Ac-SDKP (N-atsetüül-srüül-aspartüül-lüsüül-proliin): elundite fibroos, kudede kaitse ja eksperimentaalsed uuringud

Ac-SDKP (N-atsetüül-srüül-aspartüül-lüsüül-proliin) on endogeenne tetrapeptiid, mis tekib suuremast valgust tümosiin beetast-4. Tümosiin β4 ensümaatilisel töötlemisel tekib mitu fragmenti, sealhulgas Ac-SDKP [1]. See ühend pakub teadlastele huvi kudede kahjustuste eksperimentaalsetes mudelites täheldatud fibriinivastase toime tõttu. Selle bioloogilist püsivust piirab kiire lagunemine angiotensiini konverteeriva ensüümi (ACE) vahendusel. Uuringutes on näidatud, et ACE inhibiitorid võivad ringleva Ac-SDKP kontsentratsiooni suurendada kuni viis korda, mis on oluline nende toimet kudedele käsitlevates uuringutes [1].

Algselt keskendusid uuringud Ac-SDKP võimele hoida vereloome tüvirakke suhtelises puhkeolekus. Hiljem laiendati uuringute haaret põletikuprotsessidele, rakuvälise maatriksi remodelleerumisele ja kudede regeneratsioonile. Mitmes eelkliinilises elundikahjustuse mudelis täheldasid teadlased maatriksikomponentide patoloogilise kogunemise vähenemist. Peptiid vähendas muu hulgas armkoe peamise valgu kollageeni ülemäärast tootmist stimuleerivate rakkude signaalide aktiivsust ja piiras fibroblastide muundumist armide tekke eest vastutavateks rakkudeks.

Prekliinilistes neeruuringutes on Ac-SDKP näidanud soodsaid muutusi ka elundi talitluse parameetrites ja fibroosis. On täheldatud immuunrakkude liigse sissevoolu piiramist ja kahjustusi süvendada võivate põletikuprotsesside leevenemist. Üldiselt viitavad tulemused Ac-SDKP rollile fibroosiga seotud radade endogeense regulaatorina. Raku- ja loomkatsetest pärit tähelepanekud ei kinnita siiski kliinilist efektiivsust ega ohutust inimestel kasutamisel.

Südame-veresoonkonna uuringud: südemekiudumine, põletik ja veresoonte kahjustused

Kardiovaskulaarsetes eksperimentaaluuringutes analüüsiti Ac-SDKP-d nii ägedate südamelihase kahjustuste kui ka selle struktuuri kroonilise ümberkujundumise puhul. Hiirte südameinfarkti mudelis manustasid Nakagawa ja tema kolleegid Ac-SDKP-d annuses 1,6 mg/kg/päevas väikese nahaaluse pumba abil. Südameseina rebendite osakaal vähenes 51,0%-lt 27,3%-ni ja suremus 56,9%-lt 31,8%-ni. Teadlased seostasid neid tulemusi proinflammatoorsete M1-makrofaagide väiksema sissevooluga, ilma et M2-makrofaagide või neutrofiilide arv oleks vastavalt muutunud. Samuti täheldati infarkti järel südame kudede lagunemises osaleva ensüümi MMP-9 aktiivsuse vähenemist, samas kui MPO-marker jäi muutumatuks. See võib viidata selektiivsele mõjule teatud kahjustusmehhanismidele [2].

Uuringutes pikaajalisest hüpertensioonist tingitud südame fibroosi kohta näitasid Peng jt, et Ac-SDKP võib vähendada juba olemasolevat kiulist kude, mitte ainult piirata selle teket. Väljakujunenud hüpertensiooniga rotte hõlmanud uuringus vähendas Ac-SDKP subkutaanne manustamine annustes 400–800 µg/kg ööpäevas kaheksa nädala jooksul südame kolageenisisaldust annusest sõltuval viisil. Suurem annus oli seotud tugevama toimega. Arteriaalne vererõhk ei langenud ja normaalsed reaktsioonid angiotensiin I-le ning bradükiniinile säilisid. See tähendab, et täheldatud muutusi ei saa seletada pelgalt vererõhu langusega. Ac-SDKP kontsentratsioon veres suurenes kahe kuni viie korra võrra, samas kui fibroosi oluliste vahendajate TGF-β ja CTGF tasemed vähenesid [3].

Pärast südameinfarkti võivad püsiv põletik ja fibroos viia organi progresseeruva puudulikkuseni. Yang ja kaastöölised uurisid Ac-SDKP-d nii varases faasis kahjustuste piiramiseks kui ka hilisemas perioodis muutuste tagasipööramise võimaluse hindamiseks. Mõlemal juhul vähenes südame üldine kolageenisisaldus. Profülaktilises rühmas langes see näiteks umbes 24-lt 15 µg/mg-ni ja muutuste tagasipööramist uurivas rühmas umbes 23-lt 14 µg/mg-ni. Makrofaagide arv vähenes mõlemas rühmas umbes kolmandiku võrra ning TGF-β suhtes positiivsete rakkude arv samuti langes. Need muutused toimusid ilma vererõhu languseta ja südame suuruse vähenemiseta. Profülaktilises rühmas ei ilmnenud ühest paranemist kontraktiilsuses. Sellest hoolimata viitasid fibroosi ja põletiku piiramine soodsamatele südamelihase struktuursetele parameetritele uuritavas mudelis [4].

Ac-SDKP võib osaleda ka täiendavates kaitsetoimetes, mida täheldatakse AKE inhibiitorite kasutamisel. Rasoul ja kaasautorid võrdlesid angiotensiin II-ga esile kutsutud hüpertensiooni mudelit rühmadega, mis said kaptopriili või Ac-SDKP-d annustes 400–800 µg/kg/päevas. Peptiidi kontsentratsioon veres mitmekordistus ja see taasesitas mitmeid AKE inhibiitorite toimega sarnaseid efekte: piiras rakkude liigset proliferatsiooni südames, vähendas makrofaagide ja nuumrakkude arvu, langetas TGF-β ja CTGF taset ning piiras kollageeni ladestumist. Need efektid ilmnesid ilma vererõhu languse või südame hütroofia vähenemiseta, mis viitab otsesele toimele südamelihase koes [5].

Rhaleb ja kaastöölised uurisid Ac-SDKP-d roti südame fibroblastide kultuurides, kasutades kontsentratsioone 0,05 kuni 100 nmol/l. Nad täheldasid kahte olulist toimet: rakkude proliferatsiooni piiramist, mida mõõdeti DNA sünteesi põhjal, väärtusteni, mis olid normaalsetega sarnased umbes 1 nmol/l juures, ning endoteliin-1 (tugeva fibroosi vahendaja) poolt stimuleeritud kollageeni tootmise vähenemist. Madalamad kontsentratsioonid olid kollageeni sünteesi pärssimisel tõhusamad, samas kui väga kõrged olid vähem aktiivsed. Mehhanism näis olevat seotud p44/42 MAPK/ERK signaaliülekande nõrgenemisega. Tuntud MAPK inhibiitor tekitas sarnase efekti. Tulemused on kooskõlas fibroblastide proliferatsiooni ja maatriksi sünteesi piiramisega rakukasvu reguleerivate radade moduleerimise kaudu [6].

Järgmistes uuringutes on näidatud, et Ac-SDKP võib piirata galektiin-3 esile kutsutud südamekahjustusi. Liu ja kaastöölised manustasid täiskasvanud the ratsutajatele – *siin peab olema täpne, korrigeerin grammatiliselt* – [...] Liu ja kaastöölised manustasid täiskasvanud rotile galektiin-3, põletikku ja fibroosi soodustavat valku, nelja nädala jooksul. Loomadel täheldati suuremat põletikurakkude arvu, südame seinte paksenemist, suurenenud perivaskulaarset ja intestitsiaalset fibroosi, TGF-β/Smad3 raja aktiivsuse tõusu ja süstoolse funktsiooni langust ehhokardiograafilisel uuringul. Ac-SDKP lisamine annuses 800 µg/kg/päevas hoidis ära enamiku nendest muutustest. Vähenes põletikurakkude arv, fibroos ja südame seinte paksenemine ning selle talitluse parameetrid olid soodsamad. Tulemused viitavad TGF-β/Smad3 raja pärssimise ja põletiku piiramise osalusele [7].

Rhaleb jt. hindasid Ac-SDKP-d ka klassikalises rotiriud-hüpertensiooni mudelis, mida tuntakse kahe neeru ja ühe klambri (2K1C) mudelina. Peptiidi manustati naha alla annuses 400 µg/kg ööpäevas. Vaatamata püsivalt kõrgele vererõhule ja südame hüpertroofiale täheldati põletikuliste ja prolifereeruvate rakkude arvu olulist vähenemist südamelihases. Interstitsiaalse kollageeni osakaal langes hüpertensiooniga ratsudel umbes 10,1 %-lt umbes 5,4 %-ni, mis on peaaegu identne tase näiliselt opereeritud loomadega (umbes 5,3 %). See tähendab, et kudede ümberehitus muutus vaatamata jätkuvale rõhukoormusele, mis toetab vererõhu langusest sõltumatu mehhanismi hüpoteesi [8].

