Peptyd Epitalon (Epithalon; AEDG, Ala-Glu-Asp-Gly) był podawany w opublikowanych badaniach na zwierzętach i w eksperymentach laboratoryjnych w bardzo różnych porach, z różną częstotliwością i przez różne okresy. Żadne kontrolowane badania z udziałem ludzi nie ustaliły jednak najlepszej pory dnia, przewagi stosowania rano nad wieczorem ani ustandaryzowanego cyklu klinicznego. [1–8]
Pytania takie jak „kiedy stosować Epitalon”, „Epitalon rano czy wieczorem” oraz „jak długo powinien trwać cykl Epitalon?” są często omawiane w internecie tak, jakby istniał jeden standardowy protokół. Opublikowana literatura naukowa nie potwierdza takiego uproszczenia.
W niektórych badaniach stosowano pięć kolejnych dni podawania w każdym miesiącu, w innych Epitalon podawano pięć razy w tygodniu przez wiele miesięcy, a jeszcze inne obejmowały krótkotrwałą ekspozycję donosową u szczurów. Badania z podaniem doustnym trwały czasem miesiąc. W badaniach rytmu dobowego mierzono nocne stężenie melatoniny lub wieczorne odpowiedzi hormonalne, jednak pory wykonywania pomiarów nie należy utożsamiać z dowodem na to, że sam Epitalon powinien być podawany wieczorem.
Kiedy Epitalon był podawany w badaniach?
Epitalon był podawany według wielu różnych schematów badawczych, a nie o jednej standardowej porze. Badania na zwierzętach obejmowały między innymi pięć kolejnych dni podawania w każdym miesiącu, pięć podań tygodniowo przez wiele miesięcy, pojedyncze ostre ekspozycje donosowe oraz miesięczne schematy doustne. Harmonogram dobierano do badanego punktu końcowego, a nie na podstawie zwalidowanego protokołu leczenia ludzi. [1–6]
Jeden z najbardziej przejrzystych przykładów pochodzi z długoterminowego badania starzenia u myszy. Samice myszy SHR pochodzenia szwajcarskiego otrzymywały 1 μg Epitalon podskórnie przez pięć kolejnych dni każdego miesiąca, począwszy od trzeciego miesiąca życia aż do naturalnej śmierci. [1]
W innym badaniu na samicach myszy CBA zastosowano podobny schemat miesięczny, ale niższą ilość eksperymentalną: 0,1 μg na zwierzę przez pięć kolejnych dni każdego miesiąca, począwszy od szóstego miesiąca życia aż do naturalnej śmierci. [2]
Inne badania nie wykorzystywały cykli miesięcznych. W jednym długoterminowym badaniu karcynogenezy u myszy Epitalon podawano w iniekcji pięć razy w tygodniu przez 6,5 miesiąca. [3]
Z kolei w badaniu na szczurach Epithalon podawano doustnie przez jeden miesiąc, analizując aktywność enzymów jelita cienkiego. [4]
W badaniu neurofizjologicznym na szczurach zastosowano ostre podanie donosowe, po którym w krótkim czasie rejestrowano aktywność neuronów korowych, zamiast prowadzić długotrwały cykl podawania. [5]
Przykłady te pokazują, że moment i schemat podawania Epitalon zależały od konkretnego pytania naukowego.
Epitalon rano czy wieczorem?
Opublikowane badania nie wykazały, że Epitalon powinien być podawany konkretnie rano lub wieczorem. Chociaż w kilku badaniach mierzono wieczorne lub nocne stężenie melatoniny ze względu na związek Epitalon z funkcją szyszynki i rytmem dobowym, wykonywanie pomiarów podczas biologicznej nocy nie stanowi dowodu na przewagę wieczornego podawania. [6–8]
Pytanie dotyczące stosowania rano lub wieczorem wynika w dużej mierze z badań nad melatoniną.
Melatonina naturalnie podlega rytmowi dobowemu, a jej stężenie wzrasta podczas biologicznej nocy. Badacze analizujący możliwość wpływu Epitalon na związane z wiekiem zmiany funkcji szyszynki często mierzyli więc melatoninę wieczorem lub w nocy.
