Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolīns): orgānu fibroze, audu aizsardzība un eksperimentālie pētījumi

Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolīns) ir endogēns tetrapeptīds, kas veidojas no lielāka olbaltumumvielas – timozīna beta-4. Timozīna β4 enzīmiskās apstrādes rezultātā rodas vairāki fragmenti, tostarp Ac-SDKP [1]. Šis savienojums izraisa zinātnieku interesi, pateicoties tā pretfibrotiskajai iedarbībai, kas novērota eksperimentālos audu bojājumu modeļos. Tā bioloģisko noturību ierobežo ātra sadalīšanās ar angiotenzīnu konvertējošā enzīma (AKE) starpniecību. Pētījumos ir parādīts, ka AKE inhibitori var palielināt cirkulējošā Ac-SDKP koncentrāciju pat piecas reizes, kam ir nozīme pētījumos par to ietekmi uz audiem [1].

Sākotnēji pētījumi koncentrējās uz Ac-SDKP spēju uzturēt asinsrades cilmes šūnas relatīva miera stāvoklī. Vēlāk pētījumu loks tika papildināts ar iekaisuma procesiem, ārpusšūnu matricas pārstrukturēšanu un audu reģenerāciju. Vairākos pirmsklīniskajos orgānu bojājumu modeļos zinātnieki novēroja matricas sastāvdaļu patoloģiskās uzkrāšanās samazināšanos. Peptīds mazināja, cita starpā, to signālu aktivitāti, kas stimulē šūnas pārmērīgai kolagēna – galvenā rētas audu olbaltumvakumola – ražošanai, kā arī ierobežoja fibroblastu pārvēršanos par šūnām, kas atbildīgas par rētu veidošanos.

Preklīniskajos pētījumos attiecībā uz nierēm Ac-SDKP uzrādīja arī labvēlīgas izmaiņas orgāna funkcijas un fibrozes parametros. Tika novērota pārmērīgas imūnšūnu ieplūšanas ierobežošana, kā arī iekaisuma procesu pavājināšanās, kas var pastiprināt bojājumus. Kopumā rezultāti norāda uz Ac-SDKP kā endogēna regulatora lomu ar fibrozi saistītajos ceļos. Tomēr novērojumi no šūnu un dzīvnieku pētījumiem neapstiprina klīnisko efektivitāti vai lietošanas drošumu cilvēkiem.

Sirds un asinsvadu sistēmas izmeklējumi: sirds fibroze, iekaisums un asinsvadu bojājumi

Eksperimentos sirds un asinsvadu pētījumos tika analizēts Ac-SDKP gan akūtu sirds muskula bojājumu, gan hroniskas tā struktūras remodelēšanas gadījumā. Pelēm ar eksperimentālu miokarda infarktu Nakagava (Nakagawa) un līdzstrādnieki ievadīja Ac-SDKP devā 1,6 mg/kg dienā, izmantojot nelielu zemādas sūkni. Sirds sienas plīsumu īpatsvars samazinājās no 51,0 % līdz 27,3 %, bet mirstība – no 56,9 % līdz 31,8 %. Pētnieki šos rezultātus saistīja ar mazāku proinflammatorisko M1 makrofāgu pieplūdi, novērojot, ka M2 makrofāgu vai neitrofilu skaits nemainījās. Tika novērota arī MMP-9 – enzīma, kas piedalās sirds audu noārdīšanā pēc infarkta – aktivitātes samazināšanās, savukārt MPO marķieris palika nemainīgs. Tas varētu liecināt par selektīvu iedarbību uz noteiktiem bojājuma mehānismiem [2].

Pētījumos par sirds fibrozi, ko izraisa ilggadējs paaugstināts asinsspiediens, Pens un līdzautori pierādīja, ka Ac-SDKP spēj samazināt jau pastāvošu šķiedraino audu apjomu, nevis tikai ierobežot to veidošanos. Žurkām ar nostabilizētu hipertensiju Ac-SDKP subkutāna ievadīšana devās 400–800 µg/kg dienā astoņu nedēļu laikā samazināja kolagēna saturu sirdī no devas atkarīgā veidā. Lielāka deva bija saistīta ar spēcīgāku efektu. Arteriālais asinsspiediens nesamazinājās, un normālas reakcijas uz angiotensīnu I un bradikinīnu saglabājās nemainīgas. Tas nozīmē, ka novērotās izmaiņas nevar izskaidrot tikai ar asinsspiediena pazemināšanos. Ac-SDKP koncentrācija asinīs palielinājās divas līdz piecas reizes, savukārt TGF-β un CTGF, kas ir būtiski fibrozes mediatori, līmenis samazinājās [3].

Pēc sirds infarkta ilgstošs iekaisums un fibroze var izraisīt progresējošu orgāna mazspēju. Jans un līdzstrādnieki pētīja Ac-SDKP gan agrīnā fāzē, lai ierobežotu bojājumus, gan vēlākā periodā, lai novērtētu iespēju vērst izmaiņas atpakaļ. Abos gadījumos kopējais kolagēna saturs sirdī samazinājās. Profilaktiskajā grupā tas samazinājās, piemēram, no aptuveni 24 līdz 15 µg/mg, bet grupā, kurā pētīja izmaiņu atgriezeniskumu, – no aptuveni 23 līdz 14 µg/mg. Makrofāgu skaits abās grupās saruka par aptuveni vienu trešdaļu, un samazinājās arī TGF-β pozitīvo šūnu skaits. Šīs izmaiņas notika bez arteriālā asinsspiediena pazemināšanās un bez sirds izmēra samazināšanās. Profilaktiskajā grupā netika uzrādīts viennozīmīgs sistoliskā spēka uzlabojums. Neskatoties uz to, fibrozes un iekaisuma ierobežošana liecināja par labvēlīgākiem sirds muskula strukturālajiem rādītājiem pētītajā modelī [4].

Ac-SDKP var arī piedalīties papildu aizsargmehānismos, kas novēroti AKE inhibitoru lietošanas laikā. Rasouls un līdzstrādnieki salīdzināja angiotenzīna II izraisītas hipertensijas modeli ar grupām, kas saņēma kaptoprilu vai Ac-SDKP devās 400–800 µg/kg dienā. Peptīds vairākas reizes palielināja savu koncentrāciju asinīs un atjaunoja daudzus efektus, kas bija līdzīgi AKE inhibitoru darbībai: tas ierobežoja pārmērīgu šūnu proliferāciju sirdī, samazināja makrofāgu un putekļšūnu skaitu, pazemināja TGF-β un CTGF līmeni un ierobežoja kolagēna uzkrāšanos. Šie efekti radās bez arteriālā spiediena pazemināšanas vai sirds hipertrofijas samazināšanas, kas liecina par tiešu ietekmi uz miokarda audiem [5].

Rhalebs ar līdzstrādniekiem pētīja Ac-SDKP žurku sirds fibroblastu kultūrās, izmantojot koncentrācijas no 0,05 līdz 100 nmol/l. Viņi novēroja divus būtiskus efektus: šūnu proliferācijas samazināšanos, ko mēra pēc DNS sintēzes, līdz vērtībām, kas tuvas normālajām, pie aptuveni 1 nmol/l, un endotelīna-1 – spēcīga fibrozes mediatora – stimulētās kolagēna ražošanas samazināšanos. Zemākas koncentrācijas uzrādīja lielāku efektivitāti kolagēna sintēzes ierobežošanā, savukārt ļoti augstas bija mazāk aktīvas. Mehānisms šķita saistīts ar p44/42 MAPK/ERK signalizācijas pavājināšanos. Zināms MAPK inhibitors izraisīja līdzīgu efektu. Rezultāti saskan ar fibroblastu proliferācijas un matricas sintēzes ierobežošanu, modulējot šūnu augšanu regulējošos ceļus [6].

Turpmākos pētījumos tika pierādīts, ka Ac-SDKP var mazināt galektīna-3 izraisītos sirds bojājumus. Liu un līdzstrādnieki četru nedēļu garumā ievadīja pieaugušām žurkām galektīnu-3 – olbaltumvielu, kas veicina iekaisumu un fibrozi. Dzīvniekiem novēroja lielāku iekaisuma šūnu skaitu, sirds sieniņu sabiezēšanu, pastiprinātu perivaskulāru un intersticiālu fibrozi, TGF-β/Smad3 signālceļa aktivitātes palielināšanos, kā arī sistoliskās funkcijas pasliktināšanos ehokardiogrāfijas izmeklējumā. Ac-SDKP pievienošana devā 800 µg/kg dienā novērsa lielāko daļu šo izmaiņu. Samazinājās iekaisuma šūnu skaits, fibroze un sirds sieniņu sabiezēšanās, savukārt tās darbības parametri bija labvēlīgāki. Rezultāti liecina par TGF-β/Smad3 signālceļa kavēšanas un iekaisuma mazināšanas lomu [7].