Cavasin ja kaastöölised arutasid oma narratiivses ülevaates tümosiin $\beta$4 ja selle fragmendi Ac-SDKP täiendavaid omadusi. Tümosiin $\beta$4 osaleb rakkude migratsioonis ja ellujäämises, samas kui Ac-SDKP avaldab hüpertensiooni mudelites fibroosivastast toimet. Südamelihase infarkti uuringutes piiras peptiid põletikku, vähendas fibroosi ja soodustas ka angiogeneesi, mida täheldati nii *in vivo* kui ka *ex vivo*. Hiire mudelites vähendas see ka südameseina rebenemise riski. Mõjude osaline kattuvus viitab sellele, et Ac-SDKP võib vastutada mõningate tümosiin $\beta$4-le omistatud bioloogiliste toimete eest. Autorid rõhutasid siiski kliiniliste uuringute läbiviimise vajadust inimestel [9].

Ac-SDKP-d uuriti ka selle mõju osas ekstratsellulaarse maatriksi komponente lagundavate ensüümide suhtes. Täiskasvanud theedi südame fibroblastides näitasid Rhaleb ja kaastöötajad, et interleukiin-1β (IL-1β) suurendab oluliselt metalloproteinaside MMP-2, MMP-9 ja MMP-13 ekspressiooni. Need ensüümid osalevad maatriksi lagundamises ja võivad aidata kaasa kudede ebasoodsale ümberehitusele. Ac-SDKP ei muutnud MMP-de baasekspressiooni, kuid pärssis tugevalt IL-1β esile kutsustud tõusu. Samal ajal suurendas see metalloproteinaside naturaalsete inhibiitorite TIMP-1 ja TIMP-2 ekspressiooni, taastades maatriksi ümberkujunemise tasakaalustatuma regulatsiooni.

Peptiid pärssis samuti NF-κB ja ERK/MAPK, kahe põletiku ja proliferatsiooniga seotud olulise raja aktivatsiooni. Oluline on, et IL-1β ei suurendanud selles mudelis kollageeni tootmist ning ka Ac-SDKP ei mõjutanud selle sünteesi. See viitab kudede ümberehituse selektiivsele regulatsioonile, mitte kollageeni tootmise üldisele pärssimisele. Tulemused viitavad Ac-SDKP võimalikule rollile rakuvälise maatriksiga seotud protsesside tasakaalu säilitamisel [10].

Nakagawa ja kaastöölised uurisid Ac-SDKP-d T-lümfotsüütidest sõltuva müokardiidi rotimudelis. Peptiidi saanud immuniseeritud Lewise ratastel säilis nii südame süstoolne kui ka diastoolne funktsioon. Samuti piirati elundi suurenemist, kiulise koe teket ja selle struktuuri kahjustusi. Histoloogiline analüüs näitas immuunrakkude, sealhulgas makrofaagide, dendriitrakkude ja T-lümfotsüütide väiksemat infiltratsiooni.

Põletikumediaatorite, sealhulgas IL-1α, TNF-α, IL-2 ja IL-17, kemokiinide CINC-1 ja IP-10, adhesioonimolekulide ICAM-1 ja L-selektiini ning metalloproteinaaside tasemed samuti vähenesid. Ac-SDKP ei muutnud aga müosiinivastaste autoantikehade taset ega antigeenispetsiifiliste T-lümfotsüütide vastust. See viitab sellele, et täheldatud kaitsev toime tulenes eelkõige immuunrakkude ja põletikumediaatorite rekrueerimise piiramisest, mitte aga autoantikehade tootmise muutusest või T-lümfotsüütide aktiveerimisest [11].

González ja kaastöölised uurisid Ac-SDKP-d ratsutel, kellele manustati kolme nädala jooksul angiotensiini II. Vererõhk ja südame hütrooofia jäid nii ravitud kui ka kontrollloomadel kõrgeks. Ac-SDKP aga hoidis ära kollageeni üldsisalduse suurenemise ja selle ristseondumise. Mehhanism hõlmas lüsüüloksüdaasi (LOX) mRNA ja LOXL1 valgu ekspressiooni pärssimist, mis on ensüümid, osalevad kollageeni ristseoste moodustamises ja kiulise koe jäigastumises.

Lisaks vähenes TGF-β ekspressioon, NF-κB aktivatsioon ning CD4⁺ ja CD8⁺ T-lümfotsüütide ja CD68⁺ makrofaagide sissevool südamelihasesse. CD4⁺ lümfotsüütide sissevool korreleerus LOXL1 ekspressiooniga, mis viitab mehhaanilisele seosele immuunrakkude aktiivsuse ja kiulise koe jämenemise vahel. Tulemused viitavad põletiku- ja fibroosivastasele toimele, mis ei sõltu vererõhu muutustest [12].

Peng ja kaastöölised analüüsisid Ac-SDKP mõju südamekahjustuse varastele ja hilistele etappidele pärast müokardiinfarkti C57BL/6J hiirtel. Loomad saadi 1,6 mg/kg/päevas. Esimesel nädalal vähenes südameseina letaalsete rebendite sagedus, ICAM-1 ekspressioon, makrofaagide sissevool, želatiini lagundavate ensüümide aktiivsus, p53 tase ja kardiomüotsüütide surm. Samal ajal suurenes kahjustatud piirkonna perifeerias väikeste veresoonte arv, mis viitas angiogeneesi tugevnemisele.

Viiendal nädalal täheldati väiksemat interstitsiaalse kollageeni sisaldust, paremini säilinud südamestruktuuri, madalamaid endoplasmaatilise retiikulumi stressi näitajaid, sealhulgas CHOP-i, ning kardiomüotsüütide kaltsiumi regulatsioonis olulise valgu SERCA2 taseme säilimist. Südame üldine funktsioon oli soodsam. Uuring viitab muutustele nii varajases kahjustuses kui ka hilisemas vatsakeste ümberkujunemises [13].

Castoldi ja kaastöölised hindasid Ac-SDKP-d diabeetilise kardiomüopaatia rotimudelis. Kaks kuud pärast diabeedi esilekutsumist alustati peptiidi kaheksanädalast manustamist annuses 1 mg/kg/päevas minipumpade abil. Diabeediga rotil esines hüperglükemia, väljendunud intestitsiaalne ja perivaskulaarne fibroos ning TGF-β1 ja fosforüülitud Smad2/3 valgutasemete tõus. Ac-SDKP vähendas mõlemat tüüpi fibroosi ja piiras TGF-β/Smad signaalülekannet, seda ka ACE inhibiitorit ramipriili saanud loomadel.

Ehhokardiograafiline uuring näitas diabeediga seotud südame süstoolseid ja diastoolseid häireid. Insuliin ja ramipriil taastasid mõlemad funktsioonid, samas kui Ac-SDKP parandas osaliselt diastoolset funktsiooni. Tulemused viitavad antifibrootilisele toimele, mida saatis mõõdukas funktsionaalne paranemine selles mudelis [14].

Sharma ja kaastöölised uurisid pärgarterite kaitset kiirguskahjustuste eest. Rottide rindkere kiiritamise mudelis manustati Ac-SDKP-d naha alla 18 nädala jooksul. Kiirgus vähendas südame verevoolu puhkeolekus, viis endoteelirakkude surmani, suurendas pärgarterite fibroosi ja kahjustas tiheliiduste valke, sealhulgas klaudiin-1 ja JAM-2.

Ac-SDKP taastas verevoolu normväärtuste suunas, soodustas endoteelirakkude säilimist, vähendas fibroosi ja parandas tiheliiduste organisatsiooni. Laboratoorsed uuringud näitasid, et peptiid tungis endoteelirakkudesse ja piiras reaktiivsete hapnikuliikide teket pärast kiiritamist. Elusloomadel kogunes märgistatud peptiid endoteelirakkudesse paari tunni jooksul. Tulemused viitavad veresoonte kaitsele, väiksemale oksüdatiivsele kahjustusele ja mikrotsirkulatsiooni paremale säilimisele selles mudelis [15].

Inimeste südame fibroblastidega läbi viidud uuringutes eksponeeriti rakke eelnevalt Ac-SDKP-le kontsentratsioonis 10 nM ja seejärel endoplasmaatilise retiikuliumi stressi tekitava tunikamütsiiniga (0,25 µg/ml). Peptiid piiras stressis rakkudes liigset kollageeni tootmist. See efekt oli seotud stressivastuse nõrgenemise, CHOP-i ja NF-κB aktiivsuse vähenemise ning IL-6 taseme langusega.