Na przykład w badaniu na naczelnych Epitalon znacząco stymulował wieczorną syntezę melatoniny u starzejących się rezusów i był związany z normalizacją rytmu dobowego kortyzolu. [6]
W innym badaniu na rezusach stwierdzono niższe nocne stężenie melatoniny u starszych zwierząt i analizowano, czy Epitalon może wpływać na związane z wiekiem zaburzenia hormonalne. [7]
W osobnej publikacji obejmującej stare małpy i osoby starsze opisano przywrócenie nocnego poziomu endogennej melatoniny oraz normalizację jej rytmu dobowego po zastosowaniu peptydów szyszynki. [8]
Żadne z tych wyników nie ustanawia jednak klinicznej zasady, zgodnie z którą Epitalon powinien być podawany przed snem.
Pokazują one przede wszystkim, że noc jest ważnym okresem pomiarowym w badaniach hormonów związanych z rytmem dobowym.
Jaka jest najlepsza pora dnia według opublikowanych badań?
Nie ustalono najlepszej pory dnia na stosowanie Epitalon. W opublikowanej literaturze nie ma kontrolowanego badania z udziałem ludzi bezpośrednio porównującego podanie rano i wieczorem oraz wykazującego lepszą skuteczność, wchłanianie, bezpieczeństwo, wpływ na sen, odpowiedź melatoninową lub efekty związane z długowiecznością o jednej z tych pór.
Rzetelna odpowiedź oparta na dowodach na pytanie „jaka jest najlepsza pora na stosowanie Epitalon?” wymagałaby badania bezpośrednio porównującego podanie o różnych porach dnia.
Badacze mogliby na przykład porównać podawanie rano i wieczorem przy zachowaniu tej samej dawki, drogi podania, czasu trwania, badanej populacji oraz warunków eksperymentalnych. Następnie można byłoby ocenić farmakokinetykę, melatoninę, fazę rytmu dobowego, sen, działania niepożądane lub inny wcześniej określony punkt końcowy.
Dostępna literatura dotycząca Epitalon nie zawiera takiego badania.
Rozróżnienie to jest istotne, ponieważ chronobiologia może sprawiać, że pora podania ma znaczenie biologiczne, nie wskazując jednocześnie, jaka konkretnie pora jest właściwa.
Sama melatonina jest silnie zależna od czasu. W innych kontekstach eksperymentalnych odpowiedź biologiczna na melatoninę może zmieniać się zależnie od fazy rytmu dobowego. Ta ogólna zasada chronobiologii nie oznacza jednak, że Epitalon ma taki sam profil zależności od pory podania.
Zalecanie stosowania Epitalon rano lub wieczorem wyłącznie na podstawie badań dotyczących melatoniny byłoby więc wyjściem poza dostępne dowody.
Jak długo trwały cykle Epitalon w badaniach?
Cykle badawcze Epitalon obejmowały okresy od pojedynczej ostrej ekspozycji, przez powtarzane pięciodniowe cykle miesięczne i miesięczne badania z podaniem doustnym, aż po wielomiesięczne powtarzane podawanie oraz schematy obejmujące znaczną część życia zwierzęcia. Nie istnieje jedna opublikowana długość cyklu, która zostałaby zwalidowana jako optymalny schemat dla ludzi. [1–5]
Czas trwania w dużej mierze zależał od tego, co badacze zamierzali mierzyć.
Pięciodniowe cykle miesięczne
W kilku klasycznych badaniach dotyczących starzenia i nowotworów stosowano pięć kolejnych dni podawania w każdym miesiącu.
W eksperymencie dotyczącym długowieczności u myszy SHR pięciodniowy cykl miesięczny rozpoczynano w trzecim miesiącu życia i kontynuowano aż do naturalnej śmierci. [1]
W badaniu na myszach CBA stosowano taki sam pięciodniowy schemat miesięczny, rozpoczynając go w szóstym miesiącu życia. [2]
W eksperymencie na transgenicznych myszach HER-2/neu Epithalon również podawano przez pięć kolejnych dni każdego miesiąca, począwszy od drugiego miesiąca życia. [9]
Pięć razy w tygodniu przez wiele miesięcy
Inne badania wykorzystywały bardziej ciągły schemat.
