Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin): vezivno tkivo organov, zaščita tkiv in eksperimentalne raziskave

Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina) je endogeni tetrapeptid, nastal iz večjih beljakovin, tj. timozina beta-4. V rezultatu encimatske preobrazbe timozina β4 nastane več fragmentov, vključno z Ac-SDKP [1]. Ta spojina vzbuja zanimanje znanstvenikov zaradi protivnetnega delovanja, ki ga opazimo v eksperimentalnih modelih poškodbe tkiv. Njegova biološka obstojnost je omejena zaradi hitrega razpadanja s pomočjo encima konvertiranja angiotenzina (ACE). V raziskavah je bilo pokazano, da lahko zaviralci ACE povečajo koncentracijo krožečega Ac-SDKP kar petkrat, kar je pomembno za raziskave njegovega vpliva na tkiva [1].

Na začetku so raziskave osredotočale na sposobnost Ac-SDKP, da ohranja tvorne matične celice v stanju relativnega mirovanja. Kasneje so raziskovalni obseg razširili na vnetne procese, prenovo zunajceličnega matriksa in regeneracijo tkiv. V več predkliničnih modelih poškodb organov so znanstveniki opazili zmanjšanje patološkega kopičenja sestavin matrikse. Peptid je med drugim zmanjševal aktivnost signalov, ki spodbujajo celice k prekomerni proizvodnji kolagena, glavnega beljakovine v kožnem tkivu, ter omejeval preoblikovanje fibroblastov v celice, odgovorne za nastanek brazgotin.

V predkliničnih raziskavah na ledvicah je Ac-SDKP pokazal tudi pozitivne spremembe v funkcijah organa in v vezivnem tkivu. Opazili so zmanjšanje prekomernega pretoka imunskih celic ter oslabitev vnetnih procesov, ki lahko poslabšajo poškodbe. Na splošno kažejo rezultati na vlogo Ac-SDKP kot endogenega regulatorja signalnih poti, povezanih z vezivnim tkivom. Vendar pa opazovanja iz kliničnih in živalskih raziskav ne potrjujejo klinične učinkovitosti ali varnosti uporabe pri ljudeh.

Raziskave srčno-žilnega sistema: krčenje srca, vnetni proces in poškodbe žil

Eksperimentalne srčno-žilne študije so analizirale Ac-SDKP tako pri akutnih poškodbah srčne mišice kot pri kronični preobrazbi njene strukture. V mišjem modelu srčnega infarkta so Nakagawa in sodelavci dajali Ac-SDKP v odmerku 1,6 mg/kg/dan z majhno podkožno črpalko. Delež razpok srčne stene se je zmanjšal s 51,0% na 27,3%, smrtnost pa s 56,9% na 31,8%. Raziskovalci so te rezultate povezali z manjšim pritokom prozaskodnih makrofagov M1, brez ustrezne spremembe števila makrofagov M2 ali nevtrofilov. Opozorili so tudi na zmanjšanje aktivnosti metaloproteinaze MMP-9, encima, ki sodeluje pri razgradnji srčnega tkiva po infarktu, medtem ko je marker MPO ostal nespremenjen. To lahko kaže na selektivno delovanje na določene mehanizme poškodbe [2].

V raziskavah o tkivnem prokržanju srca zaradi dolgotrajnega povišanega krvnega tlaka so Peng in sodelavci pokazali, da lahko Ac-SDKP zmanjša že obstoječo tkivo v tkivih srca in ne le omeji njegovo nastajanje. Pri podganah z obstoječim povišanim krvnim tlakom podkožno dajanje Ac-SDKP v odmerkih 400–800 µg/kg na dan v obdobju osmih tednov zmanjšuje vsebnost kolagena v srcu v odvisnosti od odmerka. Večja doza je povzročila močnejši učinek. Pritisk arterij ni padel, pravilne odzive na angiotenzin I in bradikinin pa so ohranili. To pomeni, da opažene spremembe ni mogoče razložiti zgolj z zmanjšanjem tlaka. Raven Ac-SDKP v krvi se je povečala od dveh do petkrat, medtem ko so se ravni TGF-β in CTGF, pomembnih mediatorjev tkivnega prokržanja, zmanjšale [3].

Po srčnem infarktu lahko ohranjen vnetni proces in raztezanje povzročita napredno okvaro organa. Yang in sodelavci so preučevali Ac-SDKP tako v zgodnji fazi, da bi omejili poškodbe, kot tudi v poznejšem obdobju, da bi ocenili možnost vračanja sprememb. V obeh primerih se je skupna vsebnost kolagena v srcu zmanjšala. V profilaktični skupini je na primer upadla s približno 24 na 15 µg/mg, v skupini, ki je preučevala vračanje sprememb, pa s približno 23 na 14 µg/mg. Število makrofagov se je v obeh skupinah zmanjšalo za približno tretjino, število celic z pozitivno vrednostjo TGF-β pa se je zmanjšalo tudi. Te spremembe so se pojavile brez znižanja krvnega tlaka in brez zmanjšanja velikosti srca. V profilaktični skupini ni bilo opaziti očitnega izboljšanja krčenja. Kljub temu je zmanjšanje raztezanja in vnetja kazalo na boljše strukturne parametre srčne mišice v preučevanem modelu [4].

Ac-SDKP lahko sodeluje tudi v dodatnih zaščitnih ukrepih, ki jih opazimo med uporabo zaviralcev ACE. Rasoul in sodelavci so primerjali model visokega krvnega tlaka, ki ga povzroča angiotenzin II, z skupinami, ki so prejemale kaptopril ali Ac-SDKP v odmerkih 400–800 µg/kg/dan. Peptid je večkrat povečal svojo koncentracijo v krvi in povzročil številne učinke, podobne tistim inhibitorjev ACE: zmanjšal je prekomerno proliferacijo celic v srcu, zmanjšal število makrofagov in mastocitov, znižal je raven TGF-β in CTGF ter omejil odlaganje kolagena. Te učinke so se pojavljali brez znižanja krvnega tlaka ali zmanjšanja prekomernega raztezanja srca, kar kaže na neposreden vpliv na srčno mišično tkivo [5].

Rhaleb in sodelavci so raziskovali Ac-SDKP v kulturah srčnih fibroblastov podgan, pri koncentracijah od 0,05 do 100 nmol/l. Opazili sta dva pomembna učinka: zmanjšanje proliferacije celic, merjeno na podlagi sinteze DNA, do vrednosti približno enake normalni vrednosti pri približno 1 nmol/l, ter zmanjšanje proizvodnje kolagena, sproščanega z endotelinom-1, močnim mehanizmom vezave v tkivu. Nižje koncentracije so pokazale večjo učinkovitost pri omejevanju sinteze kolagena, medtem ko so zelo visoke bile manj aktivne. Mehanizem je bil po vsej verjetnosti povezan z zmanjšanjem signalizacije MAPK/ERK p44/42. Znani inhibitor MAPK je povzročil podoben učinek. Rezultati so v skladu z omejevanjem proliferacije fibroblastov in sinteze matriks z modulacijo signalnih poti, ki urejajo rast celic [6].

V nadaljnjih raziskavah je bilo pokazano, da lahko Ac-SDKP zmanjša poškodbe srca, ki jih povzroča galektina-3. Liu in sodelavci so odraslim prašičem dajali galektino-3, beljakovino, ki spodbuja vnetje in tvorbo vaskularnih vlaken, štiri tedne. Pri živalih so opazili večjo količino vnetnih celic, zgostitev stene srca, poslabšanje vaskularnega in mezofilnega vnetja, povečanje aktivnosti TGF-β/Smad3 in oslabitev krčenja v ekokardiografskem pregledu. Z dodajanjem Ac-SDKP v odmerku 800 µg/kg/dan se je preprečilo večino teh sprememb. Število vnetnih celic, vaskularizacija in zgostitev stene srca so se zmanjšala, parametri njegovega delovanja pa so bili boljši. Rezultati kažejo na vlogo zaviranja TGF-β/Smad3 in zmanjšanja vnetja [7].

Rhaleb in sodelavci so ocenjevali tudi Ac-SDKP v klasičnem podganjem modelu vaskulopatije ledvic, imenovanem model dveh ledvic in enega čepa (2K1C). Peptid so dajali pod kožo v odmerku 400 µg/kg/dan. Čeprav se je ohranil zvišan krvni tlak in prekomerna tvorba srca, so opazili znatno zmanjšanje števila vnetnih celic in proliferativnih celic v srčnem tkivu. Del ščitničnega kolagena se je zmanjšal s približno 10,1% pri podganah s hipertenzijo na približno 5,4%, kar je raven skoraj enaka kot pri živalih, ki so bile teoretično operirane (približno 5,3%). To pomeni, da se je obnova tkiv spremenila kljub nadaljevanju pritiskovnega preobremenitve, kar podpira hipotezo o mehanizmu, neodvisnem od znižanja tlaka [8].

V pregledu Cavasin in sodelavci so opisali dopolnilne lastnosti timozina β4 in njegovega fragmenta Ac-SDKP. Timozin β4 sodeluje pri migraciji in preživljanju celic, medtem ko Ac-SDKP kaže protivnetno delovanje v modelih hipertenzije. V študijah srčnega infarkta je peptid omejeval vnetje, zmanjševal vnetno tkivo in podpiral angiogenezo, kar so opazili tako in vivo kot ex vivo. V modelih mišic je tudi zmanjšal tveganje za zlom srčne stene. Združevanje delov učinkov nakazuje, da lahko Ac-SDKP odgovarja za nekatere biološke učinke, ki se pripisujejo timozinu β4. Avtorji so pa poudarili potrebo po kliničnih raziskavah pri ljudeh [9].

