Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinas): organų fibrozė, audinių apsauga ir eksperimentiniai tyrimai

Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinas) yra endogeninis tetrapeptidas, susidarantis iš didesnio baltymo timozino beta-4. Dėl enciminiame timozino β4 apdorojimo susidaro keli fragmentai, įskaitant Ac-SDKP [1]. Šis junginys sukelia mokslininkų susidomėjimą dėl antifibrotinio poveikio, pastebėjimo eksperimentiniuose audinių pažeidimo modeliuose. Jo biologinį patvarumą riboja greitas irimas, kurį tarpininkauja angiotenziną konvertuojantis fermentas (AKF). Tyrimai parodė, kad AKF inhibitoriai gali padidinti cirkuliuojančio Ac-SDKP koncentraciją net penkis kartus, o tai turi reikšmės tyrinėjant jų poveikį audiniams [1].

Iš pradžių tyrimai buvo orientuoti į Ac-SDKP gebėjimą palaikyti kraujodaros kamienines ląsteles santykinės ramybės būsenoje. Vėliau tyrimų sritis buvo išplėsta, įtraukiant uždegiminius procesus, ekstraląstelinės matrikso remodeliaciją ir audinių regeneraciją. Keliuose ikikliniginiuose organų pažeidimo modeliuose mokslininkai stebėjo patologinio matrikso komponentų kaupimosi sumažėjimą. Be kita ko, peptidas mažino ląstes skatinančių signalų aktyvumą per daug gaminti kolageną – pagrindinį randinio audinio baltymą – ir ribojo fibroblastų virsmą už randų susidarymą atsakingomis ląstelėmis.

Ikiklinikiniuose tyrimuose su inkstais Ac-SDKP taip pat parodė teigiamus organo funkcijos ir fibrozės parametru pokyčius. Buvo stebimas pernelyg didelio imuninių ląstelių antplūdžio sumažinimas bei uždegiminių procesų, kurie gali sustiprinti pažeidimus, susilpninimas. Apskritai rezultatai rodo Ac-SDKP, kaip endogeninio su fibroze susijusių takų reguliatoriaus, vaidmenį. Tačiau pastebėjimai iš ląstelių ir gyvūnų tyrimų nepatvirtina klinikinio veiksmingumo ar vartojimo saugumo žmonėms.

Širdies ir kraujagyslių sistemos tyrimai: širdies fibrozė, uždegimas ir kraujagyslių pažeidimai

Eksperimentiniai širdies ir kraujagyslių tyrimai analizavo Ac-SDKP poveikį tiek esant ūmiems miokardo pažeidimams, tiek lėtinei jo struktūros remodeliacijai. Pelių miokardo infarkto modelyje Nakagawa su bendradarbiais skyrė Ac-SDKP po 1,6 mg/kg per parą, naudodami nedidelį poodį siurblį. Širdies sienelės plyšimų dažnis sumažėjo nuo 51,0 % iki 27,3 %, o mirtingumas – nuo 56,9 % iki 31,8 %. Tyrėjai šiuos rezultatus siejo su mažesniu prouždegiminių M1 makrofagų antplūdu be atitinkamų M2 makrofagų ar neutrofilų skaičiaus pokyčių. Taip pat buvo pastebėtas metaloproteinazės MMP-9, fermento, dalyvaujančio širdies audinių irimo procesuose po infarkto, aktyvumo apribojimas, tuo tarpu MPO žymuo liko nepakitęs. Tai gali rodyti selektyvų poveikį tam tikriems pažeidimo mechanizmams [2].

Tyrimuose dėl ilgalaikio hipertenzijos sukelto širdies fibrozės Peng su bendradarbiais įrodė, kad Ac-SDKP gali sumažinti jau esamą fibrozinį audinį, o ne tik apriboti jo susidarymą. Žiurkėms, turinčioms nusistovėjusią hipertenziją, po oda skiriamas Ac-SDKP 400–800 µg/kg paros dozėmis aštuonias savaites sumažino kolageno kiekį širdyje priklausomai nuo dozės. Didesnė dozė buvo susijusi su stipresniu poveikiu. Arterinis kraujospūdis nesumažėjo, o normalios reakcijos į angiotensiną I ir bradikininą išliko nepakitusios. Tai reiškia, kad pastebėtų pokyčių negalima paaiškinti vien kraujospūdžio sumažėjimu. Ac-SDKP koncentracija kraujyje padidėjo nuo dviejų iki penkių kartų, o TGF-β ir CTGF, svarbių fibrozės mediatorių, lygis sumažėjo [3].

Po miokardo infarkto besitęsiantis uždegimas ir fibrozė gali sukelti progresuojantį organo nepakankamumą. Yang ir bendradarbiai tyrė Ac-SDKP tiek ankstyvuoju laikotarpiu pažeidimams apriboti, tiek vėlesniu laikotarpiu pokyčių grįžtamumui įvertinti. Abiem atvejais bendras kolageno kiekis širdyje sumažėjo. Profilaktinėje grupėje jis sumažėjo, pavyzdžiui, nuo maždaug 24 iki 15 µg/mg, o pokyčių grįžtamumą tyrusioje grupėje – nuo maždaug 23 iki 14 µg/mg. Makrofagų skaičius abiejose grupėse sumažėjo maždaug vienu trečadaliu, taip pat sumažėjo TGF-β teigiamų ląstelių skaičius. Šie pokyčiai įvyko nesumažėjus kraujospūdžiui ir nesumažėjant širdies dydžiui. Profilaktinėje grupėje vienareikšmiško susitraukimo jėgos pagerėjimo nenustatyta. Nepaisant to, fibrozės ir uždegimo sumažėjimas rodo palankesnius širdies raumens struktūrinius parametrus tirtame modelyje [4].

Ac-SDKP gali taip pat dalyvauti papildomose apsauginėse veikose, stebimuose vartojant AKF inhibitorius. Rasoul su bendradarbiais palygino angiotenzino II sukelto hipertenzijos modelį su grupėmis, gausančiomis kaptoprilį arba Ac-SDKP po 400–800 µg/kg per parą. Peptidas kelis kartus padidino savo koncentraciją kraujyje ir atkūrė daugelį poveikių, panašių į AKF inhibitorių veikimą: apribojo per didelę ląstelių proliferaciją širdyje, sumažino makrofagų ir putliųjų ląstelių skaičių, sumažino TGF-β bei CTGF lygį ir apribojo kolageno nusėdimą. Šie poveikiai pasireiškė nesumažinus kraujospūdžio ar širdies hipertrofijos, o tai leidžia daryti prielaidą apie tiesioginį poveikį širdies raumens audiniui [5].

Rhalebas su bendradarbiais tyrė Ac-SDKP ratų širdies fibroblastų kultūrose, naudodamas nuo 0,05 iki 100 nmol/l koncentracijas. Jie pastebėjo du reikšmingus efektus: ląsterių proliferacijos, matuotos pagal DNR sintezę, sumažėjimą iki normą atitinkančių verčių maždaug ties 1 nmol/l, ir endotelino-1, stipraus fibrozės mediatoriaus, skatinamos kolageno gamybos sumažėjimą. Mažesnės koncentracijos buvo veiksmingesnės mažinant kolageno sintezę, tuo tarpu labai didelės buvo mažiau aktyvios. Manoma, kad mechanizmas buvo susijęs su p44/42 MAPK/ERK signalizacijos susilpnėjimu. Žinomas MAPK inhibitorius sukėlė panašų poveikį. Rezultatai sutampa su fibroblastų proliferacijos ir matricos sintezės apribojimu moduliuojant ląsterių augimą reguliuojančius takus [6].

Kolesniuose tyrimuose nustatyta, kad Ac-SDKP gali sumažinti galektino-3 sukeliamus širdies pažeidimus. Liu ir bendradarbiai keturias savaites skyrė galektino-3, uždegimą ir fibrozę skatinančio baltymo, suaugusioms žiurkėms. Gyvūnams stebėtas didesnis uždegiminių ląstelių skaičius, širdies sienelių sustorėjimas, padidėjusi perivaskulinė ir intersticinė fibrozė, padidėjęs TGF-β/Smad3 kelio aktyvumas bei echokardiografijos metu nustatytas sistolinės funkcijos susilpnėjimas. Ac-SDKP papildymas 800 µg/kg/parą doze užkirto kelią daugumai šių pokyčių. Sumažėjo uždegiminių ląstelių skaičius, fibrozė ir širdies sienelių sustorėjimas, o jos funkciniai parametrai buvo palankesni. Rezultatai rodo TGF-β/Smad3 kelio slopinimo ir uždegimo ribojimo dalyvavimą [7].

Rhaleb ir bendradarbiai taip pat vertino Ac-SDKP klasikiniame žiurkių renovaskulinio hipertenzijos modelyje, vadinamajame dviejų inkstų ir vieno spaustuko (2K1C) modelyje. Peptidas buvo leidžiamas po oda 400 µg/kg per parą doze. Nepaisant išliekančio padidėjusio kraujospūdžio ir širdies hipertrofijos, buvo pastebėtas reikšmingas uždegiminių ir proliferuojančių ląstelių skaičiaus sumažėjimas širdies raumenyje. Intersticinio kolageno dalis sumažėjo nuo maždaug 10,1% hipertenzija sergančioms žiurkėms iki maždaug 5,4% – lygio, beveik identiško stebėtam sham operuotiems gyvūnams (maždaug 5,3%). Tai reiškia, kad audinių persitvarkymas pasikeitė nepaisant išliekančios spaudimo apkrovos, o tai palaiko mechanizmo, nepriklausomo nuo kraujospūdžio mažinimo, hipotezę [8].