W jednym długoterminowym eksperymencie na myszach C3H/He Epitalon podawano pięć razy w tygodniu przez 6,5 miesiąca. [3]
Miesięczne podawanie doustne
Stare szczury Wistar otrzymywały Epithalon doustnie przez jeden miesiąc w badaniu dotyczącym enzymów jelitowych. [4]
Ostre badania donosowe
Badania neurofizjologiczne z podaniem donosowym miały zupełnie inną konstrukcję. Epitalon podawano jednorazowo znieczulonym szczurom, a następnie w krótkim oknie eksperymentalnym rejestrowano aktywność neuronów korowych. [5]
Określenie „cykl Epitalon” opisuje więc wiele różnych historycznych protokołów, a nie jeden oparty na dowodach standard kliniczny.
Jak często podawano Epitalon?
W opublikowanych badaniach Epitalon stosowano z częstotliwością od pojedynczej ekspozycji eksperymentalnej, przez codzienne podawanie podczas krótkich cykli, po pięć podań tygodniowo oraz pięć kolejnych dni podawania powtarzanych co miesiąc. Częstotliwość różniła się zależnie od gatunku i punktu końcowego, a żadna częstotliwość dawkowania u ludzi nie została ustalona jako klinicznie optymalna. [1–5,9]
Częstotliwość i czas trwania należy rozpatrywać oddzielnie.
Badanie może wykorzystywać krótki, ale powtarzany cykl, na przykład pięć kolejnych dni podawania każdego miesiąca.
Inne może obejmować częstą i długotrwałą ekspozycję, na przykład pięć podań w tygodniu przez kilka miesięcy.
W badaniu na myszach SHR stosowano pięć kolejnych codziennych iniekcji każdego miesiąca. [1]
W badaniu HER-2/neu również stosowano pięć kolejnych dni podawania każdego miesiąca. [9]
W badaniu na myszach C3H/He wykonywano pięć iniekcji tygodniowo przez 6,5 miesiąca. [3]
Natomiast w ostrym badaniu donosowym na szczurach analizowano pojedyncze podanie, po którym natychmiast rejestrowano aktywność neuronalną. [5]
Schematów tych nie można porównywać wyłącznie poprzez liczbę podań. Pięciodniowy miesięczny protokół dotyczący starzenia i jednorazowy donosowy eksperyment elektrofizjologiczny odpowiadają na całkowicie różne pytania biologiczne.
Kiedy mierzono efekty Epitalon w badaniach?
Efekty Epitalon mierzono w bardzo różnych przedziałach czasowych — od minut po podaniu donosowym, przez nocne pomiary hormonów i miesięczne biochemiczne punkty końcowe, po wielomiesięczne wyniki dotyczące nowotworów oraz przeżycie przez całe życie. Nie istnieje więc jeden oparty na dowodach „czas początku działania”, który pozwalałby przewidzieć, kiedy dana osoba odczuje efekt. [1,3–8]
Znaczenie początku działania zależy całkowicie od ocenianego punktu końcowego.
Minuty
W donosowym badaniu kory nowej szczura badacze rejestrowali spontaniczną aktywność neuronów korowych po ostrej ekspozycji i obserwowali zmiany w kolejnych minutach. [5]
Był to elektrofizjologiczny punkt końcowy, a nie objaw kliniczny czy efekt terapeutyczny.
Wieczór lub noc
U starszych rezusów badacze mierzyli wieczorne lub nocne stężenie melatoniny, ponieważ hormon ten podlega rytmowi dobowemu. W jednym badaniu opisano znaczącą stymulację wieczornego poziomu melatoniny u starzejących się małp. [6]
W badaniach z udziałem ludzi i małp również oceniano nocną melatoninę w kontekście związanych z wiekiem zaburzeń rytmu dobowego. [8]
Jeden miesiąc
W eksperymencie dotyczącym enzymów jelitowych u szczurów wyniki oceniano po miesiącu podawania doustnego. [4]
Kilka miesięcy
Badanie nowotworów u myszy C3H/He trwało 6,5 miesiąca, a rozwój nowotworów i toksyczność oceniano w tym okresie. [3]
Całe życie
Niektóre badania nad starzeniem rozpoczynały podawanie stosunkowo wcześnie i kontynuowały je aż do naturalnej śmierci zwierząt, dlatego ostatecznymi punktami końcowymi były długość życia i rozwój spontanicznych nowotworów. [1,2]
Różnice te oznaczają, że stwierdzenie „Epitalon działa po X dniach” nie znajduje potwierdzenia w literaturze.
