un enlace peptídico y una molécula de agua, de una forma que resulta esencial para la hidrólisis. [4]
Carácter parcial del doble enlace y resonancia
El enlace peptídico C–N suele representarse en las fórmulas como una línea simple, aunque la distribución real de los electrones es más compleja.
El par de electrones libres del átomo de nitrógeno puede participar en el sistema electrónico adyacente del grupo carbonilo. La deslocalización de los electrones hace que el enlace C–N adquiera el carácter parcial del enlace doble.
Este fenómeno suele explicarse mediante estructuras resonantes.
Las estructuras de resonancia son formas alternativas de representar la distribución de los electrones en una misma molécula. No deben interpretarse como formas distintas de la molécula que cambian rápidamente unas en otras.
Del mismo modo, el carácter parcial del enlace doble no significa que el enlace peptídico sea un enlace simple durante un porcentaje determinado de tiempo y un enlace doble normal durante el tiempo restante.
La estructura electrónica real resulta de la deslocalización de electrones dentro de todo el grupo amida.
En un estudio computacional, Fedorov analizó la contribución de la resonancia en la determinación del orden del enlace peptídico. Los valores numéricos detallados dependen del método de análisis de la estructura electrónica utilizado. Sin embargo, para una comprensión general, la conclusión más importante es que la interacción entre el sistema electrónico del nitrógeno y el grupo carbonilo es responsable de parte de las propiedades inusuales del enlace C–N. [1]
¿Por qué está limitada la rotación alrededor del enlace peptídico?
El carácter parcial del enlace doble tiene una importante consecuencia estructural: la rotación alrededor del enlace amida C–N está más limitada que la rotación alrededor de un enlace simple típico de carbono-nitrógeno.
Sin embargo, esto no significa que las proteínas no puedan doblarse ni plegarse.
El esqueleto peptídico también contiene otros enlaces alrededor de los cuales es posible la rotación. Por lo tanto, la cadena proteica consta de grupos peptídicos repetitivos, relativamente rígidos, unidos a través de otros enlaces del esqueleto caracterizados por una mayor flexibilidad conformacional.
La combinación de estas restricciones y de las posibilidades de rotación contribuye a la enorme diversidad de estructuras tridimensionales que pueden adoptar los péptidos y las proteínas.
La planitud aproximada no significa que la estructura sea perfectamente plana
La deslocalización de electrones favorece en la aproximación de geometría plana del grupo peptídico y limita la rotación alrededor del enlace amídico C–N.
Sin embargo, las estructuras moleculares reales pueden diferir ligeramente de la planeidad matemática ideal.
Improta y colaboradores combinaron cálculos mecano-cuánticos con el análisis de estructuras cristalinas de péptidos y proteínas. Los resultados mostraron pequeñas desviaciones sistemáticas dependientes de la geometría local del esqueleto. [2]
Por lo tanto, es correcto afirmar que los grupos peptídicos son aproximadamente plano, sin embargo, afirmar que cada enlace peptídico en cada péptido o proteína es perfectamente plano sería una simplificación excesiva.
Este es un buen ejemplo de la diferencia entre un modelo educativo útil y el comportamiento más detallado de las estructuras moleculares reales.
¿Dónde se encuentran los enlaces peptídicos?
En el esqueleto de péptidos y proteínas
Los enlaces peptídicos se encuentran entre los residuos de aminoácidos vecinos en las cadenas peptídicas y proteicas típicas.
Junto con los átomos que los rodean, forman un elemento repetitivo esqueleto molecular. Las cadenas laterales de los aminoácidos sobresalen de esta estructura y confieren a los distintos residuos propiedades químicas adicionales.
Una proteína puede constar de una sola cadena peptídica o de varias cadenas unidas en un complejo molecular más grande. Cada una de ellas tiene sus propias conexiones de esqueleto.
Diferentes cadenas pueden unirse mediante interacciones no covalentes o enlaces covalentes adicionales. Tales uniones no deben clasificarse automáticamente como enlaces peptídicos.
La síntesis química del inhibidor de tripsina pancreático bovino, o BPTI, muestra bien la diferencia entre la formación del esqueleto peptídico y la creación de puentes disulfuro adicionales. Los investigadores primero obtuvieron el material lineal y luego llevaron a cabo su oxidación y caracterización. Por lo tanto, el estudio separa la construcción de la cadena de su posterior organización estructural. [5]
Los enlaces peptídicos determinan la continuidad de la secuencia primaria
La secuencia de residuos de aminoácidos en un péptido o proteína se determina como su estructura primaria.
Los enlaces peptídicos proporcionan la continuidad covalente básica que mantiene esta secuencia.
Por ejemplo, la secuencia:
Ala-Gly-Ser
contiene los mismos tres tipos de aminoácidos que:
Ser–Gly–Ala
Sin embargo, no son las mismas secuencias peptídicas.
La posición de los distintos residuos con respecto a los enlaces peptídicos es diferente.
Por lo tanto, la sola lista de aminoácidos presentes en la muestra no es suficiente para identificar el péptido. También es necesario conocer su orden y forma de unión.
En péptidos lineales y cíclicos
Un péptido de cadena abierta típico tiene dos extremos, denominados Fin i C-koniec.
El extremo N corresponde a un extremo del esqueleto peptídico, mientras que el extremo C corresponde al otro. Las secuencias peptídicas se escriben por norma general desde el extremo N hacia el extremo C.
Péptido cíclico de cabeza a cola, es decir, cerrado por la unión de los extremos de la cadena, contiene un enlace de cadena adicional que forma un anillo.
Sin embargo, no todos los péptidos cíclicos se cierran de la misma manera. El anillo también puede formarse con la participación de una cadena lateral, y algunas moléculas contienen más de un tipo de enlace cruzado.
Definición cíclico por lo tanto, describe una característica de la arquitectura de la molécula, y no una única forma universal de su conexión.
