Ac-SDKP (N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolin): fibrilace orgánů, ochrana tkání a experimentální studie

Ac-SDKP (N-acetyl-seryl-aspartyl-lysylo-prolin) je endogenní tetrapeptid vznikající z většího proteinu, tymozinu beta-4. V důsledku enzymatického zpracování tymozinu β4 vzniká několik fragmentů, včetně Ac-SDKP [1]. Tento sloučenina vzbuzuje zájem vědců kvůli protizánětlivému účinku pozorovanému v experimentálních modelích poškození tkání. Jeho biologická trvanlivost je omezená rychlým rozpadem enzymem konvertujícího angiotenzin (ACE). V studiích bylo prokázáno, že inhibitory ACE mohou zvýšit koncentraci cirkulujícího Ac-SDKP až pětkrát, což má význam pro studium jejich účinku na tkáně [1].

Původně se studie zaměřovala na schopnost Ac-SDKP udržovat tvorbu krevních progenitorových buněk v relativním klidu. Později byla oblast výzkumu rozšířena o procesy zánětlivé, regeneraci vnějšího obalového materiálu a regeneraci tkání. V několika předklinických modelích poškození orgánů vědci pozorovali omezení patologického hromadění komponent vnějšího obalového materiálu. Tento peptid snižoval například aktivitu signálů, které stimulují buňky k nadměrné tvorbě kolagenu, hlavního proteinu tkáně vrásek, a také omezoval přeměnu fibroblastů na buňky odpovědné za tvorbu vrásek.

V předklinických studiích týkajících se ledvin Ac-SDKP také vykazoval příznivé změny parametrů funkce orgánu a ztluštění tkáně. Pozoroval se omezení nadměrného příchodu imunitních buněk a oslabení zánětlivých procesů, které mohou zesilovat poškození. Celkově ukazují výsledky na roli Ac-SDKP jako endogenního regulátora cévních vazebných receptorů. Avšak pozorování pocházející z buněčných a zvířecích studií nepotvrzují klinickou účinnost ani bezpečnost používání u lidí.

Studie kardiovaskulárního systému: ztluštění srdce, zánět a poškození cév

Experimentální kardiologické studie analyzovaly Ac-SDKP jak v akutních poškozeních srdečního svalu, tak v chronickém remodelování jeho struktury. V myším modelu infarktu srdeční Nakagawa a kolegové podávali Ac-SDKP v dávce 1,6 mg/kg/den pomocí malé podkožní pumpy. Podíl prasklin v srdeční stěně se snížil z 51,0% na 27,3% a úmrtnost z 56,9% na 31,8%. Badatelé spojili tyto výsledky s menším přívodem prozapalných makrofagů M1 bez odpovídajících změn v počtu makrofagů M2 nebo neutrofilů. Také bylo pozorováno omezení aktivity metaloproteinázy MMP-9, enzymu účastnícího se odbourávání srdečních tkání po infarktu, zatímco marker MPO zůstal nezměněn. To může naznačovat selektivní účinek na konkrétní mechanizmy poškození [2].

V studiích týkajících se ztluštění srdeční tkáně způsobeného dlouhodobým hypertenzí prokázali Peng a kolegové, že Ac-SDKP může redukovat již existující fibrózu srdeční tkáně a nejen omezovat její vznik. U králíků s trvalým hypertenzí snižuje podkožní podávání Ac-SDKP v dávkách 400–800 µg/kg denně po dobu osmi týdnů obsah kolagenu v srdci v závislosti na dávce. Vyšší dávka byla spojena s silnějším účinkem. Systolický tlak se nezmenšil a normální reakce na angiotenzin I a bradykinin zůstaly zachovány. To znamená, že pozorované změny nelze vysvětlit pouze snížením tlaku. Koncentrace Ac-SDKP v krvi se zvýšila od dvou do pětikrát, zatímco hladiny TGF-β a CTGF, významných mediátorů ztluštění, se snížily [3].

Po infarktu srdeční zánět a ztluštění mohou vést k progresivní poruše orgánu. Yang a kolegové zkoumali Ac-SDKP jak v rané fázi k omezení poškození, tak v pozdější fázi k posouzení možnosti zvrácení změn. V obou případech se celková hladina kolagenu v srdci snížila. V profilaci skupina zaznamenala pokles například z přibližně 24 na 15 µg/mg, zatímco v skupině zkoumající zvrácení změn došlo k poklesu z přibližně 23 na 14 µg/mg. Počet makrofágů se v obou skupinách snížil přibližně o třetinu, zatímco počet buněk pozitivních na TGF-β také klesl. Tyto změny se objevily bez snížení krevního tlaku ani bez snížení velikosti srdce. V profilaci skupina nezaznamenala jednoznačnou zlepšení kontraktilní síly. Přestože se snížení zánětu a ztluštění ukázalo jako prospěšné, struktury srdečního svalu v zkoumaném modelu zůstaly podobné [4].

Ac-SDKP může také podílet na dodatečných ochranných účincích pozorovaných při užívání inhibitorů ACE. Rasoul a kolegové porovnali model hypertenze vyvolaného angiotenzinem II u skupin užívajících kaptopryl nebo Ac-SDKP v dávkách 400–800 µg/kg/den. Tento peptid mnohonásobně zvyšoval svou koncentraci v krvi a vyvolával řadu účinků podobných účinkům inhibitorů ACE: omezoval nadměrnou proliferaci buněk v srdci, snižoval počet makrofágů a tukových buněk, snižoval hladiny TGF-β a CTGF a omezoval ukládání kolagenu. Tyto účinky se objevovaly bez snížení krevního tlaku ani snížení hypertrofie srdce, což naznačuje přímý účinek na tkáň srdečního svalu [5].

Rhaleb a kolegové studovali Ac-SDKP v kulturách srdečních fibroblastů potkanů za použití koncentrací od 0,05 do 100 nmol/l. Zjistili dva významné efekty: omezení proliferace buněk měřené na základě syntézy DNA na hodnoty blízké normálu při přibližně 1 nmol/l a snížení produkce kolagenu podpořeného endotelinem-1, silným fibronektinovým mediátorem. Nižší koncentrace vykazovaly vyšší účinnost při omezení syntézy kolagenu, zatímco velmi vysoké byly méně aktivní. Mechanismus se zdal příliš odvíjet od oslabení signalizace MAPK/ERK p44/42. Dále známý inhibiční lék MAPK vyvolal podobný efekt. Výsledky jsou v souladu s omezením proliferace fibroblastů a syntézy matice modulací cévních regulujících proteinů [6].

V dalších studiích bylo prokázáno, že Ac-SDKP může omezit poškození srdce způsobené galektynou-3. Liu a kolegové podávali dospělým prasatám galektynu-3, proteinu podporujícímu zánět a tvorbu tkáně v tkáních, po dobu čtyř týdnů. U zvířat bylo pozorováno zvýšené množství zánětlivých buněk, zhrubnutí stěn srdce, zesílení vaskulárního a mezokarditálního zhrubnění, zvýšení aktivity TGF-β/Smad3 a oslabení kontraktilních funkcí při echokardiografickém vyšetření. Přidání Ac-SDKP v dávce 800 µg/kg/den zabránilo většině těchto změn. Zmenšilo se množství zánětlivých buněk, zhrubnutí a zpevnění stěn srdce a zlepšily se parametry jeho funkce. Výsledky naznačují účast blokování TGF-β/Smad3 a omezení zánětu [7].

Rhaleb a kolegové také vyhodnotili účinek Ac-SDKP v klasickém modelu arteriovenózního hypertenze u potkanů, známém jako model dvou ledvin a jednoho uzávěru (2K1C). Peptyd byl podáván subkutánně v dávce 400 µg/kg/den. Navzdory udržovanému zvýšenému tlaku v cévách a nadměrnému srdečnímu rozvoji byl pozorován významný pokles počtu zánětlivých buněk a buněk proliferujících v srdečním svalu. Podíl intersticiálního kolagenu se snížil z přibližně 10,1% u potkanů s hypertenzí na přibližně 5,4%, což je úroveň téměř totožná s úrovní u zřejmě operovaných zvířat (přibližně 5,3%). To znamená, že regenerace tkání se změnila navzdory přetrvávajícímu tlakovému zátahu, což podporuje hypotézu mechanismu nezávislého na snížení tlaku [8].