Czy czas stosowania różni się w zależności od drogi podania?
Tak, czas i schemat badań różniły się zależnie od drogi podania, ale wynikało to z konstrukcji eksperymentów, a nie z dowodów wskazujących, że każda droga wymaga określonej pory dnia u ludzi. W badaniach donosowych często analizowano szybkie odpowiedzi neuronalne, w badaniach doustnych oceniano dłuższe efekty dotyczące przewodu pokarmowego, natomiast badania z iniekcjami często obejmowały powtarzane protokoły dotyczące starzenia lub nowotworów, trwające tygodnie, miesiące lub całe życie zwierząt.
Donosowo
Epitalon podawany donosowo badano przede wszystkim u szczurów.
W eksperymencie dotyczącym kory nowej z 2007 roku podanie donosowe wykorzystano specjalnie do analizy szybkich zmian aktywności neuronalnej. [5]
Krótki czas pomiaru był więc odpowiedni dla tego konkretnego pytania naukowego.
Nie ustala to jednak, kiedy Epitalon podawany donosowo powinien być stosowany przez ludzi.
Doustnie
Badania z podaniem doustnym zwykle koncentrowały się na wolniej rozwijających się efektach biologicznych.
W badaniu jelitowym na starych szczurach Wistar Epithalon podawano doustnie przez jeden miesiąc przed oceną aktywności enzymów. [4]
Nie ma solidnych danych farmakokinetycznych u ludzi pokazujących, czy stosowanie rano, wieczorem, na czczo lub po posiłku istotnie zmienia ekspozycję na doustny Epitalon.
Iniekcje
Podanie podskórne dominuje w klasycznej literaturze dotyczącej gerontologii i karcynogenezy.
Badania te często wykorzystywały powtarzane cykle trwające wiele miesięcy lub aż do naturalnej śmierci, zamiast koncentrować się na natychmiastowych efektach zależnych od pory dnia. [1–3,9]
Historyczne protokoły iniekcyjne dostarczają więc informacji przede wszystkim o częstotliwości i czasie trwania, ale zazwyczaj nie wskazują preferowanej pory podania w rytmie dobowym.
Jak interpretować dowody dotyczące czasu stosowania Epitalon?
Badania wskazują na wyraźną różnicę pomiędzy czasem podania, czasem wykonywania pomiarów oraz strukturą cyklu.
| Pytanie dotyczące czasu | Co potwierdzają opublikowane dowody |
|---|---|
| Czy udowodniono, że najlepiej stosować rano? | Nie |
| Czy udowodniono, że najlepiej stosować wieczorem? | Nie |
| Czy wykonywano pomiary nocnych efektów? | Tak, szczególnie melatoniny [6–8] |
| Czy badano pięciodniowe cykle? | Tak, w kilku modelach mysich [1,2,9] |
| Czy Epitalon podawano pięć razy w tygodniu? | Tak, w niektórych długoterminowych badaniach na zwierzętach [3] |
| Czy badano miesięczne schematy doustne? | Tak, u szczurów [4] |
| Czy badano ostre efekty podania donosowego? | Tak, u szczurów [5] |
| Czy istnieje zwalidowana długość cyklu dla ludzi? | Nie |
| Czy ustalono czas początku działania u ludzi? | Nie |
| Czy nocny pomiar melatoniny dowodzi, że podawanie wieczorem jest najlepsze? | Nie |
Najważniejszy wniosek brzmi więc:
Opublikowane badania Epitalon opisują wiele różnych schematów badawczych, ale nie określają jednej klinicznie zwalidowanej pory dnia, długości cyklu, częstotliwości ani czasu początku działania u ludzi.
Najczęściej zadawane pytania o czas stosowania Epitalon
Czy Epitalon należy stosować rano czy wieczorem?