Pärast CHOP ekspressiooni geneetilist vähendamist pärssis Ac-SDKP endiselt NF-κB aktiivsust ja I tüübi kolageeni ekspressiooni nii valgu kui ka mRNA tasemel. Tulemused toetavad hüpoteesi, et peptiid võib raku stressi tingimustes piirata kiulise koe komponentide liigset tootmist [16].

Inimese pärgarterite endoteelirakkudes põhjustas TNF-α stimulatsioon ICAM-1, leukotsüütide veresoone pinnale kinnitumises osaleva adhesioonimolekuli, ekspressiooni märgatava tõusu. Esmakordne kokkupuude Ac-SDKP-ga vähendas ICAM-1 taset annusest sõltuval viisil. Mehhanistlik analüüs viitas põletikuliste geenide aktivatsioonis keskset rolli mängiva IKK → IκB → NF-κB kaskaadi pärssimisele. Kaks teist rada, p38 MAPK ja ERK, jäid muutumatuks. See viitab Ac-SDKP selektiivsele mõjule NF-κB signalingule endoteelirakkudes. Need on aga rakulised tulemused, mitte veresoonte kliinilise kaitse kinnitus [17].

Angiotensiin II indutseeritud hüpertensiooniga boti mudelis piiras Ac-SDKP kollageeni ladestumist aordis ning vähendas I ja III tüüpi kollageeni mRNA ekspressiooni. Samuti täheldati valgukinaas C madalamat aktiivsust, väiksemat oksüdatiivset stressi, ICAM-1 ekspressiooni piiramist ja makrofaagide väiksemat sissevoolu veresoone seina. TGF-β1 ja Smad2 aktiivsus vähenes, samas kui selle raja naturaalse inhibiitori Smad7 tase tõusis. Vererõhk ja aordi paksus jäid kõrgemaks, mis viitab sellele, et täheldatud muutused veresoone seinas ei tulenenud vererõhu langusest [18].

Ühes teises rottide rindkere kiiritamise mudelis soodustas 18-nädalane Ac-SDKP manustamine südame funktsiooni säilimist, piiras ekstratsellulaarse maatriksi kogunemist ja fibroosi, vähendas makrofaagide sissevoolu ja südamerakkude surma. Samuti langesid fibroosiga seotud makrofaagide valgu Mac-2 (galaktiin-3) tasemed ja vabanemine. Ac-SDKP-d täheldati makrofaagide sees raku tuuma lähedal ja selle olemasolu piiras kiirgusest esile kutsutud Mac-2 vabanemist. Kui fibroblastid ei sisaldanud Mac-2, kutsus kiirgus esile märgatavalt nõrgemad fibroosi soodustavad signaalid. Need uuringud pakuvad prekliinilisi tõendeid põletikulise ja fibrootilise koemuutuse piiramiseks pärast kiiritamist [19].

Hingamiselundite uuringud: kopsufibroos ja põletikulised kahjustused

Võrdlevad kopsouuringud analüüsisid erinevusi Ac-SDKP ja selle eelkäija tümosiin β4 vahel. Idiopaatilise kopsuveresoonte fibroosiga (IPF) inimeste kopsurakkudega tehtud laborikatsetes piiras Ac-SDKP rakkude liigset proliferatsiooni ja vähendas TGF-β poolt stimuleeritud kahe fibriinimarkeri – α-SMA ja kollageeni – ekspressiooni.

Bleomütsiinist põhjustatud kopsukahjustuse hiiremudelis vähendas tümosiin β4 seitsmendal päeval põletikku ja varast fibroosi, kuid ei hoidnud ära fibroosi hilisemates etappides, 14. ja 21. päeva vahel. Tulemused viitavad sellele, et Ac-SDKP võib pärssida kiulise koe tekke algetappe rakkudes ja avaldada potentsiaalselt püsivamat antifibrootilist toimet kui selle prekursor. See hüpotees vajab siiski edasist kinnitamist [20].

Silikoosi uuringutes analüüsiti KIF3A ja β-kateniini raja rolli. KIF3A tasemed olid madalamad nii patsientide proovides kui ka the rataste (ja/või rottide) kopsudes. KIF3A aktiivsuse taastamine vähendas β-kateniini signaaliülekannet ja selle downstream-vahendajaid MRTF-A ja SRF, piirates epiteelrakkude muundumist miofibroblastideks (EMyT), mis on fibroosiga seotud protsess.

Ac-SDKP suurendas KIF3A aktiivsust ja vähendas β-kateniini / MRTF-A / SRF signaaliülekannet. Kui KIF3A ekspressiooni kunstlikult piirati, kadusid Ac-SDKP kasulikud toimed. See viitab sellele, et KIF3A on uuritava fibroosivastase mehhanismi hädavajalik komponent [21].

Järgmises uuringus piiras Ac-SDKP kombinatsioon vasoaktiivse intestinaalse펩tiidiga (VIP) hiirtel sigaretisuitsust põhjustatud kroonilise obstruktiivse kopsuhaiguse (KOK) sarnaseid muutusi. Vähenesid oksüdatiivsete kahjustuste markerid, sealhulgas MDA, kollageeniga seotud hüdroksüproliini sisaldus ja TGF-β tase. Samal ajal langesid põletikuliste tsütokiinide TNF-α, IL-1β ja IL-6 kontsentratsioon ning superoksiiddismutaasi (SOD) aktiivsus kasvas. Histoloogiline uuring näitas vähem põletikku ja nõrgemat kopsude struktuurset ümberehitust. Kombinatsioonil oli seega suitsust põhjustatud kahjustuse mudelis antioksüdantne, põletikuvastane ja fibroosivastane toime [22, 23].

Ac-SDKP näitas aktiivsust ka bleomütsiini esile kutsutud kopsufibroosi nii varases kui ka hilises staadiumis. CD-1 hiirtel parandas manustamine annuses 0,6 mg/kg intraperitoneaalselt, alates 0. või 7. päevast, elulemust ja vähendas bleomütsiiniga seotud kehakaalu langust. Kopsudes täheldati väiksemat turset, vähem infiltreerunud immuunrakkudeid, paremini säilinud koestruktuuri ja vähem fibrioosi. Kollageeni värvumine ja lahustuva kollageeni hulk vähenesid. Samuti langesid IL-17, TGF-β ja α-SMA tasemed, mis viitas müofibroblastide väiksemale arvule. Efektid ilmnesid nii varase kui ka hilinenud manustamise alustamise korral [24].

Roti silikoosi mudelis piiras Ac-SDKP fibroosi, mõjutades P-HSP27/SNAI1 rada. Ränidioksiid suurendas P-HSP27, SNAI1, α-SMA ning I ja III tüüpi kolageeni taset kopsukoes. Ac-SDKP manustamine enne kokkupuudet või pärast haiguse algust vähendas kõiki neid markereid ning P-HSP27 ja α-SMA suhtes samaaegselt positiivsete rakkude arvu. Tervetel kontrollloomadel peptiid nende valkude ekspressiooni ei muutnud, mis viitab täheldatud toimete sõltuvusele kudede haiguslikust seisundist [25].

Metaanalüüs, mis hõlmas 18 randomiseeritud loomkatset aastatel 2008–2021, hõlmas kokku 428 looma. Võrreldes ravimata mudelitega vähendas Ac-SDKP mitmeid fibroosi markereid: α-SMA-d (standardiseeritud keskmine erinevus [SMD] −2,44), I tüüpi kolageeni (SMD −5,36), III tüüpi kolageeni (SMD −3,07), TGF-β-d (SMD −2,88) ja kopsunoodulite pindala (SMD −1,80). Kõigi nende parameetrite puhul oli p < 0,001.

Samštus oli ka hüdroksüproliini, kollageenisisalduse markeri muutumine (SMD 7,62; 95% CI 4,90–10,33; p < 0,001), mis viitas mõjule kollageenivahetusele. Loomkatsete koondtulemused toetavad fibroosivastase toime olemasolu analüüsitud mudelites, kuid neile kehtivad prekliinilistele metaanalüüsidele omased metoodilised piirangud [26].

Teises uuringus toodi rotid ränidioksiidi toimele, et kutsuda esile fibroos, ning seejärel manustati Ac-SDKP-d profülaktilise skeemi alusel või pärast kahjustuste väljakujunemist annuses 800 µg/kg ööpäevas. Võrreldes silikoosiga kontrollrühmadega olid TGF-β1 ja CTGF valgutasemed kopsudes oluliselt madalamad, vastavalt ligikaudu 0,244 ± 0,016 ja 0,241 ± 0,017. Samuti vähenes mRNA tase, eriti CTGF oma (p < 0,05). Profülaktilises rühmas olid nii TGF-β1 valk kui ka mRNA oluliselt madalamad kui kaheksanädalases silikoosimudelis. Histoloogilised uuringud kinnitasid väiksemat fibroosi [27].

