Peptidas GHK-Cu: molekuliniai mechanizmai, žaizdų gijimas, odos tyrimai ir eksperimentiniai rezultatai

GHK-Cu yra varį jungiantis kompleksas, susidedantis iš natūraliai esančio tripeptido glicilo-L-histidilo-L-lizino (GHK) ir vario jono. GHK sudaro tris aminorūgštys: glicinas, histidinas ir lizinas. Jis buvo identifikuotas žmogaus plazmoje 1973 metais. Šio peptido buvimas taip pat buvo aprašytas kituose kūno skysčiuose, įskaitant seiles ir šlapimą. Ankstyvieji tyrimai siejo GHK su baltymų gamybos pokyčiais senstančiame kepenų audinyje, o tai paskatino susidomėjimą jo galimu vaidmenimi palaikant ir atstatant audinius.

Nuo tol laiko mokslininkai tyrė GHK ir jo kompleksą su variu odos biologijos, žaizdų atstatymo, uždegimo, oksidacinio streso ir kitų eksperimentinių procesų kontekste. Peptido gebėjimas koordinuoti vario jonus yra ypač svarbus, nes varis dalyvauja daugelio fermentų ir ląstelių procesų veikloje. Tačiau pats vario surišimas, laboratorinių biomarkerų pokyčiai ar geresni rezultatai su gyvūnų modeliais nėra klinikinės naudos žmonėms įrodymas.

GHK-Cu taip pat pasirodo kosmetikos tyrimuose, ypač susijusiuose su odos išvaizda ir plaukų priežiūros formulėmis. Kiti siūlomi taikymo būdai, tarp jų sergant neurologinėmis ir plaučių ligomis, tebėra kur kas ankstesniame tyrimų etape. Šioje apžvalgoje pristatomi individualūs tyrimai, analizuojami biologiniai keliai ir iš jų išplaukiančių išvadų apribojimai.

GHK-Cu a audinių atstatymas: žaizdų gijimas ir ekstraląstelinės matrikso remodeliacija

Gydomųjų ląstelių mobilizacija ir uždegiminių signalų reguliavimas

2008 metų apžvalgoje Pickart aptarė GHK dalyvavimą audinių pertvarkyme, įskaitant makrofagų ir su kapiliarais susijusių ląstelių pritraukimą į pažeidimo vietas [1]. Šios ląstelės dalyvauja šalinant pažeistus komponentus, kraujagyslių reakcijose ir audinių atstatyme. Apžvalgoje taip pat aprašytas poveikis kolagenui, elastinui ir kitiems struktūriniams baltymams, atsakingiems už ekstraląstelinės matrikso palaikymą.

Siūlomi mechanizmai apima kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF), nervų augimo faktoriaus ir susijusių signalų, susijusių su angiogeneze ir audinių organizacija, aktyvumo pokyčius. Taip pat buvo tiriamas GHK-Cu poveikis oksidaciniams procesams, įskaitant superoksido dismutazės aktyvumą, ir vietinėms kraujagyslių reakcijoms.

Šie tarpusavyje susiję mechanizmai yra biologinis pagrindas susidomėjimui šiuo peptidu. Tačiau daugelis stebėjimų yra gauti iš ląstelių kultūrų arba bandymų su gyvūnais, o ne iš galutinių klinikinių tyrimų [1].

Keratinocitų proliferacija, integrinos ir p63 baltymas

Kang su bendradarbiais tyrė GHK kompleksą su variu laboratoriniuose eksperimentuose, kuriuose dalyvavo keratinocitai – ląstelės, sudarančios didelę išorinio apsauginio odos sluoksnio dalį [2].

Stebimas padidėjęs ląstelių dauginimasis (proliferacija) bei su ląstelių adhezija ir atsinaujinimu susijusių baltymų pokyčiai. Tyrėjai ypač aprašė integrinų, proliferuojančių ląstelių branduolinio antigeno (PCNA) ir p63 baltymo, kuris yra svarbus epiteliocitų populiacijos žymuo, raiškos padidėjimą.

Šioms reakcijoms įvertinti buvo naudojami histologiniai dažymai, imunohistochemija ir Vesterno bloto (Western blot) metodas.

Bendrai rezultatai rodo, kad vario GHK kompleksas gali paveikti ląstelių procesus, svarbius epidermio regeneracijai. Vis dėlto jie neįrodo, kad kiekvienas lokaliai vartojamas preparatas sukelia identišką atsaką nepažeistoje žmogaus odoje [2].

Liposomalny GHK-Cu w komórkach naczyniowych i modelu oparzeń u myszy

Viename tyrime buvo vertinamas nanometrinio dydžio liposomose uždarytas GHK-Cu, naudojant kraujagyslių ląstelių kultūras ir pelių terminio nudegimo modelį [3].

Žmogaus virkštelės venos endotelio ląstelėse (HUVEC) liposominis preparatas susiję su ląstelių proliferacijos padidėjimu 33,%.

Tėkmės citometrijos rezultatai parodė ląstelės ciklinių fazių pasiskirstymo pokytį: padidėjusį ląstelių procentą G1 fazėje ir sumažėjusį G2 fazėje.

Tyrėjai taip pat užregistravo didesnį VEGF, fibroblastų augimo faktoriaus 2 (FGF-2), CDK4 ir ciklino D1 lygį. Šie rezultatai sutapo su kraujagyslių vystymąsi ir ląstelės ciklą reguliuojančios signalizacijos pokyčiais.

Atliekant nudegimų eksperimentus su pelėmis, liposominė formulė buvo susijusi su stipresniu CD31 ir Ki67 žymenų dažymusi bei didesniu angiogeniniu atsaku nei laisvasis GHK-Cu.

Žaizdų regeneracija buvo aprašoma maždaug 14-ąją dieną po pažeidimo.

Rezultatai yra svarbūs formulių tyrimams, nes pristatymo sistemos gali pakeisti medžiagų patekimo į audinius būdą. Tačiau liposomoms gautų rezultatų negalima automatiškai pritaikyti kitiems produktams, kurių sudėtyje yra GHK-Cu [3,4].

