Timozyna beta-4 (Tβ4): molekyylimekanismit, kliiniset tutkimukset ja ennakkotutkimukset

Tutkimusympäristö: Tässä artikkelissa esitetään mainituissa julkaisuissa kuvatut tulokset. Solu- ja eläintutkimuksissa ei ole vahvistettu lääkkeen tehokkuutta ihmisillä. Mainitut pitoisuudet, annokset ja antotavat koskevat pelkästään tutkimusprotokollia eivätkä ne ole lääketieteellisiä neuvoja tai ohjeita itsenäiseen käyttöön. Mainitut viitteet ovat lähdeaineistosta ja niitä ei ole tarkistettu itsenäisesti.

Timozyna beta-4 (Tβ4), joka tunnetaan myös nimellä timbetasin, on pieni proteiini, joka koostuu 43 aminohaposta. Se esiintyy luonnollisesti ihmisten ja hiirien elimissä. Tutkijat ovat myös kehittäneet sen synteettisiä ja rekombinoidtuja versioita, joita käytetään laboratoriotutkimuksissa sekä varhaisessa vaiheessa kliinisiä tutkimuksia varten. Timoosin β4-summapohja on C₂₁₂H₃₅₀N₅₆O₇₈S, ja molekyylipaino on noin 4963 Da [1].

Tymosiini β4 herättää tutkijoiden mielenkiintoa sen vuoksi, että se osallistuu kudosten korjaamiseen, soluunmuodostukseen ja tulehdusviranomien säätelyyn. Kokeellisissa tutkimuksissa on kuvailtu sen vaikutusta haavojen kiinnittymiseen, angiogeneesiin, kudosmuodostukseen ja kudosten vaurioitumiseen. Näiden havaintojen ei kuitenkaan ole vahvistettu kliinisen tehokkuuden osalta kaikissa tutkituissa elimissä.

Peptidi osallistuvat solujen siirtymiseen vaurioituneille alueille sekä luonnollisten korjaavien signaalien säätelyyn, muun muassa VEGF:n HIF-1α:n välityksellä. Tutkimuksissa on myös todettu muutoksia sydän-, keuhko-, maksa- ja luustokudoksen suojelemiseen. Tiamoksiini β4 voi myös vaikuttaa autofagiaan eli soluprosessiin, joka mahdollistaa vaurioituneiden solujen komponenttien poistamisen.

Aminohapot tymosiinin beta-4-rakenteessa [1]

Kokeellisten tutkimusten tulosten perusteella tutkijat analysoivat timoksynib β4:n erilaisia mahdollisia kliinisiä käyttökohteita, sydänvaurioista ja verenkiertohäiriöistä ihojen uudistamiseen. Yksi tutkituista formuloiduista, RGN-259, valmistetaan silmätipatena silmäsairauksien tutkimusta varten. Terveille koehenkilöille tehtiin myös turvallisuusnäytteet. Tämä osoittaa, että kiinnostus tätä peptidejä kohtaan ulottuu sekä sen perustaisille biologisille toimintoille että mahdollisille lääketieteellisille käyttökohteille.

Tymosin β4: turvallisuus ja farmakokinetiikka kliinisessä tutkimuksessa

Ihmisten osallistamassa ensimmäisessä kliinisessä tutkimuksessa Wang ja kollegat (2021) arvioivat CHINAS-tutkimuksessa NL005-nimisen rekombinoidun tymosiinin β4:n terveille aikuisille vapaaehtoisille [2].

Tutkimus koostui kahdesta osasta. Ensimmäisessä osassa osallistujat saivat yksittäisen laskimonsyötön 0,05–25,0 µg/kg annoksina. Toisessa osassa heille annettiin päivittäisiä laskimonsyötöitä 0,5, 2,0 tai 5,0 µg/kg annoksina 10 päivän ajan.

Lääke oli hyvin siedetty tutkimuksen molemmissa osissa. Vaikeita haittavaikutuksia tai annoksen lisäämiseen liittyviä ongelmia ei todettu. Yksittäistä annosta saaneessa ryhmässä noin 57% osallistujaa ilmoitti lievistä tai kohtalaisista haittavaikutuksista, kun taas lumelääkeryhmässä osuus oli 70%. Yhdistelmäannosta saaneessa ryhmässä lieviä haittavaikutuksia ilmoitti 67% henkilöä, jotka saivat NL005:ää, ja 83% henkilöä, jotka saivat lumelääkettä.

Useimmat havaittuja muutoksia olivat ohimeneviä ja niihin sisältyivät pieniä poikkeamia laboratoriotutkimusten tuloksissa, EKG-tietojen tai syöpämerkkiaineiden perusteella.

Valmisteen farmakokinetiikka oli suhteellisen ennustettavissa. Yksittäisen annon jälkeen veren huippupitoisuus kasvoi annoksen mukaan, alimmalla annoksella 1,99 ng/ml ja korkeimmalla 230,07 ng/ml. Koko altistus aineelle kasvoi myös suhteellisesti.

Puoliintumisaika pidentyi hieman suuremmilla annoksilla ja oli noin 0,5–2,1 tuntia. Kymmenen päivän ajan tapahtuneen annostelun aikana ei todettu merkittävää aineen kertyneisyyttä elimistössä. Klireenssi ja jakautumistilavuus pysyivät vakaana.

Lääkkeen aiheuttama immunologinen vaste havaittiin vain harvoissa osallistujissa: yhdessä yksittäisen annoksen ryhmässä ja kahdessa moninkertaistamisryhmässä. Näiden reaktioiden kesto oli ohimenevä.

Pieniä I-vaiheen tutkimuksia koskevissa tuloksissa havaittiin hyvä siedettävyys, alhainen havaittu immunogenisuus ja suhteellisen vakaa farmakokinetiikka. Ne eivät kuitenkaan vahvista pitkäaikaisen turvallisuuden tai tehokkuuden sydän- ja verisuonitautipotilailla.

Silmätippoja tymosynilla β4 raskasrasituksen silmäsairauden hoidossa

II-vaiheen tutkimuksessa arvioitiin, voivat timoksyniini β4-lisäaineita sisältävät silmälasit parantaa vakavan kuivan silmäsairauden oireita ja silmän pinnan tilaa.

Sosne ja kollegat (2015) tutkivat RGN-259-napsautuksia, jotka sisälsivät 0,1% tymosiinia β4, myös potilailla, joilla oli vastaanottajien vastustuskyvyn aiheuttama silmätiheys [3].

Osallistujat käyttivät tiputuksia kuusi kertaa päivässä 28 päivän ajan, minkä jälkeen seurasi uusi 28 päivän hoitamattomuusjakso.

RGN-259-ryhmässä silmien epämukavuuden väheneminen oli 35,1% ja silmien pinnan vaurioiden merkit 59,1% vähemmän kuin lumelääkkeellä.

Myös muut parametrit parantuivat, kuten silmänkyynärräpyyn vakauttuminen ja silmien vuotokapasiteetti. Tärkeitä turvallisuusongelmia ei todettu, ja valmiste oli hyvin siedetty.

Alustavat tulokset oikeuttivat jatkotutkimusten tekemisen RGN-259:tä kohtaan, mutta ne eivät olleet riittäviä sen tavanomaisen kliinisen käytön vahvistamiseen.

Intravenös timozyna β4: varhaiset turvallisuustiedot

Aikaisessa laskimoon annetussa tutkimuksessa arvioitiin terveiden vapaaehtoisten toleranssia timosiini β4:lle eri annoksina.

Ruff ja kollegat (2010) tutkivat synteettistä β4-tymosiinia käyttämällä neljää injektoitavaa annosta: 42, 140, 420 ja 1260 mg [4]. Alkuvaiheen turvallisuusarvioinnin jälkeen samat annokset annettiin kerran päivässä 14 päivän ajan.

Lääke oli hyvin siedetty sekä vaiheissa. Ilmoitetut haittavaikutukset olivat lieviä tai kohtalaisia ja vaikeita reaktioita ei todettu.

Yleiskonttori-altistus kasvoi suhteessa annokseen, ja aineen pysyvyys elimistössä piteni korkeampien annosten yhteydessä.

Tulokset tukivat lisää tutkimuksia tymosyni β4:stä verenvirtauksen häiriöihin liittyvissä sairauksissa, kuten aivohalvauksessa tai sydänkohtauksessa. Ne eivät kuitenkaan olleet vahvistus sen tehokkuudesta näissä sairauksissa.

Paikallinen β4-tymosiini kroonisten jalkaterän verisuonitulehduksien hoidossa

II-vaiheen tutkimuksessa timoksyni β4-geeliä sisältävä geeli arvioitiin kokeellisena lisäkeinona perinteiseen hoitoon peräpukamatulehduksissa.

Guarnera ja kollegat (2010) tekivät tutkimuksen kahdeksassa eurooppalaisessa keskuksessa, johon osallistui 73 potilasta, joilla oli kroonisia vatsavaurioita, jotka johtuivat laskimotukosta [5].

Tutkittiin erilaisia geelin pitoisuuksia, mukaan lukien 0,03%. Lääkettä käytettiin yhdessä standardin mukaisen hoidon kanssa, joka sisälsi muun muassa puristushoitoja ja haavojen puhdistamista.

Parhaat tulokset todettiin 0,03%-pitoisuudella olevan geelin kohdalla. Noin 25% potilaalla haava parani kokonaan kolmen kuukauden kuluessa, erityisesti lievästä tai kohtalaisesta vaikeusasteesta kärsivillä tapauksissa.

Valmiste oli hyvin siedetty eikä vaikeita haittavaikutuksia ilmoitettu.

Havainnot olivat yhdenmukaisia aiemmilla laboratoriokokeilla, jotka osoittivat tymosiinin β4:n osallisuuden ihon solujen liikkeessä, kollageenin tuotannossa ja uusien verisuonten muodostumisessa.