Järgmises silikoosimudelis vähendas Ac-SDKP kollageeni kogunemist ja parandas kopsude struktuuri. Rottidele manustati peptiidi pärast kahjustust või 48 tundi enne ränidioksiidiga kokkupuudet. Ravirühmades vähenes nodulite pindala võrreldes silikoosimudelitega vastavalt 84,28% ja 67,93%, hüdroksüproliini tase 70,89% ja 58,18%, I tüüpi kollageeni tase 71,08% ja 58,13% ning III tüüpi kollageeni tase 80,13% ja 70,70% kontrollväärtustest eri ajahetkedel.

Ennetavates rühmades vähenes kaheksanädalase ränikopsupõletiku mudeliga võrreldes sõlmede pindala 61,13%, hüdroksüproliin 60,27% ning I ja III tüübi kollageen vastavalt 40,13% ja 65,77%. HE ja VG histoloogiline värvimine näitas kergemat fibroosi. Tulemused kinnitavad nii kollageenisisalduse kui ka nähtavate kiuliste muutuste vähenemist uuritud mudelis [28].

Ränidioksiidi kokkupuute uuringud hõlmasid ka kopse ja luid. Roti- ja rakumudelites aktiveeris ränidioksiid TLR4 ja RANKL-i, suurendades kopsupõletikku ja luude resorptsiooni eest vastutavate osteoklastide moodustumist. Ac-SDKP pärssis TLR4 ja RANKL-i signaalijada, soodustas kopsu elastiini säilimist, piiras põletikku ja makrofaagide aktiveerumist. Luukoes pärssis see osteoklastide diferentseerumist ning aitas säilitada luutihedust ja mikroarhitektuuri. Tulemused viitavad samaaegsetele kaitsvatele muutustele kopsudes ja luukoes ränidioksiidiga seotud kahjustuste eksperimentaalsetes mudelites [29].

Ac-SDKP-d uuriti ka selle mõju osas fibroblastide diferentseerumisele müofibroblastideks. TGF-β1 stimuleerib kopsufibroblastide sellist muundumist ja suurendab kolageeni tootmist. Kui Ac-SDKP-d kasutati enne kokkupuudet TGF-β1-ga, siis α-SMA ja kolageeni tasemed vähenesid, samuti TGF-β1 ja selle retseptori tasemed.

Ränidioksiidist põhjustatud kopsukahjustusega rotil on peptiidi manustamine enne kokkupuudet või pärast seda vähendanud TGF-β1 taset, RAS-signaalülekannet ja SRF-i aktiivsust ning vähendanud α-SMA-positiivsete miofibroblastide arku kopsunöpsudes. Sellega kaasnes väiksem kollageeni ladestumine [30, 31].

Kopsu alveooliepiteeli rakkudega läbi viidud uuringutes analüüsiti epiteeli-mesenhümaalset üleminekut. Ränidioksiidi ja TGF-β1 mõjul epiteeli markerite, nagu E-kadheriini ja SP-A, tasemed alanesid, samas kui mesenhümaalsed ja fibrootilised markerid, sealhulgas vimentiin, α-SMA ning I ja III tüüpi kollageen, tõusid.

Ac-SDKP piiras neid muutusi. Rakud säilitasid suuremal määral epiteliaalseid tunnuseid, fibroosi markerite tasemed langesid ja TGF-β1/ROCK1 raja aktiivsus nõrgenes. See viitab kopsualveoolide epiteeli struktuuri paremale säilimisele eksperimentaalse kahjustuse tingimustes [32].

Ac-SDKP mõjutas samuti endoplasmaatilise retiikuliumi stressi ja kopsualveoolide epiteelrakkude surma. Kokkupuude ränidioksiidiga suurendas GRP78, fosforüülitud PERK-i ja eIF2α, CHOP-i ning kaspaas-12 taset, mida saatis suurenenud rakkude surm. Ac-SDKP juuresolekul, sarnaselt endoplasmaatilise retiikuliumi stressi inhibiitori 4-PBA kasutamisega, need markerid vähenesid. Samuti piirati rakkude surma laborikatsetes ja ratsudel ning kollageeni sisaldust kopsudes. Tulemused viitavad sellele, et PERK/eIF2α/CHOP raja ja kaspaas-12 aktiivsuse nõrgenemine võib osaleda epiteeli kaitsmises ja fibroosi piiramises [33].

Neerude uuringud: fibroos ja filtratsioonifunktsioon

Nakagawa ja kaastöötajad (2017) näitasid luupusele eelsoodumusega NZBWF1 hiiremudelil, et Ac-SDKP piiras neerukahjustust ja glomeruloskleroosi ilma süstoolset vererõhku langetamata. Raske hüpertensioon, albuminuuria ja enneaegne surm ilmnesid ravitud loomadel hiljem, kuid need erinevused ei saavutanud statistilist olulisust [34].

Worou ja kolleegid (2015) uurisid soolatundlikke Dahli rotte, kes said Ac-SDKP-d kuue nädala jooksul annustes 800 või 1600 µg/kg/päevas. Kõrge soolasisaldusega dieet tõstis endiselt vererõhku, kuid neerudes täheldati vähem põletikku, väiksemat fibroosi ja paremini säilinud glomeruleid. Ainult suurem annus vähendas albuminuuriat soolatundlatel rottidel. Vastupidavamas SS13BN liinis hoidsid mõlemad annused ära albumiini kadu ja struktuursed kahjustused. Tulemused viitavad sellele, et vähemalt osa neeruatoimest oli vererõhu langusest sõltumatu [35].

Liao ja kolleegid (2015) uurisid Ac-SDKP-d luupusele eelsoodumusega hiirtel 20 nädala jooksul. Peptiidi saanud loomadel täheldati paremat neerufunktsioon, hoolimata sellest, et luupusega seotud autoantikehade tasemed ei muutunud. Neerudes esines vähem infiltreeruvaid makrofaage ja T-lümfotsüüte. Tsütokiinide ja kemokiinide tasemed vähenesid ning komplementkomponentide C5–9 ja vahendajate RANTES, MCP-5 ja ICAM-1 aktiivsus oli pärsitud. Sellega kaasnes filtratsioonifunktsiooni säilimine ja väiksemad mikroskoopilised kahjustused [36].

DOCA-soola tekitatud hüpertensiooni mudelis manustasid Rhaleb jt (2011) hiirtele Ac-SDKP-d annuses 800 µg/kg ööpäevas 12 nädala jooksul. Hoolimata püsivast hüpertensioonist vähenes neerufibroos, maatriksi ladestumine glomeruliides ning monotsüütide ja makrofaagide sissevool. Albuminuuria langes 41 ± 5 µg-lt 13 ± 3 µg-ni 10 g kehamassi kohta ööpäevas, jõudes kontrollrühmale lähedaste väärtusteni. Samuti taastus osaliselt nefriini, olulise filtratsioonipilu valgu tase. Tulemused viitavad filtratsioonibarjääri kaitsele ja fibroosi piiramisele vererõhust sõltumatult [37].

Shibuya ja kaastöötajad (2005) analüüsisid Ac-SDKP-d 2. tüüpi diabeediga db/db-hiirtel. Kaheksanädalane manustamine minipumpade abil suurendas peptiidi kontsentratsiooni plasmas umbes kolm korda ilma glükeemiat muutmata. Pärsiti glomerulaarset hütrotroofiat, mesangiaalse maatriksi ja rakuvälise maatriksi komponentide liigset ladestumist. Kreatiniini kontsentratsioon plasmas lähenesnormväärtustele. Albuminuuria samuti vähenes, kuid erinevus ei olnud statistiliselt oluline. Mehhaaniliselt pärssis Ac-SDKP Smad3 liikumist rakutuuma, piirates fibroosiga seotud TGF-$\beta$/Smad signaaliülekannet [38].

Castoldi ja kollegad (2013) uurisid diabeediga rotte, kellele manustati Ac-SDKP-d annuses 1 mg/kg/päevas, ramipriili annuses 3 mg/kg/päevas, mõlemat ühendit koos või keskkonnakontrolli. Ravimata loomadel esines hüperglükemia, suurenenud albuminuuria, neerufibroos ja vähenenud nefriini hulk glomeruliinides. Ac-SDKP üksi vähendas fibroosi, kuid ei parandanud albuminuuriat. Ramipriil vähendas nii albuminuuriat kui ka fibroosi ning taastas nefriini taseme. Ac-SDKP ja ramipriili kombinatsioon piiras fibroosi tugevamini kui ramipriil üksi, kuid ei toonud kaasa täiendavat albuminuuria paranemist. Tulemused viitavad täiendavale antifibrootilisele toimele uuritud mudelis ilma albumiini eritumise täiendava paranemiseta [39].

