Ac-SDKP (N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolina): fibrilácia orgánov, ochrana tkanív a experimentálne štúdie

Ac-SDKP (N-acetyl-seryl-aspartyl-lyso-proline) je endogénny tetrapeptid vznikajúci z väčšieho proteínu tymozínu beta-4. V dôsledku enzymatického spracovania tymozínu β4 vzniká niekoľko fragmentov vrátane Ac-SDKP [1]. Tento zlúčok vzbudzuje záujem vedcov kvôli protizápalovému účinku pozorovanému v experimentálnych modeloch poškodenia tkanív. Jeho biologická trvanlivosť je obmedzená rýchlym rozpadom pomocou enzýmu konvertujúceho angiotenzín (ACE). V štúdiách sa preukázalo, že inhibítory ACE môžu zvýšiť koncentráciu cirkulujúceho Ac-SDKP až päťnásobne, čo je dôležité pre štúdie o jeho účinkoch na tkanivá [1].

Spočiatku sa výskum sústreďoval na schopnosť Ac-SDKP udržiavať tvorivé bunky matky krvi v relatívnom stave spánku. Neskôr sa rozsah výskumu rozšíril o zápalové procesy, regeneráciu extracelulárnej matky a regeneráciu tkanív. V niekoľkých predklinických modeloch poškodenia orgánov vedci pozorovali obmedzenie patologického hromadenia komponentov matky. Tento peptid znižoval napríklad aktivitu signálnych molekúl, ktoré povzbudzujú bunky k nadmernej tvorbe kolagénu, hlavného proteínu bliznovatej tkaniny, a obmedzoval transformáciu fibroblastov na bunky zodpovedné za tvorbu blizn.

V predklinických štúdiách týkajúcich sa obličiek vykazoval Ac-SDKP tiež priaznivé zmeny v parametroch funkcie orgánu a zrážanlivosti. Zaznamenalo sa obmedzenie nadmerného prúdenia imunitných buniek a oslabenie zápalových procesov, ktoré môžu zhoršiť poškodenie. Celkovo ukazujú výsledky na úlohu Ac-SDKP ako endogénneho regulátora cievnych cvičných dráh. Avšak pozorovanie pochádzajúce z bunkových a živočíšnych štúdií nepotvrdzuje klinickú účinnosť ani bezpečnosť použitia u ľudí.

Štúdie kardiovaskulárneho systému: zhrubnutie srdca, zápal a poškodenie ciev

Experimentálne kardiovaskulárne štúdie analyzovali Ac-SDKP v situáciách akútnych poškodení srdcového svalu aj v chronickom procese jeho rekonštrukcie. V myšom modeli srdcového infarktu Nakagawa a spolupracovníci podávali Ac-SDKP v dávke 1,6 mg/kg/deň pomocou malé podkožnej pumpy. Percento prasknutí srdcového svalu sa znížilo z 51,0% na 27,3% a úmrtnosť z 56,9% na 31,8%. Výskumníci spájali tieto výsledky s menším prílevom prozapalových makrofágov M1 bez zodpovedajúcich zmien počtu makrofágov M2 alebo neutrofilov. Zistili sa tiež obmedzenia aktivity metaloproteinázy MMP-9, enzýmu zúčastňujúceho sa na rozklade srdcových tkanív po infarkte, zatiaľ čo marker MPO zostal nezmenený. To môže naznačovať selektívny účinok na konkrétne mechanizmy poškodenia [2].

V štúdiách týkajúcich sa zhrubnutia srdca spôsobeného dlhodobým hypertenziou identifikovali Peng a jeho kolegovia, že Ac-SDKP môže znižovať už existujúcu fibrózu, a nie len obmedzovať jej vznik. U potkanov s pretrvávajúcim hypertenziou podkožné podávanie Ac-SDKP v dávkach 400–800 µg/kg denne počas ôsmich týždňov znižovalo obsah kolagénu v srdci v závislosti od dávky. Vyššia dávka bola spojená so silnejším účinkom. Systolický tlak sa neznížil a správne reakcie na angiotenzín I a bradykinínu zostali zachované. To znamená, že pozorované zmeny nemožno vysvetliť výlučne znížením tlaku. Koncentrácia Ac-SDKP v krvi sa zvýšila od dvoch do piatichnásobku, zatiaľ čo hladiny TGF-β a CTGF, dôležitých mediátorov zhrubnutia, sa znížili [3].

Po infarkte srdca môžu pretrvávajúce zápal a zhrubnutie viesť k progresívnej poruche funkcie orgánu. Yang a spolupracovníci skúmali Ac-SDKP tak v počiatočnej fáze, aby obmedzili poškodenie, ako aj v neskoršom období, aby zhodnotili možnosť zvrátenia zmien. V oboch prípadoch sa celková hladina kolagénu v srdci znížila. V preventívnej skupine sa napríklad znížila z približne 24 na 15 µg/mg, pričom v skupine skúmajúcej zvrátenie zmien to bolo zhruba 23 na 14 µg/mg. Počet makrofágov sa v oboch skupinách znížil približne o jednu tretinu, pričom aj počet buniek pozitívnych na TGF-β klesol. Tieto zmeny sa vyskytli bez zníženia krvného tlaku ani bez zmenšenia srdca. V preventívnej skupine neboli zaznamenané jednoznačné zlepšenia v sile sťahovacej sily. Napriek tomu obmedzenie zhrubnutia a zápalu naznačovalo priaznivé štrukturálne parametre srdcového svalu v skúšanom modeli [4].

Ac-SDKP môže tiež účinkovať na dodatočné ochranné účinky pozorované pri použití ACE inhibítorov. Rasoul a spolupracovníci porovnali model hypertenzie vyvolanej angiotenzínom II u skupín dostávajúcich kaptopril alebo Ac-SDKP v dávkach 400–800 µg/kg/deň. Peptid mnohonásobným spôsobom zvyšoval svoju koncentráciu v krvi a reprodukoval mnohé účinky podobné účinkom ACE inhibítorov: obmedzoval nadmernú proliferáciu buniek v srdci, znižoval počet makrofágov a tukových buniek, znižoval hladiny TGF-β a CTGF a obmedzoval ukladanie kolagénu. Tieto účinky sa prejavovali bez zníženia krvného tlaku ani zníženia hypertrofie srdca, čo naznačuje priamy vplyv na svalovú tkáň srdca [5].

Rhaleb a spolupracovníci skúmali Ac-SDKP v kultúrach srdcových fibroblastov potkanov použitím koncentrácií od 0,05 do 100 nmol/l. Zistili dva významné efekty: obmedzenie proliferácie buniek meranej na základe syntézy DNA na hodnoty približne rovné normálnym pri približne 1 nmol/l a zníženie produkcie kolagénu podporenej endotelínom-1, silným fibróznym mediátorom. Nižšie koncentrácie vykazovali vyššiu účinnosť pri obmedzovaní syntézy kolagénu, zatiaľ čo veľmi vysoké boli menej účinné. Mechanizmus sa zdal súvisieť so oslabením signálnej dráhy p44/42 MAPK/ERK. Poznaný inhibítor MAPK vyvolával podobný efekt. Výsledky sú v súlade s obmedzením proliferácie fibroblastov a syntézy matice moduláciou cievnych regulujúcich procesov [6].

V ďalších štúdiách sa ukázalo, že Ac-SDKP môže obmedziť poškodenie srdca vyvolané galektynou-3. Liu a jeho kolegovia podávali dospelým prasatám galektynu-3, proteín podporujúci zápal a zhrubnutie ciev, počas štyroch týždňov. U zvierat sa pozorovala vyšší počet zápalových buniek, zahusťovanie steny srdca, zosilnené vaskulárne a medzobunkové zhrubnutie, zvýšená aktivita proteínu TGF-β/Smad3 a slabšia kontrakčná funkcia v echokardiografickom vyšetrení. Pridanie Ac-SDKP v dávke 800 µg/kg/deň zabránilo väčšine týchto zmien. Znížila sa počet zápalových buniek, zahusťovanie a zahusťovanie steny srdca, pričom parametre jeho funkcie boli priaznivejšie. Výsledky naznačujú účasť blokovania proteínu TGF-β/Smad3 a obmedzenia zápalu [7].

Rhaleb a spolupracovníci tiež hodnotili Ac-SDKP v klasickom potkaneckom modeli arteriovenózneho hypertenzie, známeho ako model dvoch obličiek a jedného uzáveru (2K1C). Peptid sa podával subkutánne v dávke 400 µg/kg/deň. Napriek udržiavaniu zvýšeného tlaku v artériách a prebytkovému srdcovému svalu sa pozorovala významná redukcia počtu zápalových buniek a proliferujúcich buniek v srdcovom svale. Podiel kolagénu v medzizubnej chrupke sa znížil z približne 10,1% u potkanov s hypertenziou na približne 5,4%, čo je úroveň takmer identická s úrovňou u zdanlivo operovaných zvierat (približne 5,3%). To znamená, že regenerácia tkanív sa zmenila napriek pretrvávajúcemu tlakovému namáhaniu, čo podporuje hypotézu mechanizmu nezávislého od zníženia tlaku [8].