Savo apžvalginiame tyrime Cavasin su bendradarbiais aptarė papildomas timozino β4 ir jo fragmento Ac-SDKP savybes. Timozino β4 dalyvauja ląstelių migracijoje ir išgyvenime, o Ac-SDKP pasižymi antifibroziniu aktyvumu hipertenzijos modeliuose. Tyrimuose su miokardo infarktu peptidas ribojo uždegimą, mažino fibrozę ir palaikė angiogenezę, kas buvo stebima tiek in vivo, tiek ex vivo. Pelių modeliuose jis taip pat sumažino širdies sienelės plyšimo riziką. Dalinis poveikio persidengimas rodo, kad Ac-SDKP gali būti atsakingas už tam tikrą biologinį poveikį, priskiriamą timozinui β4. Tačiau autoriai pabrėžė būtinumą atlikti klinikinius tyrimus su žmonėmis [9].

Ac-SDKP taip pat buvo ištirtas dėl jo poveikio tarpląstelinės matrikso komponentus ardančių fermentų veiklai. Suaugusių žiurkių širdies fibroblastuose Rhaleb su bendradarbiais įrodė, kad interleukinas 1β (IL-1β) reikšmingai padidina metaloproteinazių MMP-2, MMP-9 ir MMP-13 ekspresiją. Šie fermentai dalyvauja matrikso degradacijoje ir gali prisidėti la nepalankaus audinių remodeliavimo. Ac-SDKP nekeitė bazinės MMP ekspresijos, tačiau stipriai slopino IL-1β sukeltą padidėjimą. Kartu jis didino natūralių metaloproteinazių inhibitorių TIMP-1 ir TIMP-2 ekspresiją, atkurdamas labiau subalansuotą matrikso remodeliavimo reguliavimą.

Peptidas taip pat slopino NF-κB ir ERK/MAPK aktyvaciją – dviejų svarbių signalinių kelių, susijusių su uždegimu ir proliferacija. Svarbu tai, kad IL-1β šiame modelyje nepadidino kolageno gamybos, o Ac-SDKP taip pat neturėjo įtakos jo sintezei. Tai rodo selektyvų audinių remodeliacinį reguliavimą, o ne bendrą kolageno gamybos slopinimą. Rezultatai rodo galimą Ac-SDKP vaidmenį palaikant su tarpląsteline matrica susijusių procesų pusiausvyrą [10].

Nakagawa su bendradarbiais tyrė Ac-SDKP žiurkių T ląstelių sukelto miokardito modelyje. Imunizuotoms Lewis žiurkėms, gavusioms peptidą, išliko tiek sistolinė, tiek diastolinė širdies funkcija. Taip pat buvo apribotas organo padidėjimas, skaidulinio audinio susidarymas ir jo struktūros pažeidimas. Histologinė analizė parodė mažesnę imuniteto ląstelių infiltraciją, įskaitant makrofagus, dendritines ląsteles ir T limfocitus.

Taip pat sumažėjo uždegiminių mediatorių, įskaitant IL-1α, TNF-α, IL-2 ir IL-17, chemokinų CINC-1 ir IP-10, adhezijos molekulių ICAM-1 ir L-selektino bei metaloproteinazių lygis. Tuo tarpu Ac-SDKP nepakeitė autoantikūnų prieš mioziną lygio ar antigenui specifinių T limfocitų atako atsako. Tai rodo, kad stebėtas apsauginis poveikis visų pirma atsirado dėl imuninių ląstelių ir uždegiminių mediatorių rekrutavimo apribojimo, o ne dėl autoantikūnų gamybos pokyčių ar T limfocitų aktyvacijos [11].

González su bendradarbiais tyrė Ac-SDKP poveikį žiurkėms, kurioms tris savaites buvo duodama angiotensino II. Arterinis kraujospūdis ir širdies hipertrofija išliko padidėję tiek gydytiems, tiek kontroliniams gyvūnams. Tačiau Ac-SDKP užkirto kelią bendro kolageno kiekio padidėjimui ir jo kryžminiam susiejimui. Mechanizmas apėmė liziloksidazės (LOX) mRNR ir LOXL1 baltymo, t. y. fermentų, dalyvaujančių kolageno kryžminių jungčių susidaryme ir skaidulinio audinio standinime, ekspresijos slopinimą.

Be to, mažėjo TGF-β ekspresija, NF-κB aktyvacija bei CD4⁺ ir CD8⁺ T limfocitų ir CD68⁺ makrofagų infiltracija į širdies raumenį. CD4⁺ limfocitų infiltracija koreliavo su LOXL1 ekspresija, o tai rodo mechanistinį ryšį tarp imuninių ląstelių aktyvumo ir skaidulinio audinio standėjimo. Rezultatai rodo priešuždegiminį ir antifibrozinį poveikį, nepriklausomą nuo arterinio kraujospūdžio pokyčių [12].

Peng su bendradarbiais tyrė Ac-SDKP poveikį ankstyvosioms ir vėlyvosioms širdies pažeidimo stadijoms po miokardo infarkto C57BL/6J pelėms. Gyvūnai gavo 1,6 mg/kg per parą. Per pirmąją savaitę sumažėjo mirtinų širdies sienelės plyšimų dažnis, ICAM-1 raiška, makrofagų antplūdis, želatiną skaidančių fermentų aktyvumas, p53 lygis ir kardiomiocitų žūtis. Tuo pačiu metu pažeistos srities pakraščiuose padidėjo smulkių kraujagyslių skaičius, kas rodė suaktyvėjusią angiogenezę.

Penktąją savaitę buvo stebimas mažesnis intersticinio kolageno kiekis, geriau išsaugota širdies struktūra, žemesni endoplazminio tinklo streso rodikliai, įskaitant CHOP, bei palaikomas SERCA2 – baltymo, svarbaus kardiomiocitų kalcio reguliacijai, lygis. Bendra širdies funkcija buvo palankesnė. Tyrimas rodo pokyčius tiek ankstyvojo pažeidimo, tiek vėlesnio skilvelių remodeliavimo metu [13].

Castoldi su bendradarbiais tyrė Ac-SDKP poveikį diabetinės kardiomiopatijos žiurkių modeliui. Praėjus dviem mėnesiams po cukrinio diabeto sukėlimo, per mini pompas aštuonias savaites buvo pradėtas skirti peptidas 1 mg/kg/dieną doze. Diabetu sergančioms žiurkėms pasireiškė hiperglikemija, padidėjusi intersticinė ir perivaskulinė fibrozė bei padidėjęs TGF-β1 ir fosforifikuotų Smad2/3 proteinų lygis. Ac-SDKP sumažino abiejų tipų fibrozę ir apribojo TGF-β/Smad signalizaciją, taip pat ir gyvūnams, gavusiems ACE inhibitoriaus ramiprilio.

Echokardiografinis tyrimas parodė su cukriniu diabetu susijusius širdies sistolinio ir diastolinio funkcijos sutrikimus. Insulinas ir ramiprilis atstatė abi funkcijas, o Ac-SDKP iš dalies pagerino diastolinę funkciją. Rezultatai rodo antifibrozinį poveikį, kurį lydėjo vidutinis funkcinis pagerėjimas šiame modelyje [14].

Sharma su bendradarbiais tyrė vainikinių kraujagyslių apsaugą nuo radiacijos sukelto pažeidimo. Žiurkių krūtiną apšvitinus, Ac-SDKP buvo skiriamas po oda 18 savaičių. Radiacija sumažino ramybės širdies kraujotaką, lėmė endotelio ląstelių žūtį, padidino vainikinių kraujagyslių fibrozę ir sutrikdė sandariųjų jungčių baltymus, įskaitant klaudiną-1 ir JAM-2.

Ac-SDKP atstatė kraujotaką iki normalių verčių, skatino endotelio ląstelių išsaugojimą, mažino fibrozę ir gerino glaudžiųjų jungčių organizaciją. Laboratoriniai tyrimai parodė, kad peptidas pateko į endotelio ląsteles ir po apšvitos sumažino reaktyviųjų deguonies formų susidarymą. Gyvuose gyvūnuose žymėtas peptidas endotelio ląstelėse kaupėsi per kelias valandas. Rezultatai rodo kraujagyslių apsaugą, mažesnį oksidacinį pažeidimą ir geresnį mikroapytakos išsaugojimą šiame modelyje [15].

Atliekant tyrimus su žmogaus širdies fibroblastais, ląstelės buvo iš anksto veikiamos 10 nM koncentracijos Ac-SDKP, o vėliau tunikamicinu (0,25 µg/ml), kuris sukelia endoplazminio tinklo stresą. Peptidas slopino per didelę kolageno gamybą stresą patyrusiose ląstelėse. Šis poveikis buvo susijęs su streso atsako susilpnėjimu, CHOP ir NF-κB aktyvumo sumažėjimu bei IL-6 lygio pažemėjimu.