Zhang ja kolleegid (2022) töötasid välja bioloogilisest inspiratsioonist kantud kahevõrgulise hüdrogeeli, mis koosneb želatiinist ning kurkumiini-tsingi kompleksist, on kaetud DOPA-ga ja funktsionaliseeritud immobiliseeritud Ac-SDKP-ga. Süsteem loodi vabadest ainetest tulenevate lahustuvuse, imendumise ja stabiilsuse probleemide leevendamiseks. Pärast in vivo manustamist osalise nefrektoomia läbinud the ratsude neerudesse vähendas hüdrogeel kohalikku fibroosi, toetas angiogeneesi ja soodustas uute neerutorukeste moodustumist. Materjaliuuringud kinnitasid piisavat poorsust, mehaanilist tugevust ja biokompatibiilsust, mis toetab selle lahenduse edasist uurimist [40].

Zuo jt (2013) võrdlesid Ac-SDKP-d, tümosiin β4-t ja tümosiin β4-t koos proliini oligopeptidaasi (POP) inhibiitoriga ühepoolse kusejuha obstruktsiooni hiiremudelites metüüptüübi ja PAI-1-puudulikutel hiirtel. Ac-SDKP vähendas järjekindlalt fibroosi mõlemas genotüüpides. Täheldati vähem kolageeni ja fibronektiini, vähem aktiveeritud müofibroblaste ja makrofaage ning nõrgemat fibroosi soodustavat signaaliülekannet. Võrdlevad uuringud viitavad samuti tümosiin β4 erinevatele ja haiguse staadiumist sõltuvatele toimetele [41].

Wang ja kaastöötajad (2010) näitasid, et Ac-SDKP piiras obstruktsioonist põhjustatud neeruinfektsiooni ja -fibroosi. Ühepoolse kusejuha obstruktsiooniga rotil vähendas 14-päevane peptiidi manustamine histoloogilisel uuringul täheldatud tubulointerstitsiaalset fibroosi ja põletikulisi muutusi. Täheldati väiksemat ED-1 makrofaagide infiltratsiooni ning madalamat MCP-1, NF-κB, α-SMA ja TGF-β1 taset tuubulite ja intestiitsiumi rakkudes. Samuti langes MCP-1 ja TGF-β1 geenide ekspressioon, mis viitas nii põletikuliste rakkude värbamise kui ka ekstratsellulaarse maatriksi aktiveerimise piiramisele [42].

Liao ja kolleegid (2010) manustasid Ac-SDKP-d annuses 800 µg/kg/päev 5/6 neerektoomiaga rottidele, alustades manustamist enne kahjustust või pärast selle teket. Vaatamata püsivale hüpertensioonile ja vasaku vatsakese hüpertroofiale vähendas peptiid albuminuuriat, piiras makrofaagide sissevoolu ja vähendas neerude kolgeenisisaldust mõlemas rühmas. Nefriini kadu glomeruliides oli samuti osaliselt piiratud või tagasi pööratud. Tulemused viitavad filtratsioonibarjääri terviklikkuse paranemisele nii kahjustuse varajases kui ka edasijõudnud faasis, peamiselt põletiku- ja fibroosivastase toimimise, mitte aga vererõhu kontrolli kaudu [43].

Peng ja kaastöötajad (2001) uurisid rotte pärast ühe neeru eemaldamist, kellele manustati kuue nädala jooksul aldosterooni ja soola. Sekkumine tõstis vererõhku, põhjustas südame ja neeru suurenemist ning suurendas kollageeni ja rakulise proliferatsiooni markeri PCNA sisaldust. Ac-SDKP, eriti suuremas annuses 800 µg/kg/päevas, vähendas oluliselt kollageeni ja PCNA sisaldust annusest sõltuvalt. Vererõhk ja elundite suurenemine jäid siiski muutumatuks ning väiksem annus 400 µg/kg/päevas avaldas osalisi toimeid [44].

Omata ja kaastöötajad (2006) uurisid rotte, kellel oli esile kutsutud glomerulaarse basaalmembraani vastaste antikehadega (anti-GBM) nefriit. Ac-SDKP manustamist annuses 1 mg/kg päevas alustati 14 päeva pärast haiguse teket ja seda jätkati neli nädalat. Võrreldes ravimata loomadega täheldati väiksemat valgu eritumist uriiniga, madalamat uurea ja kreatiniini kontsentratsiooni plasmas ning paremat kreatiniini kliirensit. Koeluuringud näitasid vähem glomeruloskleroosi ja interstitsiaalset fibroosi. Fibronektiini, kolageni ja TGF-β1 tase ning Smad2 signaaliülekanne vähenesid, samas kui Smad7 tase tõusis. Samuti piirati makrofaagide kogunemist neerukoesse [45].

Nagai ja kaastöölised (2014) näitasid diabeedimudelites, et Ac-SDKP võib piirata neerufibroosi, pärssides endoteeli-mesenhüümset üleminekut (EndMT) ehk endoteelirakkude muundumist fibroosi soodustavate omadustega rakkudeks. Peptiid taastas looduslike kaitsvate radade aktiivsuse, sealhulgas mikroRNA let-7 ja FGF retseptori signaaliülekande, mida diabeet oli nõrgendanud. Ac-SDKP kombineerimine AKE inhibiitoriga tagas uuritud mudelis suurema neerukaitse kui pelgalt AKE inhibeerimine [46].

Srivastava ja kolleegid (2020) võrdlesid diabeediga hiirtel AKE inhibiitoreid, angiotensiini retseptori blokatoreid (ARB), Ac-SDKP-d ja nende kombinatsioone. Samuti blokeerisid teadlased Ac-SDKP loomulikku teket proliini oligopeptidaasi inhibiitori (POPi) abil. Tulemused viitasid sellele, et Ac-SDKP osaleb AKE inhibiitorite kasulikes toimetes neerude ainevahetuse muutmise kaudu. Taastati SIRT3 tase, paranes mitokondiaalne rasvhapete oksüdatsioon ja glükoosi ebanormaalne kasutamine vähenes.

Loodusliku Ac-SDKP tekke pärssimine langetas selle kontsentratsiooni, kiirendas fibroosi ja häiris ainevahetuse tasakaalu. ACE inhibiitorid, erinevalt ARB-dest, taastasid osaliselt peptiidi taseme ja vähendasid fibroosi. Nii ACE inhibiitorid kui ka Ac-SDKP piirasid mesenhüümset üleminekut ning vähendasid I tüüpi kolageeni ja fibronektiini sisaldust diabeetilistes neerudes [47].

Kliinilistes uuringutes analüüsiti samuti Ac-SDKP analoogi kui potentsiaalset vererakke kaitsvat vahendit keemiaravi ajal. Carde ja kaastöölised (1992) hindasid Seraspeniidi I–II faasi topeltpimedas ristuvas uuringus, mis hõlmas 53 tsütarabiini või ifosfamiidi saavat patsienti. Võrreldes kontrollperioodidega täheldati Seraspeniidi saanutel keemiaravi toksilise toime tingimustes perifeersete vererakkude arvu paremat säilimist. Preparaat oli hästi talutav ja kõrvaltoimetest ei teatatud. Tulemused julgustasid edasisi uuringuid vereloomekaitse alal, kuid ei kinnitanud rutiinset kliinilist efektiivsust [48].

Eraldi uuringus ei ilmnenud kaitset keemiaravi hematoloogilise toksilisuse eest. Cappelaere jt (1995) uurisid 84 kaugelearenenud lamerakk-vähiga patsienti, kes said karboplatiini ja 5-fluorouratsiili pidevat infusiooni ning platseebot või Goralatiidi (Ac-SDKP) annustes 12,5 või 62,5 µg/kg/päevas. 221 keemiaravi tsükli jooksul ei täheldatud rühmade vahel erinevusi leukotsüütide, granulotsüütide, trombotsüütide ega hemoglobinumi madalaimates väärtustes. Samuti ei muutunud toksilisuse kestus. Aneemia ja lümfopeenia esinesid siiski sagedamini Goralatiidi rühmades. Ehkki preparaati hinnati üldiselt talutavaks, ei hoidnud see ära keemiaraviga seotud tsütopeeniaid ning seostus sagedasema aneemia ja lümfopeeniaga [49].

Nitta ja kaastöötajad (2016) uurisid Ac-SDKP-d 1. ja 2. tüüpi diabeedi mudelites. Streptozototsiin-indutseeritud diabeediga CD-1 hiired ja db/db hiired said suukaudselt Ac-SDKP-d, AKI inhibiitorit imidaprüüli või mõlemat ühendit. Ac-SDKP üksi ja kombineeritud ravi vähendasid glomeruloskleroosi ja tubulointerstitsiaalset fibroosi. Neerukahjustuse korral tõusnud plasma tsüstatiin C kontsentratsioon lähenes normväärtustele.

Kõik sekkumised taastasid fibroosivastaste mikroRNA-de miR-29 ja let-7 taseme, kusjuures suurimat paranemist täheldati kombinatsioonravi rühmas. Peptiidi kontsentratsioon uriinis oli samas rühmas kõrgeim, mis viitas suuremale süsteemsele ekspositsioonile [50].