V přehledu tematických studií Cavasin a spolupracovníci se zabývali vzájemnými vlastnostmi timozinu β4 a jeho fragmentu Ac-SDKP. Timozin β4 účinkuje na migraci a životní cyklus buněk, zatímco Ac-SDKP vykazuje protizánětlivou aktivitu v modelích hypertenze. V studiích srdečního infarktu peptid omezoval zánět, snižoval ztluštění a zároveň podporoval angiogenii, což bylo pozorováno jak in vivo, tak ex vivo. V modelích myší také snižoval riziko prasknutí srdeční stěny. Součinnost těchto účinků naznačuje, že Ac-SDKP může být zodpovědný za některé biologické účinky připisované timozinu β4. Autori však zdůraznili potřebu klinických studií u lidí [9].

Ac-SDKP byl také zkoumán z hlediska vlivu na enzymy rozkládající látky z vnějšího obalového materiálu buněk. U fibroblastů srdce dospělých potkanů Rhaleb a kolegové prokázali, že interleukina 1β (IL-1β) výrazně zvyšuje expresi metaloproteináz MMP-2, MMP-9 a MMP-13. Tyto enzymy jsou zapojeny do degradace vnějšího obalového materiálu a mohou přispívat k nepříznivé regeneraci tkání. Ac-SDKP nezměnil základní expresi MMP, ale silně potlačil růst vyvolaný IL-1β. Současně zvyšoval expresi přirozených inhibitorů metaloproteináz, TIMP-1 a TIMP-2, a tím obnovoval vyváženější regulaci regenerace vnějšího obalového materiálu.

Peptid také omezoval aktivaci NF-κB a ERK/MAPK, dvou důležitých cévních spojení spojených s zánětem a proliferací. Co je důležité, IL-1β v tomto modelu nezvýšila produkci kolagenu a Ac-SDKP také neovlivnil jeho syntézu. To naznačuje selektivní regulaci regenerace tkání a ne obecné potlačování syntézy kolagenu. Výsledky naznačují možnou roli Ac-SDKP v udržování rovnováhy procesů spojených s extracelulární maticí [10].

Nakagawa a spolupracovníci zkoumali Ac-SDKP u potkacího modelu srdečního svalstva závislého na lymfocytech T. U imunizovaných potkanů Lewis získala peptidová imunizace zachování jak kontraktilní, tak relaxační funkce srdce. Rovněž byla omezena hypertrofie orgánu, tvorba tkáně vlnité a poškození její struktury. Histologická analýza prokázala menší počet leukocytů odolnosti, včetně makrofágů, dendritických buněk a lymfocytů T.

Také se snížily hladiny zánětlivých mediatorů, včetně IL-1α, TNF-α, IL-2 a IL-17, chemokin CINC-1 a IP-10, adheziových molekul ICAM-1 a L-selektiny a metaloproteináz. Ac-SDKP však neměnil hladinu autoprotilátek proti miozinu ani odpověď T-lymfocytů na antigen. To naznačuje, že pozorovaný ochranný účinek vyplýval především z omezení rekruťace imunitních buněk a zánětlivých mediatorů, a ne z změny produkce autoprotilátek nebo aktivace T-lymfocytů [11].

González a jeho kolegové studovali Ac-SDKP u potkanů, kterým po dobu tří týdnů podávali angiotenzin II. Systolický tlak a hypertrofie srdce zůstaly zvýšené jak u zvířat léčených, tak u kontrolních skupin. Ac-SDKP však zabraňoval zvýšení celkové hladiny kolagenu a jeho ztvrdnutí. Mechanismus zahrnoval blokování expresi mRNA oxidační lize (LOX) a proteinu LOXL1, tedy enzymů účastnících se tvorby přímých vazeb kolagenu a utužování vláknitých tkání.

Kromě toho se snížila exprese TGF-β, aktivace NF-κB a příchod CD4⁺ a CD8⁺ T-buněk a CD68⁺ makrofágů do srdečního svalu. Příchod CD4⁺ buněk koreloval s expresí LOXL1, což naznačuje mechanismus související s interakcí mezi aktivitou imunitních buněk a stálostí tkáně. Výsledky ukazují protizánětlivý a protizánětlivý účinek nezávislý na změně tlaku v cévní soustavě [12].

Peng a kolegové analyzovali vliv Ac-SDKP na časné a pozdní stádia po infarktu srdeční u myší C57BL/6J. Zvířata dostávala 1,6 mg/kg/den. V prvním týdnu se snížila četnost smrtelných ruptur srdečního svalu, exprese ICAM-1, příchod makrofágů, aktivita enzymů degradujících želatinu, hladina p53 a smrt kardiomiocytů. Současně na okraj poškozeného oblasti vzrostla četnost drobných krevních cév, což naznačovalo zintenzivnění angiogeneze.

V pátém týdnu bylo pozorováno nižší obsah kolagenu mezobuněčného, lepší zachovaná struktura srdce, nižší hodnoty stresového markeru retikulární endoplazmatické membrány včetně CHOP a udržení hladiny SERCA2, bílkoviny důležité pro regulaci vápníku v kardiomyocytech. Celková funkčnost srdce byla lepší. Studie ukazuje na změny jak v raném poškození, tak v pozdější obnově buněk [13].

Castoldi a kolegové hodnotili Ac-SDKP u potkacího modelu cukrovky. Dva měsíce po vzniku cukrovky bylo zahájeno osmitýdenní podávání peptidu v dávce 1 mg/kg/den pomocí minipump. U potkanů s cukrovkou došlo k hyperglikémii, zesílenému myokarditidu a endoteliitidě a k zvýšeným hladinám TGF-β1 a fosforylovaných proteinů Smad2/3. Ac-SDKP snižoval oba typy myokarditidu a omezoval signalizaci TGF-β/Smad, a to i u zvířat léčených ramiprilem, inhibitorem ACE.

Echokardiografické vyšetření prokázalo poruchy kontrakce a relaxace srdce spojené s diabetem. Inzulín a ramipril obnovovali obě funkce, zatímco Ac-SDKP částečně zlepšoval relaxaci. Výsledky ukazují protinádorové účinky, které byly doprovázeny mírnou funkční úpravou v tomto modelu [14].

Sharma a jeho spolupracovníci zkoumali ochranu koronárních cév před poškozením způsobeným zářením. V krysím modelu expozice kardiální kavitace Ac-SDKP podávali subkutánně po dobu 18 týdnů. Záření snižovalo krevní oběh při spánku, vedlo k úmrtí endotelných buněk, zvyšovalo zhrubnutí cév a narušovalo spojení proteinů, včetně klaudinu-1 a JAM-2.

Ac-SDKP obnovoval krevní tok směrem k normálním hodnotám, prospíval zachování endotelných buněk, snižoval zhrubnutí a zlepšoval organizaci endotelných spojení. Laboratorní studie prokázaly, že peptid pronikl do endotelných buněk a omezoval tvorbu reaktivních forem oxidu uhelnatého po ozařování. U živých zvířat se značovaný peptid během několika hodin hromadil v endotelných buňkách. Výsledky ukazují na ochranu cév, menší oxidační poškození a lepší zachování mikrocirkulace v tomto modelu [15].

V studiích na lidských srdečních fibroblastech byly buňky podrobeny předchozí expozici Ac-SDKP v koncentraci 10 nM a následně působení tunicamycinu (0,25 µg/ml), který vyvolává stres endoplazmatického retikula. Tento peptid omezoval nadměrnou produkci kolagenu v stresovaných buňkách. Tento účinek byl spojován se snížením stresové odpovědi, snížením aktivity CHOP a NF-κB a snížením hladiny IL-6.

Po genetickém snížení exprese CHOP Ac-SDKP nadále omezoval aktivitu NF-κB a expresi kolagenu typu I jak na úrovni proteinu, tak na úrovni mRNA. Výsledky podporují hypotézu, že peptid může omezovat nadměrnou produkci složek vláknitých tkání za stresových podmínek buněk [16].

V lidských endotelných buňkách stimulace TNF-α vedla k výraznému zvýšení expresí ICAM-1, což je adheziální molekula zapojená do přichycování leukocytů k povrchu cév. První expozice Ac-SDKP snižovala hladinu ICAM-1 v závislosti na dávce. Mechanistická analýza ukázala, že inhibice řetězce IKK → IκB → NF-κB hraje ústřední roli v aktivaci zánětlivých genů. Dva další kanály, p38 MAPK a ERK, zůstaly nezměněny. To naznačuje selektivní účinek Ac-SDKP na signalizaci NF-κB v endotelných buňkách. Tyto výsledky jsou však molekulární, nikoli potvrzení klinické ochrany cév [17].