Po genetinio CHOP raiškos sumažinimo Ac-SDKP vis tiek slopino NF-κB aktyvumą ir I tipo kolageno raišką tiek baltymų, tiek mRNR lygiu. Šie rezultatai patvirtina hipotezę, kad peptidas gali riboti per didelę skaidulinio audinio komponentų gamybą ląstelių streso sąlygomis [16].

Žmogaus vainikinių arterijų endotelio ląstelėse TNF-α stimuliacija sukėlė ryškų ICAM-1 – adhezinės molekulės, dalyvaujančios leukocitų prisijungimame prie kraujagyslių paviršiaus, – raiškos padidėjimą. Pirminis poveikis su Ac-SDKP nuo dozės priklausomai sumažino ICAM-1 lygį. Mechanistinė analizė parodė IKK → IκB → NF-κB kaskados, atliekančios pagrindinį vaidmenį uždegiminių genų aktyvavime, slopinimą. Du kiti keliai, p38 MAPK ir ERK, liko nepakitę. Tai rodo selektyvų Ac-SDKP poveikį NF-κB signalizacijai endotelio ląstelėse. Tačiau tai yra ląsteliniai rezultatai, o ne klinikinės kraujagyslių apsaugos patvirtinimas [17].

Žiurki angiotenzinu II sukelto hipertenzijos modelio metu Ac-SDKP ribojo kolageno kaupimąsi aortoje ir sumažino I bei III tipo kolageno mRNR raišką. Taip pat pastebėtas mažesnis baltymų kinazės C aktyvumas, mažesnis oksidacinis stresas, ribota ICAM-1 raiška ir mažesnis makrofagų antplūdis į kraujagyslės sienelę. Sumažėjo TGF-β1 ir Smad2 aktyvumas, tuo tarpu Smad7, natūralaus šio kelio inhibitoriaus, lygis padidėjo. Arterinis kraujospūdis ir aortos storis išliko padidėję, o tai rodo, kad stebėti pokyčiai kraujagyslės sienelėje nebuvo kraujospūdžio sumažėjimo pasekmė [18].

Kitame žiurkių krūtinės ląstos apšvita pagrįstame modelyje 18 savaičių trukęs Ac-SDKP vartojimas padėjo išsaugoti širdies funkciją, sumažino ekstraląstelinės matrikso kaupimąsi ir fibrozę, sumažino makrofagų antplūdį ir širdies ląstelių žūtį. Taip pat sumažėjo su fibrozė susijusio makrofagų baltymo Mac-2 (galektino-3) lygis ir išsiskyrimas. Ac-SDKP buvo pastebėtas makrofagų viduje, šalia ląstelės branduolio, o jo buvimas apribojo spinduliuotės sukeltą Mac-2 išsiskyrimą. Kai fibroblastuose nebuvo Mac-2, spinduliuotė sukėlė kur kas silpnesnius fibrozę skatinančius signalus. Šie tyrimai suteikia ikiklinikinių įrodymų apie uždegiminio ir fibrozinio audinių remodeliavimo ribojimą po apšvitos [19].

Kvėpavimo sistemą tyrimai: plaučių fibrozė ir uždegiminiai pažeidimai

Lyginamieji plaučių tyrimai analizavo skirtumus tarp Ac-SDKP ir jo pirmtako – timozino β4. Laboratoriniuose eksperimentuose su žmogaus plaučių ląstelėmis, gautomis iš sergančiųjų idiopatine plaučių fibroze (IPF), Ac-SDKP ribojo pernelyg didelę ląstelių proliferaciją ir sumažino dviejų TGF-β skatinamų fibrozės žymenų – α-SMA ir kolageno – raišką.

Pelėms sukelto bleomicino plaučių pažeidimo modele timozinas β4 sumažino uždegimą ir ankstyvą fibrozę septintąją dieną, tačiau neapsaugojo nuo fibrozės vėlesniais etapais – nuo 14 iki 21 dienos. Rezultatai rodo, kad Ac-SDKP gali slopinti pagrindinius skaidulinio audinio susidarymo etapus ląstelėse ir potencialiai pasižymėti patvaresniu antifibroziniu poveikiu nei jo pirmtakas. Tačiau ši hipotezė reikalauja tolimesnio patvirtinimo [20].

Silikozės tyrimuose buvo analizuojamas KIF3A ir β-katenino kelio vaidmuo. KIF3A lygis buvo sumažėjęs tiek pacientų mėginiuose, tiek žiurkių plaučiuose. KIF3A aktyvumo atstatymas sumažino β-katenino ir jo tolesnių mediatorių MRTF-A bei SRF signalizaciją, taip apribodamas epitelio ląstelių virsmą miofibroblastais (EMyT) – su fibroze susijusį procesą.

Ac-SDKP padidino KIF3A aktyvumą ir sumažino β-katenino/MRTF-A/SRF signalizavimą. Dirbtinai apribojus KIF3A raišką, teigiami Ac-SDKP poveikiai išnyko. Tai rodo, kad KIF3A yra būtinas tiriamo antifibrozinio mechanizmo elementas [21].

Kitoje studijoje Ac-SDKP ir Vazoaktyvaus žarnyno peptido (VIP) derinys sumažino cigarečių dūmų sukeltus lėtine obstrukcine plaučių liga (LOPL) sergantiems pacientams būdingus pakitimus pelėms. Sumažėjo oksidacinės pažaidos žymenų, įskaitant MDA, su kolagenu susijusio hidroksiprolino kiekis ir TGF-β lygis. Kartu krito uždegiminių citokinų TNF-α, IL-1β ir IL-6 koncentracijos, o superoksiddismutazės (SOD) aktyvumas padidėjo. Histologinis tyrimas parodė mažesnį uždegimą ir silpnesnę struktūrinę plaučių remodeliaciją. Taigi, junginys pasižymėjo antioksidaciniu, uždegimą slopinančiu ir fibrozę stabdančiu poveikiu dūmų sukelto pažeidimo modelyje [22, 23].

Ac-SDKP taip pat pasižymėjo aktyvumu tiek ankstyvuoju, tiek vėlyvuoju bleomicino sukelto plaučių fibrozės etapu. CD-1 pelėms skiriant 0,6 mg/kg dozę intraperitoniškai, pradedant 0-ąją arba 7-ąją dieną, pagerėjo išgyvenamumas ir sumažėjo su bleomicinu susijęs kūno svorio netekimas. Plaučiuose buvo stebimas mažesnis edema, mažiau infiltruotų imuninių ląstelių, geriau išsilaikiusi audinių struktūra ir silpnesnė fibrozė. Sumažėjo kolageno dažymasis ir tirpaus kolageno kiekis. Taip pat sumažėjo IL-17, TGF-β ir α-SMA lygiai, kas rodė mažesnį miofibroblastų skaičių. Poveikis pasireiškė tiek ankstyvuoju, tiek vėluojančiu vartojimo pradžios atveju [24].

Žiurkių silikozės modelyje Ac-SDKP mažino fibrozę per poveikį P-HSP27/SNAI1 takui. Silicio dioksidas didino P-HSP27, SNAI1, α-SMA bei I ir III tipo kolageno kiekį plaučių audinyje. Ac-SDKP vartojimas prieš ekspoziciją arba prasidėjus ligai sumažino visus šiuos žymenis bei ląstelių, kurios vienu metu buvo teigiamos P-HSP27 ir α-SMA atžvilgiu, skaičių. Sveikiems kontroliniams gyvūnams peptidas šių baltymų raiškos nepakeitė, o tai rodo stebėtų poveikių priklausomybę nuo patologinės audinių būklės [25].

Metaanalizė, apimanti 18 atsitiktinių imčių tyrimų su gyvūnais, atliktų 2008–2021 metais, iš viso apėmė 428 gyvūnus. Palyginti su negydytais modeliais, Ac-SDKP sumažino kelis fibrozės žymenis: α-SMA (standartizuotas vidurkių skirtumas [SVS] −2,44), I tipo kolageną (SVS −5,36), III tipo kolageną (SVS −3,07), TGF-β (SVS −2,88) bei plaučių mazgelių plotą (SVS −1,80). Visiems šiems parametrams nustatyta p < 0,001.

Reikšmingas buvo ir hidroksiprolino, kolageno kiekio žymens, pokytis (SMD 7,62; 95% CI 4,90–10,33; p < 0,001), nurodantis poveikį kolageno apykaitai. Bendri tyrimų su gyvūnais rezultatai patvirtina antifibrozinio signalo buvimą analizuojamuose modeliuose, tačiau jiems taikomi ikiklinikinių metaanalizių metodologiniai apribojimai [26].

Kitiame tyrime žiurkės buvo veikiamos silicio dioksidu, kad būtų sukeltas fibrozė, o vėliau buvo skiriamas Ac-SDKP profilaktine schema arba po pakitimų išsivystymo, 800 µg/kg/parą doze. Palyginti su kontrolinėmis grupuis su silikoze, TGF-β1 ir CTGF baltymų lygis plaučiuose buvo reikšmės žemesnis ir siekė atitinkamai apie 0,244 ± 0,016 bei 0,241 ± 0,017. Taip pat sumažėjo mRNR lygis, ypač CTGF (p < 0,05). Profilaktinėje grupėje tiek baltymas, tiek TGF-β1 mRNR buvo reikšmingai žemesni nei aštuonių savaičių silikozės modelyje. Histologiniai tyrimai patvirtino mažesnę fibrozę [27].