V prehľade tematických štúdií Cavasin a spolupracovníci zhodnotili vzájomné účinky timozínu β4 a jeho fragmentu Ac-SDKP. Timozín β4 sa podieľa na migraci a prežívaní buniek, zatiaľ čo Ac-SDKP vykazuje protizápalové účinky v modeloch hypertenzie. V štúdiách srdcového infarktu peptid obmedzoval zápal, znižoval zhrubnutie a tiež podporoval angiogenézu, čo sa pozorovalo tak in vivo ako aj ex vivo. V modeloch myší znižoval tiež riziko prasknutia srdcovej steny. Zlúčenie týchto účinkov naznačuje, že Ac-SDKP môže byť zodpovedný za niektoré biologické účinky pripisované timozínu β4. Avšak autori zdôraznili potrebu klinických štúdií u ľudí [9].

Ac-SDKP bol tiež testovaný z hľadiska vplyvu na enzýmy rozkladajúce zložky extracelulárnej matrice. V srdcových fibroblastoch dospelých potkanov Rhaleb a spolupracovníci zistili, že interleukín 1β (IL-1β) výrazne zvyšuje expresiu metaloproteináz MMP-2, MMP-9 a MMP-13. Tieto enzýmy sa podieľajú na degradácii matrice a môžu prispieť k nepriaznivému remodelovaniu tkanív. Ac-SDKP nezmenil základnú expresiu MMP, ale výrazne spomaľoval rast spôsobený IL-1β. Zároveň zvyšoval expresiu prirodzených inhibítorov metaloproteináz, TIMP-1 a TIMP-2, pričom obnovil vyváženejšiu reguláciu remodelovania matrice.

Peptid tiež obmedzoval aktiváciu NF-κB a ERK/MAPK, dvoch významných cenných dráh spojených s zápalom a proliferáciou. Dôležité je, že IL-1β v tomto modeli neposilňovala produkciu kolagénu a Ac-SDKP tiež neovplyvňoval jeho syntézu. To naznačuje selektívnu reguláciu obnovy tkanív a nie všeobecné spomaľovanie syntézy kolagénu. Výsledky naznačujú možnú úlohu Ac-SDKP pri udržiavaní rovnováhy procesov spojených s extracelulárnou maticou [10].

Nakagawa a spolupracovníci skúmali Ac-SDKP u potkaních modelov infarktu myokardu závislého od T-lymfocytov. U imunizovaných potkaních myší, ktoré dostávali peptid, bola zachovaná funkcia kontrakcie aj relaxácie srdca. Omeštené bolo tiež zväčšenie orgánu, tvorba väzivovej tkanivovej hmoty a poškodenie jej štruktúry. Histologická analýza ukázala menší objem imunitných buniek, vrátane makrofágov, dendritických buniek a T-lymfocytov.

Znížili sa aj hladiny mediátorov zápalu, vrátane IL-1α, TNF-α, IL-2 a IL-17, chemokinov CINC-1 a IP-10, adhéznych molekúl ICAM-1 a L-selektínu, a tiež metaloproteináz. Ac-SDKP však nezmenil hladinu protilátok proti miozinínu ani odpovede T-lymfocytov na antigén. To naznačuje, že pozorovaný ochranný účinok vyplýval predovšetkým z obmedzenia rekrycie imunitných buniek a mediátorov zápalu, a nie z zmien v produkcii protilátok alebo aktivácie T-lymfocytov [11].

González a jeho spolupracovníci skúmali Ac-SDKP u potkanov, ktorým počas troch týždňov podávali angiotenzín II. Systolický tlak a hypertrofia srdca zostali zvýšené u zvierat liečených aj kontrolných. Ac-SDKP však zabránil zvýšeniu celkovej hladiny kolagénu a jeho zhrubnutiu. Mechanizmus zahŕňal inhibíciu expresie mRNA oxidázy lyzázy (LOX) a proteínu LOXL1, ktoré sú enzýmami zúčastňujúcimi sa na vytváraní priečnych väzieb kolagénu a spevnení väzivovej tkanivovej štruktúry.

Okrem toho sa znížila expresia TGF-β, aktivácia NF-κB a prílev CD4⁺ a CD8⁺ T-buniek a CD68⁺ makrofágov do srdcového svalu. Príliv CD4⁺ buniek koreloval s expresiou LOXL1, čo naznačuje mechanistický vzťah medzi aktivitou imunitných buniek a stuhnutosťou väzov. Výsledky poukazujú na protizápalové a protizápalové účinky nezávislé od zmien tlaku v artériách [12].

Peng a spolupracovníci analyzovali vplyv Ac-SDKP na skoré a neskoré štádia po infarkte srdca u myší C57BL/6J. Zvieratá dostávali 1,6 mg/kg/deň. V prvom týždni sa znížila frekvencia smrteľných ruptúr srdcových stien, expresia ICAM-1, prietok makrofágov, aktivita enzýmov degradujúcich želatínu, hladina p53 a úmrtnosť srdcových svalov. Zároveň na okrajoch poškodenej oblasti sa zvýšila frekvencia drobných krvných ciev, čo naznačovalo zintenzívnenie angiogenézy.

V piatom týždni sa pozorovala nižšia koncentrácia intersticiálneho kolagénu, lepšie zachovaná štruktúra srdca, nižšie hodnoty stresového indexu retikulárneho endoplazmatického systému vrátane CHOP a udržanie hladiny SERCA2, bielkoviny dôležitej pre reguláciu vápnika v kardiomiocytoch. Celková funkcia srdca bola lepšia. Štúdia poukazuje na zmeny v skorom poškodení aj v neskoršom obnovení buniek [13].

Castoldi a spolupracovníci hodnotili Ac-SDKP v kardiomiopatii cukrovky u potkanov. Dva mesiace po vzniku cukrovky sa začalo osemtýždňové podávanie peptidu v dávke 1 mg/kg/deň pomocou minipumpy. U potkanov s cukrovkou sa pozorovala hyperglykémia, zosilnené zhrubnutie medzizubných a obehových ciev a zvýšené hladiny TGF-β1 a fosfolipovaných proteínov Smad2/3. Ac-SDKP znižoval oba typy zhrubnutia a obmedzoval signalizáciu TGF-β/Smad, a to aj u zvierat dostávajúcich ramipril, inhibítor ACE.

Echokardiografické vyšetrenie preukázalo poruchy kontrakcie a rozparovania srdca spojené s cukrovkou. Inzulín a ramipril obnovili obe funkcie, zatiaľ čo Ac-SDKP čiastočne zlepšil kontrakciu. Výsledky poukazujú na protinematogénny účinok, ktorý bol sprevádzaný miernou funkčnou úľavou v tomto modeli [14].

Sharma a jeho spolupracovníci skúmali ochranu koronárnych ciev pred poškodením spôsobeným žiarením. V myšom modeli expozície hrudnej kosti sa Ac-SDKP podával subkutánne počas 18 týždňov. Žiarenie znižovalo spiatočný prietok krvi cez srdce, vedelo k smrti buniek stenových svalov, zvyšovalo zhrubnutie koronárnych ciev a narušovalo spojenia bielkovín, vrátane klaudínu-1 a JAM-2.

Ac-SDKP obnovoval krvný tok v smere správnych hodnôt, podporoval zachovanie endotelových buniek, znižoval zhrubnutie a zlepšoval organizáciu tesných spojení. Laboratórne štúdie ukázali, že peptid prenikal do endotelových buniek a obmedzoval tvorbu reaktívnych foriem kyslíka po ožiarení. U živých zvierat sa značovaný peptid počas niekoľkých hodín zhromažďoval v endotelových bunkách. Výsledky ukazujú na ochranu ciev, menšie oxidačné poškodenie a lepšiu funkciu mikrocirkulácie v tomto modeli [15].

V štúdiách na ľudských srdcových fibroblastoch sa bunky podrobili predbežnej expozícii Ac-SDKP v koncentrácii 10 nM a následne účinku tunicamycínu (0,25 µg/ml), ktorý vyvoláva stres endoplazmatického retikula. Tento peptid obmedzil nadmernú produkciu kolagénu v stresovaných bunkách. Tento účinok spájal oslabenie stresovej odpovede, zníženie aktivity CHOP a NF-κB a zníženie hladiny IL-6.

Po genetickom znížení expresie CHOP Ac-SDKP stále obmedzoval aktivitu NF-κB a expresiu kolagénu typu I tak na úrovni proteínu, ako aj mRNA. Výsledky podporujú hypotézu, že peptid môže obmedzovať nadmernú produkciu látok zrážaných v tkanive [16].

V ľudských endoteliálnych bunkách stimulácia TNF-α spôsobovala výrazný nárast expresie ICAM-1, adhéznej molekuly zúčastňujúcej sa pripojenia leukocytov k povrchu ciev. Predbežná expozícia Ac-SDKP znižovala hladinu ICAM-1 v závislosti od dávky. Mechanistická analýza poukázala na inhibíciu reťazca IKK → IκB → NF-κB, ktorý zohráva ústrednú úlohu pri aktivácii zápalových génov. Ostatné dva cesty, p38 MAPK a ERK, zostali nezmenené. To naznačuje selektívny účinok Ac-SDKP na signalizáciu NF-κB v endotelových bunkách. To sú však výsledky z bunkových štúdií a nie potvrdenie klinickej ochrany ciev [17].