Kolagenas, glikozaminoglikanai ir jungiamojo audinio komponentų kaupimasis

Eksperimentuose su žiurkėmis ir žiurkių odos fibroblastų kultūrose buvo vertinama, ar GHK-Cu veikia naujai susidarančio audinio sudėtį žaizdų srityje [5].

Atliekant bandymus su gyvūnais, buvo aprašyti pakartotiniai injekcijų po 2 mg vienai dozei atvejai.

Gydomose žaizdose nustatyta didesnė audinio sausoji masė ir bendras baltymų kiekis, taip pat I tipo kolageno kiekio padidėjimas bei su glikozaminoglikanais susijusių parametrų, tokių kaip hidroksiprolinas ir uroninė rūgštis, padidėjimas.

Tyrėjai taip pat stebėjo pokyčius, susijusius su atskirais matrikso komponentais. Žaizdos audinyje chondroitino sulfato ir dermatano sulfato kiekis didėjo, o hialurono rūgšties kiekis stebėjimo laikotarpiu mažėjo.

Rezultatai rodo selektyvią tarpląstelinės matrikscios sintezės reguliaciją, o ne vienodą visų jos komponentų padidėjimą [5].

Išsamesnėje apžvalgoje aptarti su GHK susiję pokyčiai apšvitintuose fibroblastuose, imuninių ir endotelinių ląstelių recrutavimas bei galima reikšmė odai, plaukų folikulams ir virš A[v]irškinamojo trakto audiniams [6].

Taip pat buvo analizuojami kosmetiniai rodikliai, tokie kaip odos tekstūra, elastingumas, smulkios raukšlelės ir matomi fotosenėjimo požymiai.

Tačiau tai yra atskiros įrodymų kategorijos. Laboratorinės reakcijos padeda paaiškinti mechanizmus, tuo tarpu kosmetiniai rezultatai su žmonėmis reikalauja tinkamai kontroliuojamų paruoštų preparatų tyrimų.

GHK-Cu eksperimentiniuose plaučių tyrimuose

Bleomicino sukelta plaučių fibrozė

Keliuose tyrimuose buvo analizuojamas GHK arba GHK-Cu pelės plaučių fibrozės modeliuose.

Viename eksperimente Ma su bendradarbiais vertino GHK-Cu po bleomicino sukleto plaučių pažeidimo [7].

Gyvūnams, gavusiems tirtą junginį, stebėtas uždegiminių signalų, oksidacinio streso, kolageno kaupimosi ir su fibroze susijusių biocheminių požymių sumažėjimas.

Mokslininkai taip pat analizavo fermentų aktyvumo ir reguliacinių takų pokyčius, turinčius įtakos ekstraląstelinės matrikso remodeliavimuisi ir epitelio ląstelių elgsenai.

Susijusiame tyrime su pelėmis GHK buvo analizuojamas bleomicino sukelto plaučių fibrozės modelio, orientuojantis į TGF-β1/Smad signalinį kelią [8].

Stebimas mažesnis intersticinio audinio sustorėjimas, ribota kolageno deposicija bei mažesni uždegimo ir fibrozės žymenų lygiai.

Rezultatai taip pat rodė epitelio-mezenchiminio virsmo slopinimą – procesą, kurio metu epitelio ląstelės įgyja su audinių remodeliacija susijusių savybių.

Nors šie stebėjimai rodo biologiškai tikėtinus mechanizmus, bleomicino sukeltas plaučių pažeidimas pelėms nėra tapatus idiopatinei plaučių fibrozei pacientams [7,8].

Ūminis plaučių pažeidimas ir uždegiminė signalizacija

Park ir bendradarbiai tyrė GHK-Cu lipopolisacharidų (LPS) sukelto ūminio plaučių pažeidimo modelyje [9].

Ląstelių eksperimentuose ekspozicija kompleksui pasižymėjo žemesniu reaktyviųjų deguonies formų (RDF) lygiu, didesniu superoksiddismutazės (SOD) aktyvumu ir ribota uždegiminių citokinų gamyba.

Eksperimentuose su pelėmis taip pat buvo aprašyti mažesni audinių pažeidimai ir silpnesnis uždegiminis atsakas po eksperimentinio pažeidimo sukėlimo.

Šie stebėjimai pagrindžia tolesnius oksidacinių ir uždegiminių takų tyrimus sergant ūminiu plaučių pažeidimu.

Tačiau jos neįrodo, kad GHK-Cu išgydo ūminio respiracinio distreso sindromą (ŪRDS) žmonėms, kurio klinikinė eiga yra kur kas sudėtingesnė [9].

Cigarečių dūmai, plaučių emfizema ir raumenų funkcijos sutrikimai

12 savaičių trukmės pelių, veikiamų cigarečių dūmais, ekspozicijos modelyje buvo vertinama, ar GHK-Cu keičia su plaučių emfizema susijusius požymius [10].

Tyrimas užregistravo mažesnį struktūrinį plaučių pažeidimą, mažesnį uždegiminių citokinų ir oksidacinio streso žymenų kiekį bei palankesnę audinius ardančių fermentų ir jų inhibitorių pusiausvyrą.

Papildomi eksperimentai su žmogaus plaučių ląstelėmis patvirtino antioksidacinio poveikio galimybę laboratorinėmis sąlygomis.

Atskiri tyrimai buvo skirti skeleto raumenų funkcijos sutrikimams, susijusiems su cigarečių dūmų poveikiu [11].

Ištirtose ląstelėse ir pelėse GHK-Cu buvo siejamas su mažesniais raumenų irklavimo rodikliais bei pokyčiais antioksidacinės apsaugos takuose.

Tyrėjai nurodė sirtuino 1 (SIRT1), baltymo, dalyvaujančio ląstelinio streso atake, vaidmenį.

Rezultatai rodo tiriamąjį ryšį zwischen dūmų sukeltu raumenų pažeidimu ir nuo SIRT1 priklausoma signalizacija. Tačiau jie nėra GHK-Cu veiksmingumo gydant sergančiųjų lėtine obstrukcine plaučių liga (LOPL) raumenų sutrikimus įrodymas [10,11].