Kitoje silikozės modelyje Ac-SDKP sumažino kolageno kaupimąsi ir pagerino plaučių struktūrą. Žiurkėms peptidas buvo duodamas po pažeidimo arba 48 valandas prieš ekspoziciją silicio dioksidui. Gydymo grupėse, palyginti su silikozės modeliais, mazgelių plotas sumažėjo iki 84,28% ir 67,93%, hidroksiprolino lygis – iki 70,89% ir 58,18%, I tipo kolageno – iki 71,08% ir 58,13%, o III tipo kolageno – iki 80,13% ir 70,70% nuo atitinkamų kontrolinių verčių tam tikrais laiko tarpais.

Profilaktinėse grupėse, lyginant su aštuonių savaičių silikozės modeliu, mazgelių plotas sumažėjo iki 61,13%, hidroksiprolinas – iki 60,27%, o I ir III tipo kolagenas – atitinkamai iki 40,13% ir 65,77%. HE ir VG histologinis dažymas parodė lengvesnę fibrozę. Rezultatai patvirtina, kad tiriamajame modelyje sumažėjo tiek kolageno kiekis, tiek matomi fibroziniai pokyčiai [28].

Tyrimai dėl silicio dioksido poveikio taip pat apėmė plaučius ir kaulus. Žiurkių ir ląstelių modeliuose silicio dioksidas aktyvavo TLR4 ir RANKL, sustiprindamas plaučių uždegimą ir už kaulų rezorbciją atsakingų osteoklastų susidarymą. Ac-SDKP slopino TLR4 ir RANKL signalizaciją, skatino plaučių elastino išsaugojimą, ribojo uždegimą ir makrofagų aktyvaciją. Kauliniame audinyje jis slopino osteoklastų diferenciaciją ir padėjo palaikyti kaulų tankį bei mikroarchitektūrą. Rezultatai rodo vienu metu vykstančius apsauginius pokyčius plaučius ir kauliniame audinyje eksperimentiniuose su silicio dioksidu susijusių pažeidimų modeliuose [29].

Ac-SDKP taip pat buvo tiriamas dėl jo poveikio fibroblastų diferenciacijai į miofibroblastus. TGF-β1 skatina plaučių fibroblastus tokiam virsmui ir didina kolageno gamybą. Kai Ac-SDKP buvo naudojamas prieš poveikį TGF-β1, α-SMA ir kolageno lygiai sumažėjo, kaip ir TGF-β1 bei jo receptoriaus lygiai.

Žiurkėms su silikozės sukeltu plaučių pažeidimu peptido vartojimas prieš ekspoziciją arba po jos sumažino TGF-β1 lygį, RAS signalizaciją ir SRF aktyvumą bei sumažino α-SMA teigiamų miofibroblastų skaičių plaučių mazgeliuose. Tai lydėjo mažesnis kolageno nusėdimas [30, 31].

Atliekant plaučių alveolinių epitelio ląstelių tyrimus, buvo analizuojama epitelinė-mezenchiminė transliacija. Veikiant silicio dioksidui ir TGF-β1, epitelinių žymenų, tokių kaip E-kadherinas ir SP-A, lygis mažėjo, tuo tarpu mezenchiminiai ir fibrozės žymenys, įskaitant vimentiną, α-SMA bei I ir III tipo kolageną, didėjo.

Ac-SDKP slopino šiuos pokyčius. Ląstelės didesniu laiku išlaikė epitelio savybes, fibrozės žymenų lygis sumažėjo, o TGF-β1/ROCK1 kelio aktyvumas susilpnėjo. Tai rodo geresnį plaučių alviolių epitelio struktūros išsaugojimą eksperimentinio pažeidimo sąlygomis [32].

Ac-SDKP taip pat turėjo įtakos endoplazminio tinklo streso ir plaučių alveolių epitelio ląstelių žūčiai. Silicio dioksido poveikis padidino GRP78, fosforiluotų PERK ir eIF2α, CHOP bei kaspazės-12 lygį, o tai buvo susiję su padidėjusia ląstelių žūtimi. Esant Ac-SDKP, panaudojus endoplazminio tinklo streso inhibitorių 4-PBA, šie žymenys sumažėjo. Laboratoriniuose eksperimentuose ir su žiurkėmis taip pat sumažėjo ląstelių žūtis bei kolageno kiekis plaučiuose. Rezultatai rodo, kad PERK/eIF2α/CHOP kelio ir kaspazės-12 aktyvumo susilpnėjimas gali prisidėti prie epitelio apsaugos ir fibrozės mažinimo [33].

Inkstų tyrimai: fibrozė ir filtracinė funkcija

Nakagawa ir bendradarbiai (2017) su lupusei predisponuotų NZBWF1 pelių modeliu parodė, kad Ac-SDKP sumažino inkstų pažeidimą ir glomerulosklerozę nesumažindamas sistolinio kraujospūdžio. Sunki hipertenzija, albuminurija ir priešlaikinė mirtis gydytiems gyvūnams pasireiškė vėliau, tačiau šie skirtumai nepasiekė statistinio reikšmingumo [34].

Worou ir bendradarbiai (2015) tyrė druskai jautrias Dahl žiurkes, kurioms šešias savaites buvo skiriamas Ac-SDKP 800 arba 1600 µg/kg per parą dozėmis. Daug druskos turinti dieta vis tiek didino kraujospūdį, tačiau inkstuose buvo stebimas mažesnis uždegimas, mažesnė fibrozė ir geriau išsisaugoję inkstų kūneliai. Tik didesnė dozė sumažino albuminuriją druskai jautrioms žiurkėms. Atsparesnėje SS13BN linijoje abi dozės apsaugojo nuo albumino netekimo ir struktūrinių pažeidimų. Rezultatai rodo, kad bent dalis inkstų poveikio buvo nepriklausoma nuo kraujospūdžio mažinimo [35].

Liao ir bendradarbiai (2015) 20 savaičių tyrė Ac-SDKP pelėms, turinčioms polinkį į vilkligę. Gyvūnams, gavusiems peptidą, stebėta geresnė inkstų funkcija, nors su vilklige susijusių autoantikūnų lygis nepasikeitė. Inkstuose buvo mažiau infiltruojančių makrofagų ir T limfocitų. Sumažėjo citokinų ir chemokinų lygis, o komplemento komponentų C5–9 bei mediatorių RANTES, MCP-5 ir ICAM-1 aktyvacija buvo apribota. Tai lydėjo išsaugota filtracinė funkcija ir mažesni mikroskopiniai pažeidimai [36].

DOCA ir druskos sukelto hipertenzijos modelio tyrime Rhaleb ir bendradarbiai (2011) pelėms skyrė Ac-SDKP po 800 µg/kg per parą 12 savaičių. Nepaisant išliekančios hipertenzijos, sumažėjo inkstų fibrozė, matrikso kaupimasis glomeruluose bei monocitų ir makrofagų infiltracija. Albuminurija sumažėjo nuo 41 ± 5 µg iki 13 ± 3 µg 10 g kūno svorio per parą, pasiekdama kontrolinėms reikšmėms artimus dydžius. Taip pat buvo iš dalies atstatytas nefryno – svarbaus filtracinio tinklelio baltymo – lygis. Rezultatai rodo filtracinio barjero apsaugą ir fibrozės sumažėjimą nepriklausomai nuo arterinio kraujospūdžio [37].

Shibuya ir bendradarbiai (2005) analizavo Ac-SDKP db/db pelėms su 2 tipo cukriniu diabetu. Aštuonių savaičių vartojimas mini pompų pagalba padidino peptido koncentraciją plazmoje maždaug tris kartus, nepakeisdamas glikemijos. Buvo ribojamas inkstų kapiliarų kamuolėlių padidėjimas, pernelyg didelis mezangialinės matrikso ir ekstraląstelinės matrikso komponentų kaupimasis. Kreatinino koncentracija plazmoje artėjo la link normos verčių. Albuminurija taip pat sumažėjo, tačiau skirtumas nebuvo statistiškai reikšmingas. Mechaniškai Ac-SDKP slopino Smad3 judėjimą į ląstelės branduolį, apribodamas su fibroze susijusį TGF-β/Smad signalizavimą [38].

Castoldi ir bendradarbiai (2013) tyrė sergančius cukriniu diabetu žiurkes, kurioms buvo skiriamas Ac-SDKP (1 mg/kg per dieną), ramiprilis (3 mg/kg per dieną), abiejų junginių deriniai arba kontrolinis gydymas. Neįsitempusiems gyvūnams pasireiškė hiperglikemija, padidėjusi albuminurija, inkstų fibrozė ir sumažėjęs nefrino kiekis glomeruluose. Vienas Ac-SDKP sumažino fibrozę, bet nepagerino albuminurijos. Ramiprilis sumažino tiek albuminuriją, tiek fibrozę ir atstatė nefrino lygį. Ac-SDKP derinys su ramipriliu stipriau sumažino fibrozę nei vienas ramiprilis, tačiau nesuteikė papildomo albuminurijos pagerėjimo. Rezultatai rodo papildomą antifirozinį poveikį tirtame modelyje be papildomo albumino išsiskyrimo pagerėjimo [39].