Keskitason rinnakkaisnäköhäiriön tutkimus: osittain myönteiset tulokset

Sosne ja Ouslerin (2015) II-vaiheen kliinisessä tutkimuksessa arvioitiin 0,1% timosiinia β4 sisältäviä RGN-259-suihkeita 72:lla aikuisella, joilla oli kohtalainen tai vaikea kuiva silmäoireyhtymä [6].

Tutkimus tehtiin yhdessä satunnaistettussa, kaksisuuntaisessa ja lumelääkettä kontrolloidussa tutkimuskeskuksessa. Käytettiin Controlled Adverse Environment (CAE™)-mallia, joka mahdollistaa silmän pintojen reaktion arvioimisen tiettyihin olosuhteisiin.

Tutkimus kesti 28 päivää, ja 32 päivän aikana suunniteltiin kuusi tarkistuskäyntiä. Osallistujat jaettiin satunnaisesti RGN-259-ryhmään tai lumelääkkeeseen.

Kaksi päätarkoitusta, eli silmän epämukavuuden vähentäminen ja alaleukopohjan värjäytymisen vähentäminen, eivät osoittaneet merkittävää tilastollisesti eroa suunnitellussa mittauksessa 29. päivänä.

Samalla havaittiin hyödyllisiä muutoksia useissa toissijaisissa parametreissä. 28. päivänä CAE™-valmisteen altistuksen aiheuttama epämukavuus oli 27 prosenttia pienempi kuin lumelääkeryhmässä. Samoin todettiin merkittävää parannusta keskiosan ja yläosan sokerin tilassa.

Joitakin silmien punoituksen, kyynelkalvon vakauden ja päivittäin kirjattujen oireiden indikaattoreita myös parannettiin.

Tutkimusvalmistetta koskevia haittavaikutuksia tai silmälääketieteellistä turvallisuusarviointia koskevia ongelmia ei todettu.

Vaikka tutkimus ei saavuttanut suunniteltuja päätetapahtuma-indikaattoreita, toissijaiset tulokset oikeuttivat jatkotutkimuksia, mukaan lukien suurempien potilasryhmien arvioimista ja mittausten ajankohdan määrittämistä.

Tymozyna β4 kroonisten sarveiskalvon haavaumien hoidossa

Dunn ja kollegat (2010) kuvailivat neljän 47–84-vuotiaan potilaan sarjaa, joilla oli pitkäaikaisia neurotrofisia sieni-ärsytystulehduksia (RVO) [7].

Vaurioiden syiksi kuului muun muassa silmänsisäinen verenvuoto ja diabetes. Ennennäkemätön hoito, joka sisälsi antibiootteja, kosteuttavia valmisteita, steroidilääkkeitä ja suojaava-lasit, ei tuottanut odotettua parannusta.

Potilaat saivat RegeneRx Biopharmaceuticalsin tuottamia timosynibα4-tippoja neljä kertaa päivässä neljän viikon ajan.

Yhdellä potilaalla sarveiskalvon haavauma täysin parani 25 päivässä ja pysyi kiinni 56. päivään asti. Toisella havaittiin merkittävä haavan pinta-alan pienentyminen 28. päivänä. Kolmannella paraneminen eteni hitaammin, mutta jatkui 70. päivään asti. Neljännellä sarveiskalvon haavauma parani 42. päivänä ja saatu lopputulos säilyi.

Kumpikaan potilaista ei ilmoittanut kipua tai sivuoireita. Kaikissa havaittiin parantunut mukavuus ja vähenemä punoituksesta.

Pieniä tapausmääräyksiä vihjasi mahdollisuuteen jatkaa tutkimuksia tosinyylin β4:stä hoidettavissa olevissa korvakudoksen vaurioissa, mutta ne eivät antaneet yksiselitteisiä päätelmiä tehokkuudesta.

Hoidon ja paranemisen hidastuminen: eläinkokeissa ja ihmisillä tehdyt tutkimukset

Eläinkokeet ja varhaiset kliiniset tutkimukset osoittivat, että tymosiini β4 voi vaikuttaa haavojen paranemisen nopeuteen ja niiden kokonaan sulkeutumiseen tarvittavaan aikaan.

Terveillä rottien ja hiirien ihohaavoissa, joilla oli diabetes, sekä steroideja saavilla ja vanhempia rottuja saavilla, todettiin nopeampaa paranemista tymosynibi β4-valmistetta saavilla ryhmillä [9].

Verisuonien verenvuotoja ja nivuskuolemia koskevissa kliinisissä tutkimuksissa tyrosiinibakteerien β4-lääkityksen jälkeen paranemista sairauksien haavoista saavuttaneet potilaat saavuttivat tämän tuloksen keskimäärin noin kuukausi aiemmin kuin henkilöt, jotka saivat lumelääkettä.

Eläinkokeissa keskityttiin lähinnä haavojen kiinnittymisnopeuteen, kun taas kliinisissä tutkimuksissa arvioitiin aikaa, jonka kuluessa haavat paranivat kokonaan.

Ehdotetut mekanismit sisältävät solujen siirtymisen edistämisen, kantasolujen osallistumisen kudosten korjaamiseen, tulehduksen rajoittamisen, solujen suojelemisen vaurioitumiselta sekä mahdollisen riskin vähentämisen infektiotartuntojen suhteen.

Tulokset viittaavat aktiivisuuteen eri paranemisvaiheissa, mutta todisteeksi hyödyistä, oikeiden formulointien määrittämiseksi ja potilasryhmien tunnistamiseksi tarvitaan suurempia tutkimuksia.

Gelatiini β4-tyrosiinilla laskimotulehduksissa polven alla

Guarnera ja kollegat (2007) suunnittelivat eurooppalaista tutkimusta tymosiinibeta4:stä laskimotulehduksissa kymmenessä sairaalassa Italiassa ja Puolassa [10].

Tutkimus oli satunnaistettu, kaksoissokkoutettu ja plasebokontrolloitu. Se sisälsi kolme annosryhmää, joissa oli 24 osallistujaa kussakin ryhmässä, ja kolmivuotuisen tutkimuksen aikana kolme neljäsosaa osallistujista sai tymosyni β4:ää.

Kaikki potilaat saivat myös standardiahoitusta haavojen hoidossa, joka sisälsi kompressioterapiaa ja haavojen puhdistamista.

84 päivän ajan haavaan lisättiin timoksynib β4-geeliä tai lumelääkettä, minkä jälkeen seurattiin vielä 14 päivää lisää.

Päävaikutustekijöinä olivat täysin parantuneiden haavojen osuus 84. päivänä ja keskimääräinen paranemisaika.

Turvallisuutta, β4-tymosiinia veren pitoisuutta sekä viikoittaisia laboratoriotutkimusten tuloksia myös seurattiin.

Tutkimus oli vielä käynnissä julkaisupäivänä, ja ensimmäiseen alaryhmään, jolle annettiin alhaisin annos, lisättiin 21 henkilöä.

Hankkeen vahvuuksia olivat tiukka peittaus, yksityiskohtainen seuranta ja tarkat mittaukset haavojen pinta-alasta. Rajoituksina olivat suunniteltu pieni osallistujamäärä, joka oli 72 henkilöä, sekä lopputulosten puuttuminen julkaisun aikaan.

Ihon uudistuminen: tutkimusten katsauksen tulokset

Kleinman ja Sosne (2016) esittivät katsauksen tutkimuksista, jotka koskivat timosiinin β4:n vaikutusta ihon paranemiseen [8].

Peptidi esiintyy luonnollisesti ihmisen kudoksissa ja verisoluissa. Se on tutkittu eri muodoissa, muun muassa paikallisten voiteiden, injektionesteiden sekä synteettisten ja dimeristen molekyylimuotojen muodossa.

Eläinmalleissa tymosiini β4 nopeutti haavojen paranemista myös vaikeuttavissa olosuhteissa, kuten vanhenemisen, diabeteksen, steroidien käytön ja heikentyneen verenkiertoa.

On havaittu angiogeneesin voimistumista, ihosolujen muuttumista ja kollageenin järjestelmällisemmän rakenteen syntyä sekä verenvuodon vähenemistä.

Verenkiertohäiriöiden mallissa peptidi paransi ihonpalojen eloonjääneisyyttä ja paransi paranemista raajoihin kohdistuneen verenkierron heikkenemisen jälkeen, erityisesti käyttäen valvotusti vapautuvia systeemejä.

Eläinkokeissa dimeryyttiset β4-tymosiiniformaat osoittivat hieman suurempaa parantumiseen liittyvää aktiivisuutta kuin tavallinen yksimonomeerinen muoto.

Kliinisissä tutkimuksissa varhaiset turvallisuusarviot eivät osoittaneet merkittäviä haittavaikutuksia tai vertailukelpoisia aineen pitoisuuksia veressä paikallisesti annettuna.

Kolmen pienen II-vaiheen tutkimuksen, jotka koskivat kroonisia haavoja, kuten haavaisia murtumia, laskimotulehduksia ja kuolavien ihon kerrostumien eroosioita, osoittivat nopeampaa paranemista gelilääkkeiden käytön yhteydessä, jotka sisälsivät 0,02–0,03% timosiinia β4, erityisesti neljännen ja yhdeksännen viikon välisenä aikana [8].

Alhaisemmat ja korkeammat pitoisuudet eivät tuottaneet yhtä hyviä tuloksia, mikä korostaa riippuvuuden merkitystä pitoisuuden ja biologisen vasteen välillä.

Mekanisoiduissa mekanismeissa oli kyse tulehduksen ja solujen vaurioitumisen rajoittamisesta, haitallisten molekyylien säätelystä, ihon ja verisuonten solujen muuttoliikkeen ja kasvun tukemisesta sekä mahdollisesta kantasolujen ja hiuspohjien aktivoitumisesta.

Nämä vaikutukset liittyivät tiettyihin peptidi- ja signaalireittien osiin, muun muassa ATP-reseptoreihin, PI3K/AKT-reitille ja lämpösokkureitteihin.