Nie ma kontrolowanych badań z udziałem ludzi wykazujących przewagę podawania rano lub wieczorem. W badaniach Epitalon często mierzono nocne stężenie melatoniny, ponieważ hormon ten naturalnie podlega rytmowi dobowemu, ale nocna pora pomiaru nie dowodzi, że sam Epitalon powinien być podawany wieczorem.
Czy Epitalon jest lepszy wieczorem ze względu na melatoninę?
Nie zostało to wykazane. Badania na naczelnych oraz ograniczone starsze badania z udziałem ludzi opisywały zmiany wieczornego lub nocnego poziomu melatoniny, jednak żadne badanie nie porównało bezpośrednio podawania Epitalon rano i wieczorem, wykazując lepszy wpływ wieczornego stosowania na melatoninę, sen, bezpieczeństwo lub długowieczność. [6–8]
Jak długo trwa cykl Epitalon?
Nie istnieje jeden standardowy cykl. Opublikowane badania na zwierzętach obejmowały pięć kolejnych dni podawania powtarzanych co miesiąc, schematy pięciu podań tygodniowo przez wiele miesięcy, miesięczną ekspozycję doustną oraz długotrwałe podawanie aż do naturalnej śmierci. [1–4,9]
Jak często podawano Epitalon w badaniach?
Częstotliwość wahała się od pojedynczego ostrego podania donosowego do pięciu kolejnych dni podawania każdego miesiąca lub pięciu podań tygodniowo. Schemat zależał od gatunku i badanego punktu końcowego, a nie od ustandaryzowanego protokołu klinicznego. [1–5]
Jak szybko działa Epitalon?
Nie ustalono zwalidowanego czasu początku działania u ludzi. Wyniki laboratoryjne mierzono w ciągu minut po ekspozycji donosowej, podczas wieczornych lub nocnych pomiarów hormonalnych, po miesiącu podawania doustnego, po kilku miesiącach albo przez całe życie zwierzęcia. Tych okresów obserwacji badawczej nie należy interpretować jako czasu działania leczenia u ludzi.
Czy donosowy Epitalon działa szybciej niż Epitalon w iniekcji lub doustny?
W badaniu na szczurach wykryto efekty neuronalne w ciągu minut po podaniu donosowym, ale nie dowodzi to, że donosowy Epitalon działa klinicznie szybciej lub skuteczniej u ludzi. Różne drogi podania nie zostały porównane w kontrolowanych badaniach farmakokinetycznych lub badaniach skuteczności z udziałem ludzi. [5]
Ograniczenia dowodów dotyczących czasu stosowania i cykli
Największym ograniczeniem jest to, że większość danych dotyczących czasu stosowania pochodzi z badań na zwierzętach, a nie z kontrolowanych badań farmakologicznych u ludzi.
Drugim ograniczeniem jest fakt, że poszczególne badania projektowano pod kątem różnych punktów końcowych. Ostra aktywność neuronów, nocna melatonina, aktywność enzymów jelitowych, rozwój nowotworów i długość życia wymagają całkowicie różnych schematów.
Po trzecie, literatura zasadniczo nie zawiera bezpośrednich porównań podawania rano i wieczorem.
Po czwarte, czas pomiaru wyników łatwo pomylić z czasem podania. Badanie melatoniny w nocy nie musi oznaczać, że peptyd podawano wieczorem, a nawet jeśli tak było, sam taki projekt nie dowodzi przewagi tej pory.
Po piąte, brakuje solidnych danych dotyczących farmakokinetyki u ludzi. Bez zwalidowanych informacji o wchłanianiu, dystrybucji, metabolizmie, eliminacji oraz zmianach ekspozycji w czasie nie ma mocnych podstaw do określenia optymalnego chronoterapeutycznego okna podania.
Wreszcie, powtarzające się w starszych badaniach schematy, takie jak pięć kolejnych dni w miesiącu, należy traktować jako protokoły konkretnych badań, a nie jako uniwersalnie zwalidowane „cykle”.