Zhang su bendradarbiais (2022) sukūrė biologiniais sprendimais įkvėptą dvigubo tinklelio hidrogelį, sudarytą iš želatinos ir cinko-kurkumino komplekso, padengtą DOPA ir funkcionalizuotą immobilizuotu Ac-SDKP. Sistema sukurta siekiant sumažinti problemas, susijusias su laisvų medžiagų tirpumu, absorbcija ir stabilumu. In vivo panaudojus žiurkių inkstuose po dalinės nefrektomijos, hidrogelis mažino vietinį fibrozę, palaikė angiogenezę ir skatino naujų inkstų kanalėlių formavimąsi. Medžiagų tyrimai patvirtino tinkamą poringumą, mechaninį stiprumą ir biologinį suderinamumą, o tai palaiko tolesnius šio sprendimo tyrimus [40].

Zuo ir bendradarbiai (2013) palygino Ac-SDKP, timoziną β4 ir timoziną β4 kartu su prolino oligopeptidazės inhibitoriumi (POP) vienpusės šlapimtakio obstrukcijos modeliuose su laukinėmis ir PAI-1 neturinčiomis pelėmis. Ac-SDKP nuosekliai mažino fibrozę abiejuose genotipuose. Buvo pastebėta mažiau kolageno ir fibronektino, mažiau aktyvuotų miofibroblastų ir makrofagų bei silpnesnis fibrozę skatinantis signalizavimas. Lyginamieji tyrimai taip pat rodo, kad tymozino β4 poveikis yra skirtingas ir priklauso nuo ligos stadijos [41].

Wang ir bendradarbiai (2010) parodė, kad Ac-SDKP sumažino obstrukcijos sukeltą inkstų uždegimą ir fibrozę. Žiurkėms, turinčioms vienpusę šlapimvatio obstrukciją, 14 dienų peptido vartojimas sumažino tubulointersticines fibrozės ir uždegiminius pokyčius, matomus histologiniame tyrime. Stebėtas mažesnis ED-1 makrofagų antplūdis ir mažesnis MCP-1, NF-κB, α-SMA bei TGF-β1 lygis kanalėlių ir intersticiumo ląstelėse. Taip pat krito MCP-1 ir TGF-β1 genų raiška, kas rodė tiek uždegiminių ląstelių recrutavimo, tiek ekstraląstelinės matrikso aktyvacijos sumažėjimą [42].

Liao ir bendradarbiai (2010) skyrė Ac-SDKP 800 µg/kg per parą dozę žiurkėms, pašalinus 5/6 inkstų masės, o vaisto vartojimas buvo pradėtas prieš pažeidimą arba jam pasireiškus. Nepaisant išliekančios hipertenzijos ir kairiojo skilvelio hipertrofijos, peptidas sumažino albuminuriją, apribojo makrofagų infiltraciją ir sumažino kolageno kiekį inkstuose abiejose grupėse. Nefryno netekimas inkstų kapiliarų kamuolėliuose taip pat buvo iš dalies apribotas arba atvirkštinis. Rezultatai rodo, kad pagerėja filtracinio barjero vientisumas tiek ankstyvoje, tiek labiau pažengusioje pažeidimo stadijoje, daugiausia dėl priešuždegiminio ir antifibrozinio poveikio, o ne kraujospūdžio kontrolės [43].

Peng ir bendradarbiai (2001) tyrė žiurkes, kurioms pašalinus vieną inkstą šešias savaites buvo duodama aldosterono ir druskos. Ši intervencija padidino arterialinį kraujospūdį, sukėlė širdies ir inksto padidėjimą bei padidino kolageno ir ląstelių proliferacijos žymens PCNA kiekį. Ac-SDKP, ypač didesne 800 µg/kg per parą doze, reikšmingai sumažino kolageno ir PCNA kiekį dozuotai priklausomu būdu. Tačiau kraujospūdis ir organų padidėjimas liko nepakitę, o mažesnė 400 µg/kg per parą dozė davė dalinį poveikį [44].

Omata ir bendradarbiai (2006) tyrė žiurkes, sergančias inkstų uždegimu, kurį sukėlė antikūnai prieš glomerulų pamatinę membraną (anti-GBM). Ac-SDKP skyrimas 1 mg/kg per parą doze buvo pradėiamas praėjus 14 dienų nuo ligos pradžios ir tęsiamas keturias savaites. Palyginti su negydytais gyvūnais, stebėtas mažesnis baltymų išskyrimas su šlapimu, mažesnė karbamido ir kreatinino koncentracija plazmoje bei geresnis kreatinino klirensas. Audinių tyrimai parodė mažesnę glomerulų sklerozę ir intersticinę fibrozę. Sumažėjo fibronektino, kolageno ir TGF-β1 lygis bei Smad2 signalizacija, tuo tarpu Smad7 padidėjo. Taip pat sumažėjo makrofagų kaupimasis inkstų audinyje [45].

Nagai ir bendradarbiai (2014) diabeto modeliuose įrodė, kad Ac-SDKP gali sumažinti inkstų fibrozę, slopindamas endotelio ir mezenchimos virsmą (EndMT) – endotelio ląstelių transformaciją į ląsteles, turinčias fibrozę skatinančių savybių. Peptidas atkūrė natūralių apsauginių kelių, įskaitant mikroRNA let-7 ir FGF receptoriaus signalizaciją, kuriuos diabetas buvo susilpninęs, aktyvumą. Ac-SDKP derinys su ACE inhibitoriumi tirtame modelyje užtikrino geresnę inkstų apsaugą nei vien tik ACE inhibicija [46].

Srivastava ir bendradarbiai (2020) palygino AKF inhibitorius, angiotenzino receptorių blokatorius (ARB), Ac-SDKP bei jų derinius sergantiems cukrumi pelėms. Tyrėjai taip pat blokavo natūralų Ac-SDKP susidarymą naudodami proliloligopeptidazės inhibitorių (POPi). Rezultatai parodė, kad Ac-SDKP dalyvauja teigiamame AKF inhibitorių poveikyje, keisdamas inkstų metabolizmą. Buvo atstatytas SIRT3 lygis, pagerėjo mitochondrijų riebalų rūgščių oksidacija ir sumažėjo neanormalus gliukozės naudojimas.

Natūralaus Ac-SDKP susidarymo slopinimas sumažino jo koncentraciją, paspartino fibrozę ir sutrikdė metabolinę pusiausvyrą. ACE inhibitoriai, lyginant su ARB, iš dalies atstatė peptido lygį ir sumažino fibrozę. Tiek ACE inhibitoriai, tiek Ac-SDKP apribojo mezenchiminius virsmus ir sumažino I tipo kolageno bei fibronektino kiekį sergančių cukriniu diabetu inkstuose [47].

Klininiuose tyrimuose taip pat buvo analizuojamas Ac-SDKP analogas kaip potenciali priemonė, apsauganti kraujo ląsteles chemoterapijos metu. Carde su bendradarbiais (1992) vertino „Seraspenide“ I–II fazės dvigubai aklame, kryžmininiame tyrime, kuriame dalyvavo 53 pacientai, gydyti citarabinu arba ifosfamidu. Lyginant su kontroliniais laikotarpiais, asmenims, gavusiems „Seraspenide“, pasireiškė geresnis periferinio kraujo ląstelių skaičiaus išsaugojimas esant toksiniam chemoterapijos poveikiui. Preparatas buvo gerai toleruojamas, nepageidaujamų reiškinių neužregistruota. Šie rezultatai paskatino atlikti tolimesnius kraujodaros sistemos apsaugos tyrimus, tačiau nepatvirtino rutininio klinikinio veiksmingumo [48].

Atskirame tyrime nebuvo įrodyta apsauga nuo chemoterapijos sukelto hematologinio toksiškumo. Cappelaere su bendradarbiais (1995) tyrė 84 pacientus, sergančius pažengusiais plokščialąsteliniais navikais, kuriems buvo taikoma karboplatina ir nepertraukiamas 5-fluorouracilo infuzinis gydymas bei placebo arba Goralatido (Ac-SDKP) 12,5 arba 62,5 µg/kg/parą dozės. Per 221 chemoterapijos ciklą jokių skirtumų tarp grupių leukocitų, granulocitų, trombocitų ar hemoglobino mažiausiose vertėse nepastebėta. Toksiškumo trukmė taip pat nepasikeitė. Tačiau anemija ir limfopenija Goralatido grupėse pasitaikė dažniau. Nors preparatas apskritai buvo įvertintas kaip toleruojamas, jis neapsaugojo nuo su chemoterapija susijusių citopenijų ir buvo siejamas su dažnesne anemija bei limfopenija [49].

Nitta ir bendradarbiai (2016) tyrė Ac-SDKP 1 ir 2 tipo cukrinio diabeto modeliuose. CD-1 pelėms su streptozotocino sukeltu cukriniu diabetu ir db/db pelėms buvo skiriamas geriamasis Ac-SDKP, AKF inhibitorius imidaprilis arba abu junginiai. Vien Ac-SDKP ir kombinuotas gydymas sumažino glomerulų sklerozę bei tubulointersticacinę fibrozę. Cistatino C koncentracija plazmoje, kuri padidėja pažeidus inkstus, artėjo prie normos verčių.