V krysím modelu hypertenze vyvolané angiotensinem II Ac-SDKP omezoval ukládání kolagenu v aortě a snižoval expresi mRNA kolagenu typu I a III. Také byla pozorována nižší aktivita proteinové kinázy C, menší oxidační stres, omezení expresi ICAM-1 a menší příchod makrofágů do stěny cév. Zmenšila se aktivita TGF-β1 a Smad2, zatímco hladina Smad7, přirozeného inhibitoru tohoto cesty, vzrostla. Systolický tlak a tloušťka aorty zůstaly zvýšené, což naznačuje, že pozorované změny v stěně cév nebyly důsledkem snížení tlaku [18].

V dalším modelu expozice klatce prsní u potkanů 18týdenní podávání Ac-SDKP prospělo zachování srdečních funkcí, omezilo hromadění extracelulární matrice a fibrilaci, snížilo průtok makrofágů a úmrtí srdečních buněk. Také klesly hladiny a uvolňování Mac-2 (galektyny-3), proteinu makrofágů spojeného s fibrilací. Ac-SDKP byl pozorován uvnitř makrofágů poblíž jaderné jámy a jeho přítomnost omezovala radioterapii vyvolanou uvolňování Mac-2. Když fibroblasty neobsahovaly Mac-2, radioterapie vyvolávala mnohem slabší signály podporující fibrilaci. Tyto studie poskytují předklinické důkazy o omezení zánětlivé a fibrilace tkáně po expozici k radioterapii [19].

Studie dýchacího systému: zhrubnutí plic a zánětlivé poškození

Porovnávací studie týkající se plic analyzovala rozdíly mezi Ac-SDKP a jeho předchůdkářem, tymozinem β4. V laboratorních experimentech na lidských plicních buňkách pocházejících od osob s idiopatickou fibrózou plic (IPF) Ac-SDKP omezoval nadměrnou proliferaci buněk a snižoval expresi dvou markerů fibrózy podněcovaných TGF-β: α-SMA a kolagenu.

V myším modelu poškození plic vyvolaného bleomycinem tymozin β4 snižoval zánět a předčasné zhrubnutí v sedmém dni, ale nezabránil zhrubnutí v pozdějších fázích, mezi 14. a 21. dnem. Výsledky naznačují, že Ac-SDKP může bránit základním etapám tvorby tkáně v buňkách a potenciálně vykazovat trvalejší protizhrubnutí než jeho prekurzor. Tato hypotéza však vyžaduje další potvrzení [20].

V rámci studií byly analyzovány role KIF3A a β-katekinového kanálu. Úrovně KIF3A byly sníženy jak v vzorcích pacientů, tak v plicích králíků. Obnovení aktivity KIF3A snižovalo signalizaci β-katekinu a jeho dalších mediátorů MRTF-A a SRF, což omezovalo přechod buněk sliznice do miofibroblastů (EMyT), což je proces spojený s fibrózou.

Ac-SDKP zvyšoval aktivitu KIF3A a snižoval signalizaci β-catenin/MRTF-A/SRF. Při umělém omezení exprese KIF3A se pozitivní účinky Ac-SDKP ztratily. To naznačuje, že KIF3A je nezbytnou součástí zkoumaného mechanizmu protizánětlivého [21].

V dalším studiu spojení Ac-SDKP s endotelním aktivním peptidem (VIP) omezovalo změny připomínající chronickou obstrukční plicní nemoc (COPD) vyvolanou tabákem u myší. Snižovaly se markerové změny oxidačního poškození, včetně MDA, obsahu hydroxyproliny spojené s kolagenem a hladiny TGF-β. Současně klesaly koncentrace zánětlivých cytokinů TNF-α, IL-1β a IL-6 a aktivita dismutázy superoxide dismutase (SOD) rostla. Histologické vyšetření prokázalo méně zánětu a slabší strukturu plic po poškození způsobeném kouřením [22, 23].

Ac-SDKP také vykazoval aktivitu jak v raném, tak v pozdějším stádiu fibrózy plic vyvolané bleomycinem. U myší CD-1 podávání 0,6 mg/kg subkutánně začaté v den 0 nebo 7 zlepšovalo přežití a omezovalo ztrátu tělesné hmotnosti spojenou s bleomycinem. V plicích bylo pozorováno menší zánět, méně pohlcujících imunitních buněk, lépe zachovaná struktura tkání a slabší fibróza. Zmenšovalo se barvení kolagenu a množství rozpustného kolagenu. Klesaly také hladiny IL-17, TGF-β a α-SMA, což naznačovalo menší počet miofibroblastů. Tyto účinky se objevovaly jak při včasném, tak pozdním zahájení podávání [24].

V křečkovém modelu Ac-SDKP omezoval fibrózu působením na genomový řetězec P-HSP27/SNAI1. Ac-SDKP zvyšoval hladiny P-HSP27, SNAI1, α-SMA a kolagenu typu I a III v plicní tkáni. Podávání Ac-SDKP před expozicí nebo po nástupu onemocnění snižovalo hladiny všech těchto markerů a počet buněk současně pozitivních na P-HSP27 a α-SMA. U zdravých kontrolních zvířat peptid nezměnil expresi těchto proteinů, což naznačuje vazbu pozorovaných účinků na stav nemocných tkání [25].

Metaanalýza zahrnující 18 randomizovaných studií na zvířatech provedených v letech 2008–2021 zahrnovala celkem 428 zvířat. Ve srovnání s neléčenými modely Ac-SDKP snižoval několik parametrů ztluštění: α-SMA (standardizovaná střední odchylka [SMD] −2,44), typ I kolagenu (SMD −5,36), typ III kolagenu (SMD −3,07), TGF-β (SMD −2,88) a plochu plicních uzlin (SMD −1,80). Pro všechny tyto parametry byla uvedena hodnota p < 0,001.

Významnou změnou byla také změna hydroxyproliny, markeru obsahu kolagenu (SMD 7,62; 95% CI 4,90–10,33; p < 0,001), což naznačovalo vliv na metabolismus kolagenu. Celkové výsledky zvířecích studií podporují přítomnost protinádorového signálu v zkoumaných modelích, ale podléhají metodickým omezením příslušným pro metaanalýzy předklinických [26].

V jiném experimentu byly krysám podávány dávky křemíku s cílem vyvolat fibrilaci a následně byla v profilaxickém režimu nebo po rozvinutí změn podávána dávka Ac-SDKP ve výši 800 µg/kg/den. Ve srovnání s kontrolními skupinami byly hladiny proteinů TGF-β1 a CTGF v plicích výrazně nižší a činily přibližně 0,244 ± 0,016 a 0,241 ± 0,017 respektive. Také hladiny mRNA byly sníženy, zejména CTGF (p < 0,05). V profilaxní skupině byly jak protein, tak mRNA TGF-β1 významně nižší než v osmihodinovém modelu křemíku. Histologické vyšetření potvrdilo menší fibrilaci [27].

V dalším modelu ac-SDKP omezoval akumulaci kolagenu a zlepšoval strukturu plic. Psi byli podáváni peptidem po poškození nebo 48 hodin před expozicí křízmu. V léčebných skupinách se v porovnání s modely ac-SDKP plocha uzlíků snížila na 84,28% a 67,93%, hladina hydroxyproliny na 70,89% a 58,18%, kolagenu typu I na 71,08% a 58,13% a kolagenu typu III na 80,13% a 70,70% v porovnání s referenčními hodnotami v jednotlivých časových bodech.

V profilaktických skupinách ve srovnání s osmihodinovým modelem křemice klesla plocha uzlin na 61,13%, hydroxyprolin na 60,27% a typ I a III kolagenu na 40,13% a 65,77%. Histologické barvy HE a VG prokázaly mírnější fibrilaci. Výsledky potvrzují omezení jak obsahu kolagenu, tak viditelných fibrilních změn v zkoumaném modelu [28].

Studie expozice křemíku zahrnovaly také plíce a kosti. V modelích krysích a buněčných studiích křemík aktivoval TLR4 a RANKL, což zhoršovalo zánět plic a tvorbu osteoklastů odpovědných za resorci kostí. Ac-SDKP blokoval signalizaci TLR4 a RANKL, prospíval zachování plicní elastiny, omezoval zánět a aktivaci makrofágů. V kostní tkáni blokoval růst osteoklastů a pomáhal udržet hustotu a mikroarchitekturu kostí. Výsledky ukazují na souběžné ochranné změny v plicích a kostní tkáni u experimentálních modelů poškození spojeného s křemíkem [29].