Arvioinnissa käsiteltiin 0,02–0,03% ppm:n pitoisuuksilla olevia kokeellisia geeliä, joita käytettiin noin 8–12 viikon kestävillä tutkimuksilla. Nämä parametrit koskevat tutkimusprotokollia eikä sovittuja kliinisiä suosituksia.

Timozin β4:tä on arvioitu turvallisuudelta noin 200 potilaalla I- ja II-vaiheen tutkimuksissa. Vaikeita haittavaikutuksia ei ilmoitettu edes suurina laskimoinjektioiden annoksina tehdyssä tutkimuksessa [8].

Koska tymosiini β4 osallistuu soluunmuodostukseen ja angiogeneesiin, prosesseihin, joilla voi olla myös merkitystä syöpien kehittymiselle, on syöpäturvallisuuden kysymys vaativa erityistä huomiota.

Ihon tutkimuksissa ei todettu syöpien kasvua edistäviä vaikutuksia, ja jotkut tulokset viittasivat jopa syöpää vastustavaan vaikutukseen tietyissä malleissa, kuten monisoluinen keuhkosyöpä.

Kirjoittajat korostivat kuitenkin tarvetta jatkotutkimukseen molekyylimekanismien, haavaluonteisiin parametreihin perustuvan valinnan sekä kehittyneempiin formulointiin, mukaan lukien dimerit ja aktiiviset peptidifrakterit.

Tymosin β4 ihon pintakerroksen (epidermisen) erittymisessä (EB)

Tymozynę β4 on myös tutkittu ihon kerrostumisen aikana (pęcherzowy oddelulaisprosessi).epidermolysis bullosa, EB) ja muita vakavia ihovaurioita.

EB on harvinainen geneettinen sairaus, joka aiheuttaa voimakkaan herkkyyden iholla ja usein esiintyviä rakkuloita. Se liittyy kipuun, lisääntyneeseen tartuntariskiin, arpeutumiseen, toimintarajoituksiin ja joissakin tapauksissa myös ihosyöpäisiin sairauksiin. Lähteissä kuvattu hoito on suureksi osaksi tukitoimenpidettä, jolla on rajallinen tehokkuus [11].

Timotysyna β4 esiintyy luonnollisesti useimmissa kudoksissa ja kehon nesteissä, mukaan lukien haava-aineessa. Se osallistuu tulehduksen säätelyyn, solujen eloonjäämiseen, angiogeneesiin ja soluseinän organisointiin.

Pendenttien eri fragmentit vastaavat erilaisista biologisista toiminnallisista ominaisuuksista. Jotkut osallistuvat tulehduksen ja verenvuodon rajoittamiseen, toiset tukevat solujen eloonjäämistä, liikkuvuutta, verisuonien muodostumista tai sydänlihaksen korjaavia prosesseja.

Ehdotetut mekanismit sisältävät NF-κB-signaalin eston, ihosolujen suojaamisen vaurioitumisilta, ravinteiden saannin lisäämisen angiogeneesin kautta, solujen liikkuvuuden ja kiinnittymisen parantamisen sekä kollageenin järjestelmällisemmän kertymisen.

Myös mikrobien vastustavat ja antioksidanttiset ominaisuudet on kuvailtu, jotka voivat osallistua tartuntojen ja hapetusvahinkojen rajoittumiseen [11].

Vaiheen II tutkimuksessa, johon osallistui noin 30 EB-potilasta, arvioitiin kolmea paikallista valmisteen pitoisuutta.

Pääasialliseen tavoitteeseen, joka oli haavojen täydellinen paraneminen 56. päivänä, ei saavutettu. Kuitenkin 14. päivänä haavojen pinta-ala oli pienempi timoksyni β4-ryhmässä kuin lumeryhmässä.

Lähdeaineistossa todetaan, että Yhdysvaltain FDA ei enää vaadi kokonaisten haavojen sulkemista EB-tutkimusten ainoana päätetapahtumana, joten osittainen paraneminen voi myös olla tutkimuksen tärkeä tulos.

Alustavat havainnot haavojen pinnasta kannustivat jatkotutkimuksiin, varsinkin kun modernit geeniterapiat ovat edelleen monimutkaisia ja kalliita.

Tähänastiset dermatologiset tutkimukset osoittivat hyvän siedettävyysprofiilin myös vanhemmilla henkilöillä, diabetespotilailla ja EB-potilailla. Pieni osallistujamäärä kuitenkin rajoittaa mahdollisuutta tehdä johtopäätöksiä harvinaisista ja pitkäaikaisista haittavaikutuksista.

Muut kokeelliset tulokset eläinkokeissa ja laboratoriossa

Glukoosiarvon säätely ja insuliiniherkkyys

Käytettäessä tutkimuksissa hiirillä, joilla oli diabetes, timoosyna β4 vaikutti glukoosipitoisuuden hallintaan ja lihasten herkkyyteen insuliiniin.

Zhu ja hänen kollegansa (2012) antoivat timosyniä β4-muodossa diabetespotilaille 12 viikon ajan [12]. Käytettiin KK Cg-Ay/J -tyyppiä ja koeannos oli 100 ng/10 g kehonpainoa kohden, annettu injektiona.

Vertaillaan ollennea sairastamattomien diabeteksen koirien kanssa, peptidiä saaneet eläimet saivat parempia glukoositerveystestituloksia, alhaisemman HbA1c- ja triglyseridipitoisuuden sekä korkeamman adiponektinipitoisuuden, hormonin, joka osallistuu insuliiniherkkyyden säätelyyn.

Myös lihassolujen vastaus insuliiniin parani, mikä liittyi fosforilaadun AKT:n kasvuun.

Sairastuneilla hiirillä ei havaittu vastaavia muutoksia, mikä viittaa siihen, että vaikutus riippuu diabetespotilaiden metabolisten olosuhteiden mukaisista eroista.

Verenkiertoa ja hermoston toimintaa palauttaminen diabetesneuropatiassa

Wang ja kollegat (2012) tutkivat timoksyni β4:tä 2-tyypin diabetesta ja diabeteksen neuropatiaa sairastavilla hiirillä [13].

Tutkimuksessa tarkastellussa mallissa todettiin verenkiertoa parantuminen ja verisuonten tiheytymisen lisääntyminen niskalihaksen alueella, joka on yksi alemman raajan tärkeimmistä hermoista.

Myös hermovälitteisten toimintojen parametrit paransivat.

Vahingoittuneissa hermoissa angiopoetyynin-1 (Ang1) -taso nousi, mikä on proteiini, joka osallistuu verisuonten vakauttamiseen, kun taas angiopoetyynin-2 (Ang2) -taso laski, mikä liittyy verisuonten toimintahäiriöihin.

Muutoksia havaittiin verkkokalvon ja Schwanna-solujen osissa, jotka tukevat hermojen normaalia toimintaa.

Ihmisisoluihin tehdyissä laboratoriotutkimuksissa tymosiini β4 myös tukki angiogeneesin prosesseja korkean glukoosipitoisuuden olosuhteissa.

Mekanismi liitettiin PI3K/AKT-reittiin, joka on tärkeä verisuonten vakauden ja toiminnan kannalta.

Verisuonisolujen toimintakyvyn parantuminen potilailla, joilla on diabetes

Su ja kollegat (2022) tutkivat timosiini β4:n vaikutusta diabetespotilaiden indukoitujen pluripotenttejä kantasoluja (dia-hiPSC-ECs) käyttäen valmistettuihin verisuoniväli-soluihin (angiocytes).

Nämä solut osoittavat yleensä toiminnallisia häiriöitä.

600 ng/ml:n tymosiini β4-annoksella saavutettiin suurempi eloonjäämätaso, nopeampi kasvunopeus ja hitaampi solujen vanheneminen.

Endotelini-1:n (ET-1) tuotanto, joka liittyy verisuonten supistumiseen, ja MMP-1, kudosten hajoamisessa mukana oleva entsyymi, vähenivät myös.

Ei kaikki häiriöt ole korjattu. Esimerkiksi solujen normaalin energiamäärän tai joitakin muita metabolisen toiminnan parametrejä ei ole palautettu.

Kun tymosiini β4:hen altistuneet solut siirrettiin diabetespotilaisiin ja raajakävelyhäiriöihin sairastuneille kissoille, raajakuljetus parani merkittävästi.

Kirjoittajat yhdistivät tulokset AKT-signaalivälitteisen aktivaation ja haitallisten tulehduksellisten välittäjäaineiden rajoittumisen välille.

Ihon uudistuminen diabetesta ja vanhuksia sairastavilla hiirillä

Philp ja kollegat (2003) tutkivat timoksinea β4-molekyyliä diabeettisen ja erittäin vanhan (26 kuukauden ikäiset) hiiren rotilla, joilla oli syvä ihon haavaumat [15].

Valmistetta käytettiin paikallisesti PBS- tai hydrogeeli-liuoksessa.

Diabeettisillä hiirillä tymosiini β4 paransi haavojen supistumista ja kollageenin tuotantoa, joka on tärkeä ihon uudistumisessa.

Kahdeksanteen päivään mennessä kaikki diabetespotilaiden hiiret olivat täysin ihon peittyneitä, joten ei havaittu suuria eroja keratiinikantojen liikkeessä.

Vanhemmanikäisissä hiirissä, joilla paranemisprosessit kulkevat luonnollisesti hitaammin, tymosiini β4 nopeutti selvästi haavojen paranemista, paransi keratiinikudosten siirtymistä ja paransi sekä haavojen supistumista että kollageenin määrää.

Formulointityyppi, PBS vai hydrogeeli, ei vaikuttanut olennaisesti tuloksiin.

Tutkijat arvioivat myös β4-tymosiinin lyhyttä, seitsemästä aminohaposta koostuvaa fragmenttia, LKKTETQ:ta.