V potkanej modelovej hypertenzie spôsobenej angiotenzínom II Ac-SDKP sa obmedzoval odklad kolagénu v aortálnom cievnom systéme a znižoval sa expresia mRNA kolagénu typu I a III. Zistilo sa tiež nižšia aktivita proteínovej kinázy C, menší oxidačný stres, obmedzenie expresie ICAM-1 a menší príliv makrofágov do steny ciev. Znížila sa aktivita TGF-β1 a Smad2, zatiaľ čo hladina Smad7, prirodzeného inhibítora tohto šlaku, vzrástla. Systolický tlak a hrúbka aorty zostali zvýšené, čo naznačuje, že pozorované zmeny v stene ciev neboli spôsobené znížením tlaku [18].

V ďalšom modelovom štúdiu s myšami, v ktorom sa podávalo 18-týždňové podávanie Ac-SDKP počas vykrvávania hrudnej kosti, pomohlo zachovať srdcovú funkciu, obmedzilo hromadenie extracelulárnej matrice a zhrubnutie, znížilo prietok makrofágov a znížilo úmrtnosť srdcových buniek. Znížili sa aj hladiny a uvoľňovanie Mac-2 (galektyny-3), proteínu makrofágov spojeného s zhrubnutím. Ac-SDKP sa pozoroval vo vnútri makrofágov, v blízkosti jadra bunky, pričom jeho prítomnosť obmedzovala uvoľňovanie Mac-2 vyvolaného žiarením. Keď fibroblasty neobsahovali Mac-2, žiarenie spôsobovalo oveľa slabšie signály podporujúce zhrubnutie. Tieto štúdie poskytujú predklinické dôkazy o obmedzení zápalovej a zhrubnutej regenerácie tkanív po vykrváčaní [19].

Štúdie dýchacej sústavy: zhrubnutie pľúc a zápalové poškodenie

Porovnávacie štúdie týkajúce sa pľúc analyzovali rozdielnosti medzi Ac-SDKP a jeho prekurzormi, tymozínom β4. V laboratórnych experimentoch na ľudských pľúcnych bunkách pochádzajúcich od ľudí s idiopatickou fibrózou pľúc (IPF) Ac-SDKP obmedzoval nadmernú proliferáciu buniek a znižoval expresiu dvoch markerov fibróznych procesov spúšťaných TGF-β: α-SMA a kolagénu.

V myšom modeli poškodenia pľúc vyvolaného bleomycínom β4 znižovala tymozín β4 zápal a skoré fibriláciu v siedmom dni, ale nebránila fibrilácií v neskorších fázach, medzi 14. a 21. dňom. Výsledky naznačujú, že Ac-SDKP môže blokovať základné štádiá vzniku fibrilóznej tkanivovej hmoty v bunkách a potenciálne vykazovať trvalejší protinematogénny účinok ako jeho prekurzor. Táto hypotéza však potrebuje ďalšie potvrdenie [20].

V štúdiách kremeľínu sa analyzovala úloha KIF3A a β-katetínového dráhy. Úroveň KIF3A bola znížená v vzorkách pacientov aj v pľúcach potkanov. Obnovenie aktivity KIF3A znižovalo signalizáciu β-katetínu a jeho ďalších mediátorov MRTF-A a SRF, čo obmedzilo prechod buniek sliznice do miofibroblastov (EMyT), proces spojený s fibrózou.

Ac-SDKP zvyšoval aktivitu KIF3A a znižoval signalizáciu β-catenin/MRTF-A/SRF. Keď sa expresia KIF3A umelo obmedzila, priaznivé účinky Ac-SDKP zanikli. To naznačuje, že KIF3A je nevyhnutnou súčasťou skúmaného mechanizmu protizápalového [21].

V ďalšom výskume kombinácia Ac-SDKP s endotelovým aktívnym peptidom (VIP) obmedzovala zmeny podobné chronickej obštrukčnej plicnej chorobe (COPD) spôsobené tabakovým dymom u myší. Zmenšovali sa markeri oxidačného poškodenia vrátane MDA, obsahu kolagénu spojeného s hydroxyprolínom a hladiny TGF-β. Zároveň klesali koncentrácie zápalových cytokínov TNF-α, IL-1β a IL-6 a zvýšila sa aktivita dismutázy (SOD). Histologické vyšetrenie preukázalo menej zápalu a slabšiu štrukturálnu regeneráciu pľúc. Kombinácia teda preukázala antioxidačný, protizápalový a protizálovkový účinok v modeli poškodenia spôsobeného dymom [22, 23].

Ac-SDKP tiež vykazoval aktivitu v skorom aj neskorom štádiu fibrózy pľúc vyvolanej bleomycinom. U myší CD-1 zlepšenie prežitia a obmedzenie straty hmotnosti súvisiacej s bleomycinom sa dosiahlo podaním 0,6 mg/kg intraartikulárne začatého v deň 0 alebo 7. V pľúcach sa pozoroval menší opuch, menej nadmerne pohlcujúcich imunitných buniek, lepšie zachovaná štruktúra tkaniva a slabší fibrózny vývoj. Znížilo sa tiež množstvo kolagénu a rozpustného kolagénu. Tiež klesli hladiny IL-17, TGF-β a α-SMA, čo naznačovalo menší počet miofibroblastov. Efekty sa pozorovali už pri skoršom, ako aj oneskorenom začatí podávania [24].

V myšiarskom modeli ac-SDKP obmedzoval fibrózu vplyvom na dráhu P-HSP27/SNAI1. Ac-SDKP zvyšoval hladiny P-HSP27, SNAI1, α-SMA a kolagénu typu I a III v pľúcnej tkanive. Podávanie Ac-SDKP pred expozíciou alebo po nástupe ochorenia znižovalo hladiny všetkých týchto markerov a počet buniek s pozitívnou expresiou P-HSP27 a α-SMA. U zdravých kontrolných zvierat peptid nezmenil expresiu týchto bielkovín, čo naznačuje súvislosť pozorovaných účinkov s stavom ochorenia tkanív [25].

Metaanalýza zahŕňajúca 18 randomizovaných štúdií na zvieratách uskutočnených v rokoch 2008–2021 zohľadnila celkovo 428 zvierat. V porovnaní s neliečenými modelmi Ac-SDKP znižoval niekoľko ukazovateľov zhrubnutia: α-SMA (standardizovaná priemerná rozdielnosť [SMD] −2,44), typ I kolagén (SMD −5,36), typ III kolagén (SMD −3,07), TGF-β (SMD −2,88) a povrch pľúcnych uzlín (SMD −1,80). Pre všetky tieto parametre sa uviedla hodnota p < 0,001.

Významnou zmenou bola tiež substitúcia hydroxyproliny, markeru obsahu kolagénu (SMD 7,62; 95% IS 4,90–10,33; p < 0,001), čo poukazovalo na vplyv na metabolizmus kolagénu. Celkové výsledky zvieracích štúdií podporujú prítomnosť protizápalového signálu v analyzovaných modeloch, ale podliehajú metodickým obmedzeniam vlastným predklinickým metaanalýzam [26].

V inej štúdii sa myšiam podávala expozícia oxidu kremičitého s cieľom vyvolať fibrózu a následne sa použila Ac-SDKP v preventívnom režime alebo po rozvoji zmien v dávke 800 µg/kg/deň. V porovnaní s kontrolnými skupinami s oxidom kremičitým boli hladiny proteínov TGF-β1 a CTGF v pľúcach výrazne nižšie a dosiahli približne 0,244 ± 0,016 a 0,241 ± 0,017 respektíve. Tiež klesli hladiny mRNA, najmä TGF-β1 (p < 0,05). V preventívnej skupine boli ako bielkovina aj mRNA TGF-β1 výrazne nižšie ako v osemtýždňovom modeli s oxidom kremičitým. Histologické vyšetrenie potvrdilo menšie fibrózu [27].

V ďalšom modeli ac-SDKP obmedzoval zhlukovanie kolagénu a zlepšoval štruktúru pľúc. Príslušným psom sa peptid podával po poškodení alebo 48 hodín pred expozíciou k zrážaniu síry. V terapeutických skupinách sa v porovnaní s modelmi kremičitej plocha uzlíkov znížila na 84,28% a 67,93%, hladina hydroxyproliny na 70,89% a 58,18%, hladina kolagénu typu I na 71,08% a 58,13% a hladina kolagénu typu III na 80,13% a 70,70% v porovnaní s referenčnými hodnotami v jednotlivých časových bodoch.

V profilaktických skupinách, v porovnaní s ôsmimesačným modelom kremičitej, sa plocha guzkov znížila na 61,13%, hydroxyprolín na 60,27% a typy I a III kolagénu na 40,13% a 65,77%. Histologické barvenie HE a VG preukázalo miernejšiu fibriláciu. Výsledky potvrdzujú obmedzenie nielen obsahu kolagénu, ale aj viditeľných fibrilárnych zmien v skúšanom modeli [28].