Ac-SDKP byl také studován z hlediska vlivu na diferencování fibroblastů v miofibroblasty. TGF-β1 stimuluje plicní fibroblasty k tomuto přeměnění a zvyšuje produkci kolagenu. Při podávání Ac-SDKP před expozicí TGF-β1 se hladiny α-SMA a kolagenu snížily, stejně jako hladiny TGF-β1 a jeho receptoru.

U potkanů s poškozením plic způsobeným křemítem podávání peptidu před expozicí nebo po ní snižovalo hladiny TGF-β1, signalizace RAS a aktivity SRF a snižovalo počet miofibroblastů pozitivních na α-SMA v plicních uzlech. K tomu docházelo k menšímu ukládání kolagenu [30, 31].

V studiích na buňkách sliznice plic byla analyzována transsliziková transmenšína. Při působení křemíku a TGF-β1 se hladiny markerů sliznice, jako je E-kadherin a SP-A, snižovaly, zatímco hladiny mezenterických markerů a fibrilace rostly, včetně wimentinu, α-SMA a kolagenu typu I a III.

Ac-SDKP omezoval tyto změny. Buňky více vykazovaly plášťové vlastnosti, hladiny markerů ztluštění klesaly a aktivita proteinu TGF-β1/ROCK1 se oslabovala. To naznačuje lepší zachování struktury pláště plicních pľúc v podmínkách experimentálního poškození [32].

Ac-SDKP také ovlivnil stres endoplazmatického retikula a smrt buněk plicních pľúc. Expozice křemíku zvyšovala hladiny GRP78, fosforylovaných PERK a eIF2α, CHOP a caspase-12, což bylo doprovázeno silnou smrtí buněk. V přítomnosti Ac-SDKP, stejně jako při použití inhibitoru stresu retikulum 4-PBA, tyto markerové látky klesly. V laboratorních experimentech a u potkanů byla také snížena smrt buněk a obsah kolagenu v plicích. Výsledky naznačují, že oslabení PERK/eIF2α/CHOP a aktivity caspase-12 může být součástí ochrany pláště a snížení fibrózy [33].

Studie ledvin: zvrásnění a filtrace

Nakagawa a spolupracovníci (2017) v modelu myší NZBWF1 predisponovaných k zánětu prokázali, že Ac-SDKP omezoval poškození ledvin a zhoršení funkčních parametrů ledvin bez snížení arteriálního tlaku při kontrakci. Hluboký krevní tlak, albuminurie a předčasná smrt se u léčených zvířat objevovaly později, ale tyto rozdíly nebyly statisticky významné [34].

Worou a kolegové (2015) testovali slepice Dahlové citlivé na sůl, kterým podávali Ac-SDKP po dobu šesti týdnů v dávkách 800 nebo 1600 µg/kg/den. Dieta bohatá na sůl nadále zvyšovala krevní tlak, ale v ledvinách bylo pozorováno méně zánětu, menší zhrubnutí a lepší zachování chrupavky. Pouze vyšší dávka snižovala albuminuriu u slepic citlivých na sůl. V odolnější linii SS13BN obě dávky zabránily ztrátě albuminu a strukturálním poškozením. Výsledky naznačují, že alespoň část účinků na ledviny byla nezávislá na snížení krevního tlaku [35].

Liao a kolegové (2015) zkoumali Ac-SDKP u myší predisponovaných k zánětu po dobu 20 týdnů. U zvířat, kterým byl peptid podáván, byly pozorovány lepší funkce ledvin, přestože hladiny autoprotilátek spojených s zánětem se nezměnily. V ledvinách se objevovalo méně nadužívajících se makrofágů a T-buněk. Snížily se hladiny cytokinů a chemokinů a aktivace faktorů C5–9 a mediátorů RANTES, MCP-5 a ICAM-1 byla omezená. K tomu docházelo zároveň s zachováním filtrace a menšími mikroskopickými poškozeními [36].

V studii s názvem DOCA-induced hypertension: reduction of renal fibrosis, matrix deposition in glomeruli and influx of monocytes and macrophages (2011) podávali W. Ac-SDKP myším v dávce 800 µg/kg/den po dobu 12 týdnů. Navzdory trvalému hypertenzi se snižovala fibróza ledvin, ukládání matice v tubulích a příchod monocytů a makrofágů. Albuminurie se snížila z 41 ± 5 µg na 13 ± 3 µg na 10 g tělesné hmotnosti za den, čímž se dosáhlo hodnot podobných kontrolním hodnotám. Částečně se také obnovil level nefryny, významného proteinu filtrační bariéry. Výsledky ukazují na ochranu filtrační bariéry a omezení fibrózy bez ohledu na tlak v cévní síti [37].

Shibuya a kolegové (2005) analyzovali Ac-SDKP u myší db/db s diabetem typu 2. Osemtýdenní podávání pomocí minipump zvýšilo koncentraci peptidu v plazmě přibližně třikrát bez změny glykemie. Zmenšení objemových bloku, nadměrné ukládání mezangiovní matrice a extracelulárních látek se omezilo. Koncentrace kreatininu v plazmě se přibližovala k normálním hodnotám. Albuminurie se také snížila, ale rozdíl nebyl statisticky významný. Mechanicky Ac-SDKP blokoval přenos Smad3 do buněčného jádra, což omezilo signalizaci TGF-β/Smad spojenou s fibrózou [38].

Castoldi a kolegové (2013) testovali krysíky s cukrovkou, kterým podávali Ac-SDKP v dávce 1 mg/kg/den, ramipril v dávce 3 mg/kg/den, oba léčiva společně nebo kontrolní léčbu. U neléčených zvířat došlo k hyperglikémii, zvýšené albuminurii, ztluštění ledvin a snížení množství nefryny v blátkách. Samotný Ac-SDKP omezoval ztluštění, ale nezlepšoval albuminurii. Ramipril snižoval jak albuminurii, tak ztluštění a obnovoval hladinu nefryny. Kombinace Ac-SDKP s ramiprilem silněji omezovala ztluštění než samotný ramipril, ale nepřinesla žádnou další úpravu albuminurii. Výsledky ukazují na dodatečný protizánětlivý účinek v zkoumaném modelu, aniž by došlo k dalšímu zlepšení vylučování albuminu [39].

Zhang a kolegové (2022) vyvinuli hydrogel s dvojitou sítí inspirovaný biologickými principy, složený z želatiny a kurkuminového komplexu s hořčíkem, pokrytý DOPA a funkčně upravený fixovaným Ac-SDKP. Systém byl navržen tak, aby omezil problémy spojené s rozpustností, vstřebáváním a stabilitou volných látek. Po aplikaci in vivo v ledvinách potkanů snižoval hydrogel lokální zhrubnutí, podporoval angiogenézu a stimuloval tvorbu nových ledvinových kanálků. Materiálové studie potvrdily odpovídající poréznost, mechanickou pevnost a biokompatibilitu, což podporuje další výzkum tohoto řešení [40].

Zuo a spolupracovníci (2013) porovnali Ac-SDKP, tymozin β4 a tymozin β4 v kombinaci s oligopeptidázovým inhibitorem prolinovou (POP) u divokých a bez PAI-1 myší s jednostrannou stálostí močového měchýře. Ac-SDKP konsekventně snižoval tvorbu tkáně v obou genotypech. Zaznamenali menší množství kolagenu a fibronektyny, méně aktivních miofibroblastů a makrofágů a slabší signální signály podporující tvorbu tkáně. Porovnávací studie také poukazuje na odlišné účinky tymozinu β4 v závislosti na etapě onemocnění [41].

Wang a kolegové (2010) prokázali, že Ac-SDKP omezoval zánět a fibrózu ledvin způsobené nedostatečnou propustností. U králíků s jednostrannou nedostatečností močovodu po 14 dnech podávání peptidu došlo ke snížení fibrózy cévní a mezobuněčné tkáně a zánětlivých změn patrných histologicky. Pozorovala se menší produkce makrofágů ED-1 a nižší hladiny MCP-1, NF-κB, α-SMA a TGF-β1 v buňkách cév a mezobuněčné tkáni. Klesla také exprese genů MCP-1 a TGF-β1, což naznačovalo omezení jak rekrytí zánětlivých buněk, tak aktivace extracelulární matrice [42].