Rālebs (Rhaleb) un kolēģi novērtēja arī Ac-SDKP klasiskā žurku renovaskulārā hipertensijas modelī, kas pazīstams kā divu nieru un vienas skavas (2K1C) modelis. Peptīds tika ievadīts subcutāni devā 400 µg/kg dienā. Neskatoties uz saglabātu paaugstinātu arteriālo asinsspiedienu un sirds hipertrofiju, tika novērots ievērojams iekaisuma un proliferējošo šūnu skaita samazinājums miokardā. Intersticiālā kolagēna īpatsvars samazinājās no aptuveni 10,1% žurkām ar hipertensiju līdz aptuveni 5,4%, kas ir gandrīz identisks līmenis kā viltus operētiem dzīvniekiem (aptuveni 5,3%). Tas nozīmē, ka audu remodelācija mainījās par spīti saglabātajai spiediena slodzei, kas apstiprina hipotēzi par no asinsspiediena pazemināšanas neatkarīgu mehānismu [8].

Narratīvajā apskatā Kavazīns (Cavasin) un līdzstrādnieki aplūko timozīna β4 un tā fragmenta Ac-SDKP papildinošās īpašības. Timozīns β4 piedalās šūnu migrācijā un izdzīvošanā, savukārt Ac-SDKP uzrāda pretfibrotisku aktivitāti hipertensijas modeļos. Miokarda infarkta pētījumos šis peptīds ierobežoja iekaisumu, mazināja fibrozi, kā arī veicināja angioģenēzi, kas tika novērots gan in vivo, gan ex vivo. Peļu modeļos tas samazināja arī sirds sieniņas plīsuma risku. Efektu daļēja pārklāšanās liecina, ka Ac-SDKP varētu būt atbildīgs par dažām no bioloģiskajām darbībām, ko piedēvē timozīnam β4. Tomēr autori uzsvēra nepieciešamību veikt klīniskus pētījumus ar cilvēkiem [9].

Ac-SDKP tika pētīts arī attiecībā uz tā ietekmi uz enzīmiem, kas noārda ārpusšūnu matriksas komponentus. Pieaugušu žurku sirds fibroblastos Rhalēbs (Rhaleb) un līdzstrādnieki parādīja, ka interleikīns 1β (IL-1β) būtiski palielina metalloproteināžu MMP-2, MMP-9 un MMP-13 ekspresiju. Šie enzīmi piedalās matriksas degradācijā un var veicināt nelabvēlīgu audu remodelēšanu. Ac-SDKP nemainīja MMP bāzes ekspresiju, bet spēcīgi kavēja IL-1β izraisīto pieaugumu. Vienlaikus tas palielināja metalloproteināžu dabisko inhibitoru – TIMP-1 un TIMP-2 – ekspresiju, atjaunojot sabalansētāku matriksas remodelēšanas regulāciju.

Peptīds ierobežoja arī NF-κB un ERK/MAPK – divu svarīgu ar iekaisumu un proliferāciju saistītu ceļu – aktivāciju. Svarīgi, ka IL-1β šajā modelī nepalielināja kolagēna veidošanos, un arī Ac-SDKP neietekmēja tā sintēzi. Tas liecina par selektīvu audu remodelācijas regulāciju, nevis vispārēju kolagēna veidošanās nomākšanu. Rezultāti norāda uz iespējamo Ac-SDKP lomu ārpusšūnu matrikss saistīto procesu līdzsvara uzturēšanā [10].

Nakagava un līdzstrādnieki pētīja Ac-SDKP žurku modelī ar T limfocītiem saistītu miokardītu. Imunizētām Lūisas žurkām, kuras saņēma peptīdu, saglabājās gan sirds sistoliskā, gan diastoliskā funkcija. Tika ierobežota arī orgāna palielināšanās, šķiedraino audu veidošanās un tā struktūras bojājumi. Histoloģiskā analīze uzrādīja mazāku imūnšūnu, tostarp makrofāgu, dendritisko šūnu un T limfocītu, infiltrāciju.

Samazinājās arī iekaisuma mediatoru, tostarp IL-1α, TNF-α, IL-2 un IL-17, hemokīnu CINC-1 un IP-10, adhēzijas molekulu ICAM-1 un L-selektīna, kā arī metaloproteināžu līmenis. Savukārt Ac-SDKP nemainīja pret miozīnu vērsto autoantivielu līmeni vai antigēnam specifisko T limfocītu atbildes reakciju. Tas liecina, ka novērotais aizsargefekts galvenokārt izrietēja no imūnšūnu un iekaisuma mediatoru recrutēšanas ierobežošanas, nevis no autoantivielu ražošanas izmaiņām vai T limfocītu aktivācijas [11].

Gonzāless un līdzstrādnieki pētīja Ac-SDKP žurkām, kurām trīs nedēļas ievadīja angiotensīnu II. Arterialais asinsspiediens un sirds hipertrofija gan ārstētajiem, gan kontroles dzīvniekiem saglabājās paaugstināti. Tomēr Ac-SDKP novērsa kopējā kolagēna satura palielināšanos un tā šķērssaistīšanos. Mehānisms ietvēra liziloksidāzes (LOX) mRNS un LOXL1 olbaltumvielu ekspresijas inhibēšanu, kas ir fermenti, kuri piedalās kolagēna šķērssaistīšu veidošanā un šķiedru audu stīvināšanā.

Turklāt samazinājās TGF-β ekspresija, NF-κB aktivācija, kā arī CD4⁺ un CD8⁺ T limfocītu un CD68⁺ makrofāgu ieplūde miokardā. CD4⁺ limfocītu ieplūde korelēja ar LOXL1 ekspresiju, kas norāda uz mehānisku saistību starp imūno šūnu aktivitāti un fibroto audu stīvumu. Rezultāti liecina par pretiekaisuma un antifibrotisku iedarbību, kas nav atkarīga no arteriālā spiediena izmaiņām [12].

Pens un līdzstrādnieki analizēja Ac-SDKP ietekmi uz agrīnajiem un vēlīnajiem sirds bojājuma posmiem pēc miokarda infarkta C57BL/6J pelēm. Dzīvnieki saņēma 1,6 mg/kg dienā. Pirmajā nedēļā samazinājās letālu sirds sieniņu plīsumu biežums, ICAM-1 ekspresija, makrofāgu pieplūums, želatīnu degradējošo enzīmu aktivitāte, p53 līmenis un kardiomiocītu bojāeja. Vienlaikus bojātās zonas perifērijā palielinājās sīko asinsvadu skaits, kas liecināja par angioģenēzes pastiprināšanos.

Piektajā nedēļā novēroja mazāku intersticiālā kolagēna saturu, labāk saglabātu sirds struktūru, zemākus endoplazmatiskā retikula stresa rādītājus, tostarp CHOP, kā arī SERCA2 – kardiocitšu kalcija regulēšanai svarīga olbaltumvielas – līmeņa saglabāšanos. Sirds vispārējā funkcija bija labvēlīgāka. Pētījums liecina par izmaiņām gan agrīnā bojājumā, gan vēlākā kambaru remodelācijā [13].

Castoldi ar līdzstrādniekiem novērtēja Ac-SDKP ietekmi žurku diabētiskās kardiomiopātijas modelī. Divus mēnešus pēc diabētas izraisīšanas tika uzsākta astoņu nedēļu ilga peptīda ievadīšana devā 1 mg/kg diennaktī, izmantojot minipumpas. Žurkām ar cukura diabētu novēroja hiperglikēmiju, pastiprinātu intersticiālo un perivaskulāro fibrozi, kā arī paaugstinātu TGF-β1 un fosforilēto Smad2/3 olbaltumvielu līmeni. Ac-SDKP samazināja abu veidu fibrozi un ierobežoja TGF-β/Smad signālceļu, arī dzīvniekiem, kuri saņēma AKE inhibitoru ramiprilu.

Echokardiogrāfiskā izmeklēšana uzrādīja ar cukura diabētu saistītus sirds sistoliskā un diastoliskā darba traucējumus. Insulīns un ramiprils atjaunoja abas funkcijas, savukārt Ac-SDKP daļēji uzlaboja diastolisko funkciju. Rezultāti liecina par antifibrotisku iedarbību, ko papildināja mēreni funkcionāli uzlabojumi šajā modelī [14].

Šarma (Sharma) un kolēģi pētīja vainagartēriju aizsardzību pret starojuma izraisītiem bojājumiem. Žurku krūškurpes apstarošanas modelī Ac-SDKP tika ievadīts zemādas injekciju veidā 18 nedēļas. Radiācija samazināja miera stāvokļa asins plūsmu caur sirdi, izraisīja endotēlija šūnu bojāeju, pastiprināja vainagartēriju fibrozi un izraisīja traucējumus saspringto savienojumu olbaltumvielās, tostarp klaudīnā-1 un JAM-2.

Ac-SDKP atjaunoja asins plūsmu līdz normālām vērtībām, veicināja endotēlija šūnu saglabāšanos, mazināja fibrozi un uzlaboja ciešo savienojumu organizāciju. Laboratorijas pētījumi parādīja, că peptides iekļūst endotēlija šūnās un pēc apstarošanas ierobežo reaktīvo skābekļa formu veidošanos. Dzīviem dzīvniekiem marķētais peptides dažu stundu laikā uzkrājās endotēlija šūnās. Rezultāti liecina par asinsvadu aizsardzību, mazākiem oksidatīviem bojājumiem un labāku mikrocirkulācijas saglabāšanos šajā modelī [15].