La kalata B1 es un ejemplo específico de péptido cuyo esqueleto cíclico se ha confirmado mediante, entre otros, estudios de escisión enzimática, análisis de secuencia y estructura molecular. La molécula también contiene puentes disulfuro. Estos enlaces azufre-azufre adicionales difieren químicamente de los enlaces amida que conectan los residuos en el esqueleto peptídico. [6]
Enlaces peptídicos frente a enlaces isopeptídicos
En un esqueleto proteico típico, los enlaces peptídicos unen los grupos amino principales y los grupos derivados de los grupos carboxilo.
Un enlace amídico en cuya formación participa grupo funcional de la cadena lateral del aminoácido, se suele describir como enlace isopeptídico.
Por lo tanto, la regla más importante es determinar qué átomos se han unido realmente entre sí.
La mera presencia de un enlace amídico no significa automáticamente que se encuentre en una cadena peptídica típica. Al mismo tiempo, no todo enlace cruzado en un péptido o proteína es un enlace amídico; los puentes disulfuro y otras modificaciones covalentes tienen una química diferente.
Para los principiantes, el punto de partida más útil son los enlaces peptídicos ordinarios presentes en el esqueleto. Los enlaces más especializados pueden considerarse entonces como variantes distintas de la organización molecular.
¿Cuántos enlaces peptídicos hay en la cadena?
Cadena abierta simple y no ramificada que contiene n residuos de aminoácidos tienen n − 1 enlaces peptídicos en la cadena principal.
Esto significa que:
- un dipéptido tiene 2 residuos y 1 enlace peptídico;
- un tripéptido tiene 3 residuos y 2 enlaces peptídicos;
- un tetrapéptido tiene 4 residuos y 3 enlaces peptídicos;
- El pentapéptido tiene 5 residuos y 4 enlaces peptídicos;
- una cadena abierta que contiene 10 residuos tiene 9 enlaces peptídicos.
Esta dependencia se deriva directamente del modo de unión de la molécula: cada residuo sucesivo alarga la cadena existente mediante un enlace de esqueleto adicional.
El que le corresponde cadena cíclica de tipo cabeza a cola contiene n enlaces peptídicos en el esqueleto, ya que el enlace adicional cierra el anillo.
Sin embargo, estas suposiciones son importantes. Las ramificaciones, las conexiones inusuales de las cadenas laterales, la presencia de varias cadenas, los enlaces isopeptídicos o los elementos del esqueleto distintos de los amídicos requieren un análisis más detallado.
El solo número de residuos no siempre es suficiente para determinar todos los enlaces covalentes presentes en un péptido o proteína compleja.
¿Cómo unen los enlaces peptídicos a los aminoácidos?
De aminoácidos libres a residuos de aminoácidos
El aminoácido libre y el residuo correspondiente que se encuentra en el péptido están relacionados entre sí, pero no describen exactamente el mismo estado químico.
Cuando un aminoácido se incorpora a un péptido, sus grupos funcionales participan en los enlaces que forman la cadena.
Por ejemplo, la combinación de glicina y alanina en un orden determinado da lugar a glicilalaninas. La inversión del orden da lugar a alanoglicina.
Los tipos de aminoácidos son los mismos, pero su posición y entorno químico difieren.
Esto demuestra por qué la secuencia del péptido contiene más información que una simple lista de sus componentes.
La formación de enlaces puede estudiarse directamente. Stachelhaus y sus colaboradores analizaron los elementos del sistema de síntesis de péptidos no ribosomales y demostraron que la alteración de un residuo ubicado en el sitio catalítico propuesto impedía la reacción de condensación investigada. Por lo tanto, el experimento vincula la formación de un producto peptídico específico con la acción de una maquinaria molecular concreta. [7]
La ecuación de condensación es un modelo de balance de reacción
En la química básica, la formación de un péptido se representa a menudo mediante la ecuación:
aminoácido + aminoácido → dipéptido + agua
La ecuación muestra la diferencia en composición entre las moléculas de partida libres y el producto unido.
Es útil para comprender la relación química entre los sustratos y el producto.
Sin embargo, no debe interpretarse como un mecanismo completo de síntesis de proteínas dentro de una célula viva.
Los aminoácidos libres simplemente no se alinean unos junto a otros en el agua, no liberan espontáneamente moléculas de agua y no forman por sí mismos una secuencia proteica específica.
La síntesis biológica requiere sustratos activados, maquinaria molecular ordenada, información que determine la secuencia y procesos preparatorios que requieren energía.
Por lo tanto, es importante distinguir entre ecuación química global a mecanismo de reacción.
La ecuación describe la composición inicial y final. El mecanismo explica los pasos moleculares reales y los productos intermedios que conducen a la reacción.
Los experimentos con ribosomas investigan precisamente esos detalles mecanísticos en lugar de limitarse a reproducir la ecuación de condensación conocida. [3]
¿Cómo forma el ribosoma los enlaces peptídicos?
Durante la traducción, los ácidos ribonucleicos de transferencia, es decir, ARNt, transportan aminoácidos y la cadena peptídica en crecimiento dentro del ribosoma.
El grupo amino del aminoácido recién suministrado reacciona con el extremo activado de la cadena existente unido al ARN t, lo que conduce a la transferencia del péptido en crecimiento al residuo unido al nuevo ARN t.
El extremo de la cadena peptídica se alarga habitualmente por el extremo C-końca.
La activación de los aminoácidos y su unión al ARNt son procesos dependientes de energía. Por lo tanto, la descripción de cualquier enlace peptídico ribosomal como surgido directamente entre dos aminoácidos libres o como una simple „eliminación de agua” por el ribosoma sería una simplificación excesiva.
Weinger y colaboradores modificaron un grupo químico en el sustrato de tRNA y observaron una reducción significativa en la formación de enlaces peptídicos sin una disminución correspondiente en la unión del sustrato. Este resultado proporcionó evidencia de catálisis asistida por sustrato, en la cual las propiedades químicas de los propios sustratos participan en el curso de la reacción. [3]
El experimento señala por tanto el papel mecanístico de la química del ARNt, y no exclusivamente su función como un portador pasivo.