Vanhoilla hiirillä tämä osa osoitti lähellä täyttä molekyylimäärää. Tämä viittasi siihen, että tärkeä osa parantumiseen liittyvästä vaikutuksesta saattaa johtua tästä osasta, joka vaikuttaa aktinoidin cytoskeletin säätelyllä soluviilentoon ja kollageenin uudistumiseen.

Ihon palovammojen hoito diabeteksessa

Kim ja Kwon (2014) tutkivat tyrosiinibeta-4:ää diabetesta sairastavilla ja vaikeasti palaneilla hiirillä [16].

Lämmintä vettä levitetään 10 mm:n alueelle. Tiamysiini β4 annetaan injektiona haavan lähelle 5 mg/kg annoksina kahdesti viikossa kaksi viikkoa ajan.

Vertailen vertaillaan hoitamattomiin hiiriin, joille peptidi annettiin, nähtiin, että eläimet paransivat haavaa nopeammin, muodostivat enemmän uutta siittiöainekudosta ja kehittivät verisuonia haavan ympärille voimakkaammin.

RAGE-proteiinipitoisuus väheni myös, sillä korkea aktiivisuus diabeteksen yhteydessä liittyy krooniseen tulehdukseen ja paranemisvaikeuksiin.

RAGE-signaalien rajoittaminen saattoi vähentää haitallista tulehdusreaktiota ja edistää normaalin verenkiertoa vahingoittuneella iholla.

Hoidot haavojen parantamiseen eri sairauksien yhteydessä

Tutkimukset tymosynan β4:stä koskivat palovammoja, diabeteshaavoja, nilkan laskimotulehduksia, haavaisia haavaumia sekä ihon pintakerroksen irtoamista.

Saatavilla olevat todisteet perustuvat eläinkokeisiin ja suhteellisen pieniin varhaisiin kliinisiin tutkimuksiin, joilla oli erilaiset metodologia ja arvioidut tulokset.

Gao ja kollegat (2022) suorittivat tutkimusten katsauksen ja osoittivat, että paikalliset pitoisuudet noin 0,02–0,03% olivat parhaimmat tehokkuuden ja siedettävyyden kannalta analysoiduissa protokollissa [17].

Timoloni β4 esiintyy luonnollisesti verisoluissa ja haavojen kautta vuotavassa nesteessä. Se osallistuu tulehduksen säätelyyn, angiogeneesiin, ihon solujen siirtymiseen ja verenvuodon estämiseen.

Rotatrien polttamisen mallissa ihonalainen annostelu 30 mg/kg kahdesti viikossa nopeutti paranemista merkittävästi, erityisesti yhdessä muiden kasvutekijöiden, kuten bFGF:n, kanssa.

Vanhoilla hiirillä tehdyssä diabeteshaavojen tutkimuksessa paikalliset valmisteet, jotka sisältävät 0,01–0,03% timosiinia β4:ää, paransivat ihon uudistumista, verisuonten kasvua ja vähensivät tulehdusta.

72 henkilöä, joilla oli sidekalvotulehdus, osallistuneessa II-vaiheen tutkimuksessa timoksiini β4:tä 0,02%:n pitoisuudella sisältävä gel nopeutti paranemista neljännen ja yhdeksännen viikon välisenä aikana.

Verisuonitulehduksissa 0,03 -prosenttisen pitoisuuden geeli yhdistyi koko haavan sulkemiseen 33,3% potilaalla, kun vastaava luku lumelääkeryhmässä oli 17,6%.

EB-potilailla kaikki tutkitut pitoisuudet, 0,01% –0,10%, osoittivat paranemisliittyvää aktiivisuutta, mutta rajallinen osallistujamäärä ei mahdollistanut tilastollisesti merkitsevää eroa.

Mekaanisesti β4-tymosiini voi osallistua kaikkiin paranemisvaiheisiin.

Varhaisessa vaiheessa se vaikuttaa hyytymien vakautumiseen ja vähentää ROS- ja NO-yhdisteiden aiheuttamia hapetusvaurioita.

Proliferatiivisen vaiheen aikana se voi edistää angiogeneesia VEGF:n, PI3K/AKT ja siihen liittyvien reittien välityksellä.

Myöhemmissä vaiheissa se osallistuu ihokerroksen palauttamiseen ja liiallisen kollageenin ja fibroblastien kerääntymisen säätelyyn.

Toisin kuin jotkut kasvutekijät, tymosiini β4 voi levitä kudoksiin ja moduleoida luonnollisia korjausreaktioita ilman, että tarvitsee suoraa ylikuormitusta solujen lisääntymisen vuoksi.

Katsauksen kirjoittajat kiinnittivät huomiota myös formuloinnin merkitykseen. Intravenoosissa annetulla timosiinilla β4:llä on suhteellisen lyhyt puoliintumisaika, noin 2,1 tuntia.

Kehittyneet järjestelmät, kuten kollageenihitozaniset sienet ja etsomoselliset geelit, voivat pidentää niiden paikallista vaikutusaikaa.

Paikalliset geelit, joiden pitoisuudet olivat 0,02–0,03%, osoittivat hyviä tuloksia, mutta annosriippuvuus muistutti kello-muotoista kaarta. Tämä tarkoittaa sitä, että pitoisuuden lisääminen ei välttämättä johda voimakkaampaan vaikutukseen.

Terveiden vapaaehtoisten tutkimuksissa ei todettu vakavia turvallisuusongelmia edes suurilla laskimonsisäisillä annoksilla, jotka olivat 1260 mg. Tekijät suosittelivat kuitenkin varovaisuutta tietoja aktiivista syöpäpotilaiden osalta tulkittaessa, koska timotsiini β4 on mukana solujen kasvun ja siirtymisen prosessissa.

Käsitellyt pitoisuudet ja valvotun vapautumisen järjestelmät ovat tutkimusaiheita eivätkä vahvistettuja kliinisiä suosituksia [17].

Sydämen neuropatian hermojen paraneminen

Wang ja kollegat (2019) tutkivat tyrosiinib4:ää diabetesta ja hermosairauksia sairastavilla hiirillä [18].

Neljän viikon kuluttua havaittiin parannusta hermostollisuudessa ja lämpötilahyvityksessä, lisääntynyttä määrää pieniä verisuonia niskahalvaushermostossa sekä parempaa hermopelien suojaavan esteen toimintaa.

Tutkijat tutkivat angiopoetyyni-1- ja Tie2-reseptorin reittiä.

Kun Tie2-reseptori estettiin, tymosiini β4:n vaikutus hävisi. Tämä viittasi tärkeään rooliin Ang1/Tie2-signaalitoiminnassa havaituissa hermien uudistumismuutoksissa.

Nervien uudistuminen ilman glukoosipitoisuuden laskua

Erillisessä 16 viikon tutkimuksessa Wang ja hänen kollegansa (2015) osoittivat, että tymosiini β4 paransi hermoston toimintaa ilman glukoosipitoisuuden laskua veressä [19].

On havaittu parempaa hermivirtauksen ohjausta, parantunutta tuntoaistia sekä paremmin säilynyttä aksoni- ja myeliinirakennetta.

Laboratorioiden kokeissa peptidi lisäsi neuritusten eli hermosolujen poikkileikkauksen kasvuprosessia.

Tämä vaikutus hävisi Tie2:n estämisen jälkeen, mikä viittasi uudelleen Ang1/Tie2-reitin osallistumiseen.

Yhteensä tutkimukset hiirillä viittaavat siihen, että verenkierron ja hermostojen rakenteen muutokset voivat tapahtua riippumatta glukoosipitoisuuden hallinnasta. Tämän mekanismin kliininen merkitys ihmisillä on vielä tuntematon.

Luun parantuminen ja rakenteellinen lujuus hiirillä

Brady ja hänen kollegansa (2014) tutkivat tymosiini β4:n vaikutusta luun paranemiseen kirurgisen toimenpiteen jälkeen hiirillä [20].

Eläimille annettiin fyysistä suolaa tai tymosyniä β4 annoksella 6 mg/kg systeemisesti annetussa injektiona.

21. päivänä timosiini β4-ryhmässä luut osoittivat 41 prosenttia enemmän voimaa murtumiseen ja 25 prosenttia enemmän jäykkyyttä kuin kontrolliryhmässä.

Kuvausmenetelmillä todettiin 18% lisää uutta mineraalittunutta luun kudosrakkoa sekä 26% lisää voimakkaasti mineraalittunutta, kypsää luuta.

Samalla luun tilavuus oli 23 prosenttia pienempi. Siinä oli 47 prosenttia vähemmän vanhaa luustokudosta ja 31 prosenttia enemmän uutta kuitukudosta.

Tulokset viittaavat siihen, että kyseisessä mallissa luun uudelleenrakennus on tehokkaampaa ja parantavia mekanistisia ominaisuuksia on sen paranemassa kudoksessa.

Lihaksen uudistuminen ja mekaaninen lujuus

Xu ja hänen kollegansa (2013) tutkivat rotuja, joilla oli kirurgisesti normaali nilkan sivuvahti (MCL), yksi polven nivelen vakauttavista nivellihaksista [21].

Vaurion kohdalle asetettiin pieni määrä geeliä, joka sisälsi 1 µg tymosiinia β4:tä.

Neljän viikon kuluttua regeneroituneet nivelsiteet osoittivat timosiini β4-ryhmässä paremmin järjestettyä kollageenin rakennetta sekä paksumpia ja vahvempia kuiduja.

Nämä muutokset näkyivät testien aikana suurempana mekaanisena kestävyytenä.

Tulokset olivat yhdenmukaisia timosiinin β4:n osuuden kanssa solujen muuttumisessa, angiogeneesissa ja kollageenin tuotannossa, eli prosesseissa, jotka ovat tärkeitä nivelsiteiden korjaamiseen.