Liao a kolegové (2010) podávali Ac-SDKP v dávce 800 µg/kg/den prasatům po odstranění 5/6 hmotnosti ledvin, a to začátkem podávání před poškozením nebo po něm. Navzdory přetrvávajícímu hypertenzi a nadměrnému roztažení levé komory srdce peptid snížil albuminuriu, omezil příchyt makrofágů a snižoval obsah kolagenu v ledvinách v obou skupinách. Úbytek nefryny v blátnicích byl také částečně omezen nebo zvětšen. Výsledky naznačují zlepšení integrity filtrace bariéry jak v rané, tak v pokročilejší fázi poškození, zejména prostřednictvím protizánětlivého a protizánětlivého účinku, a nikoli prostřednictvím tlaku [43].

Peng a kolegové (2001) testovali krysí populace po odstranění jedné ledviny, kterým po dobu šesti týdnů podávali aldosteron a soli. Tato intervence zvyšovala krevní tlak, způsobovala zvětšení srdce a ledvin a zvyšovala obsah kolagenu a markeru proliferace buněk PCNA. Ac-SDKP, zejména při vyšší dávce 800 µg/kg/den, významně snižoval obsah kolagenu a PCNA v závislosti na dávce. Krevní tlak a zvětšení orgánů však zůstaly nezměněné, přičemž nižší dávka 400 µg/kg/den přinášela částečné účinky [44].

Omata a spolupracovníci (2006) testovali potkany s onemocněním ledvin způsobeným protilátkami proti základní membráně tubulů (anti-GBM). Podávání Ac-SDKP v dávce 1 mg/kg/den bylo zahájeno 14 dní po nástupu onemocnění a pokračovalo po dobu čtyř týdnů. Ve srovnání s neléčenými zvířaty bylo pozorováno menší vylučování proteinu močí, nižší koncentrace močoviny a kreatininu v plazmě a lepší klírensy kreatininu. Studie tkání prokázala menší ztluštění tubulů a zhrubnutí mezobuněčného vlákna. Snížené byly hladiny fibronektyny, kolagenu a TGF-β1 a signalizace Smad2, zatímco Smad7 vzrostla. Také se omezilo hromadění makrofágů v tkáni ledvin [45].

Nagai a kolegové (2014) v modelích cukrovky prokázali, že Ac-SDKP může omezit zhrubnutí ledvin tím, že blokuje průchod mezodermo-mezenchymatického (EndMT), tedy přeměnu buněk mezodermu na buňky s vlastnostmi podporujícími zhrubnutí. Tento peptid obnovuje aktivitu přirozených ochranných tras, včetně let-7 microRNA a FGF receptor signaling, které byly u diabetu oslabeny. Kombinace Ac-SDKP s inhibitorem ACE poskytovala větší ochranu ledvin než samotná inhibice ACE v zkoumaném modelu [46].

Srivastava a kolegové (2020) porovnali inhibitory ACE, blokátory receptoru angiotensinu (ARB), Ac-SDKP a jejich kombinaci u myší s cukrovkou. Výzkumníci také blokovali přirozený vznik Ac-SDKP pomocí oligopeptidázy prolinové inhibítoru (POPi). Výsledky naznačovaly, že Ac-SDKP spolu s inhibitory ACE přispívá k příznivým účinkům těchto léků tím, že mění metabolismus ledvin. Úroveň SIRT3 se obnovila, mitochondriální oxidace mastných kyselin se zlepšila a nesprávné využívání glukózy se snížilo.

Zabránění přirozenému vzniku Ac-SDKP snižovalo jeho koncentraci, urychlilo fibrulaci a narušovalo metabolickou rovnováhu. Inhibitory ACE oproti ARB částečně obnovovaly hladinu peptidu a snižovaly fibrulaci. Jak inhibitory ACE, tak Ac-SDKP omezovaly mezenchymální přechody a snižovaly obsah kolagenu typu I a fibronektynu v ledvinách diabetiků [47].

V klinických studiích byl také analyzován analog Ac-SDKP jako potenciální prostředek chránící krevní buňky během chemoterapie. Carde a kolegové (1992) hodnotili Seraspenide v I. a II. fázi klinického hodnocení s dvojitým slepem a systémem opakovaných dávek, zahrnujícím 53 pacientů léčených cytarabinom nebo ifosfamidem. Ve srovnání s kontrolními obdobií u osob užívajících Seraspenide bylo pozorováno lepší zachování počtu periferních krvetvorných buněk v podmínkách toxického účinku chemoterapie. Přípravek byl dobře tolerován a nebyly hlášeny žádné nežádoucí účinky. Výsledky vedly k dalším studiím ochrany krevních buněk, ale nepotvrdily rutinní klinickou účinnost [48].

V samostatném studiu nebyla prokázána ochrana před hematologickou toxicitou chemoterapie. Cappelaere a spolupracovníci (1995) zkoumali 84 pacientů s pokročilými benigními neoplaziemi, kteří dostávali karboplatin a kontinuální infuzi 5-fluorouracilu a placebo nebo Goralatide (Ac-SDKP) v dávkách 12,5 nebo 62,5 µg/kg/den. V 221 cyklech chemoterapie nebyla pozorována žádná rozdílnost mezi skupinami v nejnižších hodnotách počtu leukocytů, granulocytů, krevních destiček ani hemoglobinu. Čas trvání toxicity se také nezměnil. Avšak u skupin Goralatide docházelo k častějšímu výskytu anémie spojené s chemoterapií a byla spojena s častější anémií a limfopenií [49].

Nitta a kolegové (2016) studovali Ac-SDKP v modelích cukrovky typu 1 a 2. Morky CD-1 s cukrovkou vyvolanou streptozotocínou a db/db dostávaly perorální Ac-SDKP, imidapryl, inhibitor ACE nebo oba látky zároveň. Sam Ac-SDKP i kombinovaná léčba snižovala ztuhlost šlach a fibrózu meziobratlových vazů. Koncentrace cystatiny C v plazmě, zvýšená při poškození ledvin, se blížila normálním hodnotám.

Všechny intervence obnovily hladiny protilátkových mikrolipidových mikroRNA miR-29 a let-7, přičemž největší zlepšení bylo pozorováno v skupině kombinované léčby. Koncentrace peptidu v moči byla nejvyšší ve stejné skupině, což naznačovalo vyšší systémovou expozici [50].

Tan a kolegové (2012) podávali MRL/lpr myším Ac-SDKP v dávce 1,0 mg/kg/den po dobu osmi týdnů. Ve srovnání s neléčenými zvířaty, myši dostávající peptid měly nižší hladinu moči a lepší funkci ledvin. V ledvinové tkáni bylo méně přítomných T-buněk a makrofágů s aktivací NF-κB. Zmenšila se aktivace NF-κB a produkce TNF-α a také hladiny markerů ztluštění tkáně TGF-β1, α-SMA a fibronektyny. Hamovala se fosforylaci Smad2/3 a zvýšil se hladiny Smad7.

Nic se však nemělo u komplexů imunologických a hladin protilátek proti dsDNA. To naznačuje, že účinky vyplývaly z omezení dalších etap zánětu a zhrubnutí, nikoli z změny tvorby protilátek [51].

Maheshwari a kolegové (2018) zkoumali kury Zucker s normální hmotností těla (ZL) a s obezitou (ZO), které byly po dobu osmi týdnů krmeny dietou s normální koncentrací soli (0,4%) nebo s vysokou koncentrací soli (4%). Jedna z podskupin krys s obezitou (ZO) dostávala Ac-SDKP v dávce 1,6 mg/kg/den.

Dieta bohatá na sůl zhoršovala zánět a ztluštění ledvin v obou skupinách, přičemž u opic s obezitou byl nejvyšší výskyt makrofágů: 87,8 ± 10,8 oproti 19,14 ± 1,5 buněk/mm² u opic s normální hmotností. Podávání Ac-SDKP snižovalo výskyt makrofágů u opic s obezitou na 32,18 ± 2,4 buněk/mm² (p < 0,05) a omezovalo ztluštění slezin a ztluštění vnitřní stěny ledvin (p < 0,05).