La formación de enlaces peptídicos tiene una dirección específica
La síntesis de proteínas es un proceso direccional.
Dado que la cadena en crecimiento se alarga desde el extremo C-terminal, la secuencia se desarrolla en una orientación específica.
Esto está relacionado con la convención común de escribir secuencias de péptidos y proteínas desde De extremo a extremo.
Sin embargo, la dirección no es únicamente una convención de escritura. La inversión de la secuencia suele dar lugar a una molécula diferente, ya que cada residuo ocupa entonces una posición distinta con respecto a los demás elementos de la cadena.
Otras formas de crear un tipo de enlace similar
Los enlaces peptídicos también pueden formarse fuera del ribosoma.
Especializadas sistemas enzimáticos no ribosomales sintetizan algunos péptidos, mientras que la síntesis de péptidos en laboratorio utiliza componentes activados y reacciones de acoplamiento controladas.
Estas rutas difieren en su organización, sus sustratos, las condiciones de reacción y sus mecanismos catalíticos.
No se les debe tratar como procesos idénticos solo porque los productos finales contienen enlaces amídicos.
La investigación sobre la formación de enlaces no ribosomales y la síntesis química de la BPTI constituyen ejemplos de tales métodos de producción alternativos. [7] [5]
El método de síntesis, por sí solo, tampoco determina si una molécula determinada es un péptido o una proteína. La síntesis química puede dar lugar a un material equivalente a un péptido o una proteína de origen natural, siempre que se determinen correctamente su secuencia y otras características estructurales relevantes.
Enlaces peptídicos frente a otros enlaces en las proteínas
Enlaces de la cadena principal frente a las interacciones responsables del plegamiento
Los enlaces peptídicos mantienen unida la secuencia de aminoácidos.
Por su parte, otras interacciones ayudan a determinar la forma en que dicha secuencia se ordena en el espacio tridimensional o cómo interactúan entre sí las distintas cadenas peptídicas.
Los enlaces de hidrógeno se forman entre los donantes y aceptores de hidrógeno correspondientes. Dentro del esqueleto peptídico, los átomos de oxígeno de los grupos carbonilo pueden actuar como aceptores, mientras que muchos grupos amida N–H pueden actuar como donantes.
El amida no suele considerarse un aceptor de enlaces de hidrógeno porque su par de electrones libre participa en el sistema electrónico del grupo amida.
También requieren especial atención los grupos peptídicos que contienen prolina, ya que el nitrógeno del esqueleto carece entonces del hidrógeno N-H típico.
Por lo tanto, un grupo que contenga un enlace peptídico puede participar en la formación de enlaces de hidrógeno, pero el enlace peptídico y el enlace de hidrógeno son diferentes tipos de conexiones.
Uno de ellos une covalentemente residuos de aminoácidos. El segundo participa en interacciones dentro de la molécula o entre moléculas.
Investigaciones sobre el péptido corto y plegado CLN025 analizaron la estructura estabilizada, entre otros factores, por enlaces de hidrógeno y otras interacciones intramoleculares. Esto demuestra que el plegamiento puede ocurrir sin la formación de una nueva secuencia vertebral. [8]
Los puentes disulfuro unen cadenas laterales que contienen azufre
Los puentes de disulfuro son enlaces covalentes de azufre-azufre que se forman con mayor frecuencia entre las cadenas laterales de la cisteína.
Pueden unir fragmentos distantes de la misma cadena peptídica o cadenas diferentes.
No son enlaces peptídicos y no se encuentran en todas las proteínas.
La formación o rotura de un puente disulfuro puede alterar significativamente la organización espacial de la molécula sin necesidad de cortar su esqueleto peptídico.
En el estudio sobre la síntesis del BPTI se preparó la secuencia natural y análogos diseñados para modificar la capacidad de formar puentes disulfuro. El material con la secuencia natural se comparó con el BPTI natural mediante métodos analíticos y funcionales. El resumen de la publicación no confirmaba todas las implicaciones estructurales relativas a los análogos, por lo que las diferencias propuestas no deben presentarse como resultados plenamente establecidos. [5]
Interacciones iónicas e hidrófobas
Los grupos cargados pueden atraerse o repelerse, afectando a la organización espacial de la molécula.
Por otro lado, las regiones no polares interactúan con el entorno acuoso de una manera que puede favorecer su ocultamiento en el interior de la estructura, su asociación o agregación. Este fenómeno se analiza a menudo en el contexto de del efecto hidrófobo.
Estas interacciones pueden tener una gran importancia para el plegamiento de las proteínas; sin embargo, la interacción hidrofóbica no es un nuevo enlace covalente entre aminoácidos.
Por eso, no es correcto denominar «enlaces peptídicos» a todas las fuerzas que estabilizan la proteína.
Los distintos tipos de interacciones también pueden responder de manera diferente a la temperatura, el disolvente, la acidez, las condiciones iónicas y otros cambios ambientales. Determinar qué tipo de enlace o interacción está cambiando permite comprender con mayor exactitud el resultado del experimento.
| Conexión o interacción | Ubicación o función principal | ¿Conecta los residuos adyacentes en una cadena principal típica? |
|---|---|---|
| Enlace peptídico | Enlace covalente amídico a lo largo de la cadena | Toma |
| Enlace de hidrógeno | La interacción entre el donante y el aceptor correspondientes | No |
| Puente de disulfuro | Enlace covalente entre cadenas laterales que contienen azufre | No |
| Interacción iónica | Atracción o repulsión de grupos cargados | No |
| Efecto hidrófobo | El impacto de los grupos no polares y su entorno de disolvente | No |
La desnaturalización no es lo mismo que la hidrólisis
Desnaturalización modifica el tipo de organización estructural típica de una proteína.
Puede interferir con la plegamiento o la asociación de las moléculas, dejando al mismo tiempo la mayoría o todas las uniones peptídicas intactas.
Hidrólisis Sin embargo, modifica los enlaces químicos al descomponer la unión susceptible de desintegración en la reacción con la participación del agua.