Výskum expozície k oxidu kremičitému zahŕňal aj pľúca a kosti. V modeloch myší a buniek oxid kremičitý aktivoval TLR4 a RANKL, čo zosilnilo zápal pľúc a tvorbu osteoklastov zodpovedných za resorpciu kostí. Ac-SDKP blokoval signalizáciu TLR4 a RANKL, podporoval zachovanie pľúcnej elastíny, obmedzil zápal a aktiváciu makrofágov. V kostnej tkanive blokoval diferencovanie osteoklastov a pomáhal udržiavať hustotu a mikroarchitektúru kostí. Výsledky naznačujú súbežné ochranné zmeny v pľúcach a kostnej tkanive pri experimentálnych modeloch poškodenia súvisiacich s oxidom kremičitým [29].

Ac-SDKP bol tiež testovaný z hľadiska vplyvu na diferencovanie fibroblastov na miofibroblasty. TGF-β1 stimuluje pľúcne fibroblasty k tomuto prechodu a zvyšuje produkciu kolagénu. Keď sa Ac-SDKP podával pred expozíciou TGF-β1, hladiny α-SMA a kolagénu klesali, rovnako ako hladiny TGF-β1 a jeho receptora.

U potkanov s poškodením pľúc spôsobeným sírou podávanie peptidu pred expozíciou alebo po nej znižovalo hladiny TGF-β1, signálnej látky RAS a aktivity SRF a znižovalo počet miofibroblastov pozitívnych na α-SMA v pľúcnych uzlinách. S tým sprevádzal menší odklad kolagénu [30, 31].

V štúdiách na bunkách pľúcnej sliznice sa analyzoval transmembránový prechod. Vplyvom křemenných látok a TGF-β1 sa hladiny markerov buniek pľúcnej sliznice, ako je E-kadherín a SP-A, znížili, zatiaľ čo hladiny markerov mezodermu a zhrubnutia, vrátane wimentínu, α-SMA a kolagénu typu I a III, sa zvýšili.

Ac-SDKP obmedzoval tieto zmeny. Bunky viac podrobili bunky membránovému štruktúre, hladiny markerov zrážania sa znížili a aktivita proteínu TGF-β1/ROCK1 sa oslabila. To naznačuje lepšie zachovanie membránovej štruktúry pľúcnych pľúcnych pľúc v rámci experimentálneho poškodenia [32].

Ac-SDKP tiež ovplyvnil stres endoplazmatického retikula a smrť buniek pľúcnej pľúcnej sliznice. Expozícia oxidu kremičitého zvyšovala hladiny GRP78, fosforylovaných PERK a eIF2α, CHOP a kaspázy-12, čo bolo sprevádzané silným úmrtím buniek. V prítomnosti Ac-SDKP, podobne ako pri použití inhibítora stresu retikulum 4-PBA, tieto markeri klesali. Tiež sa obmedzila úmrtnosť buniek v laboratórnych experimentoch a u potkanov a obsah kolagénu v pľúcach. Výsledky naznačujú, že oslabenie PERK/eIF2α/CHOP a aktivity kaspázy-12 môže prispieť k ochrane pľúcneho pletiva a obmedzeniu fibrózy [33].

Laboratórne testy na obličkách: fibróza a filtrácia

Nakagawa a spolupracovníci (2017) v modeli myší NZBWF1 predisponovaných na zlyhanie obličiek preukázali, že Ac-SDKP obmedzoval poškodenie obličiek a zhoršenie funkcie obličiek bez zníženia systolického tlaku v žilách. Ťažké zvýšenie krvného tlaku, albuminúria a predčasná smrť sa u liečených zvierat vyskytli neskôr, ale tieto rozdiely neboli dostatočne významné z hľadiska štatistickej významnosti [34].

Worou a spolupracovníci (2015) skúmali soľ citlivé myši Dahl, ktorým podávali Ac-SDKP počas šiestich týždňov v dávkach 800 alebo 1600 µg/kg/deň. Diéta bohatá na soľ aj naďalej zvyšovala arteriálny tlak, no v obličkách sa pozoroval menší zápal, menšie zhrubnutie a lepšie zachované šupky. Len vyššia dávka znižovala albuminúriu u soľ citlivých myší. V odolnejšej linii SS13BN obe dávky zabránili strate albumínu a štrukturálnym poškodeniam. Výsledky naznačujú, že aspoň časť účinkov na obličky bola nezávislá od zníženia tlaku [35].

Liao a kolegovia (2015) skúmali Ac-SDKP u myší predisponovaných k zápalu počas 20 týždňov. U zvierat, ktorým bol podaný peptid, sa pozorovala lepšia funkcia obličiek, hoci hladiny autoprotilátok spojených s zápalom nezmenili. V obličkách sa pozorovali menej makrofágov a T-buniek. Znížili sa hladiny cytokínov a chemokinov a aktivácia komponentov C5–9 a mediátorov RANTES, MCP-5 a ICAM-1 bola obmedzená. Spoločne s týmto dochádzalo k zachovaniu filtračnej funkcie a menším mikroskopickým poškodeniu [36].

V štúdii nadmerného tlaku vyvolaného DOCA a solí Rhaleb a spolupracovníci (2011) podávali myšiam Ac-SDKP v dávke 800 µg/kg/deň počas 12 týždňov. Napriek pretrvávajúcemu nadmernému tlaku sa znižovala fibróza obličiek, akumulácia matíc v tubuloch a prísun monocytov a makrofágov. Albuminúria klesla z 41 ± 5 µg na 13 ± 3 µg na 10 g telesnej hmotnosti za deň, dosahujúc hodnoty približne podobné kontrolným hodnotám. Čiastočne sa tiež obnovil hladina nefryny, významného proteínu filtračnej clony. Výsledky poukazujú na ochranu filtračnej bariéry a obmedzenie fibrózy bez ohľadu na tlak v artériách [37].

Shibuya a spolupracovníci (2005) analyzovali Ac-SDKP u myší db/db s cukrovkou typu 2. Osemtýždňové podávanie pomocou minipumpy zvýšilo koncentráciu peptidu v plazme približne trojnásobne bez zmeny glykemie. Znížili sa zväčšenie klenbutárových buniek, nadmerné odkladanie mezangiových matíc a zložiek extracelulárnej matice. Koncentrácia kreatinínu v plazme sa približovala k normálnym hodnotám. Albuminúria tiež klesla, ale rozdiel nebol štatisticky významný. Mechanicky Ac-SDKP blokoval prenos Smad3 do jadra bunky, čo obmedzilo signalizáciu TGF-β/Smad spojenú s fibrózou [38].

Castoldi a spolupracovníci (2013) skúmali myši s cukrovkou, ktorým podávali Ac-SDKP v dávke 1 mg/kg/deň, ramipril v dávke 3 mg/kg/deň, oba lieky spolu alebo kontrolnú liečbu. U nešetrevaných zvierat sa pozorovala hyperglikémia, zvýšená albuminúria, zhrubnutie obličiek a znížená hladina nefryny v obličkách. Samotný Ac-SDKP znižoval zhrubnutie, ale nezdokonaloval albuminúriu. Ramipril znižoval ako albuminúriu, tak zhrubnutie a vracal hladinu nefryny. Kombinácia Ac-SDKP s ramiprilem silnejšie obmedzovala zhrubnutie ako samotný ramipril, ale nepriniesla dodatočnú úľavu pri albuminúrii. Výsledky poukazujú na dodatočný protizhubkový účinok v skúmanom modeli bez ďalšieho zlepšenia vylučovania albumínu [39].

Zhang a spolupracovníci (2022) vyvinuli dvojitou sieťovou hydrogelovú látku inšpirovanú biologickými riešeniami, zloženú z želatíny a kurkumín-zinového komplexu pokrytého DOPA a funkčne upraveného stabilizovaným Ac-SDKP. Systém bol navrhnutý tak, aby zmiernil problémy súvisiace s rozpustnosťou, vstrebávaním a stabilitou voľných látok. Po aplikácii in vivo v obličkách potkanov znížil hydrogel lokálne zhrubnutie, podporoval angiogenézu a stimuloval tvorbu nových obličkových kanálikov. Materiálové štúdie potvrdili vhodnú porozitosť, mechanickú pevnosť a biozložiteľnosť, čo podporuje ďalšie štúdie tohto riešenia [40].

Zuo a spolupracovníci (2013) porovnali Ac-SDKP, tymozín β4 a tymozín β4 v kombinácii s oligopeptidázovým inhibítorom prolinovou (POP) u divých myší bez PAI-1 s poruchou močového traktu. Ac-SDKP konštantne znižoval fibrózy v oboch genotypoch. Zaznamenali sa nižší objem kolagénu a fibronektyny, menej aktivovaných miofibroblastov a makrofágov a slabšia signalizácia podporujúca fibrózy. Porovnávacie štúdie tiež poukazujú na odlišné a etapovo závislé účinky tymozínu β4 [41].