Tan ja kaaslased (2012) manustasid luupusega MRL/lpr hiirtele Ac-SDKP-d annuses 1,0 mg/kg/päevas kaheksa nädala jooksul. Võrreldes ravimata loomadega oli peptiidi saanud hiirtel väiksem proteinuuria ja parem neerufunktsioon. Neerukoes esines vähem infiltreeruvaid T-lümfotsüüte ja makrofaage. Vähenes NF-κB aktivatsioon ja TNF-α tootmine ning fibroosomarkerite TGF-β1, α-SMA ja fibronektiini tase. Smad2/3 fosforüülimist pärssiti ja Smad7 tase tõusis.

Immuunkomplekside ladestumine ega anti-dsDNA aatomite tase seevastu ei muutunud. See viitab sellele, et toime tulenes põletiku ja fibroosi edasiste etappide piiramisest, mitte antikehade tekke muutumisest [51].

Maheshwari jt (2018) uurisid normaalse kehakaaluga (ZL) ja rasvunud (ZO) Zuckeri rotte, keda söödeti kaheksa nädala vältel normaalse soolasisaldusega (0,4%) või kõrge soolasisaldusega (4%) dieediga. Üks ZO-rottide alagrupp sai Ac-SDKP-d annuses 1,6 mg/kg/päevas.

Soolarikas dieet süvendas põletikku ja neerufibroosi mõlemas rühmas, kusjuures rasvunud ratsudel oli makrofaagide infiltratsioon suurim: 87,8 ± 10,8 versus 19,14 ± 1,5 rakku/mm² kõhnadel ratsudel. Ac-SDKP manustamine vähendas makrofaagide sissevoolu rasvunud ratsudel väärtuseni 32,18 ± 2,4 rakku/mm² (p < 0,05) ning piiras glomeruloskleroosi ja interstitsiaalset fibroosi neerukoores ja -säsis (p < 0,05).

Süstoolne vererõhk rasvunud rottidel, kes olid saanud suure soolasisaldusega dieeti, langes 164 ± 6,9-lt 144,05 ± 14,1 mmHg-ni (p = 0,004). Albuminuuria oli rasvunud loomadel kõrgem kui kõhnadel, kuid ei muutunud oluliselt dieedi ega Ac-SDKP mõjul [52].

Neuroloogilised uuringud: pea- ja seljaaju kahjustuse mudelid

Parkinsoni tõve raku- ja rotimudelid

Kamarehei ja Zahednasab (2025) uurisid Ac-SDKP toimet Parkinsoni tõvega seotud mudelites. Rakueksperimentides piiras närvirakkude SH-SY5Y eelkokkupuude 20 nM peptiidiga kahjustusi, mida põhjustas 6-OHDA – toksiin, mida sageli kasutatakse parkinsonoidsete muutuste modelleerimiseks.

Rotttel tehtud uuringutes soodustas 800 µg/kg ööpäevane manustamine pärast 6-OHDA-ga esile kutsutud ajukahjustust suurema hulga dopaminergiliste neuronite säilimist ja vähendas rakkude surma, piirates kaspaas-3 ja kaspaas-12 aktiivsust.

Peptiidi saanud loomadel oli ka parem motoorne koordinatsioon, paranenud ruumiline mälu ning vähem ärevus- ja depressioonilaadset käitumist.

Mehhaaniliselt seostati muutusi oksüdatiivse stressi, endoplasmaatilise retiikulumi stressi ja põletikulise signaalülekande vähenemisega ajas. Tulemused puudutavad siiski prekliinilisi mudeleid ega kinnita Ac-SDKP efektiivsust Parkinsoni tõvega patsientidel [53].

Seljaajukahjustuse järgne taastumine

Hashemizadeh ja kaastöölised (2022) manustasid Wistari rotile Ac-SDKP-d naha alla annuses 0,8 mg/kg once daily seitse päeva, alustades kaks või kuus tundi pärast raskuse kukutamisega tekitatud seljaaju traumat.

Võrreldes ravimata loomadega taastasid peptiidi saanud rotid parema kõndimisvõime, kaotasid vähem motoorseid neuroneid ning neil oli madalam TNF-α ja kaspaas-3 tase.

Samal ajal suurenes CD206 mRNA ekspressioon, mis on taastusprotsessides osalevate M2-makrofaagidega seotud marker. Kudede uuringud näitasid väiksemaid kahjustusalasid.

Üldiselt täheldati immuunvastuse nihkumist M1-makrofaagidega seotud aktiivsuselt M2-tüüpi vastuse suunas, millega kaasnesid soodsamad funktsionaalsed ja struktuurilised tulemused [54].

Kaitse pärast traumaatilist ajukahjustust (TBI)

Zhang jt. (2017) tekitasid rotteil kontrollitud ajukoorekahjustuse, manustasid seejärel minipumba abil kolme päeva jooksul Ac-SDKP-d annuses 0,8 mg/kg ööpäevas, alustades tund aega pärast vigastust.

7. kuni 35. päevani olid sensomotoorsete testide tulemused paremad ning 33. kuni 35. päeva vahel täheldati kontrollrühmaga võrreldes ka ruumilise õppimise paranemist (p < 0,05).

Uuringu lõpuks oli koekahjustuse piirkond ajukoores ja neuronite kadu hipokampuses väiksem. Samal ajal suurenes angiogenees, uute neuronite moodustumine ja dendriitide ogade tihedus.

Varajane manustamine piiras ka fibriini ladestumist ja immuunrakkude aktivatsiooni. Mehhaanilised uuringud näitasid, että suurema osa põletikuvastasest toimest saab seletada TGF-$\beta$1/NF-$\kappa$B signaalülekande pärssimisega [55].

Eksperimentaalne autoinmuunne entsefalomüeliit (hulgiskleroosi meenutav mudel)

Pejman jt (2020) uurisid C57BL/6 hiiri, kellel oli eksperimentaalne autoimmuunne entsefalomüeliit (EAE), mida kasutatakse hulgiskleroosi sarnaste protsesside mudelina.

EAE-l on täheldatud endoplasmaatilise retikulumi stressi markerite, sealhulgas kaspaas-12, CHOP ja PDI taseme tõusu, samuti suurenenud oksüdatiivset stressi ja immuunrakkude sjavoolu hipokampusesse.

Ac-SDKP manustamine vähendas kaspaas-12 ja CHOP taset oligodendrotsüütides ning kaspaas-3 aktiivsust. Samuti langesid reaktiivsete hapnikuliikide tasemed ja lipiidide peroksüdatsioon, paranes antioksüdantne võimekus ning IL-6 ja IL-1β kontsentratsioonid olid madalamad.

Aju koe analüüs näitas väiksemaid hipokampuse kahjustusi ja vähem infiltreeruvaid immuunrakkusid, mis vastas haiguse aeglasemale kulule selles mudelis [56].

Lähtematerjalis loetletud täiendavad neuroloogilised uuringud

Allikmaterjalide bibliograafias on samuti ära toodud rottide insuldi uuring, milles analüüsiti Ac-SDKP-d kombinatsioonis koelise plasminogeeni aktivaatoriga [57], ja tümosiin β4 fragmendi uuring, mis käsitleb hipokampuse neurogeneesi ja ruumilist mälu [58].

Esitatud artiklis ei ole nende kahe uuringu meetodeid ega tulemusi esitatud, mistõttu ei saa selle põhjal nende tulemuste kohta täiendavaid järeldusi teha.

Maksa uuringud: eksperimentaalne fibroos

Keemiliste ainetega esilekatud maksafibroosi piiramine

Wei ja kolleegid (2022) uurisid süsiniktetrakloriidiga (CCl₄) esile kutsutud maksakahjustusega rotte. Ac-SDKP manustamisel täheldati vähem maksafibroosi tekkes peamiselt osalevate tähtrakkude surma ja vähem fibroosi.

Mehhaanilised uuringud näitasid, et peptiid vähendas WTAP-i – RNA-le m⁶A modifikatsioone lisavas valgus osaleva valgu – taset. See muutus stabiliseeris Ptch1 RNA-d ja mõjutas Hedgehog-raja aktiivsust, mis on fibroosiga seotud protsesside oluline regulaator.

Wyniki wskazują na mechanizm przeciwzwłóknieniowy związany ze szlakiem WTAP/m⁶A/Ptch1 i regulacją sygnalizacji Hedgehog [59].

Ochrona w modelu włóknienia wywołanego niedrożnością dróg żółciowych

Zhang i współpracownicy (2012) zastosowali szczurzy model podwiązania przewodu żółciowego (BDL), a następnie przez dwa tygodnie podawali Ac-SDKP.

W porównaniu z nieleczonymi zwierzętami obserwowano osłabienie sygnalizacji TGF-β1 i niższe poziomy markerów aktywowanych komórek gwiaździstych, w tym α-SMA i FSP-1.