Skuterní arteriální tlak u potkanů s obezitou, kteří konzumovali dietu bohatou na soli, se snížil ze 164 ± 6,9 na 144,05 ± 14,1 mmHg (p = 0,004). Albuminurie byla u zvířat s obezitou vyšší než u zdravých, ale pod vlivem diety ani Ac-SDKP se významně neměnila [52].

Neurologické studie: modely poškození mozku a páteře

Mobilní modely a prašné choroby Parkinsonovy

Kamarehei a Zahednasab (2025) studovali Ac-SDKP v modelích Parkinsonovy choroby. V molekulárních experimentech předběžná expozice nervových buněk SH-SY5Y 20 nM peptidu omezovala poškození způsobené 6-OHDA, toxinem často používaným k modelování parkinsonovských změn.

V studiích na potkanech denní podávání 800 µg/kg po poškození mozku pomocí 6-OHDA prospělo zachování většího počtu dopaminergických neuronů a snižovalo úmrtnost buněk tím, že omezovalo aktivitu kaspaz-3 a kaspaz-12.

Zvířata, která dostávala peptid, také vykazovala lepší motorickou koordinaci, zlepšení prostorové paměti a méně příznaků podobných úzkosti a depresím.

Mechanisticky byly změny spojeny s omezením oxidačního stresu, stresu retikulum endoplazmatického systému a zánětlivé signalizace v mozku. Výsledky se však týkají preklinických modelů a nepotvrzují účinnost Ac-SDKP u pacientů s Parkinsonovou nemocí [53].

Regenerace po poškození páteře

Hashemizadeh a spolupracovníci (2022) podávali štěnkám Wistar Ac-SDKP subkutánně v dávce 0,8 mg/kg jednou denně po dobu sedmi dnů, a to dvě nebo šest hodin po poranění páteře způsobeném pádem těžkého předmětu.

Ve srovnání s tlustými zvířaty, krysy dostávající peptyd získaly lepší schopnost chůze, ztrácely méně motorických neuronů a vykazovaly nižší hladiny TNF-α a caspase-3.

Současně se zvyšovala exprese mRNA CD206, markeru spojeného s makrofagovými buňkami M2 účastnícími se reparativních procesů. Studie tkání prokázaly menší oblast poškození.

Celkově bylo pozorováno posunutí imunologické odpovědi od aktivity spojené s makrofágy M1 směrem k odpovědi typu M2, což bylo spojeno s lepšími funkčními a strukturálními výsledky [54].

Ochrana po traumatickém poranění mozku (TBI)

Zhang a kolegové (2017) u potkanů vyvolávali kontrolovanou poškození mozkové kůry a poté podávali Ac-SDKP v dávce 0,8 mg/kg/den pomocí minipompy po dobu tří dnů, a to hodinu po poranění.

Od 7. do 35. dne odchytů senzomotorických funkcí byly lepší výsledky, a mezi 33. a 35. dnem byl také pozorován zlepšený prostorový výcvik ve srovnání s kontrolní skupinou (p < 0,05).

Na konci studie byla poškozená oblast kory a ztráta neuronů hypokampu menší. Současně došlo ke zvýšení angiogeneze, tvorbě nových neuronů a hustotě dendritických špiček.

Včasné podávání také omezovalo ukládání fibrinu a aktivaci imunitních buněk. Mechanistické studie prokázaly, že značnou část protizánětlivého účinku lze vysvětlit inhibicí signalizace TGF-β1/NF-κB [55].

Experimentální autoimunitní onemocnění mozku a jádra (model připomínající multiple sclerosis)

Pejman a kolegové (2020) zkoumali myši C57BL/6 s experimentálním autoimunitním zánětem mozku a jádra (EAE), který se používá jako model procesů připomínajících roztroušenou sklerózu.

V EAE byly pozorovány zvýšené hladiny markerů stresu retikulární endoplazmatické membrány, včetně kaspazázy-12, CHOP a PDI, a také zvýšený oxidační stres a příchod imunitních buněk do hypokampu.

Po podání Ac-SDKP se snižovaly hladiny kaspázy-12 a CHOP v oligodendrocytách a také aktivace kaspázy-3. Také klesaly hladiny reaktivních forem kyslíku a peroxidace lipidů, zlepšovala se antioxidační schopnost a koncentrace IL-6 a IL-1β byla nižší.

Analýza mozkové tkáně prokázala menší poškození hipokampu a méně proliferujících imunitních buněk, což odpovídalo pomalejšímu vývoji patologických změn v tomto modelu [56].

Další neurologické vyšetření uvedená v původním materiálu

V bibliografii zdrojového materiálu byl také zohledněn výzkum mozkové kapičky u potkanů, ve kterém byl Ac-SDKP analyzován v kombinaci s tkáňovým aktivátorem plazminogenu [57], a také výzkum fragmentu tymozinu β4 týkajícího se neurogeneze hipokampu a prostorové paměti [58].

V předkládaném článku nebyly uvedeny metody ani výsledky těchto dvou studií, a proto nelze na jejich základě vyvodit další závěry týkající se jejich výsledků.

Zkoumání jater: experimentální fibrilace

Omezování zvrásnění jater způsobeného chemickými látkami

Wei a kolegové (2022) zkoumali potkany s poškozením jater způsobeným uhličitým chlorem (CCl₄). Po podání Ac-SDKP bylo pozorováno méně úmrtí hvězdicových buněk, hlavních buněk účastnících se tvorby tkáně v tkáně chrupavky v játrech, a menší fibrilace.

Mechanistické studie prokázaly, že peptid snižoval hladinu WTAP, proteinu účastnícího se přihlášení modifikací m⁶A do RNA. Tato změna stabilizovala RNA Ptch1 a ovlivnila aktivitu Hedgehogového signálního dráhy, důležitého regulátora procesů spojených s fibrilací.

Výsledky ukazují na protinádorový mechanismus spojený s dráhou WTAP/m⁶A/Ptch1 a regulací Hedgehog signálů [59].

Ochrana v modelu fibrinolýzy vyvolané nedostatečnou propustností žlučových cest

Zhang a kolegové (2012) použili model vazby žlučových cév u potkanů a poté po dobu dvou týdnů podávali Ac-SDKP.

Ve srovnání s neléčenými zvířaty byl pozorován úbytek signalizace TGF-β1 a nižší hladiny markerů aktivovaných hvězdicových buněk, včetně α-SMA a FSP-1.

Také klesala exprese genů spojených s typy I a III kolagenu a enzymů účastnících se regenerace matice, jako jsou MMP-2, TIMP-1 a TIMP-2.

Parametry krve týkající se funkce jater se zlepšily: hladiny ALT, AST, bilirubinu a protrombinový čas se blíží hodnotám normálu. Histologické vyšetření prokázalo menší počet tukových buněk, menší ukládání kolagenu a slabší zánět a ztluštění [60].

Zachování přirozených ochranných a opravných mechanismů

Chen a jeho spolupracovníci (2010) prokázali, že při dlouhodobém vystavení CCl₄ se přirozené koncentrace Ac-SDKP postupně snižovaly.

Podávání peptidu intravenózně v dávce 800 µg/kg/den po dobu osmi týdnů pomáhalo udržet jeho základní hladinu a omezovalo poškození jater, zánět a tvorbu fibróz.

Snížila se aktivita jaterních enzymů v krvi, počet CD45⁺ zánětlivých buněk a množství kolagenu a α-SMA fragmentů. Také klesaly hladiny TGF-β1 a fosforylovaných Smad2/3, zatímco rostla aktivita signálů spojených s regenerací tkání, jako jsou BMP-7 a fosforylovaný Smad1/5/8.

V molekulárních experimentech s Ac-SDKP přímo potlačoval aktivaci hvězdičkových buněk, což potvrzovalo protizánětlivé účinky na molekulární úrovni [61].

Regenerace kůže, modely hojení ran a další experimentální výsledky

Hydrogel obsahující Ac-SDKP a regenerace jizev

Bylo vyvinuto speciální tkáňové lepidlo na bázi celulózy Dopa-OCMC-PAA, které bylo srovnáváno s OCMC-PAA a bylo určeno k přenášení a uvolňování Ac-SDKP.

Obě verze vykazovaly odpovídající vlastnosti v oblasti tuhnutí a degradace, dobrou mechanickou odolnost a kompatibilitu s buňkami, ale Dopa-OCMC-PAA dosahoval lepší výsledky.

U myší s krvácením z jater tento lék rychleji zastavil krvácení. V testech s fibroblasty zvyšoval hladiny enzymů účastnících se regenerace tkání, MMP-1 a MMP-3, a zároveň omezoval aktivitu genů spojených s kolagenem.