Wang a spolupracovníci (2010) zistili, že Ac-SDKP znižoval zápal a fibrózu obličiek spôsobené nedostatočnou priechodnosťou. U potkanov s jednostrannou nedostatočnosťou močového traktu znižovalo podávanie peptidu po dobu 14 dní fibrózu cievno-pľúcnej a zápalové zmeny zistené histologickým vyšetrením. Zaznamenali sa nižší príliv makrofágov ED-1 a nižšie hladiny MCP-1, NF-κB, α-SMA a TGF-β1 v bunkách ciev a pľúcnej pleti. Znížila sa tiež expresia génov MCP-1 a TGF-β1, čo naznačuje obmedzenie nárastu zápalových buniek aj aktivácie extracelulárnej matrice [42].

Liao a spolupracovníci (2010) podávali Ac-SDKP v dávke 800 µg/kg/deň kurčatám po odstránení 5/6 hmotnosti obličiek, pričom podávanie začali pred poškodením alebo po ňom. Napriek pretrvávajúcemu hypertenzii a hypertrofii ľavej komory peptyd znižoval albuminúriu, obmedzoval prietok makrofágov a znižoval obsah kolagénu v obličkách v oboch skupinách. Stratu nefryny v špárach tiež čiastočne obmedzoval alebo zvrážal. Výsledky naznačujú zlepšenie integrity filtračnej bariéry tak v skorých, ako aj v pokročilejších fázach poškodenia, najmä vďaka protizápalovému a protizápalovému účinku, a nie kontrolou tlaku [43].

Peng a spolupracovníci (2001) skúmali myši po odstránení jednej obličky, ktorým počas šiestich týždňov podávali aldosterón a soľ. Táto intervencia zvyšovala arteriálny tlak, spôsobovala zväčšenie srdca a obličiek a zvyšovala obsah kolagénu a markeru proliferácie buniek PCNA. Ac-SDKP, najmä pri vyššej dávke 800 µg/kg/deň, výrazne znižoval obsah kolagénu a PCNA v závislosti od dávky. Arteriálny tlak a zväčšenie orgánov však zostali nezmenené, pričom nižšia dávka 400 µg/kg/deň prinášala čiastočné účinky [44].

Omata a spolupracovníci (2006) skúmali myši s pyelonefritídou vyvolanou protilátkami proti základnej membráne tubulov (anti-GBM). Podávanie Ac-SDKP v dávke 1 mg/kg/deň sa začalo 14 dní po nástupe ochorenia a pokračovalo počas štyroch týždňov. V porovnaní s neliečenými zvieratami sa pozorovala nižšia vylučovacia schopnosť proteínu močom, nižšie koncentrácie močoviny a kreatinínu v plazme a lepší klírens kreatinínu. Štúdie tkanív ukázali menšiu stvrdnutosť tubulov a zhrubnutie medzobuněk. Znížili sa hladiny fibronektyny, kolagénu a TGF-β1 a signalizácia Smad2, zatiaľ čo Smad7 sa zvýšila. Tiež sa obmedzil akumulácia makrofágov v tkanive obličky [45].

Nagai a spolupracovníci (2014) v modeloch cukrovky preukázali, že Ac-SDKP môže obmedzovať zhrubnutie obličiek tým, že blokuje prechod od endoteliálnych buniek do mezenchymálnych buniek (EndMT), t. j. transformáciu endoteliálnych buniek na bunky s vlastnosťami podporujúcimi zhrubnutie. Tento peptid obnovuje aktivitu prirodzených ochranných dráh, vrátane let-7 microRNA a FGF receptorového signálu, ktoré boli oslabované cukrovkou. Kombinácia Ac-SDKP s inhibítorom ACE poskytovala väčšiu ochranu obličiek ako samotná inhibícia ACE v skúmanom modeli [46].

Srivastava a spolupracovníci (2020) porovnali inhibítory ACE, blokátory angiotenzínového receptoru (ARB), Ac-SDKP a ich kombináciu u myší s cukrovkou. Výskumníci tiež blokovali prirodzený vznik Ac-SDKP pomocou oligopeptidázy prolinovej inhibítora (POPi). Výsledky naznačovali, že Ac-SDKP prispieva k priaznivým účinkom inhibítorov ACE prostredníctvom zmien metabolizmu obličiek. Úroveň SIRT3 sa obnovila, mitochondriálna oxidácia mastných kyselín sa zlepšila a nesprávne využitie glukózy sa znížilo.

Zabránenie prirodzenému vzniku Ac-SDKP znižovalo jeho koncentráciu, urýchľovalo fibrózy a narušovalo metabolickú rovnováhu. Inhibítory ACE, na rozdiel od ARB, čiastočne obnovovali hladinu peptidu a znižovali fibrózy. Ako inhibítory ACE aj Ac-SDKP obmedzovali mezenchymálne prechody a znižovali obsah kolagénu typu I a fibronektynu v obličkách s cukrovkou [47].

V klinických štúdiách sa tiež analyzoval analóg Ac-SDKP ako potenciálny prostriedok chrániaci bunky krvi počas chemoterapie. Carde a spolupracovníci (1992) hodnotili Seraspenide v I. a II. fáze štúdie s dvojitým slepom a alternatívnym systémom, v ktorej sa zúčastnilo 53 pacientov dostávajúcich cytarabín alebo ifosfamid. V porovnaní s kontrolnými skupinami u pacientov dostávajúcich Seraspenide sa pozoroval lepší stav počtu periférnych krvných buniek v podmienkach toxického účinku chemoterapie. Liek bol dobre tolerovaný a neboli hlásené žiadne nežiaduce účinky. Výsledky podnietili ďalšie štúdie o ochrane obehového systému, ale nepotvrdili rutinnú klinickú účinnosť [48].

V samostatnom výskume nebol zistený účinok na hematologickú toxicitu chemoterapie. Cappelaere a spolupracovníci (1995) skúmali 84 pacientov s pokročilými nemyoendoteliálnymi nádormi, ktorí dostávali karboplatín a kontinuálny infúzny podávanie 5-fluorouracilu, ako aj placebo alebo Goralatide (Ac-SDKP) v dávkach 12,5 alebo 62,5 µg/kg/deň. V 221 cykloch chemoterapie neboli zistené rozdiely medzi skupinami v najnižších hodnotách počtu leukocytov, granulocytov, krvných doštičiek ani hemoglobínu. Doba trvania toxicity sa tiež nezmenila. Avšak anémia a lymfopenia sa vyskytovali častejšie v skupinách Goralatide. Hoci liek bol všeobecne považovaný za tolerovaný, nebránil to cytopeniám spojeným s chemoterapiou a spájal sa s častejšou anémiou a lymfopeniou [49].

Nitta a spolupracovníci (2016) skúmali Ac-SDKP v modeloch cukrovky typu 1 a 2. Múzy CD-1 s cukrovkou vyvolanou streptozotocínom a db/db dostávali perorálne Ac-SDKP, imidapryl, inhibítor ACE alebo obidva látky. Sam Ac-SDKP a kombinovaná liečba znižovali stvrdnutie šliach a fibrózu šľachy medzi kĺbmi. Koncentrácia cystatínu C v krvi, ktorá sa zvýšila pri poškodení obličiek, sa približovala k normálnym hodnotám.

Všetky intervencie obnovili hladiny protizápalových mikroRNA miR-29 a let-7, pričom najväčší zlepšenie sa pozoroval v skupine kombinovanej liečby. Koncentrácia peptidu v moči bola najvyššia v tej istej skupine, čo naznačovalo vyššiu systémovú expozíciu [50].

Tan a spolupracovníci (2012) podávali myšiam MRL/lpr s melanómom dávku 1,0 mg/kg/deň počas ôsmich týždňov. V porovnaní s nešetrenými zvieratami myši dostávajúce peptid mali menšiu hladinu moču a lepšiu funkciu obličiek. V obličkovej tkanive sa vyskytlo menej prozápalových T-buniek a makrofágov. Znížila sa aktivácia NF-κB a produkcia TNF-α a hladiny markerov zrážania TGF-β1, α-SMA a fibronektyny. Hamovala sa fosforylácia Smad2/3 a hladina Smad7 sa zvýšila.

Zmena však neovplyvnila ukladanie imunologických komplexov ani hladinu protilátok proti dsDNA. To naznačuje, že účinky vyplývali z obmedzenia ďalších štádií zápalu a fibrózy, a nie z zmien v tvorbe protilátok [51].

Maheshwari a spolupracovníci (2018) skúmali cukrové potkany s normálnou hmotnosťou (ZL) a s obezitou (ZO), ktoré boli počas osem týždňov kŕmené diétou s normálnym obsahom soli (0,4%) alebo vysokým obsahom soli (4%). Jedna z podskupín cukrových potkanov s obezitou dostávala Ac-SDKP v dávke 1,6 mg/kg/deň.

Diéta bohatá na soľ zosilnila zápal a fibrózu oboch skupín, pričom u potkanov s obezitou bol najvyšší výskyt makrofágov: 87,8 ± 10,8 v porovnaní s 19,14 ± 1,5 buniek/mm² u potkanov s normálnou hmotnosťou. Podávanie Ac-SDKP znižovalo výskyt makrofágov u potkanov s obezitou na 32,18 ± 2,4 buniek/mm² (p < 0,05) a obmedzovalo zhoršenie fibrózy a fibrózy medzibunkovej v koreni a v jadre obličiek (p < 0,05).