Pētījumos ar cilvēka sirds fibroblastiem šūnas tika iepriekš pakļautas Ac-SDKP iedarbībai 10 nM koncentrācijā un pēc tam tunikamicīna (0,25 µg/ml) iedarbībai, kas izraisa endoplazmatiskā retikula stresu. Peptīds ierobežoja pārmērīgu kolagēna veidošanos stresam pakļautajās šūnās. Šis efekts bija saistīts ar stresa atbildes reakcijas pavājināšanos, CHOP un NF-κB aktivitātes samazināšanos, kā arī IL-6 līmeņa pazemināšanos.

Pēc ģenētiskas CHOP ekspresijas samazināšanas Ac-SDKP joprojām ierobežoja NF-κB aktivāciju un I tipa kolagēna ekspresiju gan olbaltumvielu, gan mRNA līmenī. Rezultāti apstiprina hipotēzi, ka peptīds var ierobežot šķiedraino audu komponentu pārmērīgu veidošanos šūnu stresa apstākļos [16].

Cilvēka vainagartēriju endotēlija šūnās TNF-α stimulācija izraisīja strauju ICAM-1 – adhēzijas molekulas, kas piedalās leikocītu piesaistīšanā asinsvadu virsmai, – ekspresijas palielināšanos. Sākotnēja ekspozīcija Ac-SDKP samazināja ICAM-1 līmeni no devas atkarīgā veidā. Mehānistiskā analīze norādīja uz IKK → IκB → NF-κB kaskādes inhibīciju, kurai ir izšķiroša nozīme iekaisuma gēnu aktivācijā. Divi citi ceļi – p38 MAPK un ERK – palika nemainīgi. Tas liecina par Ac-SDKP selektīvu ietekmi uz NF-κB signālceļu endotēlija šūnās. Tomēr tie ir šūnu līmeņa rezultāti, nevis klīniskas asinsvadu aizsardzības apstiprinājums [17].

Žurku angiotensīna II izraisīta hipertensijas modelī Ac-SDKP ierobežoja kolagēna uzkrāšanos aortā un samazināja I un III tipa kolagēna mRNS ekspresiju. Tika novērota arī zemāka proteīnkināzes C aktivitāte, mazāks oksidatīvais stress, ICAM-1 ekspresijas ierobežošana un mazāka makrofāgu ieplūšana asinsvada sieniņā. Samazinājās TGF-β1 un Smad2 aktivitāte, savukārt šī ceļa dabiskā inhibitora Smad7 līmenis paaugstinājās. Arteriālais spiediens un aortas biezums saglabājās paaugstināts, kas norāda, ka novērotās izmaiņas asinsvada sieniņā nebija saistītas ar spiediena pazemināšanos [18].

Citā žurku krūškurvja apstarošanas modelī 18 nedēļu ilga Ac-SDKP lietošana veicināja sirds funkcijas saglabāšanu, ierobežoja ārpusšūnu matrikas uzkrāšanos un fibrozi, samazināja makrofāgu ieplūšanu un sirds šūnu bojātuveju. Samazinājās arī ar fibrozi saistītā makrofāgu olbaltumvielas Mac-2 (galektīna-3) līmenis un izdalīšanās. Ac-SDKP novēroja makrofāgos šūnas kodola tuvumā, un tā klātbūtne ierobežoja starojuma izraisīto Mac-2 izdalīšanos. Ja fibroblastos nebija Mac-2, starojums izraisīja daudz vājākus fibrogēnos signālus. Šie pētījumi sniedz preklīniskus pierādījumus par iekaisuma un fibrotiskās audu remodelācijas ierobežošanu pēc apstarošanas [19].

Elpošanas sistēmas izmeklējumi: plaušu fibroze un iekaisīgi bojājumi

Salīdzinošie plaušu pētījumi analizēja atšķirības starp Ac-SDKP un tā prekursoru timozīnu β4. Laboratoriskajos eksperimentos ar cilvēka plaušu šūnām, kas iegūtas no personām ar idiopātisku plaušu fibrozi (IPF), Ac-SDKP ierobežoja pārmērīgu šūnu proliferāciju un samazināja divu ar TGF-β stimulatīvo fibrozes marķieru – α-SMA un kolagēna – ekspresiju.

Peles plaušu bojājuma modelī, ko izraisīja bleomicīns, timozīns β4 samazināja iekaisumu un agrīnu fibrozi septītajā dienā, bet nenovērsa fibrozi vēlākos posmos, laikā no 14. līdz 21. dienai. Rezultāti liecina, ka Ac-SDKP var inhibēt šķiedraino audu veidošanās pamatelementus šūnās un potenciāli uzrādīt ilgstošāku pretfibrotisku iedarbību nekā tā prekriptors. Tomēr šī hipotēze prasa turpmāku apstiprinājumu [20].

Silikozes pētījumos tika analizēta KIF3A un β-katenīna signālceļa loma. KIF3A līmenis bija pazemināts gan pacientu paraugos, gan žurku plaušās. KIF3A aktivitātes atjaunošana samazināja β-katenīna un tā pakārtoto mediatoru MRTF-A un SRF signālu pārnesi, ierobežojot epitēlija šūnu pāreju miofibroblastos (EMyT) — procesu, kas saistīts ar fibrozi.

Ac-SDKP palielināja KIF3A aktivitāti un samazināja β-katenīna/MRTF-A/SRF signālceļu aktivitāti. Kad KIF3A ekspresija tika mākslīgi ierobežota, Ac-SDKP labvēlīgā ietekme izuda. Tas norāda, ka KIF3A ir pētītā antifibrotiskā mehānisma neatņemama sastāvdaļa [21].

Savukārt citā pētījumā Ac-SDKP un vazoaktīvā zarnu peptīda (VIP) kombinācija mazināja cigarešu dūmu izraisītas hroniskai obstruktīvai plaušu slimībai (HOPS) līdzīgas izmaiņas pelēm. Samazinājās oksidatīvo bojājumu marķieri, tostarp MDA, ar kolagēnu saistītais hidroksiprolīna daudzums un TGF-β līmenis. Vienlaikus kritās iekaisuma citokīnu TNF-α, IL-1β un IL-6 koncentrācija, bet superoksīddismutāzes (SOD) aktivitāte palielinājās. Histoloģiskā izmeklēšanā tika novērots mazāks iekaisums un vājāka plaušu strukturālā pārstrukturēšanās. Līdz ar to kombinācijai bija antioksidatīva, pretiekaisuma un antifibrotiska iedarbība dūmu izraisīta bojājuma modelī [22, 23].

Ac-SDKP uzrādīja aktivitāti gan bleomicīna izraisītās plaušu fibrozes agrīnajā, gan vēlīnajā stadijā. CD-1 pelēm ievadīšana 0,6 mg/kg intraperitoneāli, uzsākot 0. vai 7. dienā, uzlaboja izdzīvotību un mazināja ar bleomicīnu saistīto svara zudumu. Plaušās tika novērots mazāks tūskas apjoms, mazāk infiltrējošu imūnšūnu, labāk saglabāta audu struktūra un vājāka fibroze. Samazinājās kolagēna krāsošanās un šķīstošā kolagēna daudzums. Tāpat saruka IL-17, TGF-β un α-SMA līmenis, kas norādīja uz mazāku miofibroblastu skaitu. Šie efekti izpaudaies gan agrīnas, gan aizkavētas ievadīšanas gadījumā [24].

Žurku silikozes modelī Ac-SDKP ierobežoja fibrozi, ietekmējot P-HSP27/SNAI1 ceļu. Silīcija dioksīds palielināja P-HSP27, SNAI1, α-SMA, kā arī I un III tipa kolagēna līmeni plaušu audos. Ac-SDKP ievadīšana pirms pakļaušanas iedarbībai vai pēc slimības sākuma samazināja visus šos marķierus un vienlaikus P-HSP27 un α-SMA pozitīvo šūnu skaitu. Veseliem kontroles dzīvniekiem peptīds nemainīja šo olbaltumvielu ekspresiju, kas liecina par novēroto efektu atkarību no audu slimības stāvokļa [25].

Metaanalīze, kas ietvēra 18 randomizētus pētījumus ar dzīvniekiem, kas veikti no 2008. līdz 2021. gadam, kopumā aptvēra 428 dzīvniekus. Salīdzinājumā ar neārstētiem modeļiem Ac-SDKP samazināja vairākus fibrozes rādītājus: α-SMA (standartizētā vidējā starpība [SVS] −2,44), I tipa kolagēnu (SVS −5,36), III tipa kolagēnu (SVS −3,07), TGF-β (SVS −2,88), kā arī plaušu mezgliņu laukumu (SVS −1,80). Visiem šiem parametriem p < 0,001.

Nozīmīga bija arī hidroksiprolīna, kolagēna satura marķiera, izmaiņa (SMD 7,62; 95% TI 4,90–10,33; p < 0,001), kas norādīja uz ietekmi uz kolagēna metabolismu. Apvienotie dzīvnieku pētījumu rezultāti apstiprina pretfibrotiska signāla klātbūtni analizētajos modeļos, taču uz tiem attiecas preklīnisko metaanalīžu metodiskie ierobežojumi [26].