Paksusuolen tulehduksen ja luun tuhoutumisen rajoittaminen hammaslääketieteen sairauksien mallissa

Lee ja kollegat (2016) tutkivat tymosiini β4:n vaikutusta hammasonteloon liittyvään tulehdukseen ja luun supistumiseen [22].

Toksiinisen stressin alaisissa ihmisten limakalvo-soluissa (PDLCs) happo-oksidatiivisen stressin aiheuttama luonnollinen tymosiini β4 -pitoisuus väheni.

Peptidiin lisäämisen jälkeen tulehdusmediatorien, kuten typpioksidien (NO), prostaglandiini E₂:n (PGE₂), TNF-α:n ja interleukiiniryhmään kuuluvien cytokinien, pitoisuudet vähenivät.

RANKL/OPG-suhde, joka on tärkeä luun resorptiota säätelevässä prosessissa, parani myös.

Mitä enemmän myöhäistyi osteoklastien syntyä, sitä enemmän myöhäistiin myös koiran luuytimessä tapahtunutta erilaistumista osteoklasteiksi. Tymosiini β4 estäi näiden solujen syntyä sekä luun hajoamiseen liittyvien geenien aktiivisuutta.

Menetelmä sisälsi MAPK- ja NF-κB-signaalitoiminnan heikentymisen.

Wnt5a-reitin merkitys oli myös tärkeä. Sen estäminen voimisti tymosynin β4-aktiivisuutta, kun taas Wnt5a-peptidin lisääminen heikensi havaittuja vaikutuksia.

Tulokset osoittavat monimutkaisia yhteyksiä tulehdusta ja luun aineenvaihduntaa säätelevien signaaliväylien välillä.

Munuaisten ja sisäelinten kehitys siipikarjan munien aikana

Faa ja kollegat (2021) tutkivat β4-tymosiinia raskaana olevilla hiirillä [23].

Eläimille annettiin 6 mg/kg peptidia injektioina 14. ja 17. raskauspäivänä.

Tymosiinia β4 saaneiden naaraspuolisten jälkeläisten kehon pituus oli pidempi ja elimistö kehittynyt enemmän kuin kontrolli-eläinten.

Muutokset koskivat muun muassa keuhkoja, sydäntä, munuaisia ja aivoja, mukaan lukien aivokorteksi ja selkäsuoli.

Tulokset viittaavat mahdolliseen tymosiinin β4:n osallisuuteen angiogeneesiin, muuttoliikkeeseen ja solujen erilaantuuun munivien hiirien kehityksen aikana.

Neuvovat kuitenkaan etuja eivätkä turvallisuutta käytölle raskaana oleville naisille tai vastasyntyneille.

Kuolleisuus ja tulehdus vaikeassa sepsisissa

Badamchian ja kollegat (2003) tutkivat timoksinea β4-molekyyliä myrkytyksen mallissa, joka aiheutui lipopolisakkaridista (LPS), joka on voimakas aktivoiva tekijä immuniteettireaktion aikaansaamiseksi [24].

Eläimillä, jotka olivat altistuneet LPS:lle, timosiini β4-pitoisuus väheni.

Samankaltaisia muutoksia havaittiin ihmis-vapaaehtoisissa ja septiomatoosista kärsivissä potilaissa, mikä viittasi timosiini β4:n resurssien vähenemiseen voimakkaan tulehduksen yhteydessä.

Hiiret, jotka saivat 100 µg tymosiinia β4 0, 2 ja 4 tunnin kuluttua LPS-annosta, osoittivat alhaisemman kuolleisuuden ja pienempiä tulehdusmediatoreiden, kuten IL-1β ja 6-keto-PGF1α, pitoisuuksia.

Tulokset viittasivat liiallisen immuniteetin vastaukseen rajoittamiseen ja mahdolliseen suojaan vaikeilta tulehdusvaikutuksilta tässä mallissa.

Keuhkoputkien kiristäminen ja hengitystoiminta

Yu ja kollegat (2025) tutkivat hengitysteitse annetun rekombinoidun ihmisen tymosiini β4:n (rhTβ4) vaikutusta mykobakteeri-infektiota aiheuttaneeseen keuhkovaurioon rotilla [25].

Peptidiä annettiin vaurion varhaisessa, välivaiheessa tai myöhemmässä vaiheessa.

Tutkituissa kausina havaittiin pienempää keuhkoputkien liukastumista, matalampaa kollageenin määrää ja parempia hengitysvasteominaisuuksia.

Laboratorioissa tehdyssä tutkimuksessa timosiini β4 rajoitti kuitukudoksen muodostamisessa mukana olevien fibroblastien proliferatiota ja siirtymistä.

Se myös vähensi keuhkoputkien limakalvon solujen epäsuotuisia muutoksia ja sääti TGF-β1:n, yhden pääasiallisista kiinteyttymisen välittäjäaineista, aktiivisuuden.

Tulokset viittaavat aktiivisuuteen eri vaiheissa keuhkojen eksperimentaalista vaurioitumista.

Huumoria sydämen ja keuhkojen suojelemisesta keuhkoverenpainetilojen mallissa

Wei ja kollegat (2014) tutkivat β4-toyminia keuhkoverenpainetta aiheuttavassa monokrotalina-aiheutuvassa hypertensiossa [26].

Hiiren veressä havaittiin pienempi verenpaine ja pienempi oikean kammion supistumisen voimakkuus, kun sitä saivat peptidillä.

Molekyylitutkimukset osoittivat muutoksia Notch3–Col3A1–CTGF-reitillä, joka on osallisena verisuonten ja kudosten uudistumisessa.

Tulokset viittaavat mahdollisuuteen rajoittaa haitallisia verisuonisia ja rakenteellisia muutoksia kokeellisessa keuhkoverenkierron supistuksessa.

Monien elinten kudosten korjaaminen: eläinkokeiden katsaus

Philp ja Kleinman (2010) tarkastelivat tutkimuksia timosiinista β4:stä eri elimissä [27].

Rinon vaurioitumisen mallissa paikallisessa käytössä 5 µg:n annos 5 µl:ssa kahdesti päivässä nopeutti korvakosken palovammojen paranemista aiheuttamatta kuitenkaan ei-toivottua angiogeneesia.

Eläinystämissä tehdyssä tutkimuksessa diabetespotilaiden ja vanhempien eläinten iholla peptidi tukki solujen liikettä, kollageenin tuotantoa ja uusien verisuonten syntymistä.

Lisäksi havaittiin hiustenkasvua stimuloiva vaikutus hiusjuurien aktivoitumisen kautta.

Serceä koskevissa tutkimuksissa timoksynaa β4 arvioitiin sekä pienissä eläimissä, kuten hiirissä, joille annettiin 400 ng:tä, että suuremmissa eläimissä, kuten sioissa, joille annettiin 15 mg:tä.

Nämä mallit kuvasivat kudosten vaurioitumisen rajoittumista, sydänsolujen eloonjääneisyyden lisäämistä ja vähäisempiä haavaumia vamman jälkeen.

LPS-aiheutuneen septisen taudin malleissa todettiin heikompi tulehdusreaktio ja suurempi eloonjäämisyys.

Miestään ja keskushermostoon kohdistuvissa tutkimuksissa timoosiin β4 rajoitti neuronien vaurioitumista ja edisti oligodendrociteiden eli hermosolujen kasvua, jotka tuottavat hermosolujen ympäröivän nielin.

Ehdotetut mekanismit käsittivät tulehdusmediatorien inhibointia, rautaproteiinien (MMP) regulointia, NF-κB- ja Akt-signaalivälityksen modulaatiota sekä kantasolujen aktivaatiota.

Arvioinnissa kuvattiin myös rottien ja apin toleranssituloksia tutkituilla annoksilla. Eläimistä saatavat toksikologiset tiedot eivät kuitenkaan mahdollista itsenäistä määrittämistä laajasta ihmisille soveltuvasta turvamarginaalista.

Keuhkojen suojaaminen reperfusiohoidon aiheuttamilta vaurioilta aortan sulkemisen jälkeen

Yaman ja kollegat (2019) tutkivat timoksinea β4-molekyyliä rotalla tehdyssä sydänrikon ja sydänrenkaan uudelleenjärjestelyn mallissa [28].

Eläimille annettiin 10 mg/kg peptidia tunnin ennen aortan sulkemista tai 15 minuuttia ennen veren virtaamisen palauttamista.

Molemmissa aikajaksoissa saatiin samanlaiset tulokset.

Timozyna β4 vähensi hapettumisen aiheuttamaa stressiä, alensi tulehduskokonaistekijöiden tasoja, paransi keuhkoissa ja veressä havaittuja antioksidatiivisia parametreja sekä rajoitti kudosvahinkoa.

Tulokset viittaavat mahdolliseen suojaan akuutilta keuhkovaurolta, joka liittyy verenkierron keskeytykseen ja palauttamiseen, esimerkiksi kokeellisissa malleissa kirurgisista toimenpiteistä ja vammoista.

Maksan verenvuodon vähentäminen kirurgisen toimenpiteen jälkeen

Wang ja kollegat (2019) tutkivat paikallista β4-tymosiinia sisältävää geeliä kahdeksassa sioissa, jotka olivat käyneet suolikanavan endoskooppisella eroosiohoitomenetelmällä (ESD). [29].

Tämän toimenpiteen yhteydessä on riski mahahaavan syntymiselle.

Neljä sikaa sai paikallista tosinyylibakteerijäämistä β4:tä sisältäenä, ja neljä muodosti vertailuryhmän.

Kaikissa eläimissä havaittiin supistumia, mutta tymosiini β4-ryhmässä ne olivat vähemmän voimakkaat.

Peptidiä saaneet eläimet tarvitsivat vähemmän suun laajennusleikkauksia (p = 0,002), ja paraneminen sujui nopeammin (p = 0,012).

Kirjoittajat yhdistivät vaikutukset verisuonien supistumiseen, solujen liikkuvuuden parantamiseen ja liiallista kollageenin kertymistä vähentävään vaikutukseen.