Krátkodobý arteriálny tlak u potkanov s obezitou, ktorí konzumovali stravu bohatú na soľ, sa znížil z 164 ± 6,9 na 144,05 ± 14,1 mmHg (p = 0,004). Albuminúria bola vyššia u zvierat s obezitou ako u tiel, ale nezmenila sa významne vplyvom stravy ani Ac-SDKP [52].

Neurologické štúdie: modely poškodenia mozgu a chrbtice

Mobilné modely a potrava u potkanov s Parkinsonovou chorobou

Kamarehei a Zahednasab (2025) skúmali Ac-SDKP v modeloch Parkinsonovej choroby. V bunkových experimentoch predbežná expozícia nervových buniek SH-SY5Y peptidom s koncentráciou 20 nM obmedzovala poškodenie spôsobené 6-OHDA, toxínom často používaným na modelovanie parkinsonských zmien.

V štúdiách na potkanoch denné podávanie 800 µg/kg po vyvolaní poškodenia mozgu pomocou 6-OHDA podporovalo zachovanie väčšieho počtu dopaminergických neurónov a znižovalo úmrtnosť buniek tým, že obmedzovalo aktivitu kaspázy-3 a kaspázy-12.

Zvieratá, ktoré dostávali peptid, tiež vykazovali lepšiu motorickú koordináciu, zlepšenie priestorovej pamäte a menej príznakov podobných strachu a depresie.

Mechanicky boli zmeny spojené s obmedzením oxidačného stresu, stresu retikulárnej endoplazmatickej membrány a zápalovej signalizácie v mozgu. Výsledky sa však týkajú predklinických modelov a nepotvrdzujú účinnosť Ac-SDKP u pacientov s Parkinsonovou chorobou [53].

Regenerácia po poškodení chrbtice

Hashemizadeh a spolupracovníci (2022) podávali Wistarac-SDKP podkožne v dávke 0,8 mg/kg raz denne počas siedmich dní, pričom začali dva alebo šesť hodín po poranení chrbtice spôsobenom pádom bremena.

V porovnaní s tými, ktoré neboli liečené, myši dostávajúce peptid znovu získali lepšiu schopnosť chôdze, stratili menej motorických neurónov a vykazovali nižšie hladiny TNF-α a kaspázy-3.

Zároveň sa zvýšila expresia mRNA CD206, markeru spojeného s makrofágmi M2 účastníckymi v procesoch regenerácie. Štúdie tkanív ukázali menšie oblasti poškodenia.

Vo všeobecnosti sa pozoroval posun imunologickej odpovede od aktivity spojennej s makrofágmi M1 smerom k odpovedi typu M2, pričom to bolo sprevádzané lepšími funkčnými a štrukturálnymi výsledkami [54].

Ochrana po traumatickom poškodení mozgu (TBI)

Zhang a spolupracovníci (2017) spôsobovali u potkanov kontrolované poškodenie mozgového kory a následne podávali Ac-SDKP v dávke 0,8 mg/kg/deň pomocou minipumpy počas troch dní, pričom začali o hodinu po poranení.

Od 7. do 35. dňa boli výsledky senzomotorických testov lepšie a medzi 33. a 35. dňom sa pozorovala tiež zlepšená schopnosť učenia sa priestorových informácií v porovnaní s kontrolnou skupinou (p < 0,05).

Na konci štúdie bola znížená poškodenie kôry a strata hypokampálnych neurónov. Zároveň sa zvýšila angiogenéza, tvorba nových neurónov a hustota dendritických špičiek.

Včasné podávanie tiež obmedzovalo odkladanie fibrínu a aktiváciu imunitných buniek. Mechanistické štúdie ukázali, že značnú časť protizápalového účinku možno vysvetliť inhibíciou signalizácie TGF-β1/NF-κB [55].

Experimentálna autoimunitná zápalová choroba mozgu a chrbtice (model pripomínajúci sklerózu multiplex)

Pejman a spolupracovníci (2020) skúmali myši C57BL/6 s experimentálnym autoimunitným zápalom mozgu a chrbtice (EAE), ktorý sa používa ako model procesov pripomínajúcich roztrúsenú sklerózu.

V EAE sa pozorovali zvýšené hladiny markerov stresu retikulárneho endoplazmatického systému, vrátane kaspázy-12, CHOP a PDI, ako aj zvýšený oxidačný stres a prúdenie imunitných buniek do hypokampa.

Po podaní Ac-SDKP sa znížili hladiny kaspázy-12 a CHOP v oligodendrocytoch a aktivácia kaspázy-3. Znížili sa aj hladiny reaktívnych foriem kyslíka a lipidovej peroxidácie, zlepšila sa antioxidačná schopnosť a hladiny IL-6 a IL-1β boli nižšie.

Analýza mozgových tkanív odhalila menšie poškodenie hipokampa a menej napučujúcich imunitných buniek, čo zodpovedalo pomalšiemu vývoju chorobných zmien v tomto modeli [56].

Ďalšie neurologické vyšetrenie uvedené v zdroji

V bibliografii zdrojového materiálu bol tiež zohľadnený výskum mozgového záchvatu u potkanov, v ktorom sa analyzoval Ac-SDKP v kombinácii s tkáňovým aktivatorm plazminogénu [57], a výskum fragmentu tymozínu β4 týkajúci sa neurogenezie hipokampa a priestorovej pamäte [58].

V poskytnutom článku neboli uvedené metódy ani výsledky týchto dvoch štúdií, a preto nemožno na ich základe formulovať ďalšie závery týkajúce sa ich výsledkov.

Prehliadka pečene: experimentálne zväčšenie

Zníženie fibrózy pečene spôsobené chemikáliami

Wei a spolupracovníci (2022) skúmali myši s poškodením pečene spôsobeným uhličitým chlorem (CCl₄). Po použití Ac-SDKP sa pozorovala menej úmrtí hviezdičkových buniek, hlavných buniek zapojených do tvorby väzivovej tkánine v pečeni, a menšie fibrilácie.

Mechanistické štúdie ukázali, že peptid znižoval hladinu WTAP, proteínu zapájajúceho sa do pridávania modifikácií m⁶A do RNA. Táto zmena stabilizovala RNA Ptch1 a ovplyvnila aktivitu Hedgehogovej cesty, dôležitého regulačného mechanizmu procesov spojených s fibriláciou.

Výsledky ukazujú na protizápalový mechanizmus spojený s dráhou WTAP/m⁶A/Ptch1 a reguláciou Hedgehogovej signalizácie [59].

Ochrana v modeli zhrubnutia spôsobeného nedostatočnou priechodnosťou žlčových ciest

Zhang a jeho spolupracovníci (2012) použili model pripútania žlčových ciest u potkanov a následne im počas dvoch týždňov podávali Ac-SDKP.

V porovnaní s tými, ktoré neboli liečené, sa pozoroval pokles signalizácie TGF-β1 a nižšie hladiny markerov aktivovaných hviezdičkovitých buniek vrátane α-SMA a FSP-1.

Znížila sa aj expresia génov spojených s kolagénom typu I a III a enzýmov účastiúcich v regenerácii maternice, ako sú MMP-2, TIMP-1 a TIMP-2.

Parametre krvi súvisiace s funkciou pečene sa zlepšovali: hladiny ALT, AST, bilirubínu a protrombínového času sa približovali k normálnym hodnotám. Histologické vyšetrenie ukázalo menší počet tukových buniek, menšie ukladanie kolagénu a slabšiu fibrózu a zápal [60].

Zachovanie prirodzených ochranných a nápravných mechanizmov

Chen a spolupracovníci (2010) zistili, že počas dlhodobej expozície CCl₄ sa prirodzené koncentrácie Ac-SDKP postupne znižovali.

Podávanie peptidu vo forme infúzie v dávke 800 µg/kg/deň počas osem týždňov pomohlo udržiavať jeho základnú hladinu a obmedzovalo poškodenie pečene, zápal a zhrubnutie.

Spadali hladiny pečeňových enzýmov v krvi, počet CD45⁺ zápalových buniek a množstvo kolagénu a fragmentov α-SMA. Znížili sa aj hladiny TGF-β1 a fosfolipovaných Smad2/3, zatiaľ čo vzrástla aktivita signálnych molekúl spojených s regeneráciou tkanív, ako sú BMP-7 a fosfolipované Smad1/5/8.

V bunkových experimentoch Ac-SDKP priamo inhiboval aktiváciu špirálových buniek, čo potvrdzuje protizápalové účinky na bunkovej úrovni [61].

Regenerácia kože, modely hojenia rán a ďalšie experimentálne výsledky

Hydrogel obsahujúci Ac-SDKP a regenerácia jaziev

Vyvinula sa špeciálna tkanivová náplasť na báze celulózy Dopa-OCMC-PAA, ktorá je porovnateľná s OCMC-PAA a je určená na prenos a uvoľňovanie Ac-SDKP.