Kvėpavimo takų remodeliavimas su astma susijusiame modelyje

Eksperimentiniame kiaušinio baltymo (ovalbumino) sukeltame modelio tyrime buvo tiriamas GHK-Cu poveikis kvėpavimo takų remodeliacijai [12].

Aprašyti rezultatai apėmė gleivių gamybos apribojimą, struktūrinių kvėpavimo takų pokyčių sumažėjimą bei su uždegimu susijusių signalų susilpnėjimą.

Kaip svarbus stebėto atsako elementas buvo pasiūlytas SIRT1 aktyvinimas kvėpavimo takų epitelio ląstelėse.

Kadangi pastovus oro srauto apribojimas sergant sunkia astma vystosi dėl kelių besidengiančių mechanizmų, ovalbuminio modelis leidžia paaiškinti tik dalį šio proceso.

Todėl tyrimas pateikia ikiklinikinių įrodymų dėl kvėpavimo takų signalizacijos, o ne pacientų simptomų ar plaučių funkcijos pagerėjimo patvirtinimą [12].

GHK-Cu ir transplantato gijimas po priekinio kryžminio raiščio rekonstrukcijos

Fu ir bendradarbiai tyrė GHK-Cu 72 žiurkėms po priekinio kryžminio raiščio (PKR) rekonstrukcijos [13].

Gyvūnai buvo suskirstyti į grupes, gaunančias fiziologinį tirpalą arba GHK-Cu preparatus, kurių koncentracija buvo 0,3 mg/ml ir 3 mg/ml.

Pagal aprašytą protokolą vartojimas buvo pradedamas antrą savaitę po operacijos ir tęsiamas kartą per savaitę keturias savaites.

Po šešių savaičių GHK-Cu grupėse buvo nustatytas mažesnis kelio sąnario nestabilumas nei gyvūnams, gavusiems fiziologinio tirpalo. Tai rodė laikiną skirtumą tarp transplantato stabilizacijos.

Tačiau 12-ąją savaitę grupės jau reikšmingai nesiskyrė pagal nestabilumą, transplantato standumą ar kitus vertintus mechaninius parametrus.

Svarbiausia išvada taigi susijusi su laiko atžvilgiu ribotu stebėjimo pobūdziu. Ankstyvas pagerėjimas šiame žiurkių modelje nevirto ilgalaikiu pranašumu vėlesniame vertinime [13].

Kosmetiniai tyrimai su žmonėmis: odos paviršiaus atsinaujinimas ir kolageno žymenys

Paskelbtame atveja aprašyme pristatomas 59 metų vyras, kuriam buvo pritaikyta daugiakomponentė kosmetinė formulė, kurios sudėtyje yra vario GHK komplekso, oligo-hialurono rūgšties, rausvosios rodiolos ekstrakto, traneksamo rūgšties ir β-gliukano [14].

Preparatas buvo tiekiamas naudojant „Jet-M“ įrenginį. Procedūros buvo atliekamos kas savaitę tris mėnesius.

Klininės fotografijos rodė odos tekstūros ir raukšlių pokyčius akių srityje.

Biopsijos tyrimas parodė stipresnį struktūrinių baltymų, įskaitant IV tipo kolageną, fibriliną-1, I tipo prokolageną ir tropoelastiną, dažymą.

Šiam pacientui nepageidaujamų reiškinių nepranešta.

Tačiau tyrimo dizainas neleidžia nustatyti paties vario GHK komplekso indėlio, nes vienu metu buvo naudojami keli ingredientai ir prietaisas jiems pristatyti.

Atskiras atvejo aprašymas taip pat neleidžia nustatyti bendro saugumo ar veiksmingumo didesnėje populiacijoje [14].

GHK-Cu ir glikozaminoglikanų sintezė fibroblastuose

Wegrowski su bendradarbiais tyrė GHK-Cu fibroblastų kultūrose, stebėdami radioaktyviai pažymėto gliukozamino ir sulfatų įtraukimą į glikozaminoglikanus [15].

Atsakymas priklausė nuo koncentracijos.

Didžiausias padidėjimas buvo stebimas esant maždaug 10⁻⁹–10⁻⁸ M koncentracijai, o didesnės koncentracijos lėmė rezultatus, labiau artimus vertėms, gautoms kontrolinėse ląstelėse.

Pakeitimai taip pat buvo selektyvūs.

Dermatano sulfato kiekis didėjo daugiausia tarpląstelinėje erdvėje, tuo tarpu heparano sulfatas didėjo su ląstelėmis susijusioje frakcijoje.

Nebuvo stebimas šiems pokyčiams būdingas hialurono rūgšties sintezės padidėjimas.

Rezultatai yra reikšmingi, nes rodo, kad GHK-Cu nevienodai skatino visų glikozaminoglikanų sintezę [15].

GHK-Cu žiurkių žaizdų gijimo modelio tyrimas

Maquart ir bendradarbiai panaudojo implantuojamas nerūdijančio plieno tinklelio kameras, kad sukurtų kontroliuojamą gijimo aplinką po žiurkių oda [16].

Į ląsteles buvo įvedama fiziologinė druskos tirpalas arba vario tripeptido kompleksas.

Tada tyrėjai nustatė audinio sausąją masę, DNR kiekį, bendrą baltymų kiekį, kolageną bei su glikozaminoglikanais susijusius komponentus.

Kamerose, kuriomis buvo gaunamas GHK-Cu, buvo nustatyta didesnis kelių jungiamojo audinio komponentų kiekis nei kontrolinėje grupėje.

Kolageno kiekio padidėjimas buvo maždaug dvigubai didesnis nei nekollageninių baltymų kiekio padidėjimas.

Taip pat didėjo dermatano sulfato kaupimasis, o TGF-β informacinės RNR lygis nesikeitė taip, kaip būtų galima tikėtis remiantis paprastu mechanizmu, priklausomu nuo vieno augimo faktoriaus.

Rezultatai rodo, kad matrikso komponentų kaupimąsi gali reguliuoti keli keliai, o ne vien tik vienodo pobūdžio vieno signalo aktyvumo padidėjimas [16].