En ciertas condiciones, ambos procesos pueden ocurrir en la misma muestra, pero no son sinónimos.
El desarrollo de una proteína no significa automáticamente su transformación en péptidos más cortos o aminoácidos libres.
Este fenómeno también se observa en los estudios estructurales. En los experimentos sobre el colágeno termofructificado se identificaron diferentes configuraciones cis y trans de las interacciones peptídicas relacionadas con la prolina. El cambio de la configuración del esqueleto es un fenómeno diferente del descompuesto químico de este. [9]
Formación, propiedades y hidrólisis de las uniones peptídicas
La estabilidad depende del tipo de reacción analizada
Las uniones peptídicas son suficientemente duraderas para mantener los cadenas biológicas, y al mismo tiempo los organismos pueden formarlas y desintegrarlas selectivamente.
No hay contradicción en esto.
La velocidad de respuesta depende, entre otras cosas, de Barreras de activación y presencia de catalizadores, Sin embargo, si una reacción es termodinámicamente beneficiosa o no es un asunto diferente.
El proceso puede ser químicamente posible, pero sin la correspondiente catalización, se lleva a cabo muy lentamente.
Por otra parte, un enzima puede acelerar significativamente una reacción determinada al proporcionar una ruta de reacción más favorable.
El enzima no cambia la unión peptídica en un tipo completamente diferente de unión. Cambia la ruta por la que transcurre la reacción química.
También sería incorrecto atribuir un tiempo de vida universal a todos los enlaces peptídicos, peptidos o proteínas presentes en el agua.
La secuencia, la estructura local, la disponibilidad de la unión, los grupos químicos adyacentes, la temperatura, el pH, la composición del disolvente y la presencia de catalizadores pueden influir en la conducta observada.
¿Qué cambia la hidrólisis?
La hidrólisis utiliza agua en una reacción química que descompone el enlace amidado, dando como resultado la formación de nuevas extremidades procedentes de grupos carboxílicos y amino.
Su forma ionica exacta depende de las condiciones del disolvente circundante.
La desintegración de un enlace en el esqueleto no conduce automáticamente a la formación de aminoácidos libres.
Si se rompe la unión peptídica interna en una cadena más larga y abierta, los productos directos serán normalmente dos fragmentos peptídicos más cortos.
Se necesitan otras reacciones de desintegración para reducir gradualmente estos fragmentos y finalmente liberar las aminoácidos individuales.
Los estudios estructurales de la penicillopepsina analizaron la manera en que la proteasa aspartilasa puede organizar la agua y los grupos de substrato en el proceso de hidrólisis. El modelo de reacción propuesto se basó en observaciones cristalográficas y en la modelización. Proporciona información sobre un único mecanismo enzimático, pero no demuestra que cada proteasa utilice un método de catalisis idéntico. [4]
La hidrólisis puede ser selectiva
Las proteasas y las peptididas difieren en cuanto a los enlaces reconocidos y los entornos moleculares.
Algunos enzimas rompen las uniones presentes dentro del polímero, mientras que otros eliminan los restos de la parte terminal del mismo.
La secuencia, la estructura local, la disponibilidad y los grupos químicos circundantes pueden influir en si el lugar potencialmente susceptible se descompone realmente.
Davidson y Hutton estudiaron un enzima relacionado con las células secretoras de insulina. El producto purificado eliminó las partículas básicas de los sustratos procedentes de la proinsulina y, en el ensayo utilizado, no provocó la descomposición adicional de la insulina madura. [10]
Esto muestra tratamiento biológico selectivo, y no un simple desprendimiento de todas las cadenas peptídicas.
El desdoblamiento selectivo tiene importancia biológica significativa, ya que las partículas precursoras más grandes pueden ser procesadas en lugares específicos, lo que conduce a la formación de productos maduros específicos en lugar de una degradación aleatoria.
Las condiciones son importantes: dos ejemplos experimentales
Kenley y Warne estudiaron la interleucina 11 humana recombinante en condiciones de estrés deliberadamente aplicadas, que incluían una temperatura elevada y diferentes valores de pH.
En un entorno ácido, identificaron una desintegración en un lugar específico de Asp–Pro. Los resultados muestran una degradación dependiente de la secuencia y los parámetros, pero no deberían ser interpretados como una norma universal que describa la función de todas las proteínas en condiciones biológicas típicas. [11]
En otro estudio se observó la fragmentación de un vazoactivante peptídico intestinal radioactivado en un disolvente diluido con un pH neutro. Fragmentos más cortos y similares no mostraron degradación detectable en los mismos parámetros experimentales, y los aditivos al disolvente influyeron en el resultado. [12]
Ambos estudios muestran por qué la estabilidad de las uniones peptídicas debe ser considerada en relación con de una molécula concreta, de una secuencia, de un entorno y de unos parámetros experimentales, En lugar de asumir que un determinado pH o temperatura provocaría el mismo comportamiento de cada péptido.
¿Por qué los enlazamientos peptídicos son biológicamente importantes?
Las uniones peptídicas conservan la secuencia de residuos aminoacídicos que definen la cadena peptídica o proteica.
Su geometría limita los posibles ordenamientos espaciales del enlace, mientras que los grupos carbónico y el azufre presentes en el esqueleto peptídico participan en las interacciones moleculares.
La formación controlada de enlaces peptídicos permite la síntesis de péptidos y proteínas.
La desintegración controlada de estas cadenas participa, en cambio, en el procesamiento de precursores, la digestión, la transformación de proteínas, los caminos reguladores y la degradación final de las moléculas.
Este mismo tipo básico de unión química participa, por lo tanto, en varios niveles de organización biológica.
Su creación establece la continuidad de la secuencia.
Su estructura electrónica influye en la geometría del esqueleto.
Los grupos químicos presentes en él participan en las interacciones moleculares.
Su descompresión selectiva permite que los sistemas biológicos procesen y eliminen proteínas y péptidos.