Zastrzeżenie
Niniejszy materiał służy wyłącznie celom edukacyjnym i naukowo-informacyjnym. Nie stanowi porady medycznej, instrukcji dawkowania, zaleceń dotyczących leczenia ani rekomendacji stosowania Epitalon. Epitalon/Epithalon (AEDG; Ala-Glu-Asp-Gly) nie jest zatwierdzonym przez FDA ani EMA leczeniem anti-aging, zaburzeń snu, zaburzeń rytmu dobowego, modyfikacji telomerów ani długowieczności. Nie ustalono klinicznie zwalidowanego schematu stosowania u ludzi określającego porę rano lub wieczorem, czas trwania, długość cyklu ani częstotliwość dawkowania w tych zastosowaniach. Opisane powyżej schematy eksperymentalne pochodzą głównie z badań na zwierzętach i nie powinny być przekształcane w protokoły samodzielnego stosowania. Osoby rozważające kwestie związane z eksperymentalnymi peptydami powinny skonsultować się z wykwalifikowanym pracownikiem ochrony zdrowia i zweryfikować aktualne informacje regulacyjne we właściwych instytucjach.
References
[1] Anisimov, V. N., Khavinson, V. K., Popovich, I. G., Zabezhinski, M. A., Alimova, I. N., Rosenfeld, S. V., Zavarzina, N. Y., Semenchenko, A. V., & Yashin, A. I. (2003). Effect of Epitalon on biomarkers of aging, life span and spontaneous tumor incidence in female Swiss-derived SHR mice. Biogerontology, 4(4), 193–202. https://doi.org/10.1023/A:1025114230714
[2] Anisimov, V. N., Khavinson, V. K., Mikhalski, A. I., & Yashin, A. I. (2001). Effect of synthetic thymic and pineal peptides on biomarkers of ageing, survival and spontaneous tumour incidence in female CBA mice. Mechanisms of Ageing and Development, 122(1), 41–68. https://doi.org/10.1016/S0047-6374(00)00184-6
[3] Kossoy, G., Anisimov, V. N., Ben-Hur, H., Kossoy, N., & Zusman, I. (2006). Effect of the synthetic pineal peptide Epitalon on spontaneous carcinogenesis in female C3H/He mice. In Vivo, 20(2), 253–257. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16634527/
[4] Khavinson, V. K., Timofeeva, N. M., Malinin, V. V., Gordova, L. A., & Nikitina, A. A. (2002). Effect of Vilon and Epithalon on activity of enzymes in epithelial and subepithelial layers in small intestine of old rats. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 134(6), 562–564. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12660839/
[5] Sibarov, D. A., Vol’nova, A. B., Frolov, D. S., & Nozdrachev, A. D. (2007). Effects of intranasal administration of Epitalon on neuron activity in the rat neocortex. Neuroscience and Behavioral Physiology, 37(9), 889–893. https://doi.org/10.1007/s11055-007-0095-3
[6] Khavinson, V., Goncharova, N., & Lapin, B. (2001). Synthetic tetrapeptide Epitalon restores disturbed neuroendocrine regulation in senescent monkeys. Neuro Endocrinology Letters, 22(4), 251–254. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11524632/
[7] Goncharova, N. D., Vengerin, A. A., Khavinson, V. K., & Lapin, B. A. (2005). Pineal peptides restore the age-related disturbances in hormonal functions of the pineal gland and the pancreas. Experimental Gerontology, 40(1–2), 51–57. https://doi.org/10.1016/j.exger.2004.10.004
[8] Korkushko, O. V., Lapin, B. A., Goncharova, N. D., Khavinson, V. K., Shatilo, V. B., Vengerin, A. A., Antoniuk-Shcheglova, I. A., & Magdich, L. V. (2007). Normalizing effect of the pineal gland peptides on the daily melatonin rhythm in old monkeys and elderly people. Advances in Gerontology, 20(1), 74–85. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17969590/
[9] Anisimov, V. N., Khavinson, V. K., Alimova, I. N., Provinciali, M., Mancini, R., & Franceschi, C. (2002). Epithalon inhibits tumor growth and expression of HER-2/neu oncogene in breast tumors in transgenic mice characterized by accelerated aging. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 133(2), 167–170. https://doi.org/10.1023/A:1015555023692