GHK ir mokymasis po miego deprivacijos pelėms

Rosenfeld su bendradarbiais tyrė, ar GHK veikia senstančių pelių, kurioms trūko miego, mokymosi gebėjimus [17].

Palyginti su kontroliniais gyvūnais, gavusiais fiziologinio tirpalo, GHK grupei pasireiškė mažesnis tyrime aprašytų mokymosi testų rezultatų pablogėjimas.

Tyrėjai hipokampe taip pat užfiksavo mažesnį monocitų chemotaksinio baltymo 1 (MCP-1) ir nitrotirozino kiekį.

Šie žymenys atitinkamai susiję su uždegimine signalizacija ir oksidaciniu arba nitroziniu stresu.

Tyrimas buvo atliktas su GHK pelių modeliu. Jis turėtų būti interpretuojamas kaip įrodymas, kad GHK-Cu turintis produktas apsaugo nuo su miego trūkumu susijusių atminties sutrikimų žmonėms.

Skirtumas tarp paties peptido ir jo komplekso su variu turi ypatingą reikšmę lyginant neurologinius tyrimus [17].

GHK tyrimuose apie su senėjimu susijusias kognityvines funkcijas

Tyrime, kuriame dalyvavo pagyvenusios C57BL/6 pelės, apie du mėnesius buvo vertinamas per nosį vartojamas GHK [18].

Šaltinio medžiagoje aprašomas eksperimentinis 15 mg/kg per dieną kiekis.

Pelės, gausančios GHK, pasiekė geresnių rezultatų erdvinio mokymosi arba orientacijos testuose nei kontroliniai gyvūnai.

Taip pat buvo stebimos mažesnės su neurouždegimu ir aksonų pažeidimu susijusių parametrų vertės.

Tyrimas pateiktoje bibliografijoje buvo nurodytas kaip „bioRxiv“ svetainėje paskelbtas preprintas.

Todėl prieš darant tvirtas išvadas, ypač kruopščiai reikia įvertinti publikacijos statusą ir taikytą metodologiją.

Vartojimas per nosį buvo gyvūnų eksperimento dalis, o ne patvirtintas vaistų vartojimo būdas žmonėms ar rekomenduojama dozė [18].

GHK sergamumo Alzheimerio liga modeliuose

Kitame preprinte mokslininkai tyrė intranazalisku būdu vartojamą GHK 5xFAD transgeninėms pelėms, naudojamoms tam tikroms Alcheimerio ligos savybėms tirti [19].

Eksperimentas buvo pradėtas, kai gyvūnams buvo apie keturi mėnesiai.

Aprašytą protokolą sudarė 15 mg/kg tris kartus per savaitę tris mėnesius.

Tyrėjai pateikė kognityvinių testų rezultatų, amiloidinių plokštelių kaupimosi ir uždegiminių žymenų skirtumus kaktinėje žievėje ir hipokampe.

Rezultatai gali padėti formuoti hipotezes apie neurodegeneracijos mechanizmus, tačiau jie nepatvirtina apsaugos nuo Alcheimerio ligos ar jos gydymo žmonėms.

5xFAD modelis atspindi tik tam tikrus ligos požymius, o tirta medžiaga buvo GHK, nebūtinai chemiškai charakterizuota GHK-Cu formulė [19].

Genų raiškos tyrimai ir su variu susijęs oksidacinis stresas

Genų raiškos duomenų apžvalgoje aptarta GHK galimybė paveikti genų grupes, susijusias su nervų sistemos funkcionavimu, ląstelių atstatymu, uždegimu ir senėjimu [20].

Autoriai panaudojo, be kita ko, „Connectivity Map“ duomenis, kad išanalizuotų ryšius tarp peptido ir genų raiškos profilių.

Skaičiavimo rezultatai rodo galimus kelius, kuriuos reikia toliau tirti. Jie nėra klinikinis įrodymas, kad GHK atstato senstančio žmogaus smegenų jaunesnę biologinę būseną.

Kiti apžvalginiai straipsniai aptarė vario homeostazę, oksidacinį stresą, uždegimą ir epigenetinius procesus su amžiumi susijusios degeneracijos kontekste [21].

Varis yra būtinas organizmui, tačiau sutrikus jo reguliacijai gali būti kenksmingas. Varis saugančio peptido elgsena priklauso nuo cheminio ir biologinio konteksto.

Teiginiams apie vario pusiausvyros atkūrimą arba kognityvinių funkcijų blogėjimo prevenciją reikia tiesioginių tyrimų, o ne vien išvadų, pagrįstų antioksidaciniais žymenimis.

Metalų sukeltas baltymų agregavimas ir ląstelių pažeidimas

Min su bendradarbiais tyrė GHK laboratorinėse sistemose, veikiamose vario arba cinko, ir analizavo baltymų agregaciją bei centrinės nervų sistemos ląstelių pažeidimus [22].

Eksperimentai parodė, kad GHK gali apriboti kai kurias su metalais susijusias agregacijos ir toksiškumo reakcijas.

Pateiktoje medžiagoje taip pat aptariama jaučio serumo albumino agregacija bei sąveika, dalyvaujant paraquatui ir vario ionams.

Tai mechanistiniai stebėjimai, gauti in vitro.

Gebėjimas daryti įtaką baltymų elgsenai kontroliuojamame eksperimentiniame mišinyje neprilygsta įrodytai galimybei užkirsti kelią neurodegeneracinėms ligoms.

Organisme taip pat svarbūs transportas, metabolizmas ir sudėtingos audinių sąveikos [22].

Kolageno matricos, kurių sudėtyje yra GHK, diabetinių žaizdų modeliuose

Arul su bendradarbiais sukūrė kolageno medžiagą, kurioje yra biotinilinto GHK, vadinamą peptidų įterptu kolagenu (angl. peptide-incorporated collagen, PIC), ir įvertino jį cukriniu diabetu sergantiems žiurkėms [23].

Tyrėjai palygino šią medžiagą su įprasta kolageno plėvele ir negydytomis žaizdomis.