Visos intervencijos atkūrė antifibrozinių mikroRNR miR-29 ir let-7 lygį, o didžiausias pagerėjimas pastebėtas kombinuoto gydymo grupėje. Peptido koncentracija šlapime buvo didžiausia toje pačioje grupėje, o tai rodė didesnę sisteminę ekspoziciją [50].

Tan ir bendradarbiai (2012) skyrė Ac-SDKP MRL/lpr pelėms, sergančioms vilklige, 1,0 mg/kg per parą doze aštuonias savaites. Palyginti su negydytais gyvūnais, pelės, gavusios peptidą, pasižymėjo mažesne proteinurija ir geresne inkstų funkcija. Inkstų audinyje buvo mažiau infiltruojančių T limfocitų ir makrofagų. Sumažėjo NF-κB aktyvacija ir TNF-α gamyba bei fibrozės žymenų TGF-β1, α-SMA ir fibronektino lygiai. Smad2/3 fosforilinimas buvo slopinamas, o Smad7 lygis padidėjo.

Tačiau nesikeitė imuninių kompleksų nusėdimas ar anti-dsDNA antikūnų lygis. Tai rodo, kad poveikis atsirado dėl tolesnių uždegimo ir fibrozės etapų ribojimo, o ne dėl antikūnų susidarymo pokyčių [51].

Maheshwari su kolegomis (2018) tyrė normalaus svorio (ZL) ir nutukusius (ZO) Zucker žiurkes, aštuonias savaites šertas dieta, kurioje buvo normalus druskos kiekis (0,4 %) arba daug druskos (4 %). Viena iš ZO žiurkių pogrupių gavo Ac-SDKP 1,6 mg/kg per parą.

Druskos turtinga dieta didino inkstų uždegimą ir fibrozę abi grupės, o nutukusiems žiurkėms makrofagų antplūdis buvo didžiausias: 87,8 ± 10,8, palyginti su 19,14 ± 1,5 ląstelės/mm² lieknoms žiurkėms. Ac-SDKP vartojimas sumažino makrofagų antplūdį nutukusioms žiurkėms iki 32,18 ± 2,4 ląstelės/mm² (p < 0,05) ir sumažino glomerulų sklerozę bei intersticidinę fibrozę inkstų žievėje ir šerdinėje dalyje (p < 0,05).

Sistolinis kraujospūdis nutukusiems žiurkėms, gavusioms daug druskos turinčią dietą, sumažėjo nuo 164 ± 6,9 iki 144,05 ± 14,1 mmHg (p = 0,004). Albuminurija buvo didesnė nutukusių gyvūnų nei lieknų, tačiau reikšmingai nepasikeitė dėl dietos ar Ac-SDKP poveikio [52].

Neurologiniai tyrimai: smegenų ir nugaros smegenų pažeidimo modeliai

Ląstelių ir žiurkių Parkinsono ligos modeliai

Kamarehei ir Zahednasab (2025) tyrė Ac-SDKP poveikį su Parkinsono liga susijusiuose modeliuose. Ląstelių eksperimentuose išankstinis SH-SY5Y nervinių ląstelių paveikimas 20 nM peptidu sumažino pažeidimus, kuriuos sukėlė 6-OHDA – toksinas, dažnai naudojamas parkinsono tipo pokyčiams modeliuoti.

Tyrimuose su žiurkėmis kasdienis 800 µg/kg dozuotų vaistų vartojimas sukėlus smegenų pažeidimus 6-OHDA padėjo išsaugoti daugiau dopaminerginių neuronų ir sumažino ląstelių žūtį, apribodamas kaspazės-3 ir kaspazės-12 aktyvumą.

Gyvūnai, gavę peptidą, taip pat pasižymėjo geresne judesių koordinacija, geresne erdvine atmintimi ir mažesniu nerimą bei depresiją primenančiu elgesiu.

Mehaniškai pokyčiai buvo siekiami su oksidacinio streso, endoplazminio tinklo streso ir uždegiminės signalizacijos sumažinimu smegenyse. Tačiau rezultatai susiję su ikiklinikiniais modeliais ir nepatvirtina Ac-SDKP veiksmingumo Parkinsono liga sergantiems pacientams [53].

Atsistatymas po nugaros smegenų pažeidimo

Hashemizadeh ir bendradarbiai (2022) skyrė Ac-SDKP Wistar žiurkėms po oda 0,8 mg/kg paros doze kartą per dieną septynias dienas, pradėdami praėjus dviem arba šešioms valandoms po nugaros smegenų sužalojimo, sukelto numetant svarmenį.

Palyginti su negydytais gyvūnais, peptides gavusios žiurkės atgavo geresnį vaikščiojimo gebėjimą, neteko mažiau motorinių neuronų ir pasižymėjo mažesniu TNF-α bei kaspazės-3 lygiu.

Kartu didėjo CD206 mRNA, M2 makrofagams, dalyvaujančtiems atstatymo procesuose, būdingo žymens, raiška. Audinių tyrimai parodė mažesnius pažeidimo plotus.

Apskritai buvo stebimas imuninio atsako poslinkis nuo su M1 makrofagais susijusio aktyvumo link M2 tipo atsakui, kurį lydėjo palankesni funkciniai ir struktūriniai rezultatai [54].

Apsauga po galvos smegenų traumos (TBI)

Zhang ir kt. (2017) sukėlė žiurkėms kontroliuojamą galvos smegenų žievės pažeidimą, o praėjus valandai po sužalojimo per minipompą tris dienas skyrė Ac-SDKP 0,8 mg/kg/parą dozę.

Nuo 7 iki 35 dienos sensorinių-motorinių testų rezultatai buvo geresni, o nuo 33 iki 35 dienos taip pat buvo stebimas erdvinio mokymosi pagerėjimas, palyginti su kontroline grupe (p < 0,05).

Tyrimo pabaigoje žievės pažeidimo plotas ir hipokampo neuronų netektis buvo mažesni. Kartu padidėjo angiogenezė, naujų neuronų susidarymas bei dendritinių spyglių tankis.

Anstyvus vartojimas taip pat ribojo fibrino nusodinimą ir imuninių ląstelių aktyvaciją. Mechanistiniai tyrimai parodė, kad didžiąją dalį uždegimą slopinančio poveikio galima paaiškinti TGF-β1/NF-κB signalizacijos slopinimu [55].

Eksperimentinis autoimuninis encefalomielitas (išsėtinę sklerozę primenantis modelis)

Pejman ir bendradarbiai (2020) tyrė C57BL/6 peles su eksperimentiniu autoimuniniu encefalomielitu (EAE), naudojamu kaip išsėtinę sklerozę primenančių procesų modelis.

Sergant EAE, buvo pastebėti padidėję endoplazminio tinklo streso žymenų, įskaitant kaspazę-12, CHOP ir PDI, lygiai, taip pat sustiprėjęs oksidacinis streso lygis ir imuniteto ląstelių antplūdis į hipokampą.

Po Ac-SDKP administravimo sumažėjo kaspazės-12 ir CHOP lygis oligodendrocituose bei kaspazės-3 aktyvacija. Taip pat sumažėjo reaktyviųjų deguonies formų ir lipidų peroksidacijos lygis, pagerėjo antioksidacinis pajėgumas, o IL-6 ir IL-1β koncentracijos buvo mažesnės.

Smegenų audinio analizė parodė mažesnius hipokampo pažeidimus ir mažiau infiltruojančių imuniteto ląstelių, kas atitiko lėtesnį ligos eigą šiame modelyje [56].

Papildomi neurologiniai tyrimai, nurodyti šaltinio medžiagoje

Šaltinio medžiagos bibliografijoje taip pat nurodytas tyrimas dėl insulto žiurkėms, kuriame buvo analizuojamas Ac-SDKP kartu su audinių plazminogeno aktyvatoriumi [57], ir timozino β4 fragmento tyrimas, susijęs su hipokampo neurogeneze ir erdvine atmintimi [58].

Pateiktame straipsnyje nepateikiami šių dviejų tyrimų metodai ar rezultatai, todėl jo pagrindu negalima formuoluoti papildomų išvadų apie jų rezultatus.

Kepenų tyrimai: eksperimentinė fibrozė

Cheminių medžiagų sukeltos kepenų fibrozės mažinimas

Wei ir bendradarbiai (2022) tyrė žiurkes su anglies tetrachlorido (CCl₄) sukeltu kepenų pažeidimu. Panaudojus Ac-SDKP, buvo stebimas mažesnis žvaigždinių ląstelių, kurios yra pagrindinės kepenų skaidulinio audinio susidarymame dalyvaujančios ląstelės, mirtingumas ir mažesnė fibrozė.

Mechanistiniai tyrimai parodė, kad peptidas sumažino WTAP – baltymo, dalyvaujančio pridedant m⁶A modifikacijas prie RNR – lygį. Šis pokytis stabilizavo Ptch1 RNR ir paveikė Hedgehog kelio, kuris yra svarbus fibrozės procesų reguliatorius, aktyvumą.

Wyniki wskazują na mechanizm przeciwzwłóknieniowy związany ze szlakiem WTAP/m⁶A/Ptch1 i regulacją sygnalizacji Hedgehog [59].