Citā pētījumā žurkām tika veikta silīcija dioksīda iedarbība, lai izraisītu fibrozi, un pēc tam tika lietots Ac-SDKP profilaktiskā shēmā vai pēc izmaiņu attīstības devā 800 µg/kg dienā. Salīdzinājumā ar silikozes kontroles grupām TGF-β1 un CTGF olbaltumvielu līmenis plaušās bija ievērojami zemāks, attiecīgi aptuveni 0,244 ± 0,016 un 0,241 ± 0,017. Samazinājās arī mRNA līmenis, īpaši CTGF (p < 0,05). Profilaktiskajā grupā gan TGF-β1 olbaltumviela, gan mRNA bija būtiski zemāki nekā astoņu nedēļu silikozes modelī. Histoloģiskie pētījumi apstiprināja mazāku fibrozi [27].

Nākamajā silikozes modelī Ac-SDKP samazināja kolagēna uzkrāšanos un uzlaboja plaušu struktūru. Žurkām peptīdu ievadīja pēc bojājuma vai 48 stundas pirms pakļaušanas silīcija dioksīda iedarbībai. Terapeitiskajās grupās, salīdzinot ar silikozes modeļiem, mezgliņu laukums samazinājās līdz 84,28% un 67,93%, hidroksiprolīna līmenis līdz 70,89% un 58,18%, I tipa kolagēna līmenis līdz 71,08% un 58,13%, bet III tipa kolagēna līmenis līdz 80,13% un 70,70% no attiecīgajām kontroles vērtībām dažādos laika posmos.

Profilakses grupās, salīdzinot ar astoņu nedēļu silikozes modeli, mezgliņu laukums samazinājās līdz 61,13%, hidroksiprolīns līdz 60,27%, bet I un III tipa kolagēns attiecīgi līdz 40,13% un 65,77%. H&E un VG histoloģiskā krāsošana uzrādīja vieglāku fibrozi. Rezultāti apstiprina gan kolagēna satura, gan redzamo fibrotisko izmaiņu samazināšanos pētītajā modelī [28].

Pētījumi par silīcija dioksīda iedarbību ietvēra arī plaušas un kaulus. Žurku un šūnu modeļos silīcija dioksīds aktivizēja TLR4 un RANKL, pastiprinot plaušu iekaisumu un kaulu rezorbcijai atbildīgo osteoklastu veidošanos. Ac-SDKP inhibēja TLR4 un RANKL signālu pārnesi, veicināja plaušu elastīna saglabāšanos, ierobežoja iekaisumu un makrofāgu aktivāciju. Kaulu audos tas inhibēja osteoklastu diferencēšanos un palīdzēja uzturēt kaulu blīvumu un mikroarhitektūru. Rezultāti liecina par vienlaicīgām aizsargizmaiņām plaušās un kaulu audos eksperimentālos modeļos, kas saistīti ar silīcija dioksīda izraisītiem bojājumiem [29].

Ac-SDKP pētīja arī attiecībā uz tā ietekmi uz fibroblastu diferenciāciju miofibroblastos. TGF-β1 stimulē plaušu fibroblastus šādai transformācijai un palielina kolagēna ražošanu. Kad Ac-SDKP tika lietots pirms iedarbības uz TGF-β1, α-SMA un kolagēna līmenis samazinājās, līdzīgi kā TGF-β1 un tā receptora līmenis.

Žurkām ar silikozes izraisītu plaušu bojājumu peptīda ievadīšana pirms vai pēc ekspozīcijas samazināja TGF-$\beta$1 līmeni, RAS signālu pārnesi un SRF aktivitāti, kā arī samazināja $\alpha$-SMA pozitīvo miofibroblastu skaitu plaušu mezgliņos. To pavadīja mazāka kolagēna uzkrāšanās [30, 31].

Plaušu alveolu epitēlija šūnu pētījumos tika analizēta epitēlija-mezenhimālā pāreja. Silīcija dioksīda un TGF-β1 ietekmē epitēlija marķieru, piemēram, E-kadherīna un SP-A, līmenis samazinājās, savukārt mezenhimālie un fibrozes marķieri, tostarp vimentīns, α-SMA un I un III tipa kolagēns, palielinājās.

Ac-SDKP ierobežoja šīs izmaiņas. Šūnas lielākā mērā saglabāja epitēlija pazīmes, fibrozes marķieru līmenis pazeminājās un TGF-β1/ROCK1 ceļa aktivitāte vājinājās. Tas liecina par labāku plaušu alveolu epitēlija struktūras saglabāšanos eksperimentāla bojājuma apstākļos [32].

Ac-SDKP ietekmēja arī endoplazmatiskā tīkla stresu un plaušu alveolu epitēlija šūnu bojāeju. Silīcija dioksīda iedarbība palielināja GRP78, fosforilētu PERK un eIF2α, CHOP un kaspāzes-12 līmeni, kam sekoja pastiprināta šūnu bojāeja. Ac-SDKP klātbūtnē, līdzīgi kā, izmantojot endoplazmatiskā stresa inhibitoru 4-PBA, šie marķieri samazinājās. Laboratorijas eksperimentos un žurkām tika ierobežota arī šūnu bojāeja un kolagēna saturs plaušās. Rezultāti liecina, ka PERK/eIF2α/CHOP ceļa un kaspāzes-12 aktivitātes vājināšanās var piedalīties epitēlija aizsardzībā un fibrozes ierobežošanā [33].

Nieru izmeklējumi: fibroze un filtrācijas funkcija

Nakagavas un līdzstrādnieki (2017) vilku predisponētā NZBWF1 peļu modelī pierādīja, ka Ac-SDKP ierobežoja nieru bojājumus un glomerulosklerozi, nesamazinot sistolisko asinsspiedienu. Smaga hipertensija, albuminūrija un priekšlaicīga nāve ārstētajiem dzīvniekiem parādījās vēlāk, taču šīs atšķirības nesasniedza statistisko nozīmīgumu [34].

Voru un līdzstrādnieki (2015) pētīja pret sāli jutīgas Dāla žurkas, kuras saņēma Ac-SDKP sešas nedēļas devās 800 vai 1600 µg/kg/dienā. Ar sāli bagāta diēta joprojām paaugstināja asinsspiedienu, bet nierēs novēroja mazāku iekaisumu, mazāku fibrozi un labāk saglabājušos kamoliņus. Tikai lielākā deva samazināja albuminūriju pret sāli jutīgajām žurkām. Izturīgākajā SS13BN līnijā abas devas novērsa albumīna zudumu un strukturālos bojājumus. Rezultāti liecina, ka vismaz daļa no nieru efektiem bija neatkarīga no asinsspiediena pazemināšanas [35].

Liao un līdzstrādnieki (2015) 20 nedēļas pētīja Ac-SDKP pelēm ar noslieci uz vilkēdi. Dzīvniekiem, kuri saņēma peptīdu, novēroja labāku nieru darbību, lai gan ar vilkēdi saistīto autoantivielu līmenis nemainījās. Nierēs bija mazāk infiltrējošu makrofāgu un T limfocītu. Samazinājās citokīnu un chemokīnu līmenis, un tika ierobežota komplementa komponentu C5–9 un mediatoru RANTES, MCP-5 un ICAM-1 aktivācija. To pavadīja filtrācijas funkcijas saglabāšanās un mazāki mikroskopiskie bojājumi [36].

DOCA un sāls izraisīta hipertensīvā modelī Rālebs (Rhaleb) un līdzstrādnieki (2011) ievadīja pelēm Ac-SDKP devā 800 µg/kg dienā 12 nedēļas. Neraugoties uz saglabāto hipertensiju, samazinājās nieru fibroze, matriksa nogulsnēšanās kamoliņos un monocītu un makrofāgu pieplūde. Albuminūrija samazinājās no 41 ± 5 µg līdz 13 ± 3 µg uz 10 g ķermeņa masas dienā, sasniedzot vērtības, kas bija tuvas kontroles grupai. Daļēji tika atjaunots arī nefrīna – svarīga filtrācijas spraugas olbaltumvāruma – līmenis. Rezultāti liecina par filtrācijas barjeras aizsardzību un fibrozes ierobežošanu neatkarīgi no arteriālā spiediena [37].

Shibuya un līdzstrādnieki (2005) analizēja Ac-SDKP db/db pelēm ar 2. tipa cukura diabētu. Astoņu nedēļu ilga ievadīšana, izmantojot minipumpas, palielināja peptīda koncentrāciju plazmā apmēram trīs reizes, nemainot glikēmiju. Tika ierobežota kamoliņu palielināšanās, pārmērīga mezangiālās matriksa un ārpusšūnu matriksa komponentu uzkrāšanās. Kreatinīna koncentrācija plazmā tuvojās normālām vērtībām. Arī albuminūrija samazinājās, taču atšķirība nebija statistiski nozīmīga. Mehāniski Ac-SDKP inhibēja Smad3 translokāciju šūnas kodolā, ierobežojot ar fibrozi saistīto TGF-β/Smad signālu ceļu [38].

Kastoldi un līdzstrādnieki (2013) pētīja žurkas ar cukura diabētu, kurām ievadīja Ac-SDKP devā 1 mg/kg diennaktī, ramiprilu devā 3 mg/kg diennaktī, abus savienojumus kopā vai piemēroja kontroles ārstēšanu. Neārstētiem dzīvniekiem novēroja hiperglikemiju, palielinātu albuminūriju, nieru fibrozi un samazinātu nefrīna daudzumu kamoliņos. Pats Ac-SDKP ierobežoja fibrozi, bet neuzlaboja albuminūriju. Ramiprils samazināja gan albuminūriju, gan fibrozi, kā arī atjaunoja nefrīna līmeni. Ac-SDKP un ramiprila kombinācija ierobežoja fibrozi spēcīgāk nekā pats ramiprils, taču neradīja papildu albuminūrijas uzlabojumu. Rezultāti norāda uz papildu pretfibrotisku efektu pētītajā modelī bez papildu albumīna izdales uzlabojuma [39].