Ei haittavaikutuksia ilmoitettu.

Verisuonten rakenteen säilyttäminen ja aortan tukkeumien kehittyminen

Munshaw ja kollegat (2021) tutkivat tymosiini β4:stä riippumattomia hiiriä [30].

Näiden eläinten verisuonit olivat heikommat ja aortan laskimot kehittyi useammin erityisesti angiotensiini II:hen altistumisen jälkeen.

Jos tymosiini β4 puuttui, verisuonien pehmytkudoksen solut (VSMCs) muuttivat fenotyypinsä useammin epäedullisen uudistumisen ja kiinnittymisen suuntaan.

Tätä ilmiötä yhdistettiin PDGFRβ-reseptorin liialliseen kierrätykseen; sen aktiivisuus normaaleissa olosuhteissa säädetään tymosynin β4-nimisellä proteiinilla.

Imatinibin, PDGFRβ:n estävän lääkkeen, käyttö vähensi timozyna β4:stä riippuvien verisuonten vaurioitumista hiirissä.

Tulokset viittaavat siihen, että luonnollinen timosiini β4 osallistuu verisuonten normaalin uudistumisen ylläpitämiseen säätämällä kasvutekijäsignaaleja.

Mahavetoinen seinä ja tulehdus kroonisen pikkupussikivutulehduksen mallissa

Renga ja kollegat (2019) tutkivat tymosynaa β4 kroonisen granulomatoosin (CGD) malleissa, geneettisessä häiriössä immuunijärjestelmän toiminnassa [31].

Kokeiluihin osallistuivat ihmis- ja hiirien immuunisolut sekä CGD-tautia sairastavat hiiret.

Timoksyba β4 palautti suojaavan HIF-1α-proteiinin aktiivisuuden ja stimuloi epäormaa autofagosointia DAPK1:n välityksellä.

Nämä muutokset paransivat suolikanavan estovaiheen toimintaa, vähensivät tulehdusta ja sienisäikeiden syntyä sekä lisääivät eläinten eloonjääneisyyttä.

Tulokset viittaavat tymosiinin β4:n osallisuuteen tulehdusreaktion ja vaurioituneiden solujen poistumisprosesseiden säätelössä suolessa.

Maksan vajaatoiminta ja verisuonten vakaus

Munshaw ja kollegat (2023) tutkivat timosyni β4:tä ApoE⁻/⁻ -muodossa olevilla hiirillä, jotka ovat alttiita verisuonitulehdukselle [32].

Eläimiä verrattiin ihmisen veressä olevan tymosiini β4:n oikeaan ekspressioon sekä hiiriin, jolla ei ollut tätä proteiinia.

Tymosiini β4:n puuttumisen vuoksi hiirillä kehittyi suurempia sepelvaltimotukokset, havaittiin voimakkaampia vaurioita verisuonten keskilevyissä ja sileät lihaskudokset menettivät normaalin toimintansa.

Terveissä verisuonissa tymosiini β4 esiintyi niiden soluissa, jotka osallistuivat niiden jännityksen säilyttämiseen ja toimintaan, mutta sen määrä väheni sairastuneissa soluissa.

Brak timozyny β4 johti liiallista PDGFRβ-aktiivisuutta reseptorien häiriintyneen säätelyn vuoksi, mikä voimistutti epäedullista verisuonien uudistumista.

Tulokset viittaavat endogeenisen timosiinin β4:n suojaavaan rooliin verisuonten vakauden ylläpitämisessä.

Verisuonien vakauttuminen ja eloonjääminen sepsis-malleissa

Bongiovanni ja kollegat (2015) käyttivät geeniterapiamenetelmää lisäämään timosiini β4:n ekspressiota hiirissä kaksi viikkoa ennen LPS:n aiheuttamaa sepsisia [33].

Eläimet, joilla oli kohonnut tymosiini β4-aineenvaihdunta, osoittivat lieveämpiä sairauksentekijöitä, parempia verenpainearvoja ja pienemmän verisuonten läpäisevyyden.

Lisäksi havaittiin suurempaa eloonjääneisyyttä ja parempaa säilyvyyttä pericyteissä eli sydämen ja lihasten pieniä verisuonia ympäröivissä tukimukosepoissa.

Tulokset viittaavat siihen, että tymosyyna β4 osallistuu verisuonten integraation säilyttämiseen ja nesteen yliannoksen estämiseen verisuonista raskaan tulehduksen aikana.

Keuhkoputkien kirvely ja soluvauriot tulehduksellisissa malleissa

Tian ja kollegat (2022) käyttivät geeniterapiaa tuottamaan timosiinia β4-molekyyliä hiirille, joilla oli LPS-aiheuttama keuhkovaurio [34].

Kasvatuskykyä lisäävällä tymosiini β4:n ekspressiolla varustetuilla eläimillä todettiin pienempi oksidatiivinen vaurioituminen, alhaisempi kollageenin kertyminen ja heikompi tulehdusreaktio.

I laboratoriotutkimuksissa ihmishengityslihaksisoluihin timosiini β4 paransi vahingoittuneiden mitokondrioiden korjaamista, rajoitti tulehdussolujen aktivoitumista ja hidasti kasvunopeutta aiheuttavia solumuutoksia.

Se myös hidasti fibroblastien lisääntymistä ja verisuonien verkkokalvon muodostumista.

Tulokset osoittavat tymosiinin β4:n osallistuvan useiden reittien säätelyyn, jotka johtavat pitkäaikaisiin keuhkovaurioihin.

Rinnan paraneminen toimimalla kudosten uudistamisaineiden aktivoimana

Philp ja kollegat (2006) tutkivat timoksyni β4:ää hiusläpätilamuodoissa hiirillä sekä ihmisihokappaleissa ja immuunijärjestelmässä [35].

Peptidin käytön jälkeen MMP-1-, MMP-2- ja MMP-9-metalloproteinaasien tuotanto lisääntyi, jotka osallistuvat vahingoittuneiden kudostekijöiden hajoamiseen ja uusien solujen muodostumisen valmisteluun.

Efektit havaittiin keratiinokitoissa, fibroblasteissa, verisuonikudoksen soluissa ja aktivoituneissa monosyytteissä.

Tämän vastauksen syntymiseen riitti vain pieni osa tymosiinista β4, joka kattaa aminohapot 17–23.

Tämä viittaa siihen, että peptidi osallistuu paranemiseen paitsi tukemalla solujen siirtymistä ja kasvua myös säätämällä vahingoittuneiden aineosien poistumista ja soluseinän uudistumista.

Tutkimustulokset viittaavat solunrakenteen regulaation ja vaurioituneen ihon puhdistus- ja korjausprosesseiden väliseen yhteyteen.

Tutkimuksissa kuvatut annokset ja koostumukset eivät ole kliinisiä suosituksia.

Varhassa kliinisissä tutkimuksissa arvioitiin erilaisia muotoja ja annosmäärät timosiinia β4:tä varten.

Kuvaillut protokollat eivät saa ymmärtää itsenäisen käytön suosituksina. Saatavilla olevat tiedot eivät salli määrittää standardiaikaista terapeuttista annosta.

Ensimmäisissä injektiokokeissa rekombinoidusta tymosiinibotyypin β4:stä, NL005, arvioitiin yksittäisiä annoksia 0,05–25 µg/kg ja päivittäisiä infuusiota 0,5–5 µg/kg kymmenen päivän ajan.

Verenpitoisuus kasvoi suhteessa annokseen, ja puoliintumisaika oli noin kaksi tuntia. Ei havaittu merkittävää aineen kertyneisyyttä elimistössä.

Aikaisemmassa synteettisen timosiinin β4-valmisteen tutkimuksessa käytettiin paljon suurempia laskimonsisäisiä annoksia, 42–1260 mg päivässä kahden viikon ajan, ilman merkkejä vakavista haittavaikutuksista.

Silmälääketieteellisissä tutkimuksissa arvioitiin timosynibi β4- 0,1% liuosta, joka vastaa noin 1 mg/ml:a, eri annostusohjelmissa, jotka oli vahvistettu yksittäisissä protokollissa.

Joitakin parametrejä parannettiin, mutta ainakin yksi tutkimus ei ollut aiemmin saavuttanut määriteltyjä päätetapahtuma-indikaattoreita.

Kolmen kroonisten ihon haavojen toisen vaiheen tutkimuksen mukaan paras tulos saavutettiin käytettäessä geeliä, jonka pitoisuus oli 0,02–0,03% ja jota annettiin kerran päivässä.

Kumpikin pienempi pitoisuus 0,01% sekä korkeampi 0,1% osoittivat huonompia tuloksia.

Sväninäytteissä paikallinen annostelu 0,1 -prosenttisella geelillä mahahoidon läheisyydessä vähensi verenvuotoa kirurgisesti poistetun limakalvon jälkeen, mikä viittaa mahdollisuuteen jatkaa paikallisia antoreittejä koskevien tutkimusten tekemistä.

Edellä kuvattujen pienien alkuvaiheen tutkimusten mukaan siedettävyys oli yleensä hyvä, mutta saatavilla olevat tiedot eivät riitä arvioimaan pitkäaikaisia eikä harvinaisia haittavaikutuksia.

Hyvin siedätyssä ja ohimenevässä muutoksessa laboratoriokokeiden tai EKG:n tuloksissa havaittiin noin puolella osallistujista tutkimuksessa, ja niiden esiintyvyys oli lähes sama kuin lumelääkkeen kohdalla.

Vaikeita haittavaikutuksia tai annoksen suurentamista rajoittavia reaktioita ei todettu. Löydetyt immunologiset vastaukset olivat lieviä ja ohimeneviä.

Ylimääräisillä suonensisäisillä annoksilla annetussa tutkimuksessa synteettisen tymosiinin β4:n osalta todettiin vain lieviä huimausta tai epämukavuutta injektiokohdassa ilman merkkejä sisäelinten vaurioitumisesta.