Ochrona w modelu włóknienia wywołanego niedrożnością dróg żółciowych

Zhang i współpracownicy (2012) zastosowali szczurzy model podwiązania przewodu żółciowego (BDL), a następnie przez dwa tygodnie podawali Ac-SDKP.

W porównaniu z nieleczonymi zwierzętami obserwowano osłabienie sygnalizacji TGF-β1 i niższe poziomy markerów aktywowanych komórek gwiaździstych, w tym α-SMA i FSP-1.

Zmniejszała się także ekspresja genów związanych z kolagenem typu I i III oraz enzymów uczestniczących w przebudowie macierzy, takich jak MMP-2, TIMP-1 i TIMP-2.

Parametry krwi związane z funkcją wątroby ulegały poprawie: ALT, AST, bilirubina i czas protrombinowy zbliżały się do wartości prawidłowych. Badania histologiczne wykazały mniej komórek tucznych, mniejsze odkładanie kolagenu oraz słabsze włóknienie i zapalenie [60].

Zachowanie naturalnych mechanizmów ochronnych i naprawczych

Chen i współpracownicy (2010) wykazali, że podczas długotrwałej ekspozycji na CCl₄ naturalne stężenia Ac-SDKP stopniowo się zmniejszały.

Podawanie peptydu we wlewie w dawce 800 µg/kg/dobę przez osiem tygodni pomagało utrzymać jego podstawowy poziom oraz ograniczało uszkodzenia wątroby, zapalenie i włóknienie.

Spadały aktywności enzymów wątrobowych we krwi, liczba komórek zapalnych CD45⁺ oraz ilość kolagenu i złogów α-SMA. Zmniejszały się również poziomy TGF-β1 i fosforylowanych Smad2/3, natomiast wzrastała aktywność sygnałów związanych z naprawą tkanek, takich jak BMP-7 i fosforylowane Smad1/5/8.

W eksperymentach komórkowych Ac-SDKP bezpośrednio hamował aktywację komórek gwiaździstych, co potwierdzało działanie przeciwzwłóknieniowe na poziomie komórkowym [61].

Regeneracja skóry, modele gojenia ran i inne wyniki eksperymentalne

Hydrożel zawierający Ac-SDKP i przebudowa blizn

Opracowano specjalny klej tkankowy na bazie celulozy, Dopa-OCMC-PAA, porównywany z OCMC-PAA, przeznaczony do przenoszenia i uwalniania Ac-SDKP.

Obie wersje wykazywały odpowiednie właściwości pęcznienia i degradacji, dobrą wytrzymałość mechaniczną oraz zgodność z komórkami, ale Dopa-OCMC-PAA osiągał korzystniejsze wyniki.

U myszy z krwawieniem z wątroby klej ten szybciej hamował krwawienie. W testach fibroblastów zwiększał poziomy enzymów uczestniczących w przebudowie tkanek, MMP-1 i MMP-3, a jednocześnie ograniczał aktywność genów związanych z kolagenem.

U królików z przerosłymi bliznami na uszach połączenie Dopa-OCMC-PAA z Ac-SDKP zmniejszało nasilenie bliznowacenia, liczbę komórek i poprawiało organizację kolagenu. Ponownie obserwowano wzrost MMP-1 i MMP-3 oraz niższą aktywność genów kolagenowych. Wyniki wskazywały na korzystniejsze gojenie ran i mniejsze bliznowacenie w badanych modelach [62].

Miejscowe zastosowanie a przeżywalność skóry i procesy naprawcze

W szczurzych modelach chirurgicznych płatów skórnych, brzusznych i grzbietowych, podawanie Ac-SDKP w zastrzykach w dawce 5 µg/kg dwa razy dziennie przez trzy dni zwiększało powierzchnię żywej skóry.

W płatach brzusznych udział żywej tkanki wzrósł z 50,9 ± 19,3% do 66,4 ± 7,5%, a w płatach grzbietowych z 53,4 ± 4,2% do 74,7 ± 6,6%.

W tkance skórnej uszkodzonej promieniowaniem UVB miejscowe zastosowanie peptydu poprawiało przeżywalność komórek. Podawanie powierzchniowe przyspieszało również tworzenie nowego naskórka, zwiększało poziom keratyny-14, markera komórek uczestniczących w odbudowie skóry, oraz fibronektyny. Wyniki wskazują na udział w procesach angiogenezy i naprawy tkanek w warunkach eksperymentalnych [63].

Ochrona krwiotworzenia podczas chemioterapii

W badaniu myszy otrzymujących doksorubicynę, lek chemioterapeutyczny, podawanie Ac-SDKP w ilości 2,4 µg/dobę, w sposób ciągły lub w dawkach podzielonych, rozpoczynane 48 godzin przed leczeniem, zmniejszało śmiertelność i chroniło krwiotwórcze komórki macierzyste.

Ochronę obserwowano w pomiarach LTRC, CFU-S, HPP-CFC i CFU-GM. Dodanie G-CSF dodatkowo zwiększało odbudowę CFU-GM.

Moment rozpoczęcia podawania miał kluczowe znaczenie. Rozpoczęcie przed chemioterapią było konieczne do ograniczenia zarówno krótkotrwałego uszkodzenia szpiku, jak i długoterminowej utraty komórek macierzystych w tym modelu [64].

Silniejsze działanie przeciwzwłóknieniowe zmodyfikowanych analogów i połączeń z inhibitorami ACE

W eksperymentach na fibroblastach płucnych forma Ac-SDKP odporna na rozkład przez ACE silniej ograniczała sygnalizację TGF-β/Smad3 i odkładanie kolagenu niż naturalna cząsteczka.

Skrócony fragment Ac-DKP wykazywał jedynie słabe efekty i był powoli rozkładany przez ACE.

Połączenie peptydu z inhibitorami ACE silniej ograniczało poziom hydroksyproliny, markera zawartości kolagenu, niż sam peptyd. Wyniki sugerują możliwość dalszych badań nad zmodyfikowanymi analogami i ich interakcjami.

W zakresie stężeń od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M zarówno tymozyna β4, jak i Ac-SDKP zmniejszały proliferację komórek tucznych, przy czym najsilniejszy efekt obserwowano przy 10⁻¹⁴ M. Powodowały również nietypowe zmiany w jądrach komórkowych związane z zatrzymaniem cyklu komórkowego.

Przy stężeniu 10⁻⁸ M oba peptydy wywoływały także degranulację komórek tucznych. Ac-SDKP wykazywał silniejszy efekt, około 89%, niż tymozyna β4, około 57%. Pozostałe fragmenty tymozyny β4 nie wykazywały aktywności, co sugeruje zależność tych odpowiedzi od badanych nienaruszonych peptydów, a nie innych analizowanych fragmentów [65, 66].

Eksperymentalne dawki Ac-SDKP w opublikowanych badaniach – nie są zaleceniami dla ludzi

Poniższe wartości opisują protokoły stosowane w cytowanych eksperymentach na zwierzętach i komórkach. Nie są ustalonymi dawkami dla ludzi.

W analizowanych badaniach przedklinicznych Ac-SDKP często podawano podskórnie za pomocą minipomp w ilości około 0,8 mg/kg/dobę w celu oceny włóknienia i zapalenia w sercu, naczyniach i nerkach. W mysich modelach zawału serca stosowano niekiedy 1,6 mg/kg/dobę w badaniach wczesnej ochrony tkanek.

W eksperymentach dotyczących mózgu i układu nerwowego krótkie cykle rozpoczynane w ciągu kilku godzin od urazu zwykle obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę przez trzy do siedmiu dni. W badaniach komórkowych często stosowano wstępną ekspozycję na około 10 nM peptydu.

W modelach przewlekłego uszkodzenia wątroby protokoły przeciwzwłóknieniowe często obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę. W modelu włóknienia płuc wywołanego bleomycyną stosowano 0,6 mg/kg dootrzewnowo, z powtarzanymi podaniami rozpoczynanymi w dniu 0 lub 7.

W badaniach gojenia skóry i ran miejscowe schematy obejmowały 5 µg/kg na wstrzyknięcie dwa razy dziennie przez trzy dni albo hydrożele zawierające peptyd i uwalniające go miejscowo.

W badaniach hematologicznych i dotyczących ochrony szpiku wykorzystywano bardzo małe ilości, na przykład 2,4 µg/dobę u myszy przed chemioterapią oraz krótkie cykle w zakresie µg/kg/dobę we wczesnych badaniach klinicznych.

Interpretacja wyników i ograniczenia dostępnych dowodów

Największa część przedstawionej literatury obejmuje eksperymenty komórkowe i modele zwierzęce. Zmiany w odkładaniu kolagenu, mediatorach zapalnych, budowie tkanek i eksperymentalnych parametrach funkcjonalnych nie stanowią same w sobie dowodu działania terapeutycznego u ludzi.

Przytoczone wczesne badania kliniczne dotyczyły głównie parametrów hematologicznych podczas chemioterapii i przyniosły niejednoznaczne wyniki, w tym negatywne wyniki badania randomizowanego [48, 49].

Eksperymentalne drogi podawania, ilości substancji i okresy ekspozycji należy traktować jako elementy metodologii badań, a nie zalecenia dotyczące indywidualnego stosowania.