Obidva varianty preukázali vhodné vlastnosti v oblasti tuhnutia a degradácie, dobrou mechanickú odolnosť a kompatibilitu s bunkami, ale Dopa-OCMC-PAA dosiahol lepšie výsledky.

U myší s krvácaním z pečene tento lúč rýchlejšie zastavil krvácanie. V testoch s fibroblastmi zvýšil hladiny enzýmov zapojených do regenerácie tkanív, MMP-1 a MMP-3, pričom zároveň znížil aktivitu génov spojených s kolagénom.

U králikov s prehnane veľkými jazvami na uškách znížilo kombinácia Dopa-OCMC-PAA s Ac-SDKP závažnosť jaziev, počet buniek a zlepšilo organizáciu kolagénu. Opäť sa pozoroval nárast MMP-1 a MMP-3 a nižšia aktivita kolagénových génov. Výsledky naznačovali priaznivejšie hojenie rán a menšie jazvy u testovaných modelov [62].

Miestne použitie a prežitosť kože a procesy regenerácie

U potkaních modelov chirurgických kožných plášťov, brušných a chrbtových plášťov podávanie Ac-SDKP v dávkach 5 µg/kg dvakrát denne počas troch dní zvyšovalo plochu živého kožného plášťa.

V hrudných plastech sa podiel živice zvýšil z 50,9 ± 19,3% na 66,4 ± 7,5%, zatiaľ čo v chrbtových plastech sa zvýšil z 53,4 ± 4,2% na 74,7 ± 6,6%.

V kožnom tkanive poškozenom UVB žiarením miestne podanie peptidu zlepšovalo prežitie buniek. Subkutánne podanie tiež urýchlilo tvorbu nového epidermu, zvýšilo hladinu keratínu-14, markeru buniek zapojených do obnovy pokožky, a fibronektynu. Výsledky poukazujú na účasť v procesoch angiogenézy a regenerácie tkaniva v experimentálnych podmienkach [63].

Ochrana tvorby krvi počas chemoterapie

V štúdii u myší, ktorým podávali doksorubicín, chemoterapiu, podávanie Ac-SDKP v množstve 2,4 µg/deň, kontinuálne alebo v podmienených dávkach začatých 48 hodín pred liečbou, znižovalo úmrtnosť a chránilo kmeňové krvotvorné bunky.

Ochrana bola pozorovaná pri meraniach LTRC, CFU-S, HPP-CFC a CFU-GM. Pridanie G-CSF navyše zvyšovalo obnovu CFU-GM.

Moment začatia podávania bol kľúčový. Začatie pred chemoterapiou bolo nevyhnutné na obmedzenie tak krátkodobého poškodenia kostnej drene, ako aj dlhodobého straty materských buniek v tomto modeli [64].

Silnejší protinádorový účinok modifikovaných analógov a kombinácií s inhibítormi ACE

V experimentoch s pľúcnymi fibroblastmi forma Ac-SDKP, ktorá je odolná voči rozkladu ACE, silnejšie obmedzovala signalizáciu TGF-β/Smad3 a ukladanie kolagénu ako prirodzená molekula.

Skrátený fragment Ac-DKP vykazoval len slabé účinky a bol pomaly rozkladaný enzýmom ACE.

Spojenie peptidu s inhibítormi ACE silnejšie obmedzovalo hladinu hydroxyproliny, markeru obsahu kolagénu, ako samotný peptid. Výsledky naznačujú možnosť ďalších výskumov modifikovaných analógov a ich interakcií.

V rozmedzí koncentrácií od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M inhibovali taktiež tymozín β4 aj Ac-SDKP proliferáciu buniek mastných buniek, pričom najsilnejší účinok sa pozoroval pri 10⁻¹⁴ M. Tiež spôsobovali atypické zmeny v jadroch bunkových kultúr spojené s zastavením cyklu buniek.

Pri koncentrácii 10⁻⁸ M oba peptidy tiež vyvolávali degranuláciu mastných buniek. Ac-SDKP vykazoval silnejší účinok, približne 89%, ako tymozín β4, približne 57%. Ostatné fragmenty tymozínu β4 nepreukázali aktivitu, čo naznačuje závislosť týchto reakcií od testovaných nedegradovaných peptidov a nie od iných analyzovaných fragmentov [65, 66].

Experimentálne dávky Ac-SDKP v publikovaných štúdiách – nie sú odporúčané pre ľudí

Nižšie uvedené hodnoty opisujú protokoly používané v citovaných pokusoch na zvieratách a bunkách. Nejsou stanovenými dávkami pre ľudí.

V predklinických analýzach boli podávané subkutánne dávky Ac-SDKP vo veľkosti približne 0,8 mg/kg/deň pomocou minipumpy s cieľom zhodnotiť fibrózu a zápal v srdci, cievach a obličkách. V myších modeloch infarktu srdca sa niekedy používalo dávkovanie 1,6 mg/kg/deň v rámci štúdií skorého ochranného účinku tkanív.

V experimentoch týkajúcich sa mozgu a nervového systému krátke cykly začaté do niekoľkých hodín po poranení obvykle zahŕňali približne 0,8 mg/kg/deň počas troch až siedmich dní. V bunkových štúdiách sa často používala predbežná expozícia približne 10 nM peptidu.

V modeloch chronického poškodenia pečene protokoly proti fibróze často zahŕňali dávku približne 0,8 mg/kg/deň. V modeli fibrózy pľúc vyvolanej bleomycinom sa podávala dávka 0,6 mg/kg intrahepaticky v opakovaných dávkach začatých v deň 0 alebo 7.

V štúdiách hojenia kože a rán miestne schémy zahŕňali 5 µg/kg podávané dvakrát denne počas troch dní alebo hydrogély obsahujúce peptid a lokalne uvoľňujúci ho.

V hematologických a ochranných štúdiách sa používali veľmi malé dávky, napríklad 2,4 µg/deň u myší pred chemoterapiou a krátke cykly v rozsahu µg/kg/deň v skorých klinických štúdiách.

Interpretácia výsledkov a obmedzenia dostupných dôkazov

Najväčšia časť prezentovanej literatúry zahŕňa bunkové experimenty a zvieracie modely. Zmeny v produkcii kolagénu, mediátoroch zápalu, štruktúre tkanív a experimentálnych funkčných parametroch samy osebe nepredstavujú dôkaz o terapeutickom účinku u ľudí.

Uvedené skoré klinické štúdie sa týkali hlavne hematologických parametrov počas chemoterapie a priniesli nejednoznačné výsledky, vrátane negatívnych výsledkov randomizovaného skúmania [48, 49].

Experimentálne spôsoby podávania, množstvá látok a doby expozície sa majú považovať za prvky metodológie testovania a nie za odporúčania týkajúce sa individuálneho použitia.

Redakčný upozornenie: Tento článok má výhradne edukatívny a vedecký charakter. Predstavuje výsledky výskumu týkajúceho sa Ac-SDKP, molekulárne mechanizmy a obmedzenia dostupných dôkazov. Neobsahuje lekársku radu, neodporúča používanie Ac-SDKP ani nepredpisuje protokoly dávkovania, podávania alebo liečby. Výsledky laboratórnych testov a skúseností s zvieratami nepotvrdzujú bezpečnosť ani účinnosť Ac-SDKP u ľudí.