Ac-SDKP je bil tudi preučevan glede vpliva na encime, ki razgrajujejo sestavine zunanjega celičnega sloja. V srčnih fibroblastih odraslih kuncih Rhaleb in sodelavci so pokazali, da interlevkin 1β (IL-1β) znatno poveča ekspresijo metaloproteinaz MMP-2, MMP-9 in MMP-13. Te encime sodelujejo pri razgradnji celičnega sloja in lahko prispevajo k neprijetnim spremembam tkiv. Ac-SDKP ni spremenil osnovne ekspresije metaloproteinaz, vendar je močno zaviral rast, ki ga povzroča IL-1β. Hkrati pa je povečal ekspresijo naravnih inhibitorjev metaloproteinaz, TIMP-1 in TIMP-2, ter tako ponovno vzpostavil bolj uravnoteženo regulacijo razgradnje celičnega sloja.

Peptid je prav tako omejeval aktivacijo NF-κB in ERK/MAPK, dveh pomembnih poti, povezanih z vnetjem in proliferacijo. Kar je pomembno, IL-1β v tem modelu ni povečeval proizvodnje kolagena, prav tako Ac-SDKP ni vplival na njegovo sintezo. To kaže na selektivno regulacijo obnove tkiv in ne na splošno zaviranje sinteze kolagena. Rezultati kažejo na možno vlogo Ac-SDKP pri ohranjanju ravnovesja procesov, povezanih z zunajceličnim matriksom [10].

Nakagawa in sodelavci so raziskovali Ac-SDKP pri podganjih modelih srčnega miokarda, odvisnega od limfocitov T. Pri imuniziranih podganah, ki so prejele peptid, je ohranjena tako kontrakcijska kot tudi ekstrakcijska funkcija srca. Omejili so tudi povečanje organa, nastanek vlaknastih tkiv in poškodbo njegove strukture. Histološka analiza je pokazala manjše nabrekanje imunskih celic, vključno z makrofagoma, dendritičnih celic in limfocitov T.

Smanjili so se tudi ravni vnetnih mediatorjev, vključno z IL-1α, TNF-α, IL-2 in IL-17, kemokinom CINC-1 in IP-10, vezivnimi molekulami ICAM-1 in L-selektina ter metaloproteinazami. Ac-SDKP pa ni spremenil ravni avtoimunskih protiteles proti miozinu ali odziva T-limfocitov na antigen. To kaže na to, da je opazen zaščitni učinek izhajal predvsem iz omejitve rekultivacije imunskih celic in vnetnih mediatorjev, ne pa od spremembe proizvodnje avtoimunskih protiteles ali aktivacije T-limfocitov [11].

González in sodelavci so raziskovali Ac-SDKP pri kuncih, ki so jim tri tedne dajali angiotenzin II. Povišanje krvnega tlaka in povečanje srčnega popuščanja sta bila opažena pri živalih, ki so prejemale zdravilo, kot tudi pri kontrolnih živalih. Ac-SDKP pa je preprečil povečanje skupne vsebnosti kolagena in njegovo vezavo. Mehanizem je vključeval zaviranje ekspresije mRNA oksidaze lizaze (LOX) in beljakovine LOXL1, ki sta encimi, ki sodelujeta pri tvorbi poprečnih vezi kolagena in vezavi vlaknastega tkiva.

Poleg tega se je zmanjševala ekspresija TGF-β, aktivacija NF-κB ter priliv CD4⁺ in CD8⁺ T-celic ter CD68⁺ makrofagov v srčnem tkivu. Prihod CD4⁺ celic je bil povezan z ekspresijo LOXL1, kar kaže na mehanistični odnos med aktivnostjo imunskih celic in krhkostjo vezivnega tkiva. Rezultati kažejo na protivnetni in protivnetni učinek neodvisen od sprememb krvnega tlaka [12].

Peng in sodelavci so analizirali vpliv Ac-SDKP na zgodnje in pozne stopnje poškodbe srca po infarktu pri miših C57BL/6J. Živali so dobivale 1,6 mg/kg/dan. V prvem tednu se je zmanjšala pogostnost smrtnih razpok srčne stene, ekspresija ICAM-1, pritok makrofagov, aktivnost encimov za razgradnjo želatinske smole, raven p53 in smrt kardiozijskih celic. Hkrati se je na robovih poškodovanega območja povečala količina drobenih krvnih žil, kar je kazalo na poslabšanje angiogeneze.

V petem tednu so opazili manjšo vsebnost kolagena v medceličnem prostoru, bolj ohranjeno strukturo srca, nižje vrednosti stresnega retikuluma endoplazmatičnega, vključno s CHOP, ter ohranitev ravni SERCA2, beljakovine, pomembne za uravnavanje kalcija v srčnih miocitih. Splošna funkcija srca je bila boljša. Študija kaže na spremembe tako v zgodnjem poškodovanju kot v poznejši obnavljanju celic [13].

Castoldi in sodelavci so ocenjevali Ac-SDKP pri podganah z diabetesom mellitusom. Dva meseca po diagnosticiranju sladkorne bolezni so začeli s 8-tedenskim dajanjem peptida v odmerku 1 mg/kg/dan z minipompom. Pri podganah s sladkorno boleznijo so opazili hiperglikemijo, poslabšanje mezofilnega in vaskularnega vlaknjenja ter povišane ravni TGF-β1 in fosforiliranih beljakovin Smad2/3. Ac-SDKP je zmanjševal oba tipa vaskularnega vlaknjenja in omejeval signalizacijo TGF-β/Smad, tudi pri živalih, ki so prejemala ramipril, zaviralec ACE.

Echokardiografsko preiskavo so pokazale motnje krčenja in razširitve srca, povezane s sladkorno boleznijo. Insulina in ramipril sta ponovno vzpostavila obe funkcije, medtem ko je Ac-SDKP delno izboljšal razširitve. Rezultati kažejo na protiblokirajoč učinek, ki je bil spremljen z zmerno funkcionalno izboljšavo v tem modelu [14].

Sharma in sodelavci so raziskovali zaščito koronarnih žil pred poškodbami zaradi sevanja. V podganjem modelu sevanja se je Ac-SDKP dajal pod kožo 18 tednov. Sevanje je zmanjševalo mirovanje krvnega pretoka skozi srce, povzročilo smrt endotelijskih celic, povečalo prodiranje žil in motilo vezivna beljakovina, vključno z kladynom-1 in JAM-2.

Ac-SDKP je povrnilo pretok krvi v smeri normalnih vrednosti, spodbudil je ohranitev endotelnih celic, zmanjšal upogibanje in izboljšal organizacijo tesnih vezi. Laboratorijske raziskave so pokazale, da peptid prodira v endotelnih celicah in zmanjšuje nastanek reaktivnih oblik kisika po ozračevanju. Pri živeh živalih se je označeni peptid v nekaj urah nabiral v endotelnih celicah. Rezultati kažejo na zaščito žil, manjše oksidativne poškodbe in boljše delovanje mikrokrana v tem modelu [15].

V raziskavah na človeških srčnih fibroblastih so celice bile podvržene predhodni izpostavitvi Ac-SDKP v koncentraciji 10 nM in nato delovanju tunicamicina (0,25 µg/ml), ki povzroča stres endoplazemskega retikula. Peptid je omejeval prekomerno proizvodnjo kolagena v stresnih celicah. Ta učinek je bil povezan s poslabšanjem stresne odzivnosti, zmanjšanjem aktivnosti CHOP in NF-κB ter znižanjem ravni IL-6.

Po genetskem zmanjšanju ekspresije CHOP Ac-SDKP je še vedno zmanjševal aktivnost NF-κB in ekspresijo kolagena tipa I tako na ravni beljakovin kot tudi na ravni mRNA. Rezultati podpirajo hipotezo, da lahko peptid omeji prekomerno proizvodnjo komponent vezivnega tkiva v stresnih pogojih celic [16].

V celicah endotelijskih arterij srca je stimulacija TNF-α povzročila očitno povečanje ekspresije ICAM-1, vezavne molekule, ki sodeluje pri vezavi levkocitov na površino žil. Začetna izpostavljenost Ac-SDKP je zmanjšala raven ICAM-1 v odvisnosti od odmerka. Mechanistična analiza je pokazala zaviranje cikel IKK → IκB → NF-κB, ki ima osrednjo vlogo pri aktivaciji vnetnih genov. Drugi dve poti, p38 MAPK in ERK, sta ostale nespremenjene. To kaže na selektiven učinek Ac-SDKP na signalizacijo NF-κB v endotelijskih celicah. To so pa klinično potrjena vitro raziskava in ne potrditev klinične zaščite žil [17].

V podganjem modelu hipertenzije, povzročenega z angiotenzinom II Ac-SDKP, je zmanjšal odlaganje kolagena v aorti in zmanjšal ekspresijo mRNA kolagena tipa I in III. Ugotovili so tudi nižjo aktivnost beljakovinske kinaze C, manj stres oksidativnega učinka, omejitev ekspresije ICAM-1 in manj dotoka makrofagov v steno žil. Zmanjšala se je aktivnost TGF-β1 in Smad2, medtem ko se je raven Smad7, naravnega inhibitorja tega poteka, povečala. Tekočinski tlak in debelina aorte sta ostala višja, kar kaže na to, da opažene spremembe v steni žil niso posledica znižanja tlaka [18].