Zastrzeżenie redakcyjne: Niniejszy artykuł ma charakter wyłącznie edukacyjny i naukowy. Przedstawia wyniki badań nad Ac-SDKP, mechanizmy molekularne i ograniczenia dostępnych dowodów. Nie stanowi porady medycznej, nie zaleca stosowania Ac-SDKP ani nie określa protokołów dawkowania, podawania czy leczenia. Wyniki badań laboratoryjnych i doświadczeń na zwierzętach nie potwierdzają bezpieczeństwa ani skuteczności Ac-SDKP u ludzi.

Nuorodos

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). The Role of Tβ4-POP-Ac-SDKP Axis in Organ Fibrosis. Tarptautinis molekulinių mokslų žurnalas, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP decreases mortality and cardiac rupture after acute myocardial infarction. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP reverses cardiac fibrosis in rats with renovascular hypertension. Hypertension, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP reverses inflammation and fibrosis in rats with heart failure after myocardial infarction. Hypertension, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotic effect of Ac-SDKP and angiotensin-converting enzyme inhibition in hypertension. Hipertenzijos žurnalas, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on DNA and collagen synthesis in rat cardiac fibroblasts. Hypertension, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents cardiac remodeling and dysfunction induced by galectin-3, a mammalian adhesion/growth-regulatory lectin. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Long-term effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on left ventricular collagen deposition in rats with 2-kidney, 1-clip hypertension. Circulation, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Therapeutic potential of thymosin-beta4 and its derivative N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in cardiac healing after infarction. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions (Amerikos širdies ir kraujagyslių vaistų žurnalas : vaistai, prietaisai ir kitos intervencijos), 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro inhibits interleukin-1β-mediated matrix metalloproteinase activation in cardiac fibroblasts. Pflügers Archiv – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Treatment with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents experimental autoimmune myocarditis in rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline reduces cardiac collagen cross-linking and inflammation in angiotensin II-induced hypertensive rats. Clinical Science, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E., & Rhaleb, N. E. (2019). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline treatment protects heart against excessive myocardial injury and heart failure in mice. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Prevention of myocardial fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. Clinical Science, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Effects of a novel peptide Ac-SDKP in radiation-induced coronary endothelial damage and resting myocardial blood flow. Širdies ir kraujagyslių onkologija, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP attenuates ER stress-stimulated collagen production in cardiac fibroblasts by inhibiting CHOP-mediated NF-κB expression. Farmakologijos ribos, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP suppresses TNF-α-induced ICAM-1 expression in endothelial cells via inhibition of IκB kinase and NF-κB activation. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Prevention of aortic fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in angiotensin II-induced hypertension. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). A small peptide Ac-SDKP inhibits radiation-induced cardiomyopathy. Cirkuliacija: širdies nepakankamumas, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2015). Effects of thymosin β4 and its N-terminal fragment Ac-SDKP on TGF-β-treated human lung fibroblasts and in the mouse model of bleomycin-induced lung fibrosis. Expert Opinion on Biological Therapy, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S., & Yang, F. (2023). Ac-SDKP promotes KIF3A-mediated β-catenin suppression through a ciliary mechanism to constrain silica-induced epithelial-myofibroblast transition. Biomedicina ir farmakoterapija, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Immunomodulatory effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-proline and vasoactive intestinal peptide on chronic obstructive pulmonary disease pathophysiology. Fundamental & Clinical Pharmacology, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Synthesis and identification of a novel peptide, Ac-SDK (biotin) proline, that can elicit anti-fibrosis effects in rats suffering from silicosis. Drug Design, Development and Therapy, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventive and therapeutic effects of thymosin β4 N-terminal fragment Ac-SDKP in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Regulatory effect of Ac-SDKP on phosphorylated heat shock protein 27/SNAI1 pathway in silicotic rats. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Meta-analysis of Ac-SDKP inhibition of pulmonary fibrosis in animal models. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline mediated by regulation of transforming growth factor beta and connective tissue growth factor expression on rats with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Anti-fibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in lung of rat with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F., & Xu, H. (2021). Ac-SDKP attenuates activation of lung macrophages and bone osteoclasts in rats exposed to silica by inhibition of TLR4 and RANKL signaling pathways. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D., & Wang, R. (2012). A new antifibrotic target of Ac-SDKP: inhibition of myofibroblast differentiation in rat lung with silicosis. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Acetylated α-Tubulin regulated by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) exerts the anti-fibrotic effect in rat lung fibrosis induced by silica. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Protective effect of Ac-SDKP on alveolar epithelial cells through inhibition of EMT via TGF-β1/ROCK1 pathway in silicosis in rat. Toxicology and Applied Pharmacology, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) attenuates silicotic fibrosis by suppressing apoptosis of alveolar type II epithelial cells via mediation of endoplasmic reticulum stress. Toxicology and Applied Pharmacology, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Effects of N-acetyl-seryl-asparyl-lysyl-proline on blood pressure, renal damage, and mortality in systemic lupus erythematosus. Physiological Reports, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). Renal protective effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in Dahl salt-sensitive rats. Hypertension, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-Acetyl-Seryl-Aspartyl-Lysyl-Proline: mechanisms of renal protection in mouse model of systemic lupus erythematosus. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renal protective effects of N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro in deoxycorticosterone acetate-salt hypertensive mice. Hipertenzijos žurnalas, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M., & Koya, D. (2005). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents renal insufficiency and mesangial matrix expansion in diabetic db/db mice. Cukrinis diabetas, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Renal antifibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L., & Hu, B. (2022). A biomimetic double network hydrogel ameliorates renal fibrosis and promotes renal regeneration. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A., & Fogo, A. B. (2013). Thymosin β4 and its degradation product, Ac-SDKP, are novel reparative factors in renal fibrosis. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal inflammation and tubulointerstitial fibrosis in rats. International Journal of Molecular Medicine, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal injury and dysfunction in hypertensive rats with reduced renal mass: Council for High Blood Pressure Research. Hypertension, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on the heart and kidney in aldosterone-salt hypertensive rats. Hypertension, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M., & Inomata, N. (2006). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline ameliorates the progression of renal dysfunction and fibrosis in WKY rats with established anti-glomerular basement membrane nephritis. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K., & Koya, D. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline inhibits diabetes-associated kidney fibrosis and endothelial-mesenchymal transition. BioMed Research International, 2014 m., 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolic reprogramming by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline protects against diabetic kidney disease. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenide (acetylSDKP): phase I–II trial study of inhibitor of hematopoiesis protects against toxicity of aracytine and ifosfamide monochemotherapies]. Clinical Trial C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomized placebo trial of myeloprotection with goralatide in patients with squamous cell carcinoma of the upper respiratory and digestive tracts or esophagus, treated with a carboplatin-fluorouracil combination]. Bull Cancer, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K., & Koya, D. (2016). Oral Administration of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline Ameliorates Kidney Disease in Both Type 1 and Type 2 Diabetic Mice via a Therapeutic Regimen. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP ameliorates the progression of lupus nephritis in MRL/lpr mice. International Immunopharmacology, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renal protective effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in obese rats on a high-salt diet. Amerikos hipertenzijos žurnalas, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Neuroprotective effect of Ac-SDKP peptide in SH-SY5Y cells and rat model of Parkinson’s disease against 6-OHDA-induced oxidative stress and ER stress. Neuropeptides, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Ac-SDKP peptide improves functional recovery following spinal cord injury in a preclinical model. Neuropeptides, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Treatment of traumatic brain injury in rats with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S., & Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP ameliorates the progression of experimental autoimmune encephalomyelitis via inhibition of ER stress and oxidative stress in the hippocampus of C57BL/6 mice. Smegenų tyrimų biuletenis, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Combination Treatment with N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline and Tissue Plasminogen Activator Provides Potent Neuroprotection in Rats After Stroke. Stroke, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S., & Ryu, J. H. (2015). Peptide fragment of thymosin β4 increases hippocampal neurogenesis and facilitates spatial memory. Neuroscience, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (AcSDKP) mitigates liver fibrosis via WTAP/m6A/Ptch1 axis through Hedgehog pathway. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotic Effect of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on Bile Duct Ligation-Induced Liver Fibrosis in Rats. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Preservation of basal AcSDKP attenuates carbon tetrachloride-induced fibrosis in the rat liver. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A., & Brouki Milan, P. (2025). A cellulose-based skin adhesive hydrogel incorporating N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline peptide for enhanced wound healing and scar prevention in rabbit scar ear model in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). The tetrapeptide acetyl-serine-aspartyl-lysine-proline improves skin flap survival and accelerates wound healing. Wound Repair and Regeneration, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F., & Carde, P. (1998). The tetrapeptide acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatide) protects from doxorubicin-induced toxicity: improvement in mice survival and protection of bone marrow stem cells and progenitors. Kraujas, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Investigating the antifibrotic potential of N-acetyl seryl-aspartyl-lysyl-proline sequence peptides. Klinikinė ir eksperimentinė farmakologija ir fiziologija, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Thymosin beta 4 and its N-terminal tetrapeptide, AcSDKP, inhibit proliferation, and induce dysplastic, non-apoptotic nuclei and degranulation of mast cells. Chemija ir biologinė įvairovė, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/