Zmniejszała się także ekspresja genów związanych z kolagenem typu I i III oraz enzymów uczestniczących w przebudowie macierzy, takich jak MMP-2, TIMP-1 i TIMP-2.

Parametry krwi związane z funkcją wątroby ulegały poprawie: ALT, AST, bilirubina i czas protrombinowy zbliżały się do wartości prawidłowych. Badania histologiczne wykazały mniej komórek tucznych, mniejsze odkładanie kolagenu oraz słabsze włóknienie i zapalenie [60].

Zachowanie naturalnych mechanizmów ochronnych i naprawczych

Chen i współpracownicy (2010) wykazali, że podczas długotrwałej ekspozycji na CCl₄ naturalne stężenia Ac-SDKP stopniowo się zmniejszały.

Podawanie peptydu we wlewie w dawce 800 µg/kg/dobę przez osiem tygodni pomagało utrzymać jego podstawowy poziom oraz ograniczało uszkodzenia wątroby, zapalenie i włóknienie.

Spadały aktywności enzymów wątrobowych we krwi, liczba komórek zapalnych CD45⁺ oraz ilość kolagenu i złogów α-SMA. Zmniejszały się również poziomy TGF-β1 i fosforylowanych Smad2/3, natomiast wzrastała aktywność sygnałów związanych z naprawą tkanek, takich jak BMP-7 i fosforylowane Smad1/5/8.

W eksperymentach komórkowych Ac-SDKP bezpośrednio hamował aktywację komórek gwiaździstych, co potwierdzało działanie przeciwzwłóknieniowe na poziomie komórkowym [61].

Regeneracja skóry, modele gojenia ran i inne wyniki eksperymentalne

Hydrożel zawierający Ac-SDKP i przebudowa blizn

Opracowano specjalny klej tkankowy na bazie celulozy, Dopa-OCMC-PAA, porównywany z OCMC-PAA, przeznaczony do przenoszenia i uwalniania Ac-SDKP.

Obie wersje wykazywały odpowiednie właściwości pęcznienia i degradacji, dobrą wytrzymałość mechaniczną oraz zgodność z komórkami, ale Dopa-OCMC-PAA osiągał korzystniejsze wyniki.

U myszy z krwawieniem z wątroby klej ten szybciej hamował krwawienie. W testach fibroblastów zwiększał poziomy enzymów uczestniczących w przebudowie tkanek, MMP-1 i MMP-3, a jednocześnie ograniczał aktywność genów związanych z kolagenem.

U królików z przerosłymi bliznami na uszach połączenie Dopa-OCMC-PAA z Ac-SDKP zmniejszało nasilenie bliznowacenia, liczbę komórek i poprawiało organizację kolagenu. Ponownie obserwowano wzrost MMP-1 i MMP-3 oraz niższą aktywność genów kolagenowych. Wyniki wskazywały na korzystniejsze gojenie ran i mniejsze bliznowacenie w badanych modelach [62].

Miejscowe zastosowanie a przeżywalność skóry i procesy naprawcze

W szczurzych modelach chirurgicznych płatów skórnych, brzusznych i grzbietowych, podawanie Ac-SDKP w zastrzykach w dawce 5 µg/kg dwa razy dziennie przez trzy dni zwiększało powierzchnię żywej skóry.

W płatach brzusznych udział żywej tkanki wzrósł z 50,9 ± 19,3% do 66,4 ± 7,5%, a w płatach grzbietowych z 53,4 ± 4,2% do 74,7 ± 6,6%.

W tkance skórnej uszkodzonej promieniowaniem UVB miejscowe zastosowanie peptydu poprawiało przeżywalność komórek. Podawanie powierzchniowe przyspieszało również tworzenie nowego naskórka, zwiększało poziom keratyny-14, markera komórek uczestniczących w odbudowie skóry, oraz fibronektyny. Wyniki wskazują na udział w procesach angiogenezy i naprawy tkanek w warunkach eksperymentalnych [63].

Ochrona krwiotworzenia podczas chemioterapii

W badaniu myszy otrzymujących doksorubicynę, lek chemioterapeutyczny, podawanie Ac-SDKP w ilości 2,4 µg/dobę, w sposób ciągły lub w dawkach podzielonych, rozpoczynane 48 godzin przed leczeniem, zmniejszało śmiertelność i chroniło krwiotwórcze komórki macierzyste.

Ochronę obserwowano w pomiarach LTRC, CFU-S, HPP-CFC i CFU-GM. Dodanie G-CSF dodatkowo zwiększało odbudowę CFU-GM.

Moment rozpoczęcia podawania miał kluczowe znaczenie. Rozpoczęcie przed chemioterapią było konieczne do ograniczenia zarówno krótkotrwałego uszkodzenia szpiku, jak i długoterminowej utraty komórek macierzystych w tym modelu [64].

Silniejsze działanie przeciwzwłóknieniowe zmodyfikowanych analogów i połączeń z inhibitorami ACE

W eksperymentach na fibroblastach płucnych forma Ac-SDKP odporna na rozkład przez ACE silniej ograniczała sygnalizację TGF-β/Smad3 i odkładanie kolagenu niż naturalna cząsteczka.

Skrócony fragment Ac-DKP wykazywał jedynie słabe efekty i był powoli rozkładany przez ACE.

Połączenie peptydu z inhibitorami ACE silniej ograniczało poziom hydroksyproliny, markera zawartości kolagenu, niż sam peptyd. Wyniki sugerują możliwość dalszych badań nad zmodyfikowanymi analogami i ich interakcjami.

W zakresie stężeń od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M zarówno tymozyna β4, jak i Ac-SDKP zmniejszały proliferację komórek tucznych, przy czym najsilniejszy efekt obserwowano przy 10⁻¹⁴ M. Powodowały również nietypowe zmiany w jądrach komórkowych związane z zatrzymaniem cyklu komórkowego.

Przy stężeniu 10⁻⁸ M oba peptydy wywoływały także degranulację komórek tucznych. Ac-SDKP wykazywał silniejszy efekt, około 89%, niż tymozyna β4, około 57%. Pozostałe fragmenty tymozyny β4 nie wykazywały aktywności, co sugeruje zależność tych odpowiedzi od badanych nienaruszonych peptydów, a nie innych analizowanych fragmentów [65, 66].

Eksperymentalne dawki Ac-SDKP w opublikowanych badaniach – nie są zaleceniami dla ludzi

Poniższe wartości opisują protokoły stosowane w cytowanych eksperymentach na zwierzętach i komórkach. Nie są ustalonymi dawkami dla ludzi.

W analizowanych badaniach przedklinicznych Ac-SDKP często podawano podskórnie za pomocą minipomp w ilości około 0,8 mg/kg/dobę w celu oceny włóknienia i zapalenia w sercu, naczyniach i nerkach. W mysich modelach zawału serca stosowano niekiedy 1,6 mg/kg/dobę w badaniach wczesnej ochrony tkanek.

W eksperymentach dotyczących mózgu i układu nerwowego krótkie cykle rozpoczynane w ciągu kilku godzin od urazu zwykle obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę przez trzy do siedmiu dni. W badaniach komórkowych często stosowano wstępną ekspozycję na około 10 nM peptydu.

W modelach przewlekłego uszkodzenia wątroby protokoły przeciwzwłóknieniowe często obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę. W modelu włóknienia płuc wywołanego bleomycyną stosowano 0,6 mg/kg dootrzewnowo, z powtarzanymi podaniami rozpoczynanymi w dniu 0 lub 7.

W badaniach gojenia skóry i ran miejscowe schematy obejmowały 5 µg/kg na wstrzyknięcie dwa razy dziennie przez trzy dni albo hydrożele zawierające peptyd i uwalniające go miejscowo.

W badaniach hematologicznych i dotyczących ochrony szpiku wykorzystywano bardzo małe ilości, na przykład 2,4 µg/dobę u myszy przed chemioterapią oraz krótkie cykle w zakresie µg/kg/dobę we wczesnych badaniach klinicznych.

Interpretacja wyników i ograniczenia dostępnych dowodów

Największa część przedstawionej literatury obejmuje eksperymenty komórkowe i modele zwierzęce. Zmiany w odkładaniu kolagenu, mediatorach zapalnych, budowie tkanek i eksperymentalnych parametrach funkcjonalnych nie stanowią same w sobie dowodu działania terapeutycznego u ludzi.

Przytoczone wczesne badania kliniczne dotyczyły głównie parametrów hematologicznych podczas chemioterapii i przyniosły niejednoznaczne wyniki, w tym negatywne wyniki badania randomizowanego [48, 49].

Eksperymentalne drogi podawania, ilości substancji i okresy ekspozycji należy traktować jako elementy metodologii badań, a nie zalecenia dotyczące indywidualnego stosowania.