V naslednjem modelu izpostavljanja prsnega koša pri kuncih 18 tednov je dajanje Ac-SDKP spodbudilo ohranjanje srčne funkcije, omejilo kopičenje zunanje membrane in vaskularizacijo, zmanjšalo pritok makrofagov in smrt srčnih celic. Zmanjšali so se tudi ravni in izločanje Mac-2 (galektyna-3), proteina makrofagov, povezanega z vaskularizacijo. Ac-SDKP je bil zaznan v notranjosti makrofagov v bližini celičnega jedra in njegova prisotnost je omejevala izločanje Mac-2 zaradi sevanja. Ko fibroblasti niso vsebovali Mac-2, je sevanje povzročilo veliko slabše signale, ki so spodbujali vaskularizacijo. Te raziskave zagotavljajo predklinične dokaze o omejitvi vnetnega in vaskularnega obnavljanja tkiv po izpostavljenosti sevanju [19].

Raziskave dihalnega sistema: debelost pljuč in vnetni poškodbe

Primerjalne raziskave pljuč so analizirale razlike med Ac-SDKP in njegovim predhodnikom, timozinom β4. V laboratorijskih poskusih na človeških pljučnih celicah, pridobljenih od ljudi z idiopatskim pljučnim vnetjem (IPF), je Ac-SDKP omejeval prekomerno proliferacijo celic in zmanjševal ekspresijo dveh markerjev vnetja, spodbudenih s TGF-β: α-SMA in kolagena.

V mišjem modelu poškodbe pljuč, ki jo je povzročila bleomicin beta-4, je v petem dnevu zmanjšala vnetje in zgodnje vezivno tkivo, vendar ni preprečila vezivnega tkiva v kasnejših fazah, med 14. in 21. dni. Rezultati kažejo, da lahko Ac-SDKP zavira osnovne faze nastajanja vezivnega tkiva v celicah in potencialno kaže na bolj trajno protivezikulitisno delovanje kot njegov predhodnik. Ta hipoteza pa potrebuje nadaljnje potrditev [20].

V raziskavah ksilurina so analizirali vlogo KIF3A in β-kateninski poti. Nivoji KIF3A so bili zmanjšani tako v vzorcih bolnikov kot v pljučih podgan. Obnova aktivnosti KIF3A je zmanjšala signalizacijo β-katenina ter njegovih nadaljnjih mediatorjev MRTF-A in SRF, kar je omejilo prehod celic sluznice v miofibroblaste (EMyT), proces, povezan z vezivnim tkivom.

Ac-SDKP je povečal aktivnost KIF3A in zmanjšal signalizacijo β-catenin/MRTF-A/SRF. Ko je bila ekspresija KIF3A umetno omejena, so se koristni učinki Ac-SDKP izničili. To kaže na to, da je KIF3A potreben element pregledanega protimulčnega mehanizma [21].

V naslednjem raziskovanju je kombinacija Ac-SDKP z vazoaktivnim peptidom črevesja (VIP) zmanjšala spremembe, ki so bile podobne kronični obstruktivni pljučni bolezni (COPD) zaradi cigaretnega dima pri miših. Zmanjšali so se označevalci oksidativnih poškodb, vključno z MDA, vsebnost kolagenske hidroksiproline ter raven TGF-β. Hkrati so se zmanjšale koncentracije vnetnih citokinov TNF-α, IL-1β in IL-6, aktivnost dismutaze ponatrenja (SOD) pa se je povečala. Histološko preiskavo je pokazalo manj vnetja in slabšo strukturno obnovo pljuč. Združitev je torej pokazala antioksidativni, protivnetni in protivnetni učinek pri modelu poškodbe zaradi cigaretnega dima [22, 23].

Ac-SDKP je pokazal aktivnost tako v zgodnjem kot tudi v poznejšem stadiju vezivnega tkiva pljuč, ki ga povzroča bleomicin. Pri miših CD-1 je dajanje 0,6 mg/kg intravensko, začeto na dan 0 ali 7, izboljšalo preživetje in omejilo izgubo telesne mase zaradi bleomicina. V pljučih so opazili manj otekline, manj nabrekanih imunskih celic, bolj ohranjeno strukturo tkiv in manjše vezivno tkivo. Zmanjšalo se je barvanje kolagena in količina raztopljivega kolagena. Zmanjšali so se tudi ravni IL-17, TGF-β in α-SMA, kar je pokazalo manj miofibroblastov. Učinki so se pojavili tako pri zgodnjem kot tudi pri poznem začetku dajanja [24].

V podganjem modelu je akridin Ac-SDKP zmanjšal fibrilacijo z vplivom na potek P-HSP27/SNAI1. Akridin je povečal koncentracije P-HSP27, SNAI1, α-SMA in kolagena tipa I in III v pljučni tkivi. Dajanje Ac-SDKP pred izpostavitvijo ali po začetku bolezni je zmanjšalo vse te označevalce ter število celic hkrati pozitivnih za P-HSP27 in α-SMA. Pri zdravih kontrolnih živalih peptid ni spremenil ekspresije teh beljakovin, kar kaže na odvisnost opaženih učinkov od stanja bolezni tkiv [25].

Metaanaliza, ki je vključevala 18 randomiziranih študij na živalih, opravljenih v letih 2008–2021, je vključevala skupno 428 živali. V primerjavi z nezdravljenimi modeli Ac-SDKP je zmanjševal nekaj kazalnikov prokroneze: α-SMA (standardizirana povprečna razlika [SMD] −2,44), tip I kolagen (SMD −5,36), tip III kolagen (SMD −3,07), TGF-β (SMD −2,88) in površino pljučnih kile (SMD −1,80). Za vse te parametre je bil naveden p < 0,001.

Pomembna je bila tudi sprememba hidroksiprolina, označevalca vsebnosti kolagena (SMD 7,62; 95% IZ 4,90–10,33; p < 0,001), kar je kazalo na vpliv na metabolizem kolagena. Skupni rezultati študij na živalih podpirajo prisotnost protimikrogenskega signala v analiziranih modelih, vendar so podvrženi metodoloških omejitev, značilnih za predklinične metaanalize [26].

V drugem raziskovanju so podgane izpostavili žveplu za povzročitev fibrilacije in nato uporabili Ac-SDKP v profilaktičnem režimu ali po razvoju sprememb v odmerku 800 µg/kg/dan. V primerjavi s kontrolnimi skupinami so bile v pljučih ravni beljakovin TGF-β1 in CTGF z žveplom znatno nižje in znašale sta približno 0,244 ± 0,016 in 0,241 ± 0,017. Tudi ravni mRNA so se zmanjšale, zlasti CTGF (p < 0,05). V profilaktični skupini sta bila oba beljakovina in mRNA TGF-β1 znatno nižja kot v osmi tedenskem modelu žveplja. Histološka preiskava je potrdila manjše fibrilacijo [27].

V drugem modelu je akrilamid Ac-SDKP zmanjšal nastajanje kolagena in izboljšal strukturo pljuč. Psi so prejemali peptid po poškodbi ali 48 ur pred izpostavitvijo akrilamidu. V terapevtskih skupinah se je površina tumorjev v primerjavi z modeli akrilamida zmanjšala na 84,28% in 67,93%, raven hidroksiprolina na 70,89% in 58,18%, kolagena tipa I na 71,08% in 58,13% ter kolagena tipa III na 80,13% in 70,70% primerljivih kontrolnih vrednosti v posameznih časovnih točkah.

V profilaktičnih skupinah, v primerjavi z osmi tedenskim modelom kremačnega tkiva, je površina tumorjev padla na 61,13%, hidroksiprolina na 60,27%, kolagen tipa I in III pa na 40,13% in 65,77%. Histološka barvanja z HE in VG so pokazala blažjo fibrilacijo. Rezultati potrjujejo zmanjšanje tako vsebnosti kolagena kot tudi vidnih fibrilacij v obravnavanem modelu [28].

Raziskave o izpostavljenosti žveplu so vključevale tudi pljuča in kosti. V modelih podgan in celic žveplu je aktiviral TLR4 in RANKL, kar je poslabšalo vnetje pljuč in nastanek osteoklastov, odgovornih za resorpcijo kosti. Ac-SDKP je zaviral signalizacijo TLR4 in RANKL, podpiral je ohranjanje elastina v pljučih, zmanjševal vnetje in aktivacijo makrofagov. V kostni tkivi je zaviral diferenciacijo osteoklastov in pomagal ohranjati gostoto in mikroarhitekturo kosti. Rezultati kažejo na hkratne zaščitne spremembe v pljučih in kostni tkivi v eksperimentalnih modelih poškodb, povezanih z žveplom [29].

Ac-SDKP je bil tudi preučevan glede vpliva na diferenciacijo fibroblastov v miofibroblaste. TGF-β1 spodbuja pljučične fibroblaste k takemu preoblikovanju in povečuje proizvodnjo kolagena. Ko se Ac-SDKP uporablja pred izpostavitvijo TGF-β1, se raven α-SMA in kolagena zmanjšata, podobno kot raven TGF-β1 in njegovega receptorja.

Pri podganah z okvaro pljuč zaradi žveplovega prahu je dajanje peptida pred ali po izpostavljenosti zmanjšalo raven TGF-β1, signalizacijo RAS in aktivnost SRF ter zmanjšalo število miofibroblastov, pozitivnih na α-SMA v pljučnih vozliščih. To je bilo spremljeno z manjšo tvorbo kolagena [30, 31].