U králíků s nadměrnými vřesy na uších snížení intenzity vřesy a počet buněk v kombinaci Dopa-OCMC-PAA s Ac-SDKP a zlepšení organizace kolagenu. Znovu bylo pozorováno zvýšení MMP-1 a MMP-3 a snížení aktivity kolagenových genů. Výsledky ukazovaly na lepší hojení ran a menší vřesy u testovaných modelů [62].

Místní aplikace a vitalita kůže a procesy regenerace

U potkaních modelů chirurgických lézí na kůži, břiše a hrudníku podávání Ac-SDKP v dávce 5 µg/kg dvakrát denně po dobu tří dnů zvyšovalo plochu živé kůže.

V hrudních plicích se podíl živé tkáně zvýšil z 50,9 ± 19,3% na 66,4 ± 7,5%, zatímco v hrudních břišních plicích se zvýšil z 53,4 ± 4,2% na 74,7 ± 6,6%.

V kožní tkáni poškozené UVB zářením lokální aplikace peptidu zlepšovala přežití buněk. Subkutánní podání také urychlilo tvorbu nového povrchového epidermu, zvýšilo hladinu keratinu-14, markeru buněk účastnících se regenerace kůže, a fibronektynu. Výsledky ukazují na účast v procesech angiogeneze a regenerace tkání v experimentálních podmínkách [63].

Ochrana tvorby krve během chemoterapie

V studii u myší léčených doksorubicynou, chemoterapeutikou, podávání Ac-SDKP v dávce 2,4 µg/den, nepřetržitě nebo v dělených dávkách začatém 48 hodin před léčbou snižovalo úmrtnost a chránilo krevní progenitorní buňky.

Ochrana byla pozorována v měřeních LTRC, CFU-S, HPP-CFC a CFU-GM. Dodání G-CSF navíc zvyšovalo obnovu CFU-GM.

Moment zahájení podávání byl klíčový. Začátek před chemoterapií byl nezbytný k omezení jak krátkodobého poškození kostní dřeně, tak dlouhodobé ztráty maticových buněk v tomto modelu [64].

Silnější protinádorové účinky modifikovaných analogů a kombinací s inhibitory ACE

V experimentech s plicními fibroblasty způsob Ac-SDKP odolný vůči rozkladu ACE silněji omezoval signalizaci TGF-β/Smad3 a ukládání kolagenu než přirozená molekula.

Zkratěný fragment Ac-DKP vykazoval pouze slabé účinky a byl pomalu rozkládán enzymem ACE.

Spojení peptidu s inhibitory ACE silněji snižovalo hladinu hydroxyproliny, markeru obsahu kolagenu, než samotný peptid. Výsledky naznačují možnost dalšího výzkumu modifikovaných analogů a jejich interakcí.

V rozmezí koncentrací od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M jak tymozin β4, tak Ac-SDKP snižoval proliferaci myeloidních buněk, přičemž nejsilnější účinek byl pozorován při 10⁻¹⁴ M. Také způsobovaly atypické změny v jádrech buněk spojené s zastavením cyklu buněčného růstu.

U koncentrace 10⁻⁸ M oba peptidy také vyvolávaly degranulaci mastocytů. Ac-SDKP vykazoval silnější účinek, přibližně 89%, než tymozin β4, přibližně 57%. Další fragmenty tymozinu β4 neprojevovaly aktivitu, což naznačuje vazbu těchto odpovědí na zkoumané nedegradované peptidy a ne na jiné analyzované fragmenty [65, 66].

Experimentální dávky Ac-SDKP v publikovaných studiích – nejsou doporučenými dávkami pro lidi

Ponižné hodnoty popisují protokoly používané v citovaných experimentech na zvířatech a buňkách. Nejsou to stanovené dávky pro člověka.

V předklinických studiích zkoumaných v této práci byl přípravek Ac-SDKP často podáván subkutánně pomocí minipump pomocí dávky přibližně 0,8 mg/kg/den s cílem zhodnotit fibrózu a zánět v srdci, cévách a ledvinách. V myších modelích infarktu srdeční byl někdy podáván přípravek Ac-SDKP v dávce 1,6 mg/kg/den v rámci studií včasné ochrany tkání.

V experimentech týkajících se mozku a nervového systému zahrnovaly krátké cykly zahájené během několika hodin po poranění obvykle dávky kolem 0,8 mg/kg/den po dobu tří až sedmi dnů. V molekulárních studiích se často používala předchozí expozice přibližně 10 nM peptidu.

V modelích chronického poškození jater protokoly proti fibróze často zahrnovaly dávky kolem 0,8 mg/kg/den. V modelu fibrózy plic vyvolané bleomycinem byla podávána dávka 0,6 mg/kg intravenózně s opakovanými podáními začínajícími v den 0 nebo 7.

V studiích hojení kůže a ran lokální schéma zahrnovala dávku 5 µg/kg podávanou dvakrát denně po dobu tří dnů nebo hydrogély obsahující peptid a lokalizovaně ho uvolňující látky.

V hematologických a ochranných studiích se používaly velmi malé dávky, například 2,4 µg/den u myší před chemoterapií a krátké cykly v rozmezí µg/kg/den v raných klinických studiích.

Interpretace výsledků a omezení dostupných důkazů

Největší část předložené literatury se týká buněčných experimentů a zvířecích modelů. Změny v ukládání kolagenu, mediátorů zánětu, struktuře tkání a experimentálních funkčních parametrů samy o sobě nejsou důkazem terapeutického účinku u lidí.

Uvedené rané klinické studie se týkaly především hematologických parametrů během chemoterapie a přinesly nejisté výsledky, včetně negativních výsledků randomizovaného hodnocení [48, 49].

Experimentální metody podávání, dávky látky a doby expozice by měly být považovány za součást metody výzkumu a nikoli za doporučení pro individuální použití.

Redakční upozornění: Tento článek má výhradně vzdělávací a vědecký charakter. Způsobuje výsledky výzkumu týkajících se Ac-SDKP, molekulární mechanismy a omezení dostupných důkazů. Neobsahuje lékařské rady, nedoporučuje užívání Ac-SDKP ani neurčuje dávkovací režim, podávání nebo léčbu. Výsledky laboratorních testů a experimentů na zvířatech nepotvrzují bezpečnost ani účinnost Ac-SDKP u lidí.