Vertinami parametrai apėmė žaizdų gijimą, kolageno ir uroninės rūgšties kiekį, bendrą baltymų, DNR, azoto oksido kiekį bei antioksidacinius rodiklius, tokius kaip gliutationas ir askorbo rūgštis.

PIC grupėje buvo stebimas greitesnis žaizdų gijimas ir geresni antioksidaciniai parametrai nei lyginamosiose grupėse.

Histologiniai tyrimai rodo fibroblastų aktyvumo, kolageno nusodinimo ir žaizdos organizacijos skirtumus.

Laboratoriniai tyrimai taip pat parodė, kad medžiaga skatino fibroblastų augimą.

Reikia pabrėžti, kad buvo tiriama sudėtinė biomedžiaga, kurioje yra modifikuoto GHK, o ne laisvas GHK-Cu tiesiogiai žmonėms [23].

Vario tripeptido preparatų tyrimai su žmonėmis, turinčiais diabetinės pėdos opas

Mulder su bendradarbiais tyrė vietinį glicil-L-histidil-L-lizino vario kompleksą, šaltinio medžiagoje apibūdintą kaip Iamin arba Lamin gelis, pacientams, sergantiems neuropatinėmis diabetinėmis opomis [24].

Dalyviai taip pat gaudavo standartinę žaizdų priežiūrą, apimančią valymą, spaudimo mažinimą, tinkamą avalynę ir švietimą apie diabeto valdymą.

Žaizdos ploto sumažėjimo mediana pagal šaltinį buvo 98,5 % aktyvaus preparato grupėje ir 60,8 % placebo grupėje.

Taip pat buvo aprašytas mažesnis užsikrėtimų skaičius gydytojų grupėje ir ypač pastebimas atsakas didesnių opų atveju.

Tai yra žmonių žaizdų gijimo tyrimų rezultatai, tačiau jų interpretacija priklauso nuo tyrimo dizaino, dalyvių charakteristikų ir pagrindinio gydymo, taikyto abiejose grupėse.

Jos neįrodo, kad kitos, nesusijusios GHK-Cu formuluotės pasiektų palyginamus rezultatus [24].

Ankstesniame atvirame bandomajame tyrime buvo vertinamas vario GHK chelatas, pažymėtas kaip PC1020, sergant diabetinėmis opaligėmis [25].

Šaltinyje aprašomi vietiškai vartojami preparatai, kurių koncentracija yra 0,03%, 0,3% ir 3,0%, palyginti su fiziologiniu tirpalu per dviejų savaičių eksperimentinį laikotarpį.

Grupėje, kurioje buvo 0,3%, buvo stebimas didesnis žaizdų gijimas nei fiziologinį tirpalą gavusioje grupėje.

Kadangi tyrimas buvo nedidelis ir preliminarus, rezultatus reikėtų vertinti kaip ankstyvą klinikinį signalą, kurį reikia patvirtinti, o ne kaip nustatytą gydymo protokolą [25].

GHK eksperimentiniame intracerebraliniame kraujavime

Žiurkių intracerebrinio kraujavimo modelyje buvo vertinamas GHK poveikis smegenų pažeidimams [26].

Šaltinio medžiagoje aprašomi eksperimentiniai 5 ir 10 µg/g kiekiai.

Tyrėjai užregistravo mažesnę smegenų edemą, palankesnius neurologinio vertinimo rezultatus, didesnį neuronų išgyvenamumą bei uždegiminių ir su už ląstelės ribų esančia matriksa susijusių žymenų pokyčius.

Tyrimas taip pat rodo Akt/miR-146a-3p/AQP4 kelio dalyvavimą.

Tai rodo ląstelės gyvybingumą užtikrinančių signalinių takų sąsają su vandens transporto reguliacija po kraujavimo.

Rezultatai gauti iš gyvūnų modelio ir susijusių mechanistinių tyrimų. Jie nepatvirtina GHK veiksmingumo gydant hemoraginį insultą žmonėms [26].

Vietinis vario tripeptido kompleksas ischemicinėse žiurkių žaizdose

Canapp ir jo bendradarbiai tyrė vietinį vario tripeptido kompleksą, žinomą kaip „Iamin 2%“ gelis, su 24 Sprague-Dawley patinais žiurkėmis, kurioms buvo sukeltos eksperimentinės išemtinės žaizdos [27].

Lyginamosios grupės gavo tik gelio pagrindą arba buvo negydomos.

Praėjus 13 dienų, žaizdų plotas sumažėjo maždaug 64,5 % aktyvaus preparato grupėje, 45,6 % gelio bazę gavusių grupėje ir 28,2 % negydytoje grupėje.

Biopsijos matavimai taip pat parodė mažesnį tam tikrų uždegiminių ir su audinių irimu susijusių žymenų kiekį gydytose žaizdose.

Grupės, gaunančios tik preparato bazę, įtraukimas yra svarbus, nes nešiklis taip pat gali turėti įtakos gijimo sąlygoms.

Nepaisant tojo, žiurkių išemijos modelis neleidžia patvirtinti lygiavertio veiksmingumo žmonių žaizdoms [27].

Rekombinuotas GHK ir vario sukeltas kardiotoksiskumas danijoms pręgowanajams

Hsiao ir bendradarbiai gavo rekombinombinius tripeptidus, susijusius su GHK, ir tyrė jų sąveiką su variu danijo pręgowanego lervose [28].

Vandenyje esančiam vario paveiktoms lervoms peptidiniai preparatai buvo susiję su mažesne bradikardija ir retesniu nereguliarių širdies susitraukimų pasireiškimu.

Šaltinyje aprašomas aktyvumas jau nuo 1 nM koncentracijos, nepastebint palyginamų kitų vertintų širdies ir kraujagyslių parametrų pokyčių.

Tyrėjai rezultatus interpretavo vario jonų prijungimo ir apsaugos nuo jo sukeliamo toksiškumo kontekste.

Tai yra eksperimentinis toksikologinis stebėjimas nedideliame vandens organizmo modelyje, o ne įrodymas, kad GHK-Cu apsaugo žmogaus širdį nuo dažnų širdies ir kraujagyslių ligų [28].