V raziskavah na celicah sluznice pljuč so analizirali mezenhimalno-celični prehod. Pod vplivom silicijevega dioksida in TGF-β1 so se ravni markerjev mezenhimalnih celic, kot sta E-kadherin in SP-A, zmanjšali, medtem ko so se povečali markerji mezenhimalnih celic in vnetja, vključno z wimentinom, α-SMA in kolagenom tipa I in III.

Ac-SDKP je omejeval te spremembe. Celice so bolj opazno imele nablobne značilnosti, ravni vezavnih markerjev so upadle, aktivnost TGF-β1/ROCK1 pa se je zmanjšala. To kaže na boljše ohranjanje strukture nablobov pljučnih mehurjev v razmerah eksperimentalnega poškodovanja [32].

Ac-SDKP je vplival tudi na stres endoplazemskega retikulum in smrt alveolarnih epitelijskih celic pljuč. Izpostavljenost kremenčniku je povečala raven GRP78, fosforiliranih PERK in eIF2α, CHOP ter kaspazaze-12, kar je bilo spremljeno z močno smrtjo celic. V prisotnosti Ac-SDKP, podobno kot pri uporabi inhibitorja stresnega retikuluma 4-PBA, so te označevalce upadli. V laboratorijskih poskusih in pri podganah je bilo zmanjšano tudi število celic ter vsebnost kolagena v pljučih. Rezultati kažejo, da lahko oslabitev PERK/eIF2α/CHOP poti in aktivnost kaspazaze-12 sodelujeta pri zaščiti alveolarnih epitelijskih celic in omejevanju vnetja [33].

Preiskave ledvic: fibrilacija in filtracijska funkcija

Nakagawa in sodelavci (2017) so v modelu mišic NZBWF1 pri bolnikih z predispozicijo za angioedem pokazali, da Ac-SDKP zmanjšuje poškodbe ledvic in okluzijo ledvičnih kapilar, ne da bi znižal krvo tlak. Huda hipertenzija, albuminurija in prezgodnja smrt so se pri zdravljenih živalih pojavljala pozneje, vendar te razlike niso dosegale statistične pomembnosti [34].

Worou in sodelavci (2015) so raziskovali Dahlove podgane, občutljive na sol, ki so dobivale Ac-SDKP šest tednov v odmerkih 800 ali 1600 µg/kg/dan. Hrana z veliko vsebnostjo soli je še vedno povečevala krvni tlak, vendar so v ledvicah opazili manj vnetja, manj razjed in bolj ohranjene membrane. Le višja doza je zmanjšala albuminurijo pri podganah, občutljivih na sol. V bolj odporni liniji SS13BN sta obe odmerki preprečili izgubo beljakovin in strukturno poškodbo. Rezultati kažejo, da je vsaj del učinkov na ledvice odvisen od zmanjšanja krvnega tlaka [35].

Liao in sodelavci (2015) so raziskovali Ac-SDKP pri miših, ki so bile nagnjene k vnetju, za obdobje 20 tednov. Pri živalih, ki so prejemale peptid, so opazili boljšo delovanje ledvic, čeprav se nivo avtoimunskih protiteles povezanih z vnetjem ni spremenil. V ledvicah je bilo manj avtoimunskih makrofagov in limfocitov T. Zmanjšale so se tudi ravni citokinov in kemokinov ter aktivacija dodatnih komponent C5–9 in mediatorjev RANTES, MCP-5 in ICAM-1. To je bilo spremljeno z ohranjanjem filtracijske funkcije in manjše mikroskopsko poškodbo [36].

V modelu nadtlaka, ki ga je razvil Aleth i sodelavci (2011), so miši hranili z Ac-SDKP v odmerku 800 µg/kg/dan 12 tednov. Čeprav se je nadtlak ohranil, se je zmanjšalo zgrudovanje ledvic, kopičenje matriksov v mehurjih ter prihod monocytov in makrofagov. Albuminurija se je zmanjšala z 41 ± 5 µg na 13 ± 3 µg na 10 g telesne mase na dan, doseženo pa je bila vrednost, podobna kontrolni vrednosti. Delno so se ponovno vzpostavili tudi vrednosti nefrinije, pomembnega proteina filtrirne pregrade. Rezultati kažejo na zaščito filtrirne pregrade in omejitev zgrudovanja neodvisno od krvnega tlaka [37].

Shibuya in sodelavci (2005) so analizirali Ac-SDKP pri miših db/db s sladkorno boleznijo tipa 2. Dvomesečno dajanje z minipompi je povečalo koncentracijo peptida v serumu približno trikrat, brez spremembe glikemije. Zmanjšali so povečanje pločic, prekomerno odlaganje mezangialne mrežice in zunajceličnih komponent. Koncentracija kreatinina v serumu se je približala normalnim vrednostim. Albuminurija se je prav tako zmanjšala, vendar razlika ni bila statistično značilna. Mekanistično je Ac-SDKP zaviral prenos Smad3 v celično jedro, kar je omejilo signalizacijo TGF-β/Smad, povezano z fibrilacijo [38].

Castoldi in sodelavci (2013) so raziskovali podgane s sladkorno boleznijo, ki so prejemale Ac-SDKP v odmerku 1 mg/kg/dan, ramipril v odmerku 3 mg/kg/dan, obe spojini skupaj ali kontrolno zdravljenje. Pri nezdravljenih živalih so opazili hiperglikemijo, povečano albuminurijo, tvorbo mehurja in zmanjšano raven nefrinov v mehurju. Sam Ac-SDKP je zmanjševal tvorbo mehurja, vendar ni izboljšal albuminurije. Ramipril je zmanjševal tako albuminurijo kot tvorbo mehurja in ponovno vzpostavil raven nefrinov. Kombinacija Ac-SDKP z ramiprilom je močneje zmanjševala tvorbo mehurja kot sam ramipril, vendar ni prinesla dodatne izboljšave albuminurije. Rezultati kažejo na dodatni protivomulinski učinek v raziskanem modelu, brez dodatne izboljšave izločanja albumina [39].

Zhang in sodelavci (2022) so razvili dvoskoeninski hidrogel, ki je navdihnil biološke rešitve, sestavljen iz želatine in kurkumin-cinkovega kompleksa, prekrivenega s DOPA in funkcionaliziran z neaktiviranim Ac-SDKP. Sistem so zasnovali za zmanjšanje težav, povezanih z topnostjo, absorpcijo in stabilnostjo proste snovi. Po aplikaciji in vivo v ledvicah podgan po delni nefrektomiji je hidrogel zmanjšal lokalno tkivo, podpiral angiogenezo in spodbudil nastanek novih ledvičnih kanalikov. Materialne raziskave so potrdile ustrezno poroznost, mehansko trdnost in biokompatibilnost, kar podpira nadaljnje raziskave tega rešitve [40].

Zuo in sodelavci (2013) so primerjali Ac-SDKP, timozin β4 in timozin β4 v kombinaciji z oligopeptidaznim inhibitorjem prolin (POP) pri modelih enostranske obstruktivne nefropatije pri divjih miših brez PAI-1. Ac-SDKP je v obeh genotipih dosledno zmanjšal tvorbo vaskularja. Opazili so manj kolagena in fibronektyn, manj aktiviranih miofibroblastov in makrofagov ter slabšo signalizacijo, ki je spodbujala tvorbo vaskularja. Primerjalne študije kažejo tudi na različne in odrazne na stopnjo bolezni učinke timozina β4 [41].

Wang in sodelavci (2010) so pokazali, da je Ac-SDKP zmanjšal vnetje in razraščanje ledvic, ki sta posledica zaprtega mehurja. Pri podganah z enostransko zaporo sečil je 14 dni dajanja peptida zmanjšal razraščanje mezangialno-miyalinskega tkiva in vnetne spremembe, ki so bile vidne v histološkem pregledu. Opazili so manjši pritok makrofagov ED-1 in nižje ravni MCP-1, NF-κB, α-SMA in TGF-β1 v celicah mezenhima in mezangialnem tkivu. Zmanjšala se je tudi ekspresija genov MCP-1 in TGF-β1, kar je kazalo na zmanjšanje tako vstopa vnetnih celic kot aktivacije zunajceličnega matriksa [42].

Liao in sodelavci (2010) so podali Ac-SDKP v odmerku 800 µg/kg/dan prašičem po odstranitvi 5/6 mase ledvic, pri čemer so začeli dajanje pred poškodbo ali po njej. Čeprav se je ohranil visok krvni tlak in povečanje levega prekata srca, je peptid zmanjšal albuminurijo, omejil pritok makrofagov in zmanjšal vsebnost kolagena v ledvicah v obeh skupinah. Izguba nefrinov v mehurjih je bila prav tako delno omejena ali obrnjena. Rezultati kažejo na izboljšanje celovitosti filtrirne membrane tako v zgodnji kot tudi v bolj napredni fazi poškodbe, predvsem zaradi protivnetnega in protivnetnega delovanja, ne pa zaradi nadzora tlaka [43].

Peng in sodelavci (2001) so raziskovali podgane po odstranitvi ene ledvice, ki so jim šest tednov dajali aldosteron in sol. Ta intervencija je zvišala arterijski tlak, povzročila povečanje srčne in ledvične mišice ter povečala vsebnost kolagena in markerja proliferacije celic PCNA. Ac-SDKP je zlasti pri višji odmerku 800 µg/kg/dan znatno zmanjšal vsebnost kolagena in PCNA v odvisnosti od odmerka. Arterijski tlak in povečanje organov sta ostala nespremenjena, nižji odmerek 400 µg/kg/dan pa je prinesel delne učinke [44].