Odkazy

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). Role osy Tβ4-POP-Ac-SDKP v fibrotizaci orgánů. Mezinárodní časopis molekulárních věd, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP snižuje mortalitu a rupturu srdce po akutním infarktu myokardu. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP zmírňuje srdeční fibrózu u potkanů s renovaskulární hypertenzí. Hypertenze, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP zmírňuje zánět a fibrózu u potkanů s srdečním selháním po infarktu myokardu. Hypertenze, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotický účinek Ac-SDKP a inhibice angiotenzin-konvertujícího enzymu při hypertenzi. Journal of Hypertension, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Vliv N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny na syntézu DNA a kolagenu u srdečních fibroblastů potkanů. Hypertenze, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin zabraňuje kardiovaskulární remodelaci a dysfunkci vyvolané galektinem-3, což je adheziová/růstová regulující lektin savčích organismů. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Dlouhodobý účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny na ukládání kolagenu v levém komoře u potkanů s hypertenzí 2. a 1. stupně. Circulation, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Léčebný potenciál thymosinu beta4 a jeho derivátu N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolinu (Ac-SDKP) při hojení srdečních poranění. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions (Americký časopis o kardiovaskulárních lécích : léky, přístroje a další intervence), 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro inhibuje aktivaci matrix metaloproteináz prostřednictvím interleukinu-1β u srdečních fibroblastů. Archiv Pflügera – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Léčba N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolinem zabraňuje experimentální autoimunitní myokarditidě u potkanů. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proline snižuje tvorbu krevní sraženiny a zánět v srdci u potkanů s hypertenzí vyvolanou angiotensinem II. Klinická věda, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E., & Rhaleb, N. E. (2019). Léčba N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolinem chrání srdce před nadměrným poškozením myokardu a srdečním selháním u myší. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Prevence myokardiální fibrózy pomocí N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny u diabetických potkanů. Klinická věda, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Účinky nového peptidu Ac-SDKP na poškození koronárních endoteliálních buněk vyvolaného radiací a na klidový krevní průtok v myokardu. Kardioonkologie, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP snižuje produkci kolagenu stimulovanou stresem v ER u srdečních fibroblastů inhibicí expresi NF-κB spojené s CHOP. Frontiers in Pharmacology, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP potlačuje expresiu ICAM-1 indukovanou TNF-α v endotelových buňkách inhibicí IκB kinázy a aktivací NF-κB. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Prevence aortální fibrózy pomocí N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny při hypertenzi vyvolané angiotenzinem II. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). Malý peptid Ac-SDKP inhibuje kardiosklerózu vyvolanou radiací. Circulation: Srdeční selhání, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S. & Vancheri, C. (2015). Účinky thymosinu β4 a jeho N-koncového fragmentu Ac-SDKP na lidské plicní fibroblasty léčené přípravkem TGF-β a v myším modelu bleomycinem indukované plicní fibrózy. Odborné stanovisko k biologické terapii, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S., & Yang, F. (2023). Ac-SDKP podporuje potlačování β-catenin prostřednictvím ciliary mechanismu pomocí akce kofaktoru c-kit (c-kit) a to prostřednictvím mechanismu ciliary, čímž omezuje přechod epitelových myofibroblastů zprostředkovaný křemíkem. Biomedicína a farmakoterapie, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Imunomodulační účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-proliny a vazokonstrikčního intestinálního peptidu na patofyziologii chronické obstrukční plicní nemoci. Fundamentální a klinická farmakologie, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Syntéza a identifikace nového peptidu Ac-SDK (prolin) z kyseliny hyaluronové, který může vyvolat protifibrotické účinky u potkanů trpících silicózou. Design, vývoj a terapie léků, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventivní a terapeutické účinky N-terminálního fragmentu thymosinu β4 Ac-SDKP v bleomycinovém modelu plicní fibrózy. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Regulativní účinek Ac-SDKP na fosforylovaný cévní proteín 27/SNAI1 v silikotickém myšlení. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Metaanalýza inhibice plicní fibrózy pomocí Ac-SDKP u zvířecích modelů. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotické účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny prostřednictvím regulace expresí transformujícího růstového faktoru beta a koagulačního růstového faktoru u potkanů s silicózou]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Antifibrotický účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny v plicích potkanů s silicózou]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F., & Xu, H. (2021). Ac-SDKP snižuje aktivaci plicních makrofágů a kostních osteoklastů u potkanů vystavených oxidu křemíku inhibicí signálních cest TLR4 a RANKL. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D., & Wang, R. (2012). Nový antifibrotický účinek Ac-SDKP: inhibice diferencování myofibroblastů v plicích potkanů s silicózou. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D. & Yang, F. (2016). Acetylovaná α-tubulín regulovaná N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolinem (Ac-SDKP) vykazuje anti-fibrotický účinek při fibróze plic potkanů vyvolané křemíkem. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Ochranný účinek Ac-SDKP na alveolární epitelové buňky prostřednictvím inhibice EMT pomocí TGF-β1/ROCK1 v silikóze u potkanů. Toksykologie a aplikovaná farmakologie, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proline (Ac-SDKP) zmírňuje silicotickou fibrózu tím, že potlačuje apoptózu alveolárních epitelových buněk typu II prostřednictvím mediace stresu v endoplazmatickém retikulu. Toksykologie a aplikovaná farmakologie, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Účinky N-acetyl-seryl-asparyl-lyzyl-proliny na krevní tlak, poškození ledvin a úmrtnost u systémového lupus erythematosus. Fizioterapeutické zprávy, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). Renální ochranný účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny u potkanů citlivých na soli Dahl. Hypertenze, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin: mechanismy ochrany ledvin u myší s systémovým lupus erythematodesem. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renální ochranné účinky N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro v hypertenzních myších léčených deoxycholestosteronacetát-solí. Journal of Hypertension, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M. & Koya, D. (2005). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin zabraňuje renální insuficienci a expanzi mezangia u diabetických myší db/db. Cukrovka, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Nefrolitický antifibrotický účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny u diabetických potkanů. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L., & Hu, B. (2022). Biomimetický dvojitý síťový hydrogel zlepšuje renální fibrózu a podporuje regeneraci ledvin. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A., & Fogo, A. B. (2013). Thymosin β4 a jeho degradační produkt Ac-SDKP jsou novými reparativními faktory při renální fibróze. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin zmírňuje zánět ledvin a tubulointersticiální fibrózu u potkanů. Mezinárodní časopis molekulární medicíny, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin zmírňuje poškození a dysfunkci ledvin u hypertenzních potkanů s sníženou hmotností ledvin: Council for High Blood Pressure Research. Hypertenze, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotické účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny na srdce a ledviny u aldoesteron-sodových hypertenzních potkanů. Hypertenze, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M., & Inomata, N. (2006). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin zlepšuje progresi renální dysfunkce a fibrózy u potkanů WKY s již potvrzeným onemocněním glomerulární podkladové membrány. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K., & Koya, D. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proline inhibuje diabetem spojenou fibrózu ledvin a endoteliovo-mesenchymalní transpozici. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolická reprogramace pomocí N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny chrání před diabetickou onemocněním ledvin. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenid (acetylSDKP): studie fáze I–II inhibítoru hematopoézy chrání před toxicitou aracytinu a ifosfamidových monokemoterapií]. Klinická studie C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomizovaná placebová studie myeloprotekce pomocí goralatidu u pacientů s skvamocelulárním karcinomem horních cest dýchacích a zažívacích cest nebo jícnu léčených kombinací karboplatinu a fluorouracilu]. Bull Cancer, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K. & Koya, D. (2016). Perorální podání N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny zlepšuje onemocnění ledvin u diabetických myší typu 1 i typu 2 prostřednictvím terapeutického režimu. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP zmírňuje progresi lupusní nephritis u MRL/lpr myší. Mezinárodní imunofarmakologie, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renální ochranné účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny (Ac-SDKP) u obézních potkanů při dietě s vysokým obsahem soli. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Neuroprotektivní účinek peptidu Ac-SDKP v buněčných kulturách SH-SY5Y a u potkana v modelu Parkinsonovy choroby proti oxidačnímu stresu a stresu ER způsobenému 6-OHDA. Neuropeptidy, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Peptid Ac-SDKP zlepšuje funkční regeneraci po poranění míchy v prekliničném modelu. Neuropeptidy, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Léčba traumatických poranění mozku u potkanů s N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolinem. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S., & Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP zmírňuje progresi experimentální autoimunitní encefalomyelitidy inhibicí stresu ER a oxidačního stresu v hippokampu myší C57BL/6. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Kombinovaná léčba N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolinem a aktivátorem tkáňového plasminogenu poskytuje účinnou neuroprotekci u potkanů po cévní mozkové příhodě. Místo útoku, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S., & Ryu, J. H. (2015). Peptidový fragment thymosinu β4 zvyšuje neurogenizaci hippokampu a usnadňuje prostorovou paměť. Neurověda, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proline (AcSDKP) zmírňuje fibrózu jater prostřednictvím vazby WTAP/m6A/Ptch1 přes Hedgehogův systém. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotický účinek N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny na fibrotizaci jater po ligaci žlučových cest u potkanů. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Ochrana základní sekvence AcSDKP zmírňuje fibrózu vyvolanou tetrachlórmetánem v játrech potkana. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A. a Brouki Milan, P. (2025). Hydrogel na bázi celulózy obsahující peptid N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolin pro lepší hojení ran a prevenci jizev u králičího modelu jizvy v vivo. Mezinárodní časopis pro biologické makromolekuly, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). Tetrapéptid acetyl-serin-aspartyl-lyzin-prolin zlepšuje přežití kožních lemů a zrychluje hojení rán. Ošetřování a regenerace ran, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F. & Carde, P. (1998). Tetrapeptid acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatid) chrání před toxicitou vyvolanou doxorubicinem: zlepšení přežití myší a ochrana kmenových buněk a progenitorů kostní dřeně. Krev, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Prozkoumání antifibrotického potenciálu peptidů s sekvencí N-acetylseryl-aspartyl-lysyl-proline. Klinická a experimentální farmakologie a fyziologie, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Thymosin beta 4 a jeho N-koncový tetrapeptid AcSDKP inhibují proliferaci a indukovají dysplastické, neapoptotické jádry a degranulaci mastocytů. Chemie a biodiverzita, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/