Žmonių plaukų tyrimai: 5-ALA ir GHK deriniai

Lee ir bendradarbiai įvertino 5-aminolevulino rūgšties (5-ALA) ir GHK junginį, vadinamą ALAVAX, 45 vyrams, sergantiems androgenine alopecija [29].

Tyrimas truko šešis mėnesius ir jo metu buvo lyginamos skirtingos preparato koncentracijos su placebu.

Remiantis šaltiniu, reikšmingas plaukų skaičiaus pagerėjimas buvo nustatytas grupėje, gavusioje vidutinės koncentracijos preparatą, apibrėžtą kaip 50 mg/ml, palyginti su didesnės koncentracijos grupe ir placebu.

Dalyviai taip pat pranešė apie pasitenkinimą taikyta intervencija, nors plaukų ilgis ir storis tarp grupių reikšmė nesiskyrė.

Tyrimo metu nepageidaujamų reiškinių nebuvo užregistruota.

Kadangi tiriamajame preparate buvo tiek 5-ALA, tiek GHK, atskiro paties GHK indėlio išskirti negalima.

Rezultatų taip pat nereikėtų pateikti kaip įrodymų, susijusių išimtinai su GHK-Cu [29].

GHK-Cu w kosmetycznych badaniach skóry: dowody u ludzi i ich ograniczenia

2018 m. apžvalgoje buvo apibendrinti tyrimai apie GHK-Cu ir kosmetinius odos senėjimo rodiklius [30].

Viename iš minėtų tyrimų buvo stebima 71 moteris, 12 savaičių naudojusi veido preparatą. Buvo aprašyti odos tankio ir storio, suglebimo, skaidrumo bei smulkių raukšlelių pokyčiai.

Kitas tyrimas, kuriame dalyvavo 41 moteris, buvo susijęs su paakių kremu, naudojamu 12 savaičių.

Pastebėtas raukšlių išvaizdos ir odos tankio parametru pagerėjimas, palyginti su atrinktais lyginamaisiais preparatais.

Apžvalgoje taip pat aptartas kolageno gamybos šlaunų odoje tyrimas, kuriame apie 70% moterų, vartojusių GHK-Cu preparatą, parodė su kolagenu susijusių parametrų padidėjimą.

Taip pat buvo pateikti odos stangrumo, drėgmės ir elastingumo tyrimai.

Atskirame aštuonių savaičių tyrime, kuriame naudotas preparatas su nanolipidiniu nešikliu, buvo aprašytas raukšlių tūrio ir gylio sumažinimas, lyginant su kontroliniu serumu ir „Matrixyl 3000“ produktu.

Rezultatai yra svarbūs kosmetinių formulacijų tyrimams, tačiau juose reikia atsižvelgti į kelis apribojimus.

Apžvalgoje sujungiami tyrimai, kuriuose naudoti skirtingi preparatai, palyginamosios grupės, populiacijos ir matavimo metodai.

Teigiamo rezultato, gauto su paruoštu kremu, negalima vienareikšmiškai priskirti GHK-Cu be atitinkamo kontroliuojamo tyrimo.

Panašiai raukšlių parametrų ar odos storio pagerėjimas nepatvirtina sisteminio senėjimą stabdančio poveikio [30].

Išvados: ką patvirtina turimi įrodymai?

GHK ir GHK-Cu buvo tiriami daugelyje skirtingų eksperimentinių sistemų.

Dažniausiai besikartojantys mechanizmai susiję su užkardinės matrikso persitvarkymu, su kolagenu susijusiais procesais, keratinocitų ir fibroblastų aktyvumu, angiogeneze bei uždegimine ir oksidacine signalizacija.

Nedideliuose tyrimuose su žmonėmis taip pat buvo vertinami konkrečių vietinio poveikio preparatų efektai lėtiniams sunkiai gyjantiems odos pažeidimams ir kosmetiniams odos tikslams.

Kitos sritys, tokios kaip plaučių fibrozė, diabetinė neuropatologija, hemoraginis smegenų pažeidimas, Alcheimerio ligos modeliai ir su širdies funkcija susijęs vario toksiškumas, yra pagrįstos daugiausia ląstelių arba gyvūnų tyrimais.

Dalis šaltinyje minėtų neurologinių tyrimų turi preprintų statusą, o keliuose eksperimentuose GHK buvo naudojamas nepatvirtinus, kad tiriama medžiaga yra ekvivalenti GHK-Cu.

Daugiakomponentiai preparatai, liposominiai nešikliai ir modifikuoti peptidai įveda papildomų skirtumų, kurių nereikėtų ignoruoti.

Iš viso tyrimai pateikia vertingų hipotezių apie varį jungiančių peptidų biologiją.

Visgi platesnis tiriamų mechanizmų spektras neturėtų būti tapatinamas su tokiais pat stipriais klinikiniais įrodymais visiems siūlomiems pritaikymams.

Prieš pritaikant daugelį eksperimentinių rezultatų prie nusistovėjusių klinikinių išvadų, būtina atlikti didesnius, gerai kontroliuojamus tyrimus su žmonėmis, geriau charakterizuoti formuluotes ir įvertinti ilgalaikį saugumą.

Mokslinė ir redakcinė pastaba: Straipsnyje pateikiami paskelbti ir preliminarūs tyrimų rezultatai tik edukaciniais tikslais. Eksperimentinės koncentracijos, gyvūnams taikytos dozės ir vartojimo būdai aprašomi kaip pirminių tyrimų elementai, o ne kaip nurodymai, kaip vartoti žmonėms. Pirminiame šaltinyje nurodyta literatūra nebuvo savarankiškai patikrinta.