Omata in sodelavci (2006) so raziskovali kunciče z ledvičnim vnetjem, povzročilanjem protiteles proti osnovni ovojnici mehurja (anti-GBM). Dajanje Ac-SDKP v odmerku 1 mg/kg/dan se je začelo 14 dni po pojava bolezni in se je nadaljevalo štiri tedne. V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so opazili manjše izločanje beljakovin v urinu, nižje koncentracije sečne kisline in kreatinina v serumu ter boljši klirens kreatinina. Raziskave tkiv so pokazale manj oslabljenost mehurja in zadebljanje vmesnega tkiva. Zmanjšale so se koncentracije fibronektyna, kolagena in TGF-β1 ter signalizacija Smad2, medtem ko se je povečal Smad7. Zmanjšali so se tudi kopičenje makrofagov v ledvični tkivi [45].

Nagai in sodelavci (2014) so v modelih sladkorne bolezni pokazali, da lahko Ac-SDKP zmanjša tvorbo ledvičnih vlaken z zaviranjem prehajanja mezenchimalno-mezenteričnega mehanizma (EndMT), tj. pretvorbe endotelijskih celic v celice z lastnostmi, ki spodbujajo tvorbo vlaken. Peptid je ponovno aktiviral naravne zaščitne poti, vključno z mikroRNA-jem let-7 in signalizacijo receptorja FGF, ki so bili pri sladkorni bolezni oslabljeni. Kombinacija Ac-SDKP z inhibitorjem ACE zagotavlja večjo zaščito ledvic kot samo zaviranje ACE v analiziranem modelu [46].

Srivastava in sodelavci (2020) so pri miših s sladkorno boleznijo primerjali zaviralce ACE, antagoniste angiotenzinskih receptorjev (ARB), Ac-SDKP ter njihove kombinacije. Raziskovalci so tudi zavirali naravno tvorbo Ac-SDKP z oligopeptidazno inhibitorjo prolin (POPi). Rezultati so kazali, da Ac-SDKP sodeluje pri koristnih učinkih zaviralcev ACE s spremembo metabolizma ledvic. Ravni SIRT3 so se ponovno vzpostavili, mitohondrijska oksidacija maščobnih kislin se je izboljšala, nepravilno izkoriščanje glukoze pa se je zmanjšalo.

Zapore naravnega nastajanja Ac-SDKP zmanjšujejo njegovo koncentracijo, pospešujejo fibrilacijo in motijo metabolično ravnovesje. Inhibitorji ACE v nasprotju z ARB delno obnovijo raven peptida in zmanjšajo fibrilacijo. Tako kot ACE inhibitorji kot tudi Ac-SDKP zavirajo mezendimski prehod ter zmanjšujeta vsebnost kolagena tipa I in fibronekta v ledvicah pri sladkorni bolezni [47].

V kliničnih raziskavah so analogo Ac-SDKP tudi analizirali kot potencialen sredstvo za zaščito krvnih celic med kemoterapijo. Carde in sodelavci (1992) so ocenili zdravilo Seraspenide v I. in II. faznem preskušanju z dvojno slepo metodo in z izmenjavo skupin, v katerem je sodelovalo 53 bolnikov, ki so prejemali citarabin ali ifosfamid. V primerjavi z kontrolnimi skupinami so pri bolnikih, ki so prejemali Seraspenide, opazili boljšo ohranitev števila okoliških krvnih celic v okoljih toksičnega delovanja kemoterapije. Zdravilo je bilo dobro prenašeno in neželenih učinkov niso poročali. Rezultati so spodbudili nadaljnje raziskave zaščite vaskularnega sistema, vendar niso potrdili rutinske klinične učinkovitosti [48].

V ločenem raziskovanju ni bilo ugotovljeno zaščito pred hematološko toksičnostjo kemoterapije. Cappelaere in sodelavci (1995) so raziskovali 84 bolnikov z napredovalimi ploidnimi novotvorbami, ki so prejemali karboplatin in stalni intravenski vnos 5-fluorouracila ter placebo ali Goralatide (Ac-SDKP) v odmerkih 12,5 ali 62,5 µg/kg/dan. V 221 ciklih kemoterapije niso ugotovili razlik med skupinami glede najnižjih vrednosti števila levkocitov, granulocitov, krvnih ploščic in hemoglobina. Čas trajanja toksičnosti se prav tako ni spremenil. Vendar pa so se v skupinah Goralatide pogostejše pojavile anemija in limfopenija [49].

Nitta in sodelavci (2016) so raziskovali Ac-SDKP v modelih sladkorne bolezni tipa 1 in 2. Mišice CD-1 s sladkorno boleznijo zaradi streptozotocina ter miši db/db so dobivale peroralni Ac-SDKP, imidapril, inhibitor ACE ali obe spojini. Sam Ac-SDKP in kombinirano zdravljenje sta zmanjševala atrofijo ploskev in mezoderma. Nivo cystatina C v serumu, ki se povečuje pri poškodbi ledvic, se je približal normalnim vrednostim.

Vsa intervencija je ponovno vzpostavila nivo protimikrobnega mikroRNA miR-29 in let-7, pri čemer je bila največja izboljšava opažena v skupini s kombiniranim zdravljenjem. Nivo peptida v urinu je bil najvišji v tej isti skupini, kar je kazalo na večjo sistemsko izpostavljenost [50].

Tan in sodelavci (2012) so podganam MRL/lpr s tumorjem dajali Ac-SDKP v odmerku 1,0 mg/kg/dan za osem tednov. V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so imele podgane, ki so prejele peptid, manj beljakovinske mokrice in boljšo delovanje ledvic. V ledvični tkivi je bilo manj vnetnih T-celic in makrofagov. Zmanjšala se je aktivacija NF-κB in proizvodnja TNF-α ter ravni markerjev vezave TGF-β1, α-SMA in fibronekta. Hamirala se fosforilacija Smad2/3, raven Smad7 pa se je povečala.

Vendar se ni spremenilo odlaganje imunskih kompleksov ali raven protiteles proti dsDNA. To kaže na to, da so bili učinki posledica omejevanja nadaljnjih stopenj vnetja in vezanja, in ne spremembe nastajanja protiteles [51].

Maheshwari in sodelavci (2018) so raziskovali kunci Zucker z normalno telesno maso (ZL) in debelostjo (ZO), ki so bili osem tednov hranjeni z dieto z normalno vsebnostjo soli (0,4%) ali z visoko vsebnostjo soli (4%). Ena od podskupin kunci ZO je prejemala Ac-SDKP v odmerku 1,6 mg/kg/dan.

Dieta z veliko vsebnostjo soli je poslabšala vnetje in tvorbo vozlov v ledvicah v obeh skupinah, pri čemer je bila največja koncentracija makrofagov pri podganah z debelostjo: 87,8 ± 10,8 v primerjavi z 19,14 ± 1,5 celic/mm² pri podganah s normalno telesno težo. Dajanje Ac-SDKP je zmanjšalo vstop makrofagov pri podganah z debelostjo na 32,18 ± 2,4 celic/mm² (p < 0,05) in omejilo vnetje vozlov in tvorbo vozlov v medceličnem prostoru v korenu in v steni ledvic (p < 0,05).

Skrčni arterijski tlak pri podganah z debelostjo, ki so jedle hrano z veliko vsebnostjo soli, se je zmanjšal s 164 ± 6,9 na 144,05 ± 14,1 mmHg (p = 0,004). Albuminurija je bila pri živalih z debelostjo večja kot pri tistih brez debelosti, vendar ni bila pomembno spremenjena zaradi prehrane ali Ac-SDKP [52].

Nevrološke raziskave: modeli poškodb možganov in hrbtenjače

Celularni modeli in podganje Parkinsonovo bolezen

Kamarehei in Zahednasab (2025) so raziskovali Ac-SDKP v modelih Parkinsonove bolezni. V kliničnih poskusih je začetna izpostavljenost živčnih celic SH-SY5Y 20 nM peptida omejila poškodbe, ki jih povzroča 6-OHDA, strupino, ki se pogosto uporablja za modeliranje parkinsonovih sprememb.

V raziskavah na podganah je vsakodnevno dajanje 800 µg/kg po povzročitvi poškodbe možganov z 6-OHDA spodbujalo ohranitev večjega števila dopaminergičnih nevronov in zmanjševal smrt celic z zmanjšanjem aktivnosti kaspaz-3 in kaspaz-12.

Živali, ki so prejele peptid, so prav tako pokazale boljšo gibalno koordinacijo, izboljšano prostorsko spomin ter manj vedenja, ki spominja na strah in depresijo.

Mehanistično so spremembe povezovali z zmanjšanjem oksidativnega stresa, stresa retikulum endoplazmatičnega sistema in vnetnega signala v možganih. Rezultati pa se nanašajo na predklinične modele in ne potrjujejo učinkovitosti Ac-SDKP pri bolnikih s Parkinsonovo boleznijo [53].

Regeneracija po poškodbi hrbtenjače

Hashemizadeh in sodelavci (2022) so Wistarac-SDKP podkožno dajali živalim v odmerku 0,8 mg/kg enkrat na dan v obdobju sedmih dni, in sicer dva ali šest ur po poškodbi hrbtenjače zaradi padca težkega predmeta.

V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so zajci, ki so prejemali peptid, ponovno pridobili boljšo sposobnost hojo, izgubljali manj gibljivih nevronov in so imeli nižje ravni TNF-α in kaspazaze-3.