Silmätippoja ja ihohoitoaineita myös pidetään hyvin siedettyinä. Valmisteeseen liittyvää silmäärsytystä ei todettu, ja pieniä ihon punoitus tai punoitusta geelistä seurasi samanlaisella esiintymistiheyden kuin lumelääkkeellä.

Tutkituissa terveiden vapaaehtoisten ryhmissä moninkertaisesta annostelusta ei seurannut merkittävää kumulaatiota, ja havaittuja immunologisia reaktioita oli vähäisiä.

Näiden tuloksia ei kuitenkaan voi yleistää muihin väestöryhmiin, pidempiin käyttöjaksoihin tai henkilöihin, joilla on vakavat sairaudet.

Koska kliiniset tutkimukset ovat edelleen alkuvaiheessa, monet turvallisuusnäkökohdat edellyttävät varovaisuutta.

Lähteissä mainittiin vasta-aiheena peptidiin tai valmisteen sisältämiin aineisiin liittyvä yliherkkyys.

Vaikka ei ole toistaiseksi todettu lisääntynyttä syöpäriskiä, myös EB-potilaiden tutkimuksissa timotsiinibensyylihappo β4:n kyky säätää solujen liikettä ja angiogeneesia oikeuttaa erityiseen varovaisuuteen potilailla, joilla on aktiivinen syöpä, parhaiten kontrolloiduissa tutkimuksissa.

Tiamysiinin β4-valmisteen turvallisuutta raskauden ja imetyksen aikana ei ole varmistettu. Myös asianmukaisia farmakokinetiikan ja turvallisuustietoja ei ole saatavilla henkilöillä, joilla on vaikea maksava tai munuaisten toimintahäiriö.

Alkuperäiset tutkimukset eivät määrittele asianmukaista annostelusysteemiä näille väestöryhmille.

Päätelmät

Varhaiset kliiniset ja laboratoriotutkimukset osoittavat, että tymosiini β4 osallistuu useisiin kudosten korjaamiseen liittyviin prosesseihin ja yleensä osoittaa hyvän siedettävyyden tähänastisissa tutkimustilanteissa.

Intravenoosilla annettuna synteettinen tymosiini β4 ja rekombinantti lääkevalmiste NL005 olivat terveillä vapaaehtoisilla hyvin siedettyjä, myös moninkertaisella annostelulla.

Farmakokinetiikka oli suhteellisen ennustettavissa. Aine sai lyhyen puoliintumisaikansa veressä, ei osoittanut merkittävää kumulaatiota ja aiheutti vain harvoja, ohimeneviä immunologisia vasteita.

Silmäterveyslääketieteessä timosynib3 β-droppien on osoitettu tuottaneen lupaavia tuloksia silmän pinnan sairauksissa.

II-vaiheen tutkimuksissa ja tapausperusteisissa tutkimuksissa havaittiin oireiden vähenemistä, silmän pinnan vaurioiden vähenemistä värjäystekniikoiden avulla sekä kyynärrämateriaalin parametrien parantumista.

Kuitenkin yhdessä CAE™-mallia käyttävästä tutkimuksesta ei saavutettu kahta päätetapausta, vaikka useissa toissijaisissa parametreissä oli myönteisiä muutoksia.

Dermatologisissa tutkimuksissa geelit, jotka sisälsivät noin 0,02–0,03% timosiinia β4, yhdistyivät nopeampaan paranemiseen haavaumat ja laskimotulehdukset kohden II-vaiheen tutkimuksissa.

Nämä tulokset olivat yhdenmukaisia aiemmilla laboratorio-tutkimuksilla, jotka viittasivat tymosiinin β4:n osallistumiseen keratinoottien liikkeeseen, angiogeneesiin, kollageenivälineiden organisoitumiseen ja verenvuodon vähenemiseen.

Yhteensä saatavilla olevat tutkimukset viittaavat siihen, että tymosiini β4 on tärkeä säätelijä korjaavissa ja tulehduksellisissa prosesseissa.

On kuitenkin tarpeen tehdä lisätutkimuksia pitkäaikaisesta turvallisuudesta, erityisesti ihmisillä, joilla on suurentunut syöpäriski.

Tutkijoiden tulisi myös etsiä biomarkkereita, joiden avulla voidaan tunnistaa potilaita, jotka voivat saada suurimman hyödyn, sekä määrittää paremmin vuorovaikutus annoksen, formuloinnin ja biologisen vasteen välillä.

Jos tulevat tutkimukset vahvistavat tähänastiset tulokset, tymosiini β4 voi tulla jatkokehityksen kohteeksi silmän pinnan sairauksien ja vaikeasti paranemien haavojen hoidossa.

Mahdolliset systeemiset käyttöaiheet, mukaan lukien sydän- ja verisuonijärjestelmän ja hermoston akuutissa vaurioitumisessa, jäävät kuitenkin tutkimushypoteeseiksi eikä vahvistuneiksi kliinisin hyötyinä.

Huomautus: Artikkeli on yksinomaan opetusnäkökohtainen. Se ei ole lääketieteellistä neuvoa eikä suosituksia timosiinibentsyylifosfaatin (β4) käytöstä, annostuksesta tai antamisesta. Solu- ja eläinkokeiden tulokset eivät tarkoita ihmisillä todellista turvallisuutta tai tehokkuutta. 