Džans un līdzstrādnieki (2022) izstrādāja bioloģiski iedvesmotu divtīklu hidrogēlu, kas sastāv no želatīna un kurkumīna-cinka kompleksa, pārklāts ar DOPA un funkcionalizēts ar imobilizētu Ac-SDKP. Sistēma tika izstrādāta, lai mazinātu problēmas, kas saistītas ar brīvo vielu šķīdību, uzsūkšanos un stabilitāti. Pēc lietošanas in vivo žurku nierēs pēc daļējas nefrektomijas hidrogēls samazināja lokālo fibrozi, veicināja angioģenēzi un stimulēja jaunu nieru kanāliņu veidošanos. Materiālu pētījumi apstiprināja atbilstošu porainību, mehānisko izturību un biokompatibilitāti, kas pamato turpmākus pētījumus par šo risinājumu [40].

Zuo un līdzstrādnieki (2013) salīdzināja Ac-SDKP, timozīnu β4 un timozīnu β4 kombinācijā ar proline oligopeptidāzes (POP) inhibitoru vienpusējas urīnvada nosprostošanās modeļiem savvaļas tipa un PAI-1 deficīta pelēm. Ac-SDKP konsekventi samazināja fibrozi abos genotipos. Tika novērots mazāks kolagēna un fibronektīna daudzums, mazāk aktivizētu miofibroblastu un makrofāgu, kā arī vājāka fibrozi veicinoša signālu pārnese. Salīdzinošie pētījumi norāda arī uz timozīna β4 atšķirīgu un no slimības stadijas atkarīgu iedarbību [41].

Vangs un līdzstrādnieki (2010) pierādīja, ka Ac-SDKP ierobežoja obstrukcijas izraisītu nieru iekaisumu un fibrozi. Žurkām ar vienpusēju urīnvada obstrukciju 14 dienas ilga peptīda ievadīšana samazināja histoloģiskajā izmeklējumā redzamo kanāliņu un intersticiālo fibrozi un iekaisuma izmaiņas. Tika novērots mazāks ED-1 makrofāgu pieplūdums, kā arī zemāks MCP-1, NF-κB, α-SMA un TGF-β1 līmenis kanāliņu un interstīcija šūnās. Samazinājās arī MCP-1 un TGF-β1 gēnu ekspresija, kas liecināja par iekaisuma šūnu recrutēšanas un ārpusšūnu matriksa aktivācijas ierobežošanu [42].

Liao un līdzstrādnieki (2010) ievadīja Ac-SDKP devā 800 µg/kg dienā žurkām pēc 5/6 nieru masas izņemšanas, uzsākot ievadīšanu pirms bojājuma vai pēc tā rašanās. Neskatoties uz pastāvošo hipertensiju un kreisā kambara hipertrofiju, peptīds samazināja albuminūriju, ierobežoja makrofāgu pieplūdi un samazināja kolagēna saturu nierēs abās grupās. Nefrīna zudums kamoliņos tika arī daļēji ierobežots vai novērsts. Rezultāti liecina par filtrācijas barjeras integritātes uzlabošanos gan agrīnā, gan progresējošākā bojājuma fāzē, galvenokārt pateicoties pretiekaisuma un pretfibrotiskai iedarbībai, nevis asinsspiediena kontrolei [43].

Peng un līdzstrādnieki (2001) pētīja žurkas pēc vienas nieres izņemšanas, kurām sešas nedēļas tika ievadīts aldosterons un sāls. Šī intervence paaugstināja arteriālo asinsspiedienu, izraisīja sirds un nieres palielināšanos, kā arī palielināja kolagēna un šūnu proliferācijas marķiera PCNA saturu. Ac-SDKP, īpaši lielākajā devā 800 µg/kg dienā,, ievērojami samazināja kolagēna un PCNA saturu no devas atkarīgā veidā. Tomēr arteriālais asinsspiediens un orgānu palielināšanās palika nemainīgi, un mazākā deva 400 µg/kg dienā deva daļējus efektus [44].

Omata un līdzstrādnieki (2006) pētīja žurkas ar nefrītu, kas izraisīts ar antivielām pret glomerulāro bazālo membrānu (anti-GBM). Ac-SDKP ievadīšanu devā 1 mg/kg dienā uzsāka 14 dienas pēc slimības sākuma un turpināja četrus nedēļas. Salīdzinot ar neārstētiem dzīvniekiem, novēroja mazāku olbaltumvielu izdalīšanos ar urīnu, zemāku urīnvvielas un kreatinīna koncentrāciju plazmā, kā arī labāku kreatinīna klīrensu. Audu izmeklējumi uzrādīja mazāku glomerulāro sklerozi un intersticiālo fibrozi. Samazinājās fibronektīna, kolagēna un TGF-β1 līmenis, kā arī Smad2 signālu pārvade, savukārt Smad7 palielinājās. Tika ierobežota arī makrofāgu uzkrāšanās nieru audos [45].

Nagai un līdzstrādnieki (2014) cukura diabēta modeļos parādīja, ka Ac-SDKP var ierobežot nieru fibrozi, kavējot endotēlija-mezenhimālo pāreju (EndMT) jeb endotēlija šūnu pārveidošanos šūnās ar fibrogēnām īpašībām. Peptīds atjaunoja dabisko aizsargceļu aktivitāti, tostarp mikroRNA let-7 un FGF receptora signalizāciju, ko bija vājinājis cukura diabēts. Ac-SDKP kombinācija ar AKE inhibitoru nodrošināja labāku nieru aizsardzību nekā AKE inhibīcija viena pati pētītajā modelī [46].

Srivastava un līdzstrādnieki (2020) salīdzināja AKE inhibitorus, angiotensīna II receptoru blokatorus (ARB), Ac-SDKP un to kombinācijas pelēm ar cukura diabētu. Pētnieki arī bloķēja dabisko Ac-SDKP veidošanos, izmantojot prolīna oligopeptidāzes inhibitoru (POPi). Rezultāti liecināja, ka Ac-SDKP piedalās AKE inhibitoru labvēlīgajos efektos, izmainot nieru metabolismu. Tika atjaunots SIRT3 līmenis, uzlabojās mitohondriālā taukskābju oksidēšanās un samazinājās nelietderīga glikozes izmantošana.

Dabiski radītā Ac-SDKP veidošanās bloķēšana pazemināja tā koncentrāciju, paātrināja fibrozi un izjauca vielmaiņas līdzsvaru. AKE inhibitori, atšķirībā no ARB, daļēji atjaunoja peptīda līmeni un samazināja fibrozi. Gan AKE inhibitori, gan Ac-SDKP ierobežoja mezenhimālo pāreju un samazināja I tipa kolagēna un fibronektīna daudzumu nierēs ar cukura diabētu [47].

Klīniskajos pētījumos tika analizēts arī Ac-SDKP analogs kā potenciāls līdzeklis asins šūnu aizsardzībai ķīmijterapijas laikā. Kards (Carde) un līdzautori (1992) novērtēja seraspenīdu I–II fāzes dubultmaskētā un krusteniskā pētījumā, kurā piedalījās 53 pacienti, kuri saņēma citarabīnu vai ifosfamīdu. Salīdzinājumā ar kontroles periodiem personām, kuras saņēma seraspenīdu, novēroja labāku perifēro asins šūnu skaita saglabāšanos ķīmijterapijas toksiskās iedarbības apstākļos. Preparāts tika labi panākts, un blakusparādības netika ziņotas. Rezultāti mudināja veikt turpmākus pētījumus par asinsrades sistēmas aizsardzību, taču tie neapstiprināja rutīnas klīnisko efektivitāti [48].

Atsevišķā pētījumā netika pierādīta aizsardzība pret ķīmijterapijas hematoloģisko toksicitāti. Kapelērs (Cappelaere) ar līdzstrādniekiem (1995) pētīja 84 pacientus ar progresējošiem plakanšūnu audzējiem, kuri saņēma karboplatīnu un nepārtrauktu 5-fluorouracila infūziju, kā arī placebo vai Goralatīdu (Ac-SDKP) devās 12,5 vai 62,5 µg/kg dienā. 221 ķīmijterapijas ciklā netika konstatētas atšķirības starp grupām leikocītu, granulocītu, trombocītu vai hemoglobīna zemākajās vērtībās. Toksicitātes ilgums arī nemainījās. Tomēr anēmija un limfopēnija biežāk novērota Goralatīda grupās. Lai gan preparāts kopumā tika raksturots kā panesams, tas nenovērsa ar ķīmijterapiju saistītās citopēnijas un bija saistīts ar biežāku anēmiju un limfopēniju [49].

Nitta un līdzstrādnieki (2016) pētīja Ac-SDKP 1. un 2. tipa cukura diabēta modeļos. CD-1 pelēm ar streptozotocīnas izraisītu diabētu un db/db pelēm iekšķīgi tika ievadīts Ac-SDKP, AKE inhibitors imidaprils vai abi savienojumi. Tikai Ac-SDKP un kombinētā terapija samazināja glomerulosklerozi un stobriņu-intersticiālo fibrozi. Cistatīna C koncentrācija plazmā, kas bija paaugstināta nieru bojājuma gadījumā, tuvojās normālām vērtībām.