Hkrati se je povečala ekspresija mRNA CD206, označevalca makrofagov M2, ki sodelujejo v procesih obnove. Raziskave tkiv so pokazale manjše površine poškodbe.

Na splošno so opazili prehod imunološkega odziva od aktivnosti, povezanih z makrofagoma M1, proti odzivu tipa M2, kar je bilo spremljeno z boljši funkcionalni in strukturni izid [54].

Zaščita po travmatski poškodbi možganov (TBI)

Zhang in sodelavci (2017) so pri podganah povzročili nadzorovano poškodbo možganske skorje in nato z minipompom dajali Ac-SDKP v odmerku 0,8 mg/kg/dan tri dni po poškodbi.

Od 7. do 35. dneva so bili rezultati senzomotoričnih testov boljši, med 33. in 35. dni pa je bilo opaženo tudi izboljšanje pri učenju prostorskih veščin v primerjavi s kontrolno skupino (p < 0,05).

Obdobje po koncu raziskave je bilo krajše za poškodovano področje korenine in izgubo hipokampičnih nevronov. Hkrati pa se je povečala angiogeneza, tvorba novih nevronov in gostota dendritičnih vrvic.

Zgodnje dajanje je tudi omejilo odlaganje fibrina in aktivacijo imunskih celic. Mehanistična raziskovanja so pokazala, da lahko velik del protivnetnega učinka razložimo z zaviranjem signalizacije TGF-β1/NF-κB [55].

Eksperimentalno autoimunsko vnetje možganov in hrbtenjače (model, ki spominja na multiplo sklerozo)

Pejman in sodelavci (2020) so raziskovali mišice C57BL/6 z eksperimentalnim avtoimunskim vnetjem možganov in hrbtenjače (EAE), ki se uporablja kot model za procese, ki spominjajo na multiplo sklerozo.

V EAE so opazili povečane vrednosti markerjev stresnega retikularnega endoplazma, vključno s kaspazazo-12, CHOP in PDI, ter povečan oksidativni stres in pritok imunskih celic v hipokampus.

Po dajanju Ac-SDKP so se zmanjšali nivoji kaspaze-12 in CHOP v oligodendrocitih ter aktivacija kaspaze-3. Zmanjšali so se tudi ravni reaktivnih oblik kisika in lipidne oksidacije, izboljšala se je antioksidativna sposobnost, koncentracije IL-6 in IL-1β pa so bile nižje.

Analiza možganske mase je pokazala manjše poškodbe hipokampa in manj naplavajočih imunskih celic, kar je ustrezalo počasnejšemu napredovanju bolezenskih sprememb v tem modelu [56].

Dodatna nevrološka preiskovanja, navedena v viru

V bibliografiji vira je bilo upoštevano tudi raziskavo o možganski kapi pri podganah, v kateri so analizirali Ac-SDKP v kombinaciji s tkivnim aktivatorjem plazminogena [57], ter raziskavo β4 fragmenta timozina o nevrogenezah hipokampa in spominskih sposobnostih [58].

V priloženem članku niso predstavljene metode niti rezultati teh dveh raziskav, zato na podlagi njega ni mogoče oblikovati dodatnih sklepov glede njihovih rezultatov.

Preiskave jeter: eksperimentalno vezanje

Zmanjšanje fibroze jeter, ki jo povzročajo kemični snovi

Wei in sodelavci (2022) so raziskovali podgane z okvaro jeter zaradi ogljikovega monoksida (CCl₄). Po uporabi Ac-SDKP so opazili manj smrtnih primerov črnih celic, glavnih celic, ki sodelujejo pri nastajanju vezivnega tkiva v jetrih, ter manjše tvorbo vlaken.

Mehanistična raziskovanja so pokazala, da je peptid zmanjšal raven WTAP, beljakovine, ki sodeluje pri dodajanju modifikacij m⁶A v RNA. Ta sprememba je stabilizirala RNA Ptch1 in vplivala na aktivnost Hedgehogovega poteka, pomembnega regulatorja procesov, povezanih z vezivanjem.

Rezultati kažejo na protirakavni mehanizem, povezan z potjo WTAP/m⁶A/Ptch1 in regulacijo Hedgehogovega signala [59].

Zaščita v modelu fibrilacije, ki jo povzroča zamašenost žolčnih poti

Zhang in sodelavci (2012) so uporabili model vezave žolčnih vodov pri kuncih in nato dva tedna dajali Ac-SDKP.

V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so opazili zmanjšanje signalizacije TGF-β1 in nižje ravni markerjev aktiviranih galaktocitnih celic, vključno z α-SMA in FSP-1.

Zmanjševala se je tudi ekspresija genov, povezanih s kolagenom tipa I in III, ter encimov, ki sodelujejo pri obnavljanju maternice, kot so MMP-2, TIMP-1 in TIMP-2.

Parametri krvnih snovi, povezani z delovanjem jeter, so se izboljšali: vrednosti ALT, AST, bilirubina in protrombinov čas so se približali normalnim vrednostim. Histološka preiskava je pokazala manj maščobnih celic, manj kopičenja kolagena ter manjše krče in vnetje [60].

Ohranjanje naravnih zaščitnih in popravilnih mehanizmov

Chen in sodelavci (2010) so pokazali, da se sočasno z dolgotrajnim izpostavljanjem CCl₄ naravne koncentracije Ac-SDKP postopoma zmanjševale.

Dajanje peptida v obliki infuzije v odmerku 800 µg/kg/dan v obdobju osmih tednov je pomagalo ohraniti njegovo osnovno raven in zmanjšati poškodbe jeter, vnetje in razjede.

Spadala je aktivnost jetrnih encimov v krvi, število vnetnih celic CD45⁺ ter količina kolagena in fragmentov α-SMA. Zmanjševali so se tudi nivoji TGF-β1 in fosforiliranega Smad2/3, medtem ko se je povečala aktivnost signalov, povezanih z obnovo tkiv, kot so BMP-7 in fosforiliran Smad1/5/8.

V mikroskopskih eksperimentih je Ac-SDKP neposredno zaviral aktivacijo črnih celic, kar je potrjevalo protirakavinsko delovanje na mikroskopskem nivoju [61].

Regeneracija kože, modeli celjenja ran in drugi eksperimentalni rezultati

Hidrogel z Ac-SDKP in rekonstrukcija brazgotin

Razvil se je poseben tkivni lepilo na osnovi celuloze, Dopa-OCMC-PAA, ki je primerljiv z OCMC-PAA in je namenjen prenašanju in sproščanju Ac-SDKP.

Oba variante so pokazala ustrezne lastnosti razpokovanja in degradacije, dobro mehansko trdnost ter skladnost z celicami, vendar je Dopa-OCMC-PAA dosegla boljše rezultate.

Pri miših z krvavitvami iz jeter je ta lepilo hitreje upočasnjevalo krvavitev. V testih na fibroblastih je povečeval raven encimov, ki sodelujejo pri obnavljanju tkiv, MMP-1 in MMP-3, hkrati pa je zmanjševal aktivnost genov, povezanih s kolagenom.

Pri kuncih z prevelikimi brazgotinami na ušesih je kombinacija Dopa-OCMC-PAA z Ac-SDKP zmanjšala intenzivnost brazgotin, zmanjšala število celic in izboljšala organizacijo kolagena. Ponovno so opazili povečanje MMP-1 in MMP-3 ter nižjo aktivnost kolagenskih genov. Rezultati so kazali na boljše celjenje ran in manjše brazgotine pri preučevanih modelih [62].

Lokalno uporabo in preživetje kože ter procese obnavljanja

Pri laboratorijskih modelih kožnih plaščev, trebušnih in hrbtnih ploskev podgan, je dajanje Ac-SDKP v injekcijah v odmerku 5 µg/kg dvakrat na dan za tri dni povečalo površino žive kože.

V trebuhovih plasteh je delež žive tkiva narasel z 50,9 ± 19,3% na 66,4 ± 7,5%, v hrbtnih plasteh pa z 53,4 ± 4,2% na 74,7 ± 6,6%.

V koži z poškodbo zaradi UVB žarkov je lokalna uporaba peptida izboljšala preživetje celic. Podobno površinsko dajanje je pospešilo nastanek novega povrhnjega sloja, povečalo raven keratina-14, označevalca celic, ki sodelujejo pri obnavljanju kože, ter fibronektyna. Rezultati kažejo na vlogo v procesih angiogeneze in tkivnega obnavljanja v eksperimentalnih pogojih [63].

Zaščita tvorbe krvi med kemoterapijo

V raziskavi pri miših, ki so prejemali doksorubicin, kemoterapevtik, je dajanje Ac-SDKP v količini 2,4 µg/dan, stalno ali v razdeljenih odmerkih, začeto 48 ur pred zdravljenjem, zmanjšalo smrtnost in ščitilo matične krvotvorne celice.

Zaščito so opazili pri merilih LTRC, CFU-S, HPP-CFC in CFU-GM. Dodajanje G-CSF je dodatno povečalo obnovo CFU-GM.

Moment začetka dajanja je imel ključen pomen. Začetek pred kemoterapijo je bil potreben za omejitev tako kratkotrajnega poškodovanja kostnega mozga kot dolgoročnega izgona matičnih celic v tem modelu [64].

Močnejši protibolečinski učinek spremenjenih analogov in spojin z zaviralci ACE

V eksperimentih z pljučnimi fibroblasti je oblika Ac-SDKP, odporna na razgradnjo s pomočjo ACE, močneje omejevala signalizacijo TGF-β/Smad3 in nastajanje kolagena kot naravna molekula.