Estas funciones combinan la química molecular con la biología. Las evidencias provienen, entre otras cosas, de cálculos de la estructura electrónica, mediciones estructurales, estudios enzimáticos, síntesis química y experimentos con sistemas biológicos completos. Cada una de estas metodologías muestra un elemento diferente del mecanismo y no debe ser utilizada para extraer conclusiones que vayan más allá del proceso realmente estudiado. [2] [3] [10]
Preguntas más frecuentes
1. ¿El enlace peptídico es covalente?
Sí. El enlace peptídico es un enlace amidado covalente entre grupos procedentes de aminoácidos. El átomo de carbono y el átomo de azufre comparten electrones, lo que proporciona una continuidad química a la cadena peptídica. Los estudios de la estructura electrónica analizan cómo este intercambio de electrones afecta al grupo carbónico adyacente y cómo contribuye a las propiedades características del enlace peptídico. Sin embargo, el término „covalente” no significa que el enlace no pueda romperse. En condiciones químicas adecuadas o con la participación de enzimas, puede sufrir hidrólisis. Lo importante es distinguir que el enlace peptídico químicamente une las unidades en una sola molécula y no solo provoca una atracción entre las moléculas separadas o los fragmentos de la misma molécula. [1]
2. ¿Por qué el enlace peptídico tiene una naturaleza de enlace doble parcial?
El carácter parcial de la unión doble se debe a la interacción de la molécula de nitrógeno libre con el sistema electrónico adyacente del grupo carbónico. Gracias a esto, la densidad electrónica se deslocaliza dentro del grupo amidico. Los análisis computacionales analizaron la participación de este fenómeno en la cadena de unión peptídica. Las estructuras resonantes utilizadas para explicarlo son métodos alternativos para representar la misma estructura electrónica, en lugar de moléculas independientes que se alteran una tras otra. Además, los valores numéricos que describen la cadena de unión pueden depender de la metodología analítica utilizada. La consecuencia estructural más importante es la limitación del giro alrededor del enlace C–N en comparación con la unión simple libremente giratoria. [1]
3. ¿Qué átomos forman la unión peptídica?
En un esqueleto peptídico típico, la unión peptídica une el átomo de carbono de un grupo carboxílico con el átomo de azufre del otro grupo. El átomo de oxígeno permanece como parte del grupo carboxílico y no forma una conexión directa entre las dos cadenas de aminoácidos. Los análisis electrónicos y estructurales analizan estos átomos como parte de un grupo amidado relacionado, al tiempo que distinguen sus enlaces individuales. Durante la identificación de la unión peptídica típica en la estructura molecular, un punto de partida útil es encontrar la unión C–N que está directamente adyacente al grupo carboxílico. [2]
4. ¿Dónde se encuentra la unión peptídica en la proteína?
Las uniones peptídicas se encuentran en la estructura cristalina de cada cadena proteica y unen las cadenas aminoacídicas adyacentes. Diferencian de las uniones transversales entre cadenas laterales y de las interacciones entre cadenas separadas. La síntesis química de BPTI muestra esta distinción al separar la estructura cristalina del posterior desarrollo de puentes disarcarios. La estructura tridimensional completa de una proteína puede incluir muchos tipos de interacciones covalentes y no covalentes, por lo que la identificación de las uniones peptídicas requiere seguir la estructura aminoacídica, en lugar de contar todas las cadenas o los enlaces representados en el modelo molecular. [5]
5. ¿Es cada enlace amidado un enlace peptídico?
No. Las conexiones amidadas se producen en muchos compuestos orgánicos diferentes, mientras que el término „vínculo peptídico” se refiere a conexiones específicas derivadas de los aminoácidos en los péptidos y proteínas. El vínculo peptídico típico en el esqueleto es un tipo de conexión amidada. Por lo tanto, los vínculos peptídicos que utilizan la cadena lateral de un aminoácido no deberían clasificarse automáticamente como vínculos esqueléticos comunes. El estudio de las geometrías peptídicas se centra en el grupo definido de la cadena principal del péptido y no trata todos los amidos posibles como químicamente e estructuralmente idénticos. El nombre adecuado depende de los grupos participantes y sus posiciones dentro de la molécula. [2]
6. ¿Cuántas cadenas peptídicas hay en un tripeptido?
Un tipo de tripeptido abierto y no segmentado contiene dos enlaces peptídicos, Debido a que tres restos requieren dos enlaces para formar un único enlace abierto continuo. Esto se debe a la relación general n − 1 para un enlace abierto típico que contiene n restos. Este cálculo proviene de la estructura molecular y no de una información experimental o de su función biológica. La respuesta sería diferente si el enlace adicional de esqueleto cerrara la molécula en un anillo. Sin embargo, los enlaces de cadena lateral y otros enlaces covalentes deben ser calculados por separado. Por lo tanto, antes de aplicar la regla general, es necesario definir la estructura de la molécula analizada.
7. ¿Los péptidos cíclicos tienen una unión peptídica adicional?
El péptido cíclico de tipo head-to-tail tiene un número de enlaces esqueletales más uno que el correspondiente a un enlace abierto, ya que la adición de un enlace amidado une ambos extremos y cierra el anillo. Otros péptidos cíclicos, sin embargo, pueden formar un anillo con la participación de cadenas laterales, por lo que esta regla no se aplica automáticamente a cada molécula considerada cíclica. Los estudios de la calita B1 confirmaron un caso específico de un péptido cíclico que además incluía puentes disacárridos. Por lo tanto, la formación del anillo y la creación de enlaces entre las cadenas laterales deben describirse por separado durante el cálculo de los enlaces y la presentación de la arquitectura molecular. [6]
8. ¿Los enlazamientos peptídicos siempre son perfectamente planos?