Visas intervencijas atjaunoja antifibrotisko mikroRNS miR-29 un let-7 līmeni, bet vislielākais uzlabojums tika novērots kombinētās terapijas grupā. Peptīda koncentrācija urīnā bija visaugstākā tajā pašā grupā, kas norādīja uz lielāku sistēmisko ekspozīciju [50].

Tans un līdzstrādnieki (2012) ievadīja Ac-SDKP MRL/lpr pelēm ar vilkēdi devā 1,0 mg/kg dienā astoņas nedēļas. Salīdzinājumā ar neārstētiem dzīvniekiem pelēm, kuras saņēma peptīdu, bija mazāka proteinūrija un labāka nieru funkcija. Nieru audos bija mazāk infiltrējošu T limfocītu un makrofāgu. Samazinājās NF-κB aktivācija un TNF-α produkcija, kā arī fibrozes marķieru TGF-β1, α-SMA un fibronektīna līmenis. Tika inhibēta Smad2/3 fosforilācija, un Smad7 līmenis paaugstinājās.

Savukārt imūnkompleksu nogulsnīšanās un anti-dsDNA antivielu līmenis nemainījās. Tas liecina, ka efekti izrietēja no iekaisuma un fibrozes turpmāko posmu ierobežošanas, nevis no antivielu veidošanās izmaiņām [51].

Maheshwari un līdzstrādnieki (2018) pētīja normāla svara (ZL) un aptaukojušos (ZO) Cukera žurkas, kuras astoņas nedēļas tika barotas ar normālu sāls diētu (0,4%) vai augsta sāls diētu (4%). Viena no ZO žurku apakšgrupām saņēma Ac-SDKP devā 1,6 mg/kg dienā.

Ar sāli bagāts uzturs pastiprināja nieru iekaisumu un fibrozi abās grupās, turklāt žurkām ar aptaukošanos makrofāgu pieplūdums bija vislielākais: 87,8 ± 10,8 pret 19,14 ± 1,5 šūnām/mm² slaidajām žurkām. Ac-SDKP lietošana samazināja makrofāgu pieplūdumu žurkām ar aptaukošanos līdz 32,18 ± 2,4 šūnām/mm² (p < 0,05), kā arī ierobežoja glomerulāro sklerozi un intersticiālo fibrozi nieru garozā un seragrauzdā (p < 0,05).

Sistoliskais arteriālais asinsspiediens žurkām ar aptaukošanos, kuras saņēma ar sāli bagātinātu diētu, samazinājās no 164 ± 6,9 līdz 144,05 ± 14,1 mmHg (p = 0,004). Albūminūrija bija augstāka dzīvniekiem ar aptaukošanos nekā slaidajiem, bet diētas vai Ac-SDKP ietekmē būtiski nemainījās [52].

Neiroloģiskie pētījumi: smadzeņu un muguras smadzeņu bojājumu modeļi

Parkinsona slimības šūnu un žurku modeļi

Kamarehei un Zahednasab (2025) pētīja Ac-SDKP Parkinsona slimības modeļos. Šūnu eksperimentos neironu SH-SY5Y šūnu iepriekšēja ekspozīcija 20 nM peptīdam samazināja bojājumus, ko izraisīja 6-OHDA — toksīns, ko bieži izmanto parkinsonisma izmaiņu modelēšanai.

Pētījumos ar žurkām ikdienas 800 µg/kg deva pēc smadzeņu bojājumu izraisīšanas ar 6-OHDA veicināja lielāka dopamīnerģisko neironu skaita saglabāšanos un samazināja šūnu bojāeju, ierobežojot kaspāzes-3 un kaspāzes-12 aktivitāti.

Dzīvnieki, kuri saņēma peptīdu, uzrādīja arī labāku motorisko koordināciju, uzlabotu telpisko atmiņu un mazāk trauksmei un depresijai līdzīgu uzvedību.

Mehāniski izmaiņas tika saistītas ar oksidatīvā stresa, endoplazmatiskā tīkla stresa un iekaisuma signāluceļu samazināšanos smadzenēs. Tomēr rezultāti attiecas uz preklīniskiem modeļiem un neapstiprina Ac-SDKP efektivitāti Parkinsona slimības pacientiem [53].

Reģenerācija pēc muguras smadzeņu traumas

Hašemizade (Hashemizadeh) un līdzstrādnieki (2022) ievadīja Vistar žurkām Ac-SDKP subkutāni devā 0,8 mg/kg reizi dienā septiņas dienas, sākot divas vai sešas stundas pēc muguras smadzeņu traumas, ko izraisīja smaguma krišana.

Salīdzinājumā ar neārstētiem dzīvniekiem žurkām, kuras saņēma peptīdu, atjaunojās labākas iešanas spējas, tās zaudēja mazāk motoneironu un uzrādīja zemāku TNF-α un kaspāzes-3 līmeni.

Vienlaikus palielinājās CD206 mRNA ekspresija – marķiera, kas saistīts ar M2 makrofāgiem, kuri piedalās atjaunošanās procesos. Audu izpēte uzrādīja mazākus bojājuma laukumus.

Kopumā tika novērota imūnās atbildes pāreja no M1 makrofāgiem raksturīgās aktivitātes uz M2 tipa atbildes reakciju, ko pavadīja labvēlīgāki funkcionālie un strukturālie rezultāti [54].

Aizsardzība pēc smadzeņu traumas (TBI)

Džangs un līdzstrādnieki (2017) izraisīja žurkām kontrolētu smadzeņu garozas bojājumu un pēc tam ievadīja Ac-SDKP devā 0,8 mg/kg dienā, izmantojot minipumpu trīs dienas, sākot stundu pēc traumas.

No 7. līdz 35. dienai sensomotoro testu rezultāti bija labāki, un laikā no 33. līdz 35. dienai tika novērota arī telpiskās mācīšanās uzlabošanās salīdzinarumā ar kontroles grupu (p < 0,05).

Pētījuma beigās garozas bojājuma laukums un neironu zudums hipokampā bija mazāks. Tajā pašā laikā palielinājās angioģenēze, jaunu neironu veidošanās un dendrītisko spinālu blīvums.

Agrīna ievadīšana ierobežoja arī fibrīna uzkrāšanos un imūnšūnu aktivāciju. Mehāniskie pētījumi parādīja, ka lielu daļu pretiekaisuma efekta var izskaidrot ar TGF-β1/NF-κB signālu ceļa inhibīciju [55].

Eksperimentāls autoimūns encefalomielīts (multiplajai sklerozei līdzīgs modelis)

Pejman un līdzstrādnieki (2020) pētīja C57BL/6 peles ar eksperimentālu autoimūnu encefalomielītu (EAE), ko izmanto kā izkliedētās sklerozes procesiem līdzīgu modeli.

EAE gadījumā tika novērots paaugstināts endoplazmatiskā tīkla stresa marķieru, tostarp kaspāzes-12, CHOP un PDI, līmenis, kā arī pastiprināts oksidatīvais stress un imūnšūnu ieplūde hipokampā.

Pēc Ac-SDKP ievadīšanas samazinājās kaspāzes-12 un CHOP līmenis oligodendrocītos, kā arī kaspāzes-3 aktivācija. Samazinājās arī reaktīvo skābekļa formu līmenis un lipīdu peroksidācija, uzlabojās antioksidatīvā kapacitāte un IL-6 un IL-1β koncentrācija bija zemāka.

Smadzeņu audu analīze uzrādīja mazākus hipokampa bojājumus un mazāk infiltrējošu imūnšūnu, kas atbilda lēnākai slimības progresēšanai šajā modelī [56].

Papildu neiroloģiskie izmeklējumi, kas minēti avota materiālā

Avotu literatūras sarakstā tika iekļauts arī pētījums par žurku smadzeņu insultu, kurā tika analizēts Ac-SDKP kombinācijā ar audu plazminogēna aktivatoru [57], un timozīna β4 fragmenta pētījums par hipokampa neirooģenēzi un telpisko atmiņu [58].

Piegādātajā rakstā nav norādītas šo divu pētījumu metodes vai rezultāti, tāpēc uz tā pamata nav iespējams izdarīt papildu secinājumus par to rezultātiem.

Aknu izmeklējumi: eksperimentālā fibroze

Ķīmisko vielu izraisītas aknu fibrozes ierobežošana

Wei un līdzstrādnieki (2022) pētīja žurkas ar oglekļa tetrahlorīda (CCl₄) izraisītu aknu bojājumu. Pēc Ac-SDKP lietošanas tika novērots mazāk stellāto šūnu, kas ir galvenās šūnas, kuras piedalās aknu šķiedraino audu veidošanā, bojāeju, kā arī mazāka fibroze.

Mehānistiskie pētījumi parādīja, ka peptīds samazināja WTAP – proteīna, kas piedalās m⁶A modifikāciju pievienošanā RNS – līmeni. Šīs izmaiņas stabilizēja Ptch1 RNS un ietekmēja Hedgehog signālceļa aktivitāti, kas ir svarīgs ar fibrozi saistīto procesu regulators.