Skrajšani fragment Ac-DKP je pokazal le slabe učinke in se je počasi razgrajeval s pomočjo ACE.

Spoj peptida z zaviralciji ACE je močneje zmanjševal raven hidroksiprolina, označevalca vsebnosti kolagena, kot pa sam peptid. Rezultati kažejo na možnost nadaljnjih raziskav spremenjenih analogov in njihovih interakcij.

V mejah koncentracij od 10⁻⁶ do 10⁻¹⁷ M sta tudi timozin β4 in Ac-SDKP zmanjševala proliferacijo mastnih celic, pri čemer je bil najmočnejši učinek opažen pri 10⁻¹⁴ M. Prav tako so povzročile nenadne spremembe v jedrih celic, povezane z zastajanjem celičnega ciklusa.

Pri koncentraciji 10⁻⁸ M sta oba peptida povzročala tudi degranulacijo mastocitov. Ac-SDKP je pokazal močnejši učinek, približno 89%, kot timozin β4, približno 57%. Ostali fragmenti timozina β4 niso pokazali aktivnosti, kar kaže na odvisnost teh odzivov od preučevanih nedegradiranih peptidov in ne drugih analiziranih fragmentov [65, 66].

Eksperimentalne odmerki Ac-SDKP v objavljenih raziskavah – niso priporočili za ljudi

Spodaj navedene vrednosti opisujejo protokole, ki so bili uporabljeni v omenjenih poskusih na živalih in celicah. Ne veljajo za ustaljene odmerke za ljudi.

V analiziranih predkliničnih raziskavah se je Ac-SDKP pogosto dajal pod kožo z minipompi v količini približno 0,8 mg/kg/dan za oceno krčljivosti in vnetja v srcu, žilah in ledvicah. V mišjih modelih za srčni infarkt so v nekaterih raziskavah v zgodnji zaščitni fazi tkiv uporabili odmerek 1,6 mg/kg/dan.

V eksperimentih na možganih in živčnem sistemu so kratki ciklusi, začeti v nekaj urah po poškodbi, običajno vključevali približno 0,8 mg/kg/dan za tri do sedem dni. V kliničnih raziskavah so pogosto uporabljali začetno izpostavljenost približno 10 nM peptida.

Pri modelih kroničnega poškodovanja jeter so protimikrobna protokola pogosto vključevala približno 0,8 mg/kg/dan. Pri modelu debelosti pljuč zaradi bleomicina so uporabljali 0,6 mg/kg intravensko, z ponavljajočimi se odmerki, ki so se začeli na dan 0 ali 7.

V raziskavah o celjenju kože in ranah so lokalne sheme vključevale 5 µg/kg na injekcijo dvakrat na dan za tri dni ali hidrogelove, ki so vsebovale peptid in ga sproščali lokalno.

V hematoloških in zaščitnih raziskavah na kostnem mozgu so uporabljali zelo majhne količine, na primer 2,4 µg/dan pri miših pred kemoterapijo, ter kratke cikle v obsegu µg/kg/dan v zgodnjih kliničnih raziskavah.

Razlaga rezultatov in omejitve razpoložljivih dokazov

Večina predstavljenega literature zajema celice in živalske modele. Spremembe v nastajanju kolagena, vnetnih mediatorjih, strukturi tkiv in eksperimentalnih funkcionalnih parametrih niso same po sebi dokaz terapevtskega učinka pri ljudeh.

Navedeni zgodnji klinični podatki so se nanašali predvsem na hematološke parametre med kemoterapijo in so prinesli nejasne rezultate, vključno z negativnimi rezultati randomiziranega preskušanja [48, 49].

Eksperimentalne poti dajanja, količine snovi in obdobja izpostavljenosti je treba obravnavati kot elemente raziskovalne metodologije in ne kot priporočila za individualno uporabo.

Uradno opozorilo: Ta članek je izključno izobraževalnega in znanstvenega značaja. Predstavlja rezultate raziskav o Ac-SDKP, molekularne mehanizme in omejitve razpoložljivih dokazov. Ne predstavlja zdravniške navodila, ne priporoča uporabe Ac-SDKP niti ne določa protokolov za odmerjanje, dajanje ali zdravljenje. Rezultati laboratorijskih raziskav in izkušnje z živalmi ne potrjujejo varnosti ali učinkovitosti Ac-SDKP pri ljudeh.