Nuorodos

1. Pickart L. Žmogaus tripeptidas GHK ir audinių remodeliavimas. J Biomater Sci Polym Ed. 2008;19(8):969-88. doi: 10.1163/156856208784909435. PMID: 18644225. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18644225/
2. Kang YA, Choi HR, Na JI, Huh CH, Kim MJ, Youn SW, Kim KH, Park KC. Varis-GHK didina keratinocitų integrinų raišką ir p63 pozityvumą. Arch Dermatol Res. 2009 Apr;301(4):301-6. doi: 10.1007/s00403-009-0942-x. Epub 2009 Mar 25. PMID: 19319546. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19319546/
3. Wang X, Liu B, Xu Q, Sun H, Shi M, Wang D, Guo M, Yu J, Zhao C, Feng B. GHK-Cu-liposomos pagreitina pelių žaizdų gijimą skatindamos ląstelių proliferaciją ir angiogenezę. Wound Repair Regen. 2017 Apr;25(2):270-278. doi: 10.1111/wrr.12520. epub 2017 Apr 27. PMID: 28370978. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28370978/
4. Siméon A, Monier F, Emonard H, Gillery P, Birembaut P, Hornebeck W, Maquart FX. Matrikso metaloproteinazių raiška ir aktyvacija žaizdose: tripeptido ir vario komplekso glicil-L-histidil-L-lizino-Cu2+ moduliavimas. J Invest Dermatol. 1999 Jun;112(6):957-64. doi: 10.1046/j.1523-1747.1999.00606.x. PMID: 10383745. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10383745/
5. Siméon A, Wegrowski Y, Bontemps Y, Maquart FX. Glikozaminoglikanų ir mažųjų proteoglikanų raiška žaizdose: tripeptido ir vario komplekso glicil-L-histidil-L-lizino-Cu(2+) moduliavimas. J Invest Dermatol. 2000 Dec;115(6):962-8. doi: 10.1046/j.1523-1747.2000.00166.x. PMID: 11121126. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11121126/
6. Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. GHK peptidas - natūralus kelių ląstelių regeneracijos kelių moduliatorius. Biomed Res Int. 2015;2015:648108. doi: 10.1155/2015/648108. Epub 2015 Jul 7. PMID: 26236730; PMCID: PMC4508379. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26236730/
7. Ma WH, Li M, Ma HF, Li W, Liu L, Yin Y, Zhou XM, Hou G. Apsauginis GHK-Cu poveikis bleomicino sukeltai plaučių fibrozei per antioksidacinį stresą ir priešuždegiminius kelius. Life Sci. 2020 Jan 15;241:117139. doi: 10.1016/j.lfs.2019.117139. epub 2019 Dec 4. PMID: 31809714. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31809714/
8. Zhou XM, Wang GL, Wang XB, Liu L, Zhang Q, Yin Y, Wang QY, Kang J, Hou G. GHK peptidas slopina bleomicino sukeltą pelių plaučių fibrozę, slopindamas TGFβ1/Smad sukeltą epitelio ir mezenchimo perėjimą. Front Pharmacol. 2017 Dec 12;8:904. doi: 10.3389/fphar.2017.00904. PMID: 29311918; PMCID: PMC5733019. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29311918/
9. Park JR, Lee H, Kim SI, Yang SR. Tri-peptidų GHK-Cu kompleksas gerina lipopolisacharido sukeltą ūminį plaučių pažeidimą pelėms. Oncotarget. 2016 Sep 6;7(36):58405-58417. doi: 10.18632/oncotarget.11168. PMID: 27517151; PMCID: PMC5295439. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27517151/
10. Zhang Q, Yan L, Lu J, Zhou X. Glicil-L-histidil-L-lizino-Cu²⁺mažina cigarečių dūmų sukeltą plaučių emfizemą ir uždegimą, mažindamas oksidacinį stresą. Front Mol Biosci. 2022 Jul 22;9:925700. doi: 10.3389/fmolb.2022.925700. PMID: 35936787; PMCID: PMC9354777. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35936787/
11. Deng M, Zhang Q, Yan L, Bian Y, Li R, Gao J, Wang Y, Miao J, Li J, Zhou X, Hou G. Glicil-l-histidil-l-lizino-Cu²⁺gelbsti rūkymo sukeltą skeleto raumenų disfunkciją nuo sirtuino 1 priklausomu keliu. J Cachexia Sarcopenia Muscle. 2023 Jun;14(3):1365-1380. doi: 10.1002/jcsm.13213. epub 2023 Mar 10. PMID: 36905132; PMCID: PMC10235902. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36905132/
12. Zhang Q, Liu J, Deng MM, Tong R, Hou G. Ovalbumino sukelto kvėpavimo takų persitvarkymo mažinimas naudojant glicil-l-histidil-l-lizino-Cu²⁺tripeptidų kompleksą per SIRT1 aktyvinimą kvėpavimo takų epitelio ląstelėse. Biomed Pharmacother. 2023 Aug;164:114936. doi: 10.1016/j.biopha.2023.114936. epub 2023 May 29. PMID: 37257226. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37257226/
13. Fu SC, Cheuk YC, Chiu WY, Yung SH, Rolf CG, Chan KM. Tripeptido ir vario kompleksas GHK-Cu (II) laikinai pagerino gijimo rezultatus žiurkių ACL rekonstrukcijos modelyje. J Orthop Res. 2015 Jul;33(7):1024-33. doi: 10.1002/jor.22831. epub 2015 Apr 10. PMID: 25731775. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25731775/
14. Byun SY, Chae JB, Na JI, Park KC. Reikšmingas varnos pėdų pagerėjimas po gydymo Jet-M ir mišriu vario-GHK, oligohialurono rūgšties, rodiolarų ekstrakto, traneksamo rūgšties ir β-gliukano tirpalu (GHR preparatas). J Cosmet Laser Ther. 2016 Oct;18(5):293-5. doi: 10.3109/14764172.2016.1157367. epub 2016 May 26. PMID: 27064823. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27064823/
15. Wegrowski Y, Maquart FX, Borel JP. Sulfatizuoto glikozaminoglikano sintezės stimuliavimas tripeptido ir vario kompleksu glicil-L-histidil-L-lizinas-Cu2+. Life Sci. 1992;51(13):1049-56. doi: 10.1016/0024-3205(92)90504-i. PMID: 1522753. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1522753/