Wyniki wskazują na mechanizm przeciwzwłóknieniowy związany ze szlakiem WTAP/m⁶A/Ptch1 i regulacją sygnalizacji Hedgehog [59].

Ochrona w modelu włóknienia wywołanego niedrożnością dróg żółciowych

Zhang i współpracownicy (2012) zastosowali szczurzy model podwiązania przewodu żółciowego (BDL), a następnie przez dwa tygodnie podawali Ac-SDKP.

W porównaniu z nieleczonymi zwierzętami obserwowano osłabienie sygnalizacji TGF-β1 i niższe poziomy markerów aktywowanych komórek gwiaździstych, w tym α-SMA i FSP-1.

Zmniejszała się także ekspresja genów związanych z kolagenem typu I i III oraz enzymów uczestniczących w przebudowie macierzy, takich jak MMP-2, TIMP-1 i TIMP-2.

Parametry krwi związane z funkcją wątroby ulegały poprawie: ALT, AST, bilirubina i czas protrombinowy zbliżały się do wartości prawidłowych. Badania histologiczne wykazały mniej komórek tucznych, mniejsze odkładanie kolagenu oraz słabsze włóknienie i zapalenie [60].

Zachowanie naturalnych mechanizmów ochronnych i naprawczych

Chen i współpracownicy (2010) wykazali, że podczas długotrwałej ekspozycji na CCl₄ naturalne stężenia Ac-SDKP stopniowo się zmniejszały.

Podawanie peptydu we wlewie w dawce 800 µg/kg/dobę przez osiem tygodni pomagało utrzymać jego podstawowy poziom oraz ograniczało uszkodzenia wątroby, zapalenie i włóknienie.

Spadały aktywności enzymów wątrobowych we krwi, liczba komórek zapalnych CD45⁺ oraz ilość kolagenu i złogów α-SMA. Zmniejszały się również poziomy TGF-β1 i fosforylowanych Smad2/3, natomiast wzrastała aktywność sygnałów związanych z naprawą tkanek, takich jak BMP-7 i fosforylowane Smad1/5/8.

W eksperymentach komórkowych Ac-SDKP bezpośrednio hamował aktywację komórek gwiaździstych, co potwierdzało działanie przeciwzwłóknieniowe na poziomie komórkowym [61].

Regeneracja skóry, modele gojenia ran i inne wyniki eksperymentalne

Hydrożel zawierający Ac-SDKP i przebudowa blizn

Opracowano specjalny klej tkankowy na bazie celulozy, Dopa-OCMC-PAA, porównywany z OCMC-PAA, przeznaczony do przenoszenia i uwalniania Ac-SDKP.

Obie wersje wykazywały odpowiednie właściwości pęcznienia i degradacji, dobrą wytrzymałość mechaniczną oraz zgodność z komórkami, ale Dopa-OCMC-PAA osiągał korzystniejsze wyniki.

U myszy z krwawieniem z wątroby klej ten szybciej hamował krwawienie. W testach fibroblastów zwiększał poziomy enzymów uczestniczących w przebudowie tkanek, MMP-1 i MMP-3, a jednocześnie ograniczał aktywność genów związanych z kolagenem.

U królików z przerosłymi bliznami na uszach połączenie Dopa-OCMC-PAA z Ac-SDKP zmniejszało nasilenie bliznowacenia, liczbę komórek i poprawiało organizację kolagenu. Ponownie obserwowano wzrost MMP-1 i MMP-3 oraz niższą aktywność genów kolagenowych. Wyniki wskazywały na korzystniejsze gojenie ran i mniejsze bliznowacenie w badanych modelach [62].

Miejscowe zastosowanie a przeżywalność skóry i procesy naprawcze

W szczurzych modelach chirurgicznych płatów skórnych, brzusznych i grzbietowych, podawanie Ac-SDKP w zastrzykach w dawce 5 µg/kg dwa razy dziennie przez trzy dni zwiększało powierzchnię żywej skóry.

W płatach brzusznych udział żywej tkanki wzrósł z 50,9 ± 19,3% do 66,4 ± 7,5%, a w płatach grzbietowych z 53,4 ± 4,2% do 74,7 ± 6,6%.

W tkance skórnej uszkodzonej promieniowaniem UVB miejscowe zastosowanie peptydu poprawiało przeżywalność komórek. Podawanie powierzchniowe przyspieszało również tworzenie nowego naskórka, zwiększało poziom keratyny-14, markera komórek uczestniczących w odbudowie skóry, oraz fibronektyny. Wyniki wskazują na udział w procesach angiogenezy i naprawy tkanek w warunkach eksperymentalnych [63].

Ochrona krwiotworzenia podczas chemioterapii

W badaniu myszy otrzymujących doksorubicynę, lek chemioterapeutyczny, podawanie Ac-SDKP w ilości 2,4 µg/dobę, w sposób ciągły lub w dawkach podzielonych, rozpoczynane 48 godzin przed leczeniem, zmniejszało śmiertelność i chroniło krwiotwórcze komórki macierzyste.

Ochronę obserwowano w pomiarach LTRC, CFU-S, HPP-CFC i CFU-GM. Dodanie G-CSF dodatkowo zwiększało odbudowę CFU-GM.

Moment rozpoczęcia podawania miał kluczowe znaczenie. Rozpoczęcie przed chemioterapią było konieczne do ograniczenia zarówno krótkotrwałego uszkodzenia szpiku, jak i długoterminowej utraty komórek macierzystych w tym modelu [64].

Silniejsze działanie przeciwzwłóknieniowe zmodyfikowanych analogów i połączeń z inhibitorami ACE

W eksperymentach na fibroblastach płucnych forma Ac-SDKP odporna na rozkład przez ACE silniej ograniczała sygnalizację TGF-β/Smad3 i odkładanie kolagenu niż naturalna cząsteczka.

Skrócony fragment Ac-DKP wykazywał jedynie słabe efekty i był powoli rozkładany przez ACE.

Połączenie peptydu z inhibitorami ACE silniej ograniczało poziom hydroksyproliny, markera zawartości kolagenu, niż sam peptyd. Wyniki sugerują możliwość dalszych badań nad zmodyfikowanymi analogami i ich interakcjami.

W zakresie stężeń od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M zarówno tymozyna β4, jak i Ac-SDKP zmniejszały proliferację komórek tucznych, przy czym najsilniejszy efekt obserwowano przy 10⁻¹⁴ M. Powodowały również nietypowe zmiany w jądrach komórkowych związane z zatrzymaniem cyklu komórkowego.

Przy stężeniu 10⁻⁸ M oba peptydy wywoływały także degranulację komórek tucznych. Ac-SDKP wykazywał silniejszy efekt, około 89%, niż tymozyna β4, około 57%. Pozostałe fragmenty tymozyny β4 nie wykazywały aktywności, co sugeruje zależność tych odpowiedzi od badanych nienaruszonych peptydów, a nie innych analizowanych fragmentów [65, 66].

Eksperymentalne dawki Ac-SDKP w opublikowanych badaniach – nie są zaleceniami dla ludzi

Poniższe wartości opisują protokoły stosowane w cytowanych eksperymentach na zwierzętach i komórkach. Nie są ustalonymi dawkami dla ludzi.

W analizowanych badaniach przedklinicznych Ac-SDKP często podawano podskórnie za pomocą minipomp w ilości około 0,8 mg/kg/dobę w celu oceny włóknienia i zapalenia w sercu, naczyniach i nerkach. W mysich modelach zawału serca stosowano niekiedy 1,6 mg/kg/dobę w badaniach wczesnej ochrony tkanek.

W eksperymentach dotyczących mózgu i układu nerwowego krótkie cykle rozpoczynane w ciągu kilku godzin od urazu zwykle obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę przez trzy do siedmiu dni. W badaniach komórkowych często stosowano wstępną ekspozycję na około 10 nM peptydu.

W modelach przewlekłego uszkodzenia wątroby protokoły przeciwzwłóknieniowe często obejmowały około 0,8 mg/kg/dobę. W modelu włóknienia płuc wywołanego bleomycyną stosowano 0,6 mg/kg dootrzewnowo, z powtarzanymi podaniami rozpoczynanymi w dniu 0 lub 7.

W badaniach gojenia skóry i ran miejscowe schematy obejmowały 5 µg/kg na wstrzyknięcie dwa razy dziennie przez trzy dni albo hydrożele zawierające peptyd i uwalniające go miejscowo.

W badaniach hematologicznych i dotyczących ochrony szpiku wykorzystywano bardzo małe ilości, na przykład 2,4 µg/dobę u myszy przed chemioterapią oraz krótkie cykle w zakresie µg/kg/dobę we wczesnych badaniach klinicznych.

Interpretacja wyników i ograniczenia dostępnych dowodów

Największa część przedstawionej literatury obejmuje eksperymenty komórkowe i modele zwierzęce. Zmiany w odkładaniu kolagenu, mediatorach zapalnych, budowie tkanek i eksperymentalnych parametrach funkcjonalnych nie stanowią same w sobie dowodu działania terapeutycznego u ludzi.

Przytoczone wczesne badania kliniczne dotyczyły głównie parametrów hematologicznych podczas chemioterapii i przyniosły niejednoznaczne wyniki, w tym negatywne wyniki badania randomizowanego [48, 49].