Reference

1. Wang, W., Jia, W., & Zhang, C. (2022). Vloga osi Tβ4-POP-Ac-SDKP pri nastajanju organovske fibroze. International journal of molecular sciences, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D’Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP zmanjšuje smrtnost in ruptura srca po akutnem miokardnem infarktu. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N., & Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP obrne srčno fibrozo pri podganah z renovaskularno hipertenzijo. Hipertenzija, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP obrne vnetje in fibrozo pri podganah z srčnim popuščanjem po miokardnem infarktu. Hipertenzija, 43(2), 229–236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock, D. R., & Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrotik učinek Ac-SDKP in zaviranje encima konvertiranja angiotenzina pri hipertenziji. Časopis za hipertenzijo, 22(3), 593–603. https://doi.org/10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/
6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C., & Carretero, O. A. (2001). Vpliv N-acetil-seril-aspartil-lizin-proline na sintezo DNA in kolagena v srčnih fibroblastih podgan. Hipertenzija, 37(3), 827–832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D’Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J., & Carretero, O. A. (2009). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin preprečuje srčno preoblikovanje in disfunkcijo, ki ju povzroča galektin-3, lectin za regulacijo adhezije in rasti pri sesalcih. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404–H412. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E., & Carretero, O. A. (2001). Dolgoročni učinek N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolina na nastanek kolagena v levem prekatu pri podganah z hipertenzijo 2-kidney, 1-clip. Kroženje, 103(25), 3136–3141. https://doi.org/10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Terapijski potencial timozina beta4 in njegovega derivata N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin (Ac-SDKP) pri celjenju srca po infarktu. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions, 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2013). N-acetil-Ser-Asp-Lys-Pro zavira aktivacijo matriksnih metaloproteinaz s pomočjo interlevkina-1β v srčnih fibroblastih. Arhiv Pflügerja – European Journal of Physiology, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/
11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2012). Zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom preprečuje poskusno avtoimunske miokarditis pri podganah. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114–H1127. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2014). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin zmanjšuje krčenje srčnega kolagena in vnetje pri podganah z visokim krvnim tlakom, ki so bile izpostavljene angiotenzin II. Klinična medicina, 126(1), 85–94. https://doi.org/10.1042/CS20120619 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23834332/
13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E. in Rhaleb, N. E. (2019). Zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom ščiti srce pred prekomernim poškodovanjem miokarda in srčnim popuščanjem pri miših. Kanadski časopis za fiziologijo in farmakologijo, 97(8), 753–765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G., & Stella, A. (2009). Preprečevanje miokardne fibroze z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom pri diabetičnih podganah. Klinična medicina, 118(3), 211–220. https://doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D., & Pokharel, S. (2018). Učinki novega peptida Ac-SDKP pri poškodbi koronarnih endotelij v primeru sevanja in zmanjšanju pretoka krvi v srčnem miokardu v mirovanju. Kardio-onkologija, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K., & Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP zmanjšuje proizvodnjo kolagena, sproženo z stresom v ER, pri srčnih fibroblastih z zaviranjem ekspresije NF-κB, ki jo sproži CHOP. Frontiers in Pharmacology, 15, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP zavira ekspresijo ICAM-1, ki jo povzroči TNF-α, v endotelijskih celicah z zaviranjem aktivacije IκB kinaze in NF-κB. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176–H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D’Ambrosio, M. A., & Carretero, O. A. (2008). Preprečevanje aortne fibroze z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom pri hipertenziji zaradi angiotenzina II. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253–H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H., & Pokharel, S. (2018). Majhen peptid Ac-SDKP zavira kardiomiopatijo, ki jo povzroča sevanje. Circulation: srčno popuščanje, 11(8), e004867. https://doi.org/10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/
20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2015). Učinki timozina β4 in njegovega N-terminalnega fragmenta Ac-SDKP na humane pljučne fibroblaste, obdelane s TGF-β, in v mišjem modelu pljučne fibroze zaradi bleomicina. Mnenje strokovnjaka o biološki terapiji, 15(Suppl 1), S211–S221. https://doi.org/10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y., Xu, H., Li, S., & Yang, F. (2023). Ac-SDKP spodbuja zaviranje β-catenin s pomočjo ciliarnega mehanizma prek KIF3A, s čimer omejuje prehod epitelijsko-miobilozno beljakovino silicijevih oksidov v epitelij. Biomedicina in farmakoterapija, 166, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/
22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E., & Athari, S. S. (2022). Imunomodulatorni učinek N-acetil-seril-aspartil-proline in vazokonstriktivnega črevesnega peptida na patofiziologijo kronične obstruktivne pljučne bolezni. Fundamentalne in klinične farmakologije, 36(6), 1005–1010. https://doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F., & Xu, H. (2020). Sinteza in identifikacija novega peptida, ac-SDK (biotin) prolin, ki lahko povzroči protifibrozne učinke pri podganah, ki trpijo zaradi silicosis. Drug Design, razvoj in terapija, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventivni in terapevtski učinki N-terminalnega fragmenta timozina β4 Ac-SDKP v bleomicinskem modelu pljučne fibroze. Oncotarget, 7(23), 33841–33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2022). Učinek regulatornega encima Ac-SDKP na potek fosforiliranega termičnega šoka proteina 27/SNAI1 pri silicotičnih podganah. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90–96. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y., & Deng, H. J. (2023). Metaanaliza inhibicije ac-SDKP pri nastajanju pljučne fibroze v živalskih modelih. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 41(4), 262-270. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D., & Wu, K.-F. (2009). [Antifibrotični učinki N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin, ki jih posredujejo regulacija ekspresije transformacijskega rastnega faktorja beta in vezivnega tkivnega rastnega faktorja pri podganah s silicozijo]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390–394. PMID: 20039536 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/
28. Yan, J.-B., Zhang, L.-J., & Li, Q. (2008). [Protivibracijski učinek N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolina v pljučih podgan z silicozijo]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401–405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/
29. Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W., Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F. in Xu, H. (2021). Ac-SDKP zmanjšuje aktivacijo pljučnih makrofagov in kostnih osteoklastov pri podganah, izpostavljenih siliciju, z zaviranjem signalnih poti TLR4 in RANKL. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/
30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D., & Wang, R. (2012). Nov cilj za protibolečinsko delovanje Ac-SDKP: inhibicija diferenciacije miofibroblastov v pljučih podgan z silicozijo. PLoS One, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D. in Yang, F. (2016). Acetilirana α-tubulina, ki jo uravnava N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin (Ac-SDKP), izkazuje protifibrotik učinek pri fibrozah v pljučih podgan pri povzročitvi silicijevega draženja. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D., & Yang, F. (2016). Zaščitni učinek Ac-SDKP na alveolarno epitelijske celice z zaviranjem EMT prek poti TGF-β1/ROCK1 pri silicoziji pri podganah. Toksikologija in uporabna farmakologija, 294, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X., & Yang, F. (2018). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin (Ac-SDKP) zmanjšuje silicotično fibrozo s zatiranjem apoptoze alveolarnih epitelijskih celic tipa II preko mediatorja stresa endoplazemskega retikula. Toksikologija in uporabna farmakologija, 350, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2017). Učinki N-acetil-seril-asparil-lizin-prolin na krvni tlak, poškodbo ledvic in smrtnost pri sistemskem eritematoznem lupusu. Fiziološke poročila, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D’Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2015). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin kot zaščitni učinek za ledvice pri podganah, občutljivih na sol. Hipertenzija, 66(4), 816–822. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D’Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., & Carretero, O. A. (2015). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin: mehanizmi zaščite ledvic pri mišjem modelu sistemskega eritematoznega lupusa. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 308(10), F1146–F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/
37. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U., & Carretero, O. A. (2011). Renalni zaščitni učinki N-acetil-Ser-Asp-Lys-Pro v hipertenzivnih miših z deoksikortikosteronskim acetatom v soli. Časopis za hipertenzijo, 29(2), 330–338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/
38. Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M. in Koya, D. (2005). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin preprečuje ledvično insuficenco in širjenje mezangialne matrike pri diabetičnih miših db/db. Diabetes, 54(3), 838–845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
39. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G., & Stella, A. (2013). Nefrologeni učinek N-acetil-seril-aspartil-lizin-proline pri diabetičnih podganah. American Journal of Nephrology, 37(1), 65–73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
40. Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L. in Hu, B. (2022). Biomimetični dvojni hidrogel izboljša ledvično fibrozo in spodbuja regeneracijo ledvic. Journal of Materials Chemistry B, 10(45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
41. Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A. in Fogo, A. B. (2013). Timozin β4 in njegov razgradni produkt Ac-SDKP sta nova popravljiva faktorja pri ledvični fibrozi. Kidney International, 84(6), 1166–1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
42. Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S., & Xie, R. (2010). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin zmanjšuje ledvično vnetje in tubulointersticijsko fibrozo pri podganah. Mednarodni časopis za molekularno medicino, 26(6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
43. Liao, T.-D., Yang, X.-P., D’Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., & Carretero, O. A. (2010). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin zmanjšuje poškodbo in disfunkcijo ledvic pri hipertenzivnih podganah z zmanjšano maso ledvic: Svet za raziskave visokega krvnega tlaka. Hipertenzija, 55(2), 459–467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20026760/
44. Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A., & Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrotični učinki N-acetil-seril-aspartil-lizin-proline na srce in ledvice pri aldosteronsko-solnih hipertenzivnih podganah. Hipertenzija, 37(2 Pt 2), 794–800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
45. Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M. in N. Inomata (2006). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin izboljša napredovanje ledvične motnje in fibroze pri podganah WKY z že ugotovljenim nefritisom proti glomerularni podstavezni membrani. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674–685. https://doi.org/10.1681/ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
46. Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K. in Koya, D. (2014). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin zavira diabetesovo povezano fibrozo ledvic in endotelno-mesenhimalno prehodnost. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/
47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K., & Koya, D. (2020). Metabolični reprogramiranje z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom ščiti pred diabetično ledvično boleznijo. British Journal of Pharmacology, 177(16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., in drugi (1992). [Seraspenid (acetilskPDK): študija faze I–II pri preprečevanju toksičnosti aracytina in ifosfamidnih monokemoterapij z zaviralcem hematopoeze]. Klinično preskušanje C R Acad Sci III, 315(13), 545–550. PMID: 1300237 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomiziran placebo preskus za zaščito vratnih žil pri bolnikih z plazemskim rakom zgornjih dihal in prebavil ali požiralnika, ki so se zdravili s kombinacijo karboplatina in fluorouracila]. Rak na prsih, 82(9), 732–737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K. in Koya, D. (2016). Peroralna uporaba N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolina izboljša zdravje ledvic pri diabetičnih miših tipa 1 in tipa 2 s terapevtskim režimom. BioMed Research International, 2016, 9172157. https://doi.org/10.1155/2016/9172157 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X., & Yang, N. (2012). Ac-SDKP izboljša napredovanje lusknega nefritisa pri miših MRL/lpr. Mednarodna imunofarmakologija, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L., & Carretero, O. A. (2018). Renalni zaščitni učinki N-acetil-seril-aspartil-lizin-proline (Ac-SDKP) pri debelih podganah na dieti z veliko vsebnostjo soli. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/
53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Nevroprotektivni učinek peptida Ac-SDKP na celice SH-SY5Y in podganjem modelu Parkinsonove bolezni proti oksidativnemu stresu in stresu ER, ki ga povzroča 6-OHDA. Neuropeptidi, 112, https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M., & Hadjighassem, M. (2022). Peptid Ac-SDKP izboljšuje funkcionalno okrevanje po poškodbi hrbtenjače v predkliničnem modelu. Neuropeptidi, 92, https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A., & Xiong, Y. (2017). Zdravljenje travmatične možganske poškodbe pri podganah z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom. Journal of Neurosurgery, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699 http://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/
56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S. in Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP izboljša napredovanje eksperimentalne avtoimunske encefalomielitisa z zaviranjem stresnega odziva ER in oksidativnega stresa v hipokampusu mišic C57BL/6. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E., & Zhang, Z. G. (2014). Kombinirano zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolinom in aktivatorjem tkivnega plazminogena zagotavlja močno nevroprotekcijo pri podganah po možganski kapi. Krvni strdek, 45(4), 1108–1114. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S., & Ryu, J. H. (2015). Peptidni fragment timozina β4 povečuje nevrogeno tvorbo hipokampusa in omogoča lažje spominjanje na prostorsko orientacijo. Nevroznanost, 310, 51–62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/
59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B., & Liu, Z. (2022). N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin (AcSDKP) zmanjšuje jetrno fibrozo prek osi WTAP/m6A/Ptch1 prek Hedgehogove poti. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y., & Zhang, Y. (2012). Antifibrotik učinek N-acetil-seril-aspartil-lizin-proline na jetrno fibrozo, povzročeno z vezavo žolčnih vodov pri podganah. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283–5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B., Fan, J. G., & Li, D. G. (2010). Ohranitev bazalnega AcSDKP zmanjšuje fibrozo, ki jo povzroča ogljikov tetraklorid, v jetrih podgan. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/
62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A., & Brouki Milan, P. (2025). Hidrogel za kožne lepilne materiale na osnovi celuloze, ki vsebuje peptid N-acetil-seril-aspartil-lizin-prolin za izboljšanje celjenja ran in preprečevanje brazgotin v vivo modelu ran na ušesu pri kuncih. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J., & Wdzieczak-Bakala, J. (2006). Tetrapeptid acetil-serin-aspartil-lizin-prolin izboljša preživetje kožnih pregrinjal in pospeši celjenje rane. Popravilo in obnova ran, 14(3), 306–312. https://doi.org/10.1111/j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F. in Carde, P. (1998). Tetrapeptid acetil-N-Ser-Asp-Lys-Pro (Goralatid) ščiti pred toksičnostjo, povzročeno z doksorubicinom: izboljšanje preživetja mišic in zaščita matičnih celic in progenitorskih celic kostnega mozga. Kri, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/
65. Ramasamy, V., Ntsekhe, M., & Sturrock, E. (2021). Raziskovanje antifibrotičnega potenciala peptidov z zaporedjem N-acetilseril-aspartil-lizil-prolin. Klinična in eksperimentalna farmakologija in fiziologija, 48(11), 1558–1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/
66. Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E., & Huff, T. F. (2004). Timosin beta 4 in njegov N-terminalni tetrapeptid AcSDKP zavirata proliferacijo in sprožita nastanek displastičnih, neapoptotičnih jedrc ter degranulacijo mastocitov. Kemija in biotska raznovrstnost, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/