Viitteet

1. https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Thymosin-beta4#section=NCI-Thesaurus-Tree
2. Wang, X., Liu, L., Qi, L., Lei, C., Li, P., Wang, Y., Liu, C., Bai, H., Han, C., Sun, Y., & Liu, J. (2021). Ensimmäinen ihmisille suunnattu, satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, moniannosten vaiheen I tutkimus ihmisen kehossa tuotetun rekombinanttisen ihmisen thymosin β4:n käytöstä terveillä kiinalaisilla vapaaehtoisilla. Kliininen ja translatiivinen tiede, 14(5), 1949–1962. https://doi.org/10.1111/cts.13050
3. Sosne, G., Dunn, S. P., & Kim, C. (2015). Thymosin β4 parantaa merkittävästi vakavan kuivan silmän oireita ja oireita vaiheen 2 satunnaistetussa tutkimuksessa. Sarveiskalvo, 34(5), 491–496. https://doi.org/10.1097/ICO.0000000000000379
4. Ruff, D., Crockford, D., Girardi, G. & Zhang, Y. (2010). Satunnaistettu, lumelääkekontrolloitu tutkimus, jossa tutkittiin yhden ja useiden annosten intravenoitu timosiini beta4-valmistetta terveillä vapaaehtoisilla. New Yorkin tiedeakatemian vuosikirja, 1194, 223–229. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2010.05474.x
5. Guarnera, G., DeRosa, A., & Camerini, R. (2010). Thymosiinihoidon vaikutus laskimotulehdukseen. New Yorkin tiedeakatemian vuosikirja, 1194, 207–212. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2010.05490.x
6. Sosne, G., & Ousler, G. W. (2015). Thymosin beta 4-silmäliuos kuivasilmäisyydelle: satunnaistettu, lumelääkekontrolloitu II-vaiheen kliininen tutkimus, joka suoritettiin kontrolloidun haitallisen ympäristön (CAE™) mallin mukaisesti. Kliininen silmälääketiede, 9, 877-884. https://doi.org/10.2147/OPTH.S80954 https://www.tandfonline.com/doi/full/10.2147/OPTH.S80954
7. Dunn, S. P., Heidemann, D. G., Chow, C. Y. C., Crockford, D., Turjman, N., Angel, J., Allan, C. B., & Sosne, G. (2010). Kroonisten, parantumattomien neurotrofisten korneaepiteelivikojen hoito timosiinibeta 4:lla. Silmäkirurgian arkisto, 128(5), 636–638. https://doi.org/10.1001/archophthalmol.2010.71 https://pismin.com/10.1001/archophthalmol.2010.53
8. Kleinman, H. K., & Sosne, G. (2016). Thymosin β4 edistää ihon paranemista. Vitamiinit ja hormonaalit (Vol. 102, s. 251–275). Elsevier. https://doi.org/10.1016/bs.vh.2016.04.005 https://pismin.com/10.1016/bs.vh.2016.04.005
9. Treadwell, T., Kleinman, H. K., Crockford, D., Hardy, M. A., Guarnera, G. T., & Goldstein, A. L. (2012). Regeneratiivinen peptidi thymosin β4 nopeuttaa ihon paranemista prekliinisissä eläinmalleissa ja potilailla. New Yorkin akatemiaan liittyvät aikakauslehdet, 1270, 37–44. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2012.06717.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23050815/
10. Guarnera, G., De Rosa, A., & Camerini, R. (2007). Thymosin β 4 ja laskimuraalit: kliiniset huomautukset eurooppalaisesta prospektiivisesta, satunnaistetusta tutkimuksesta, joka koskee turvallisuutta, siedettävyyttä ja paranemista. Annals of the New York Academy of Sciences, 1112, [sivut odotetaan]. https://doi.org/10.1196/annals.1415.003 https://nyaspubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1196/annals.1415.003
11. Yang, W. S., Kang, S., Sung, J., & Kleinman, H. K. (2019). Thymosin β4: mahdollisuus hoitaa epidermolysis bullosaa ja muita vakavia ihovaurioita. European Journal of Dermatology, 29(5), 459-467. https://doi.org/10.1684/ejd.2019.3642 https://stm.cairn.info/revue-european-journal-of-dermatology-2019-5-page-459?lang=en
12. Zhu, J., Su, L.-P., Ye, L., Lee, K.-O., & Ma, J.-H. (2012). Thymosin beta 4 lievittää hyperglykemiaa ja parantaa KK Cg-Ay/J-hiirien insuliiniresistenssiä. Diabetestutkimus ja kliininen käytäntö, 96(1), 53-59. https://doi.org/10.1016/j.diabres.2011.12.009 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22217673/
13. Wang, L., Chopp, M., Szalad, A., Liu, Z., Lu, M., Zhang, L., Zhang, J., Zhang, R. L., Morris, D., & Zhang, Z. G. (2012). Thymosin β4 edistää perifeerisen neuropatian paranemista tyypin II diabeteksen koirilla. Neurologinen tautioppi, 48(3), 546–555. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2012.08.002 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922221/
14. Su, L., Kong, X., Loo, S., Gao, Y., Liu, B., Su, X., Dalan, R., Ma, J., & Ye, L. (2022). Thymosin beta‑4 parantaa diabetespotilaiden pluripotenttejä kantasoluja tuottavia soluja eristetyissä diabeteksen endoteelisoluissa endoteelisen toiminnan ja korjaavan voiman. Keltakudos-tutkimus ja -hoito, 13(1), 13. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02687-x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35012642/
15. Philp, D., Badamchian, M., Scheremeta, B., Nguyen, M., Goldstein, A. L., & Kleinman, H. K. (2003). Thymosin beta 4 ja sen aktiini-sitovaa aluetta sisältävä synteettinen peptidei edistävät ihon haavojen paranemista db/db-diabeettisissa hiirissä ja vanhoissa hiirissä. Vammojen korjaus ja paraneminen, 11(1), 19–24. https://doi.org/10.1046/j.1524-475x.2003.11105.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12581423/
16. Kim, S., & Kwon, J. (2014). Thymosin beta 4 parantaa ihon palovammatulehduksen paranemista hidastamalla db/db-hiirillä kehittyneiden glykeerien päästötuotteiden reseptorien toimintaa. Biokemian ja biophysikaa (BBA) – Yleiset aiheet, 1840(12), 3452-3459. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2014.09.013 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25230158/
17. Gao, Y. X., Wang, L. F., Ba, S. J., Cao, J. L., Li, F., Li, B., & Zhou, B. (2022). Zhonghua shao shang yu chuang mian xiu fu za zhi, 38(4), 378–384. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn501120-20210221-00059 https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11704510/
18. Wang, L., Chopp, M., Szalad, A., Lu, X., Lu, M., Zhang, T., & Zhang, Z. G. (2019). Angiopoietiini-1/Tie2 -signaalitekijä osallistuu thymosini β4:n terpeuttiseen vaikutukseen diabeteksen aiheuttaman perifeerisen neuropatian hoidossa. Neurotieteellinen tutkimus, 147, 1-8. https://doi.org/10.1016/j.neures.2018.10.005 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30326249/
19. Wang, L., Chopp, M., Jia, L., Lu, X., Szalad, A., Zhang, Y., Zhang, R., & Zhang, Z. G. (2015). Laajennetun thymosiniβ4-hoidon terapeuttinen hyöty riippuu verensokeritasosta diabeteksen aiheuttamaa perifeeristä neuropatiaa sairastavilla hiirillä. Diabetes Research -lehti, 2015, 173656. https://doi.org/10.1155/2015/173656 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25945352/
20. Brady, R. D., Grills, B. L., Schuijers, J. A., Ward, A. R., Tonkin, B. A., Walsh, N. C., & McDonald, S. J. (2014). Thymosin β4 -annostelu parantaa munuaismurtuman paranemista hiirissä. Journal of Orthopaedic Research, 32(10), 1277–1282. https://doi.org/10.1002/jor.22686 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25042765/
21. Xu, B., Yang, M., Li, Z., Zhang, Y., Jiang, Z., Guan, S., & Jiang, D. (2013). Thymosin β4 parantaa sisäisen sivulihakkeen vamman paranemista rotilla. Sääntelyä koskevat peptideet, 184, 1–5. https://doi.org/10.1016/j.regpep.2013.03.026 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23523891/
22. Lee, S. I., Yi, J. K., Bae, W. J., Lee, S., Cha, H. J., & Kim, E. C. (2016). Thymosin beta-4 estää osteoklastisen erilaistumisen ja tulehdusreaktioita ihmisen parodontaalikudoksen soluissa. PLoS ONE, 11(1), e0146708. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0146708 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26789270/
23. Faa, G., Piras, M., Mancuso, L., Coni, P., Pichiri, G., Orrù, G., Fanni, D., Gerosa, C., Cao, G., Taibi, R., Pavone, P., & Castagnola, M. (2021). Thymosin beta-4 -annostelu ennen syntymää parantaa sikiön kehitystä ja pysäyttää ennenaikaisen synnytyksen aiheuttamat sivuoireet. European Review for Medical and Pharmacological Sciences, 25(1), 431–437. https://doi.org/10.26355/eurrev_202101_24411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33506933/
24. Badamchian, M., Fagarasan, M. O., Danner, R. L., Suffredini, A. F., Damavandy, H. & Goldstein, A. L. (2003). Thymosin beta(4) vähentää kuolevuutta ja alentaa endotoksiinien aiheuttamaa septiikkisuhdosta johtuvaa tulehdusmediatorien aktiivisuutta. International Immunopharmacology, 3(8), 1225–1233. https://doi.org/10.1016/S1567-5769(03)00024-9 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12860178/
25. Yu, R., Li, S., Chen, L., Hu, E., Chai, D., Liu, Z., Zhang, Q., Mao, Y., Zhai, Y., Li, K., Liu, Y., Li, X., Zhou, H., Yang, C., & Xu, J. (2025). Hengitysannostettu eksoottinen thymosiniini beta 4 tukahduttaa bleomysiiniin perustuvan keuhkoputkien fibroosin hiirissä TGF-β1-signaaliteitisen kautta. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 77(4), 582–592. https://doi.org/10.1093/jpp/rgae143 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39579076/
26. Wei, C., Kim, I. K., Li, L., Wu, L., & Gupta, S. (2014). Thymosin Beta 4 suojaa hiiriä monokrotalina-aiheutuneelta keuhkovaltimoiden hypertensiolta ja oikean kammion hypertrofiolta. PLoS ONE, 9(11), e110598. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0110598 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25412097/
27. Philp, D. & Kleinman, H. K. (2010). Eläintutkimukset timosiini β4:n kanssa, joka on monitoiminen kudoskorjaus- ja -parantamispeptidi. New Yorkin tiedeakatemian vuosikirja, 1194.(1), 81–86. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2010.05479.x https://pismin.com/10.1111/j.1749-6632.2010.05479.x
28. Yaman, O. M., Guner, I., Guntas, G., Sonmez, O. F., Tanriverdi, G., Cakiris, A., Aksu, U., Akyol, S., Guzel, E., Uzun, H., Yelmen, N., & Sahin, G. (2019). Thymosin β4:n suojaava vaikutus vatsan aorttikirroosiin ja reoxygenointiin johtaneeseen akuuttiin keuhkopotilauteen rotilla. Medicina (Kaunas), 55(5), 187. https://doi.org/10.3390/medicina55050187 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31121838/
29. Wang, H., Shuai, Q., Tang, J., Long, D., Xu, C., Liu, F., & Li, Z.-S. (2019). Paikallinen timosiini β4-geeliin injektio estää mahasyövyn tulehduksen perifeerisellä endoskooppisella submuuskuloiden poistolla sian mallissa. Ruoansulatuskanavan sairaudet, 37(2), 87–92. https://doi.org/10.1159/000492216 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30428463/
30. Munshaw, S., Bruche, S., Redpath, A. N., Jones, A., Patel, J., Dubé, K. N., Lee, R., Hester, S. S., Davies, R., Neal, G., Handa, A., Sattler, M., Fischer, R., Channon, K. M., & Smart, N. (2021). Thymosin β4 suojaa aortan aneurysmaa endokyyttisen kasvutekijäsignaaloinnin kautta. Journal of Clinical Investigation, 131(10), e127884. https://doi.org/10.1172/JCI127884 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33784254/
31. Renga, G., Oikonomou, V., Moretti, S., Stincardini, C., Bellet, M. M., Pariano, M., Bartoli, A., Brancorsini, S., Mosci, P., Finocchi, A., Rossi, P., Costantini, C., Garaci, E., Goldstein, A. L., & Romani, L. (2019). Thymosin β4 edistää autofagiaa ja korjausta HIF-1α-stabilisaation kautta kroonisessa granulomatoosissa tautissa. Life Science Alliance, 2(6), e201900432. https://doi.org/10.26508/lsa.201900432 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31719116/
32. Munshaw, S., Redpath, A. N., Pike, B. T., & Smart, N. (2023). Thymosin β4 säilyttää verisuonien sileälihaksen fenotyyppin ateroskleroosissa säätämällä matalan tiheyden lipoproteiiniä vastaavaa proteiinia 1:tä (LRP1). Kansainvälinen immunofarmakologia, 115, 109702. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2023.109702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37724952/
33. Bongiovanni, D., Ziegler, T., D’Almeida, S., Zhang, T., Ng, J. K. M., Dietzel, S., Hinkel, R., & Kupatt, C. (2015). Thymosin β4 vähentää mikroverenkierron ja hemodynaamisen epävakautta sepelvaltimotautiin. Asiantuntijatutkimus biologisesta hoidosta, 15(Suppl 1), S203–S210. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1006193 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25604254/
34. Tian, Z., Yao, N., Wang, F., & Ruan, L. (2022). Thymosin β4 estää LPS-aiheutettua hiiren keuhkoprosessia vähentämällä hapetusvahinkoa ja lieventämällä tulehdusta. Tulehdus, 45(1), 59–73. https://doi.org/10.1007/s10753-021-01528-6 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34414534/
35. Philp, D., Scheremeta, B., Sibliss, K., Zhou, M., Fine, E. L., Nguyen, M., Wahl, L., Hoffman, M. P., & Kleinman, H. K. (2006). Thymosin beta4 edistää matriksimetaloproteinaasien ilmentymistä haavan korjaamisen aikana. Journal of Cellular Physiology, 208(1), 195–200. https://doi.org/10.1002/jcp.20650 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16607611/