Zastrzeżenie redakcyjne: Niniejszy artykuł ma charakter wyłącznie edukacyjny i naukowy. Przedstawia wyniki badań nad Ac-SDKP, mechanizmy molekularne i ograniczenia dostępnych dowodów. Nie stanowi porady medycznej, nie zaleca stosowania Ac-SDKP ani nie określa protokołów dawkowania, podawania czy leczenia. Wyniki badań laboratoryjnych i doświadczeń na zwierzętach nie potwierdzają bezpieczeństwa ani skuteczności Ac-SDKP u ludzi.

Viited

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). The Role of Tβ4-POP-Ac-SDKP Axis in Organ Fibrosis. Rahvusvaheline molekulaarteaduste ajakiri, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP decreases mortality and cardiac rupture after acute myocardial infarction. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP reverses cardiac fibrosis in rats with renovascular hypertension. Hypertension, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP reverses inflammation and fibrosis in rats with heart failure after myocardial infarction. Hypertension, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotic effect of Ac-SDKP and angiotensin-converting enzyme inhibition in hypertension. Journal of Hypertension, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on DNA and collagen synthesis in rat cardiac fibroblasts. Hypertension, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents cardiac remodeling and dysfunction induced by galectin-3, a mammalian adhesion/growth-regulatory lectin. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Long-term effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on left ventricular collagen deposition in rats with 2-kidney, 1-clip hypertension. Circulation, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Therapeutic potential of thymosin-beta4 and its derivative N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in cardiac healing after infarction. American journal of cardiovascular drugs : ravimid, seadmed ja muud sekkumised, 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro inhibits interleukin-1β-mediated matrix metalloproteinase activation in cardiac fibroblasts. Pflügers Archiv – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Treatment with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents experimental autoimmune myocarditis in rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline reduces cardiac collagen cross-linking and inflammation in angiotensin II-induced hypertensive rats. Clinical Science, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E., & Rhaleb, N. E. (2019). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline treatment protects heart against excessive myocardial injury and heart failure in mice. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Prevention of myocardial fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. Clinical Science, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Effects of a novel peptide Ac-SDKP in radiation-induced coronary endothelial damage and resting myocardial blood flow. Kardioonkoloogia, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP attenuates ER stress-stimulated collagen production in cardiac fibroblasts by inhibiting CHOP-mediated NF-κB expression. Frontiers in Pharmacology, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP suppresses TNF-α-induced ICAM-1 expression in endothelial cells via inhibition of IκB kinase and NF-κB activation. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Prevention of aortic fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in angiotensin II-induced hypertension. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). A small peptide Ac-SDKP inhibits radiation-induced cardiomyopathy. Circulation: südamepuudulikkus, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2015). Effects of thymosin β4 and its N-terminal fragment Ac-SDKP on TGF-β-treated human lung fibroblasts and in the mouse model of bleomycin-induced lung fibrosis. Expert Opinion on Biological Therapy, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S., & Yang, F. (2023). Ac-SDKP promotes KIF3A-mediated β-catenin suppression through a ciliary mechanism to constrain silica-induced epithelial-myofibroblast transition. Biomeditsiin ja farmakoteraapia, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Immunomodulatory effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-proline and vasoactive intestinal peptide on chronic obstructive pulmonary disease pathophysiology. Fundamental & Clinical Pharmacology, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Synthesis and identification of a novel peptide, Ac-SDK (biotin) proline, that can elicit anti-fibrosis effects in rats suffering from silicosis. Drug Design, Development and Therapy, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventive and therapeutic effects of thymosin β4 N-terminal fragment Ac-SDKP in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Regulatory effect of Ac-SDKP on phosphorylated heat shock protein 27/SNAI1 pathway in silicotic rats. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Meta-analysis of Ac-SDKP inhibition of pulmonary fibrosis in animal models. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline mediated by regulation of transforming growth factor beta and connective tissue growth factor expression on rats with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Anti-fibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in lung of rat with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F., & Xu, H. (2021). Ac-SDKP attenuates activation of lung macrophages and bone osteoclasts in rats exposed to silica by inhibition of TLR4 and RANKL signaling pathways. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D., & Wang, R. (2012). A new antifibrotic target of Ac-SDKP: inhibition of myofibroblast differentiation in rat lung with silicosis. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Acetylated α-Tubulin regulated by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) exerts the anti-fibrotic effect in rat lung fibrosis induced by silica. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Protective effect of Ac-SDKP on alveolar epithelial cells through inhibition of EMT via TGF-β1/ROCK1 pathway in silicosis in rat. Toxicology and Applied Pharmacology, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) attenuates silicotic fibrosis by suppressing apoptosis of alveolar type II epithelial cells via mediation of endoplasmic reticulum stress. Toxicology and Applied Pharmacology, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Effects of N-acetyl-seryl-asparyl-lysyl-proline on blood pressure, renal damage, and mortality in systemic lupus erythematosus. Physiological Reports, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). Renal protective effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in Dahl salt-sensitive rats. Hypertension, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-Acetyl-Seryl-Aspartyl-Lysyl-Proline: mechanisms of renal protection in mouse model of systemic lupus erythematosus. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renal protective effects of N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro in deoxycorticosterone acetate-salt hypertensive mice. Journal of Hypertension, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M., & Koya, D. (2005). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents renal insufficiency and mesangial matrix expansion in diabetic db/db mice. Diabeet, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Renal antifibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L., & Hu, B. (2022). A biomimetic double network hydrogel ameliorates renal fibrosis and promotes renal regeneration. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A., & Fogo, A. B. (2013). Thymosin β4 and its degradation product, Ac-SDKP, are novel reparative factors in renal fibrosis. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal inflammation and tubulointerstitial fibrosis in rats. International Journal of Molecular Medicine, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal injury and dysfunction in hypertensive rats with reduced renal mass: Council for High Blood Pressure Research. Hypertension, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on the heart and kidney in aldosterone-salt hypertensive rats. Hypertension, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M., & Inomata, N. (2006). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline ameliorates the progression of renal dysfunction and fibrosis in WKY rats with established anti-glomerular basement membrane nephritis. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K., & Koya, D. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline inhibits diabetes-associated kidney fibrosis and endothelial-mesenchymal transition. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolic reprogramming by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline protects against diabetic kidney disease. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenide (acetylSDKP): phase I–II trial study of inhibitor of hematopoiesis protects against toxicity of aracytine and ifosfamide monochemotherapies]. Clinical Trial C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomized placebo trial of myeloprotection with goralatide in patients with squamous cell carcinoma of the upper respiratory and digestive tracts or esophagus, treated with a carboplatin-fluorouracil combination]. Bull Cancer, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K., & Koya, D. (2016). Oral Administration of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline Ameliorates Kidney Disease in Both Type 1 and Type 2 Diabetic Mice via a Therapeutic Regimen. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP ameliorates the progression of lupus nephritis in MRL/lpr mice. International Immunopharmacology, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renal protective effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in obese rats on a high-salt diet. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Neuroprotective effect of Ac-SDKP peptide in SH-SY5Y cells and rat model of Parkinson’s disease against 6-OHDA-induced oxidative stress and ER stress. Neuropeptides, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Ac-SDKP peptide improves functional recovery following spinal cord injury in a preclinical model. Neuropeptides, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Treatment of traumatic brain injury in rats with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S., & Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP ameliorates the progression of experimental autoimmune encephalomyelitis via inhibition of ER stress and oxidative stress in the hippocampus of C57BL/6 mice. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Combination Treatment with N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline and Tissue Plasminogen Activator Provides Potent Neuroprotection in Rats After Stroke. Stroke, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S., & Ryu, J. H. (2015). Peptide fragment of thymosin β4 increases hippocampal neurogenesis and facilitates spatial memory. Neuroscience, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (AcSDKP) mitigates liver fibrosis via WTAP/m6A/Ptch1 axis through Hedgehog pathway. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotic Effect of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on Bile Duct Ligation-Induced Liver Fibrosis in Rats. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Preservation of basal AcSDKP attenuates carbon tetrachloride-induced fibrosis in the rat liver. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A., & Brouki Milan, P. (2025). A cellulose-based skin adhesive hydrogel incorporating N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline peptide for enhanced wound healing and scar prevention in rabbit scar ear model in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). The tetrapeptide acetyl-serine-aspartyl-lysine-proline improves skin flap survival and accelerates wound healing. Wound Repair and Regeneration, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F., & Carde, P. (1998). The tetrapeptide acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatide) protects from doxorubicin-induced toxicity: improvement in mice survival and protection of bone marrow stem cells and progenitors. Veri, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Investigating the antifibrotic potential of N-acetyl seryl-aspartyl-lysyl-proline sequence peptides. Kliiniline ja eksperimentaalne farmakoloogia ja füsioloogia, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Thymosin beta 4 and its N-terminal tetrapeptide, AcSDKP, inhibit proliferation, and induce dysplastic, non-apoptotic nuclei and degranulation of mast cells. Keemia ja bioloogiline mitmekesisus, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/