16. Maquart FX, Bellon G, Chaqour B, Wegrowski J, Patt LM, Trachy RE, Monboisse JC, Chastang F, Birembaut P, Gillery P, et al. Tripeptido ir vario komplekso glicil-L-histidil-L-lizino-Cu2+ jungiamojo audinio kaupimosi stimuliavimas in vivo žiurkių eksperimentinėse žaizdose. J Clin Invest. 1993 Nov;92(5):2368-76. doi: 10.1172/JCI116842. PMID: 8227353; PMCID: PMC288419. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8227353/
17. Rosenfeld M, Nickel K, Ladiges W. GHK peptidas apsaugo senstančias peles nuo miego sutrikimų. Aging Pathobiol Ther. 2023;5(1):33-35. doi: 10.31491/apt.2023.03.109. epub 2023 Mar 29. PMID: 37035833; PMCID: PMC10081520. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37035833/
18. Tucker M, Keely A, Park JY, Rosenfeld M, Wezeman J, Mangalindan R, Ratner D, Ladiges W. Intranazalinis GHK peptidas didina senstančių pelių atsparumą kognityviniam nuosmukiui. bioRxiv [Preprint]. 2023 Nov 17:2023.11.16.567423. doi: 10.1101/2023.11.16.567423. PMID: 38014118; PMCID: PMC10680828. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38014118/
19. Tucker M, Liao GY, Park JY, Rosenfeld M, Wezeman J, Mangalindan R, Ratner D, Darvas M, Ladiges W. Alzheimerio ligos elgesio ir neuropatologiniai požymiai susilpnėja pelėms 5xFAD, kurioms į burną įleistas GHK peptidas. bioRxiv [Preprint]. 2023 Nov 21:2023.11.20.567908. doi: 10.1101/2023.11.20.567908. PMID: 38045355; PMCID: PMC10690187. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38045355/
20. Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. Žmogaus peptido GHK poveikis genų raiškai, susijusiai su nervų sistemos funkcija ir pažinimo funkcijų mažėjimu. Brain Sci. 2017 Feb 15;7(2):20. doi: 10.3390/brainsci7020020. PMID: 28212278; PMCID: PMC5332963. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28212278/
21. Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. Žmogaus tripeptidas GHK-Cu oksidacinio streso ir senėjimo degeneracinių būklių prevencijai: reikšmė kognityvinei sveikatai. Oxid Med Cell Longev. 2012;2012:324832. doi: 10.1155/2012/324832. epub 2012 May 10. PMID: 22666519; PMCID: PMC3359723. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22666519/
22. Min JH, Sarlus H, Harris RA. Glicil-L-histidil-L-lizinas (GHK) apsaugo nuo vario ir cinko sukeltos baltymų agregacijos ir CNS ląstelių žūties in vitro. Metallomics. 2024 Apr 10:mfae019. doi: 10.1093/mtomcs/mfae019. Epub prieš spausdinimą. PMID: 38599632. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38599632/
23. Arul V, Kartha R, Jayakumar R. Terapinis metodas diabetinių žaizdų gijimui naudojant biotinilinto GHK inkorporuotas kolageno matricas. Life Sci. 2007 Jan 2;80(4):275-84. doi: 10.1016/j.lfs.2006.09.018. epub 2006 Sep 23. PMID: 17049946. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17049946/
24. Mulder GD, Patt LM, Sanders L, Rosenstock J, Altman MI, Hanley ME, Duncan GW. Geresnis opų gijimas cukriniu diabetu sergantiems pacientams taikant vietinį gydymą glicil-l-histidil-l-lizino variu. Wound Repair Regen. 1994 Oct;2(4):259-69. doi: 10.1046/j.1524-475X.1994.20406.x. PMID: 17147644. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17147644/
25. Massey, P., Patt, L.M. ir D'Aoust, J.C., 1998 m. Glicil-L-histidil-L-lizino vario chelato poveikis diabetinių opų gijimui: bandomasis tyrimas. Žaizdos, 4(1), p. 21-8. Nuoroda į tyrimą
26. Zhang H, Wang Y, Lian L, Zhang C, He Z. Glicinas-histidinas-lizinas (GHK) palengvina intracerebrinio kraujavimo sukeltą astrocitų sužalojimą per Akt/miR-146a-3p/AQP4 kelią. Front Neurosci. 2020 Oct 28;14:576389. doi: 10.3389/fnins.2020.576389. PMID: 33192260; PMCID: PMC7658812. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33192260/
27. Canapp SO Jr, Farese JP, Schultz GS, Gowda S, Ishak AM, Swaim SF, Vangilder J, Lee-Ambrose L, Martin FG. Vietinio poveikio tripeptido ir vario komplekso poveikis išeminių atvirų žaizdų gijimui. Vet Surg. 2003 Nov-Dec;32(6):515-23. doi: 10.1111/j.1532-950x.2003.00515.x. PMID: 14648529. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14648529/
28. Hsiao CD, Wu HH, Malhotra N, Liu YC, Wu YH, Lin YN, Saputra F, Santoso F, Chen KH. Rekombinantinių GHK tripeptidų ekspresija ir gryninimas gali apsaugoti nuo ūmaus kardiotoksiškumo, atsirandančio dėl vario poveikio vandenyje, Zebrafish. Biomolekulės. 2020 Aug 19;10(9):1202. doi: 10.3390/biom10091202. PMID: 32825031; PMCID: PMC7564529. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32825031/
29. Lee WJ, Sim HB, Jang YH, Lee SJ, Kim do W, Yim SH. 5-aminolevulino rūgšties ir glicil-histidil-lizino peptido komplekso veiksmingumas plaukų augimui. Ann Dermatol. 2016 Aug;28(4):438-43. doi: 10.5021/ad.2016.28.4.438. epub 2016 Jul 26. PMID: 27489425; PMCID: PMC4969472. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27489425/
30. Pickart, L. ir Margolina, A., 2018. Regeneracinis ir apsauginis GHK-Cu peptido poveikis atsižvelgiant į naujus genų duomenis. Tarptautinis molekulinių mokslų žurnalas, 19(7), p.1987. https://www.mdpi.com/1422-0067/19/7/1987