No. Los grupos peptídicos son aproximadamente planos, pero son posibles desviaciones de la geometría ideal. Un estudio que combinaba cálculos mecánicos cuánticos con el análisis de datos estructurales de péptidos y proteínas mostró distorsiones leves relacionadas con la disposición local de la cadena principal. Estas observaciones complementan el modelo simplificado del libro de texto, pero no lo hacen inútil. La planitud sigue siendo una preferencia estructural importante que resulta de la estructura electrónica del grupo amida; sin embargo, un análisis estructural preciso debería tener en cuenta las diferencias locales propias de una molécula particular. [2]
9. ¿Puede el proteïna deformarse si el giro alrededor de la unión peptídica está limitado?
Sí. El esqueleto de la proteína contiene otras uniones alrededor de las cuales pueden producirse variaciones en los ángulos torsales. El giro limitado alrededor de la unión amidada C–N, por lo tanto, no impide todo el segmento. Las analíticas estructurales distinguen los ángulos de giro alrededor de las uniones esqueléticas vecinas del ángulo asociado con la propia unión peptídica. Los efectos estáticos locales, las interacciones químicas locales y el tipo de restos vecinos influyen además en qué estructuras son energéticamente y físicamente accesibles. Las proteínas no son, pues, ni barras rígidas ni cadenas de elementos que giran completamente libremente. Su estructura deriva de la combinación de grados de libertad restringidos y relativamente flexibles del esqueleto. [2]
10. ¿Qué son las uniones peptídicas cis y trans?
Los términos cis y trans describen diferentes configuraciones espaciales de grupos que se encuentran en ambos lados de la unión peptídica. En los esqueletos proteicos típicos, predomina la configuración trans. Las uniones peptídicas relacionadas con la prolina requieren una atención especial, ya que en este caso la configuración cis ocurre con más frecuencia que en muchas otras combinaciones de residuos. En los estudios de RMN térmicamente desarrollados del colágeno se detectaron ambas configuraciones. Estos resultados se aplican, sin embargo, a un determinado tipo de proteína en condiciones experimentales específicas y no deben ser interpretados como valores porcentuales universales para todos los péptidos y proteínas. Los términos cis y trans describen la geometría de la unión peptídica y no los diferentes tipos de enlaces químicos. [9]
11. ¿Siempre se libera agua directamente durante la formación de un enlace peptídico?
No. El conocido ecuación que describe la liberación de agua describe la relación sumativa de la condensación entre los grupos funcionales libres, pero no describe todos los mecanismos reales de formación de enlaces peptídicos. La síntesis ribosómica utiliza substratos activados unidos a la tRNA, y los estudios experimentales indican la participación de la química del substrato en la catalisis. Por lo tanto, el curso directo de la reacción es más complejo que la simple eliminación de agua a partir de dos aminoácidos libremente disueltos. La distinción entre el balance sumativo de la reacción y el mecanismo biológico real evita que la ecuación educativa útil se transforme en una descripción incorrecta de la síntesis de proteínas. [3]
12. ¿La mezcla de aminoácidos con agua conduce a la formación de proteína?
No. La mezcla de aminoácidos libres no forma automáticamente una secuencia proteica específica. La formación controlada de péptidos requiere una química adecuada y, en las células, también una maquinaria de síntesis ordenada capaz de controlar la secuencia de los aminoácidos y la formación de enlaces. Los experimentos sobre la formación de péptidos no ribosomales han demostrado que la interrupción de un elemento catalítico específico puede impedir la formación del producto peptídico estudiado. Los resultados se refieren a una ruta biosintética específica, pero demuestran un principio más amplio: la mera presencia de bloques moleculares de construcción no es suficiente. La formación de una secuencia definida requiere una formación controlada de enlaces moleculares. [7]
13. ¿Es la unión peptídica la misma que la unión hidrófoba?
No. La unión peptídica es una unión covalente en la estructura principal de la molécula, mientras que la unión hidrófoba es una interacción entre el donador y el receptor adecuados de hidrógeno. Los grupos químicos presentes en la estructura principal del péptido pueden participar en la formación de enlaces hidrófobos sin la formación de enlaces peptídicos adicionales. Los estudios del decapeptido plegado CLN025 analizaron los enlaces hidrófobos y otras interacciones involucradas en la estabilización de su estructura. Esta distinción separa los enlaces que definen la secuencia covalente fundamental de la cadena de manera fundamental de las interacciones que ayudan a la cadena ya unida a organizarse en el espacio tridimensional.[8]
14. ¿El puente disiarcónico es un tipo de unión peptídica?
No. La unión disulfuro es una unión covalente entre el azufre y el azufre, que generalmente se forma entre las cadenas laterales de la cisteína. Por otra parte, el enlace peptídico es una unión amida que enlaza grupos derivados de los aminoácidos del esqueleto peptídico. La síntesis de BPTI estudia la estructura del esqueleto y la formación de enlaces disulfuro como procesos independientes. Ambos tipos de enlaces pueden ser importantes para la estructura de la molécula, pero también pueden enlazar otros átomos y participar en otras reacciones químicas. Por lo tanto, la ruptura de una unión disulfuro no necesariamente rompe el esqueleto peptídico, mientras que la ruptura de un enlace peptídico cambia directamente la continuidad de la secuencia de la cadena. [5]
15. ¿La desnaturalización de la proteína provoca la ruptura de las uniones peptídicas?
Esto no es necesario. La denaturación significa un trastorno de la estructura tipica de una proteína conformada o en forma de grupo, y por definición no requiere la disrupción de las uniones peptídicas. Dependiendo de las condiciones utilizadas, la degradación química puede ocurrir simultáneamente con la denaturación, pero ambos procesos no deben ser automáticamente identificados. En los estudios sobre el colágeno termofructificado, se han analizado aún otras configuraciones de sus uniones peptídicas. Por lo tanto, la cadena desarrollada y la cadena sometida a hidrólisis son estados moleculares distintos: la primera se refiere principalmente a la organización tridimensional, mientras que la segunda a los cambios de las uniones covalentes. [9]
16. ¿La hidrólisis conduce inmediatamente a la formación de aminoácidos libres?