Eksperymentalne drogi podawania, ilości substancji i okresy ekspozycji należy traktować jako elementy metodologii badań, a nie zalecenia dotyczące indywidualnego stosowania.

Zastrzeżenie redakcyjne: Niniejszy artykuł ma charakter wyłącznie edukacyjny i naukowy. Przedstawia wyniki badań nad Ac-SDKP, mechanizmy molekularne i ograniczenia dostępnych dowodów. Nie stanowi porady medycznej, nie zaleca stosowania Ac-SDKP ani nie określa protokołów dawkowania, podawania czy leczenia. Wyniki badań laboratoryjnych i doświadczeń na zwierzętach nie potwierdzają bezpieczeństwa ani skuteczności Ac-SDKP u ludzi.

Atsauces

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). The Role of Tβ4-POP-Ac-SDKP Axis in Organ Fibrosis. Starptautiskais molekulāro zinātņu žurnāls, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP decreases mortality and cardiac rupture after acute myocardial infarction. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP reverses cardiac fibrosis in rats with renovascular hypertension. Hypertension, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP reverses inflammation and fibrosis in rats with heart failure after myocardial infarction. Hypertension, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotic effect of Ac-SDKP and angiotensin-converting enzyme inhibition in hypertension. Journal of Hypertension, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on DNA and collagen synthesis in rat cardiac fibroblasts. Hypertension, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents cardiac remodeling and dysfunction induced by galectin-3, a mammalian adhesion/growth-regulatory lectin. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Long-term effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on left ventricular collagen deposition in rats with 2-kidney, 1-clip hypertension. Circulation, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Therapeutic potential of thymosin-beta4 and its derivative N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in cardiac healing after infarction. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions (Amerikas sirds un asinsvadu zāļu žurnāls : zāles, ierīces un citi pasākumi), 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro inhibits interleukin-1β-mediated matrix metalloproteinase activation in cardiac fibroblasts. Pflügers Archiv – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Treatment with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents experimental autoimmune myocarditis in rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline reduces cardiac collagen cross-linking and inflammation in angiotensin II-induced hypertensive rats. Clinical Science, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E., & Rhaleb, N. E. (2019). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline treatment protects heart against excessive myocardial injury and heart failure in mice. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Prevention of myocardial fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. Clinical Science, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Effects of a novel peptide Ac-SDKP in radiation-induced coronary endothelial damage and resting myocardial blood flow. Kardioonkoloģija, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP attenuates ER stress-stimulated collagen production in cardiac fibroblasts by inhibiting CHOP-mediated NF-κB expression. Farmakoloģijas robežas, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP suppresses TNF-α-induced ICAM-1 expression in endothelial cells via inhibition of IκB kinase and NF-κB activation. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Prevention of aortic fibrosis by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in angiotensin II-induced hypertension. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). A small peptide Ac-SDKP inhibits radiation-induced cardiomyopathy. Cirkulācija: Sirds mazspēja, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2015). Effects of thymosin β4 and its N-terminal fragment Ac-SDKP on TGF-β-treated human lung fibroblasts and in the mouse model of bleomycin-induced lung fibrosis. Expert Opinion on Biological Therapy, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S., & Yang, F. (2023). Ac-SDKP promotes KIF3A-mediated β-catenin suppression through a ciliary mechanism to constrain silica-induced epithelial-myofibroblast transition. Biomedicīna un farmakoterapija, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Immunomodulatory effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-proline and vasoactive intestinal peptide on chronic obstructive pulmonary disease pathophysiology. Fundamental & Clinical Pharmacology, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Synthesis and identification of a novel peptide, Ac-SDK (biotin) proline, that can elicit anti-fibrosis effects in rats suffering from silicosis. Drug Design, Development and Therapy, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventive and therapeutic effects of thymosin β4 N-terminal fragment Ac-SDKP in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Regulatory effect of Ac-SDKP on phosphorylated heat shock protein 27/SNAI1 pathway in silicotic rats. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Meta-analysis of Ac-SDKP inhibition of pulmonary fibrosis in animal models. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline mediated by regulation of transforming growth factor beta and connective tissue growth factor expression on rats with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Anti-fibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in lung of rat with silicosis]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F., & Xu, H. (2021). Ac-SDKP attenuates activation of lung macrophages and bone osteoclasts in rats exposed to silica by inhibition of TLR4 and RANKL signaling pathways. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D., & Wang, R. (2012). A new antifibrotic target of Ac-SDKP: inhibition of myofibroblast differentiation in rat lung with silicosis. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Acetylated α-Tubulin regulated by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) exerts the anti-fibrotic effect in rat lung fibrosis induced by silica. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Protective effect of Ac-SDKP on alveolar epithelial cells through inhibition of EMT via TGF-β1/ROCK1 pathway in silicosis in rat. Toxicology and Applied Pharmacology, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) attenuates silicotic fibrosis by suppressing apoptosis of alveolar type II epithelial cells via mediation of endoplasmic reticulum stress. Toxicology and Applied Pharmacology, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Effects of N-acetyl-seryl-asparyl-lysyl-proline on blood pressure, renal damage, and mortality in systemic lupus erythematosus. Physiological Reports, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). Renal protective effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in Dahl salt-sensitive rats. Hypertension, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-Acetyl-Seryl-Aspartyl-Lysyl-Proline: mechanisms of renal protection in mouse model of systemic lupus erythematosus. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renal protective effects of N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro in deoxycorticosterone acetate-salt hypertensive mice. Journal of Hypertension, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M., & Koya, D. (2005). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline prevents renal insufficiency and mesangial matrix expansion in diabetic db/db mice. Cukura diabēts, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Renal antifibrotic effect of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline in diabetic rats. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L., & Hu, B. (2022). A biomimetic double network hydrogel ameliorates renal fibrosis and promotes renal regeneration. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A., & Fogo, A. B. (2013). Thymosin β4 and its degradation product, Ac-SDKP, are novel reparative factors in renal fibrosis. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal inflammation and tubulointerstitial fibrosis in rats. International Journal of Molecular Medicine, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline attenuates renal injury and dysfunction in hypertensive rats with reduced renal mass: Council for High Blood Pressure Research. Hypertension, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotic effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on the heart and kidney in aldosterone-salt hypertensive rats. Hypertension, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M., & Inomata, N. (2006). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline ameliorates the progression of renal dysfunction and fibrosis in WKY rats with established anti-glomerular basement membrane nephritis. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K., & Koya, D. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline inhibits diabetes-associated kidney fibrosis and endothelial-mesenchymal transition. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolic reprogramming by N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline protects against diabetic kidney disease. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenide (acetylSDKP): phase I–II trial study of inhibitor of hematopoiesis protects against toxicity of aracytine and ifosfamide monochemotherapies]. Clinical Trial C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomized placebo trial of myeloprotection with goralatide in patients with squamous cell carcinoma of the upper respiratory and digestive tracts or esophagus, treated with a carboplatin-fluorouracil combination]. Bull Cancer, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K., & Koya, D. (2016). Oral Administration of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline Ameliorates Kidney Disease in Both Type 1 and Type 2 Diabetic Mice via a Therapeutic Regimen. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP ameliorates the progression of lupus nephritis in MRL/lpr mice. International Immunopharmacology, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renal protective effects of N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (Ac-SDKP) in obese rats on a high-salt diet. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Neuroprotective effect of Ac-SDKP peptide in SH-SY5Y cells and rat model of Parkinson’s disease against 6-OHDA-induced oxidative stress and ER stress. Neuropeptides, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Ac-SDKP peptide improves functional recovery following spinal cord injury in a preclinical model. Neuropeptides, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Treatment of traumatic brain injury in rats with N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S., & Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP ameliorates the progression of experimental autoimmune encephalomyelitis via inhibition of ER stress and oxidative stress in the hippocampus of C57BL/6 mice. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Combination Treatment with N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline and Tissue Plasminogen Activator Provides Potent Neuroprotection in Rats After Stroke. Stroke, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S., & Ryu, J. H. (2015). Peptide fragment of thymosin β4 increases hippocampal neurogenesis and facilitates spatial memory. Neuroscience, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (AcSDKP) mitigates liver fibrosis via WTAP/m6A/Ptch1 axis through Hedgehog pathway. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotic Effect of N-Acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline on Bile Duct Ligation-Induced Liver Fibrosis in Rats. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Preservation of basal AcSDKP attenuates carbon tetrachloride-induced fibrosis in the rat liver. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A., & Brouki Milan, P. (2025). A cellulose-based skin adhesive hydrogel incorporating N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline peptide for enhanced wound healing and scar prevention in rabbit scar ear model in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). The tetrapeptide acetyl-serine-aspartyl-lysine-proline improves skin flap survival and accelerates wound healing. Wound Repair and Regeneration, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F., & Carde, P. (1998). The tetrapeptide acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatide) protects from doxorubicin-induced toxicity: improvement in mice survival and protection of bone marrow stem cells and progenitors. Asinis, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Investigating the antifibrotic potential of N-acetyl seryl-aspartyl-lysyl-proline sequence peptides. Klīniskā un eksperimentālā farmakoloģija un fizioloģija, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Thymosin beta 4 and its N-terminal tetrapeptide, AcSDKP, inhibit proliferation, and induce dysplastic, non-apoptotic nuclei and degranulation of mast cells. Ķīmija un bioloģiskā daudzveidība, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/