Odkazy

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). Úloha osi Tβ4-POP-Ac-SDKP v fibróze orgánov. Medzinárodný časopis molekulárnych vied, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP znižuje úmrtnosť a ruptúru srdca po akútnom infarkte myokardu. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP zvráti srdcovú fibrózu u potkanov s renovaskulárnou hypertenziou. Hypertenzia, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP zvracia zápal a fibrózu u potkanov s srdcovým zlyhaním po infarkte myokardu. Hypertenzia, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotický účinok Ac-SDKP a inhibícia angiotenzín-konvertujúceho enzýmu pri hypertenzii. Journal of Hypertension, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Vplyv N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny na syntézu DNA a kolagénu v srdcových fibroblastoch potkanov. Hypertenzia, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín prevencia kardiovaskulárneho remodelovania a dysfunkcie vyvolanej galektínom-3, adhéznou/rastovou regulátorovou lektínou cicavcov. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Dlhodobý účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny na depozíciu kolagénu v ľavej komore srdca u potkanov s hypertenziou druhu 2-kidney, 1-clip. Obchodné činnosti, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Liečivý potenciál thymózynu beta4 a jeho derivátu N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolínu (Ac-SDKP) pri hojení srdca po infarkte. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions, 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro inhibuje aktiváciu matrix metalloproteináz sprostredkovanú interleukínom-1β u srdcových fibroblastov. Archív Pflügera – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Liečba N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolínom zabraňuje experimentálnemu autoimunitnému myokarditíde u potkanov. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin znižuje prekrvenie srdcového kolagénu a zápal u potkanov s hypertenziou spôsobenou angiotenzínom II. Klinická veda, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E., & Rhaleb, N. E. (2019). Liečba N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolínom chráni srdce pred nadmerným poškodením myokardu a srdcovým zlyhaním u myší. Kanadský časopis fyziológie a farmakológie, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Prevencia myokardovej fibrózy pomocou N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny u diabetických potkanov. Klinická veda, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Vplyv nového peptidu Ac-SDKP na poškodenie koronárnej endotelovej vrstvy vyvolaného žiarením a na prietok krvi v miokarde v pokoji. Kardioonkológia, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP znižuje produkciu kolagénu stimulovanú stresom v ER u srdcových fibroblastov inhibíciou expresie NF-κB sprostredkovanej CHOP. Frontiers in Pharmacology, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP potláča expresiu ICAM-1 indukovanú TNF-α v endotelových bunkách inhibíciou IκB kinázy a aktiváciou NF-κB. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Prevencia aortálnej fibrózy pomocou N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny pri hypertenzii vyvolanej angiotenzínom II. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). Malý peptid Ac-SDKP inhibuje kardiosklerózu vyvolanú žiarením. Cirkulácia: srdcové zlyhávanie, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2015). Účinky thymózynu β4 a jeho N-koncového fragmentu Ac-SDKP na ľudské pľúcne fibroblasty liečené TGF-β a v myšom modeli plicnej fibrózy vyvolanej bleomycinom. Odborné stanovisko k biologickej terapii, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S. a Yang, F. (2023). Ac-SDKP podporuje potlačenie β-cateninu sprostredkované proteínom KIF3A pomocou ciliárneho mechanizmu, čím obmedzuje prechod epitelových myofibroblastov spôsobený oxidom kremičitým. Biomedicína a farmakoterapia, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Imunomodulačný účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-proliny a vazoaktívneho intestinálneho peptidu na patofyziológiu chronickej obštrukčnej choroby pľúc. Fundamentálna a klinická farmakológia, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Syntéza a identifikácia nového peptidu Ac-SDK (biotín) proliny, ktorý môže vyvolať protifibrotické účinky u potkanov trpiacich silikózou. Design, vývoj a liečba liekov, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventívne a terapeutické účinky N-koncového fragmentu thymózynu β4 Ac-SDKP v bleomycinovom modeli pľúcnej fibrózy. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Regulárny účinok Ac-SDKP na cievkovú dráhu fosforylovaného proteínu 27/SNAI1 u silikotických potkanov. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Meta-analýza inhibície ac-SDKP pľúcnej fibrózy u zvieracích modelov. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotické účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny sprostredkované reguláciou expresie transformujúceho rastového faktora beta a kožného rastového faktora u potkanov s silicózou]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Anti-fibrotický účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny v pľúcach potkana s silicózou]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F., & Xu, H. (2021). Ac-SDKP znižuje aktiváciu pľúcnych makrofágov a kostných osteoklastov u potkanov vystavených oxidu kremičitého inhibíciou signálnych dráh TLR4 a RANKL. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D. a Wang, R. (2012). Nový antifibrotický cieľ Ac-SDKP: inhibícia diferenciácie myofibroblastov v pľúcach potkanov s silicózou. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D. & Yang, F. (2016). Acetylovaný α-tubulín regulovaný N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolinom (Ac-SDKP) vyvoláva protifibrotický účinok pri fibróze pľúc potkanov vyvolanej oxidom kremičitým. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Ochranný účinok Ac-SDKP na alveolárne epitelové bunky prostredníctvom inhibície EMT pomocou cesty TGF-β1/ROCK1 pri silikóze u potkanov. Toksikológia a aplikovaná farmakológia, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín (Ac-SDKP) znižuje silikotickú fibrózu potlačovaním apoptózy alveolárnych epitelových buniek typu II prostredníctvom mediácie stresu endoplazmatického retikula. Toksikológia a aplikovaná farmakológia, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Účinky N-acetyl-seryl-asparyl-lyzyl-proliny na krvný tlak, poškodenie obličiek a úmrtnosť u systémového lupus erythematosus. Fyzologické správy, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). Renálny ochranný účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny u potkanov citlivých na soľ Dahl. Hypertenzia, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-prolin: mechanizmy ochrany obličiek u myšom modelu systémového lupus erythematosus. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renálne ochranné účinky N-acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro v hypertenzívnych myších s acetátom deoxykortikosterónu v soli. Journal of Hypertension, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M. & Koya, D. (2005). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín zabraňuje renálnemu zlyhaniu a expanzii mezangia u diabetických myší db/db. Diabetes, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Renálny antifibrotický účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny u diabetických potkanov. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L., & Hu, B. (2022). Biomimetický dvojitý sieťový hydrogel zlepšuje renálnu fibrózu a podporuje regeneráciu obličiek. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A., & Fogo, A. B. (2013). Thymosin β4 a jeho degradačný produkt Ac-SDKP sú nové reparatívne faktory pri renálnej fibróze. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín znižuje zápal obličiek a tubulárnu intersticiálnu fibrózu u potkanov. Medzinárodný časopis molekulárnej medicíny, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín znižuje poškodenie a dysfunkciu obličiek u hypertenzných potkanov s zníženou hmotnosťou obličiek: Council for High Blood Pressure Research. Hypertenzia, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotické účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny na srdce a obličky u aldoesteron-soli hypertenzných potkanov. Hypertenzia, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M., & Inomata, N. (2006). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín zlepšuje progresiu renálnej dysfunkcie a fibrózy u potkaních druhu WKY s preukázaným glomerulárnym podložným membránovým nefritom. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K. & Koya, D. (2014). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín inhibuje fibrózu obličiek spojenú s diabetom a endotelno-mesenchymalný prechod. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolická reštrukturalizácia pomocou N-acetyl-seryl-aspartyl-lysil-proliny chráni pred diabetickou obličkovou chorobou. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenid (acetylSDKP): štúdia fázy I–II inhibítora hematopoézy chráni pred toxicitou aracytínu a ifosfamidových monokompatibilných terapií]. Klinická štúdia C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomizovaná placebom kontrolovaná štúdia myeloprotekcie s goralatidom u pacientov s skvamocelárnym karcinómom horných dýchacích ciest a tráviaceho traktu alebo pažeráka, liečených kombináciou karboplatinu a fluorouracilu]. Bull Cancer, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K. & Koya, D. (2016). Orálna podávanie N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny zlepšuje ochorenie obličiek u diabetických myší typu 1 aj typu 2 prostredníctvom terapeutického režimu. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP zlepšuje progresiu lupusnej nefritídy u myší s MRL/lpr. Medzinárodná imunofarmakológia, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renálne ochranné účinky N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny (Ac-SDKP) u obéznych potkanov s vysokým obsahom soli v strave. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Neuroprotektívny účinok peptidu Ac-SDKP na bunky SH-SY5Y a myšom v modeloch Parkinsonovej choroby proti oxidačnému stresu a stresu ER spôsobenému 6-OHDA. Neuropeptidy, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Peptid Ac-SDKP zlepšuje funkčnú obnovu po poškodení miechy v preklinickom modeli. Neuropeptidy, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Liečba traumatických poranení mozgu u potkanov s N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolínom. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S., & Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP zmierňuje progresiu experimentálnej autoimunitnej encefalomyelitídy inhibíciou stresu ER a oxidačného stresu v hipokampuse myší C57BL/6. Bulletin pre výskum mozgu, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Kombinovaná liečba N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolínom a aktívátorom tkanivového plazminogénu poskytuje u potkanov silnú neuroprotekciu po cievnej mozgovej príhode. Možnosť zranenia mozgu, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S. & Ryu, J. H. (2015). Peptidový fragment thymozínu β4 zvyšuje neurogenézu v hippokampu a uľahčuje priestorovú pamäť. Neurovedomie, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín (AcSDKP) zmierňuje fibrózu pečene pomocou spojenia WTAP/m6A/Ptch1 cez Hedgehogov systém. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotický účinok N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-proliny na fibrózu pečene vyvolanú ligáciou žlčových ciest u potkanov. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Ochrana základnej sekvencie AcSDKP znižuje fibrózu spôsobenú tetrachlórmetánom v pečeni potkana. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A., & Brouki Milan, P. (2025). Hydrogel na báze celulózy obsahujúci peptid N-acetyl-seryl-aspartyl-lyzyl-prolín pre zvýšenú hojenie rán a prevenciu jaziev v modelovom uchu králičieho ucha in vivo. Medzinárodný časopis pre biologické makromolekuly, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). Tetrapéptid acetyl-serin-aspartyl-lyzin-prolín zlepšuje prežitie kože a urýchľuje hojenie rán. Oprava a regenerácia rán, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F. & Carde, P. (1998). Tetrapéptid acetyl-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatid) chráni pred toxicitou vyvolanou doxorubicínom: zlepšenie prežitia myší a ochrana kmeňových buniek a progenitorov kostnej drene. Krv, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Prešetrenie antifibrotického potenciálu peptidov s sekvenciou N-acetylseryl-aspartyl-lyzyl-prolín. Klinická a experimentálna farmakológia a fyziológia, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Thymosin beta 4 a jeho N-koncový tetrapeptid AcSDKP inhibujú proliferáciu a indukovajú dysplazické, neapoptotické jadrové bunky a degranuláciu mastocytov. Chémia a biodiverzita, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/