No siempre. La hidrólisis de una unión peptídica interna en una cadena más larga y abierta suele llevar a la formación de dos fragmentos peptídicos más cortos. Son necesarias reacciones posteriores de desintegración para reducir gradualmente la longitud de estos fragmentos y liberar finalmente los aminoácidos individuales. En los estudios experimentales se han identificado fragmentos específicos que se forman tras la hidrólisis de las uniones peptídicas, entre otras cosas durante los estudios de degradación de la interleucina 11 y del péptido vasoactivo intestinal. El tipo de producto depende de los sitios que han sido deshidrolizados y del grado de avance de la hidrólisis. Por lo tanto, el término „hidrolizado” no significa automáticamente que el péptido o la proteína se haya convertido completamente en aminoácidos libres. [11] [12]
17. ¿Todos los enlaces peptídicos se descomponen con la misma velocidad?
No. La velocidad de escisión observada depende de la secuencia peptídica, la estructura molecular local, la disponibilidad de la unión, los grupos químicos vecinos, la composición de la solución, la temperatura, el pH y la presencia de catalizadores como enzimas proteolíticas. Los estudios de la interleucina 11 y el péptido vasoactivo intestinal han demostrado una degradación selectiva, dependiente de la condición, pero no un comportamiento uniforme de todos los sitios de unión. Estos experimentos no determinan una semivida universal para otros péptidos. Una conclusión científicamente justificada es que la estabilidad de un enlace peptídico debe evaluarse en función de la molécula específica, el entorno y la reacción, y no debe preverse únicamente por el nombre de unión. [11] [12]
18. ¿Qué diferencia tiene la unión peptídica de la unión izopeptídica?
La unión peptídica típica en la esqueleto suele unir a la parte principal, que proviene de un grupo carboxílico, a la parte principal, que proviene de otro grupo amino. La unión izopeptídica también es una unión amidada, pero en ella participa al menos una función fuera del típico sistema de esqueleto, por ejemplo, una función adecuada en la cadena lateral de un aminoácido. Ambos tipos de enlaces se basan en una química amidada relacionada, pero ocupan lugares diferentes en la arquitectura molecular. La distinción es importante porque el simple descubrimiento de una unión amidada no basta para afirmar que se trata de una unión peptídica habitual.
19. ¿Por qué los enlazamientos peptídicos son importantes para la estructura de las proteínas?
Las uniones peptídicas mantienen una secuencia de restos aminoacídicos ordenada y, al mismo tiempo, impiden que la estructura de la molécula se vea limitada por limitaciones geométricas. Su carácter parcialmente covalente de unión a doble enlace limita la rotación alrededor del enlace amidado C–N y favorece una geometría aproximadamente plana de la molécula peptídica. Al mismo tiempo, las grupos carbónico y N–H del esqueleto pueden participar en las estructuras de unión hidrófoba importantes para las estructuras de grado superior. Las uniones peptídicas no solo unen los aminoácidos —sus propiedades electrónicas y geométricas ayudan a determinar las posibilidades estructurales de toda la cadena—. [1] [2]
20. ¿Pueden las enzimas descomponer las uniones peptídicas?
Sí. Las proteasas y las peptididasas pueden catalizar la hidrólisis de las uniones peptídicas, pero no tienen que cortar todas las uniones sin discriminación. Cada enzima reconoce secuencias específicas, entornos estructurales o posiciones en las cadenas peptídicas. Los estudios estructurales de la penicilopepsina analizaron la manera en que la aspartatopeptidasa organizaba el sustrato y el agua durante la hidrólisis, mientras que Davidson y Hutton demostraron que el sustrato relacionado con la proinsulina se procesaba selectivamente. Estos ejemplos muestran cómo los sistemas biológicos pueden descomponer de forma controlada ciertas uniones peptídicas durante el procesamiento y la degradación de las moléculas. [4] [10]
Limitaciones en la interpretación de los estudios sobre las interacciones peptídicas
Al pasar de la química básica de los enlaces peptídicos a los resultados sobre los peptidos y proteínas reales, hay que tener en cuenta algunas limitaciones.
En primer lugar, el grupo peptídico idealizado representado en los manuales es Un modelo del típico sistema estructural. Las estructuras moleculares reales pueden mostrar desviaciones mensurables de la planitud e la geometría ideales. [2]
En segundo lugar, la estabilidad del enlace peptídico Depende del contexto. Los resultados de los experimentos realizados a temperaturas elevadas, con pH inusual, concentraciones muy bajas o en presencia de catalizadores específicos no deben utilizarse automáticamente para predecir el comportamiento de la molécula en condiciones completamente diferentes. [11] [12]
En tercer lugar, las diferentes enzimas utilizan mecanismos catalíticos diferentes. Las evidencias que describen la hidrólisis llevada a cabo por una proteasa aspartilada no significan que todas las proteasas descompongan las uniones peptídicas de la misma manera. [4]
Cuarto, los enlazamientos peptídicos pueden producirse mediante diversos mecanismos. La traducción ribosómica, la biosíntesis no ribosómica y la síntesis química en el laboratorio pueden conducir a la formación de enlaces amidados, aunque utilicen sustratos y maquinaria moleculares diferentes. [3] [7]
Por quinto, el cambio en la estructura de la proteína no debe interpretarse automáticamente como una disrupción de las uniones peptídicas. La desnaturalización, los cambios conformacionales, las transiciones cis–trans, los trastornos de las uniones hidrófobas, la reducción de los puentes disacíclicos y la hidrólisis de las uniones peptídicas describen diversos acontecimientos moleculares.
Estas diferencias son importantes, ya que el término Unión peptídica describe un tipo específico de unión covalente. Para comprender qué realmente ocurre con un péptido o una proteína, es necesario determinar qué enlace químico o interacción molecular ha cambiado.
Resumen
Las uniones peptídicas son enlaces amidicos covalentes que unen las cadenas de aminoácidos en cadenas peptídicas y proteicas. Aunque a menudo se presentan simplemente como uniones C–N en un fragmento repetitivo del esqueleto –C(=O)–NH–, Su química es más compleja que la de un enlace simple que se mueve libremente.
La deslocalización de los electrones dentro del grupo amidado confiere al enlace C–N una naturaleza parcialmente covalente, limitando su rotación y favoreciendo una geometría aproximadamente plana del grupo peptídico. Al mismo tiempo, la posibilidad de rotación alrededor de las cadenas de enlaces esqueletales permite que los cadenas peptídicas adopten estructuras tridimensionales muy variadas. [1] [2]
Las uniones peptídicas se encuentran presentes en la esqueleto de los péptidos y proteínas típicos, pero deben distinguirse de las uniones hidrófobas, los puentes disiarcicos, las interacciones iónicas, el efecto hidrofóbico y las uniones especializadas de cadenas laterales, como las uniones isopeptídicas.
Pueden formarse como resultado de diversos procesos. Las ribosomas forman enlaces peptídicos durante la traducción mediante la utilización de substratos activados asociados a la tRNA, los sistemas no ribosómicos utilizan maquinaria enzimática especializada, mientras que la síntesis en laboratorio se basa en reacciones químicas de unión controladas. [3] [7]
Igualmente importante es su descompresión. La hidrólisis puede dividir un enlace peptídico en fragmentos más cortos, y las proteasas y peptidasas permiten a los organismos seleccionar el proceso. Los estudios sobre las proteasas, el procesamiento de la proinsulina, la degradación de la interleucina 11 y el péptido intestinal vasoactivo muestran que la descompresión depende del contexto molecular y de las condiciones experimentales. [4] [10] [11] [12]
La regla más importante es, por lo tanto, simple:
Las uniones peptídicas proporcionan una continuidad covalente de los cadenas de aminoácidos, mientras que su estructura electrónica, la formación controlada y la desintegración selectiva de las uniones combinan la química fundamental con la biología de los péptidos y las proteínas.
Descargo de responsabilidad
El artículo tiene carácter exclusivamente educativo y científico-informacional. Explica la química de los enlaces peptídicos, su estructura molecular, la formación, la hidrólisis y ejemplos procedentes de estudios publicados. No constituye una recomendación médica, una indicación para el tratamiento, una instrucción de laboratorio, una recomendación de producto ni una recomendación sobre el uso de ningún péptido o proteína. Los resultados de los análisis computacionales, estructurales, bioquímicos, de investigación en animales y otros experimentos deben interpretarse dentro de los límites de las condiciones y limitaciones de cada estudio.
Referencias
- Fedorov, D. G. (2024). La unión peptídica: La resonancia aumenta la orden de la unión y complica la fragmentación. ChemPhysChem, 25(14), Artículo e202400170. https://doi.org/10.1002/cphc.202400170
- Improta, R., Vitagliano, L., & Esposito, L. (2011). Distorsiones en los enlaces peptídicos debido a la planaridad: nuevos conocimientos obtenidos a partir de cálculos mecánicos cuánticos y estructuras cristalinas de péptidos y proteínas. PLOS ONE, 6(9), Artículo e24533. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0024533
- Weinger, J. S., Parnell, K. M., Dorner, S., Green, R., & Strobel, S. A. (2004). Catalisis asistida por el sustrato para la formación de enlaces peptídicos por el ribosoma. Nature Structural & Molecular Biology, 11(11), 1101–1106. https://doi.org/10.1038/nsmb841
- James, M. N., & Sielecki, A. R. (1985). Análisis estereoquímico de la hidrólisis de enlaces peptídicos catalizada por la penicillopepsina, una proteína de la familia de las aspartasas. Biociencia, 24(14), 3701–3713. https://doi.org/10.1021/bi00335a045
- Ferrer, M., Woodward, C., & Barany, G. (1992). Síntesis en fase sólida del inhibidor de la tripsina pancreática bovina (BPTI) y de dos análogos. Un enfoque químico para evaluar el papel de los puentes disulfuro en la plegatura y estabilidad de las proteínas. International Journal of Peptide and Protein Research, 40(3–4), 194–207. Registro de PubMed
- Saether, O., Craik, D. J., Campbell, I. D., Sletten, K., Juul, J., & Norman, D. G. (1995). Desvelamiento de la estructura primaria y tridimensional del polipéptido uterotónico kalata B1. Biociencia, 34(13), 4147–4158. https://doi.org/10.1021/bi00013a002
- Stachelhaus, T., Mootz, H. D., Bergendahl, V., & Marahiel, M. A. (1998). Formación de enlaces peptídicos en la biosíntesis de péptidos no ribosomales. Función catalítica del dominio de condensación. Journal of Biological Chemistry, 273(35), 22773–22781. https://doi.org/10.1074/jbc.273.35.22773
- Hatfield, M. P. D., Murphy, R. F., & Lovas, S. (2010). Propiedades espectroscópicas de CDV del miniproteína CLN025, que forma la estructura de la cola beta, en diversos disolventes. Biopolímeros, 93(5), 442–450. https://doi.org/10.1002/bip.21356
- Sarkar, S. K., Young, P. E., Sullivan, C. E., & Torchia, D. A. (1984). Detención de los enlaces peptídicos cis y trans X-Pro en proteínas mediante RMN 13C: aplicación a la colágena. Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América, 81(15), 4800–4803. https://doi.org/10.1073/pnas.81.15.4800
- Davidson, H. W., & Hutton, J. C. (1987). La carboxipeptidasa H secretora de insulina. Purificación y demostración del papel en la transformación del proinsulina. Journal de la bioquímica, 245(2), 575–582. https://doi.org/10.1042/bj2450575
- Kenley, R. A., & Warne, N. W. (1994). Hidrólisis de enlaces peptídicos catalizada por ácido de la interleucina 11 humana recombinante. Investigación farmacéutica, 11(1), 72–76. https://doi.org/10.1023/a:1018945727640
- Mody, R., Tramontano, A., & Paul, S. (1994). Hidrólisis espontánea del péptido intestinal vasoactivo en solución acuosa neutra. International Journal of Peptide and Protein Research, 44(5), 441–447. https://doi.org/10.1111/j.1399-3011.1994.tb00180.x