Mitä on Semaxin farmakokinetiikka?: puoliintumisaika, biologinen hyötyosuus ja vaikutusaika

Farmakokinetiikka on tieteenala, joka tutkii, mitä aineelle tapahtuu elimistössä – miten se imeytyy, minne se päätyy, miten se hajoaa ja kuinka kauan se pysyy aktiivisena. Semaxin tapauksessa tilanne on monimutkaisempi kuin pelkkä vaikutusajan mittaaminen veressä.

Semax on synteettinen heptapeptidi – keinotekoisesti valmistettu seitsemän aminohapon ketju. Sen rakenne on tarkoituksellisesti suunniteltu siten, että se kestää hajoamista paremmin kuin se luonnollinen hormonifragmentti, johon se perustuu. Molekyylin päähän on lisätty lyhyt kolmen aminohapon pätkä, jota kutsutaan Pro-Gly-Pro:ksi, juuri peptidin biologisen aktiivisuuden keston pidentämiseksi elimistössä.

Jotta Semaxin käyttäytyminen ajan kuluessa voitaisiin täysin ymmärtää, tutkijat analysoivat sen imeytymistä, aivoihin pääsyn nopeutta, hajoamismekanismeja, aineenvaihduntatuotteiden aktiivisuutta sekä vaikutusten todellista kestoa. Jokainen näistä tekijöistä muodostaa farmakokineettisen profiilin, joka on huomattavasti monimutkaisempi kuin mitä yksi puoliintumisaikaa kuvaava luku antaisi ymmärtää.

On syytä huomata, että lähes kaikki saatavilla olevat farmakokineettiset tiedot ovat peräisin eläinkokeista – pääasiassa rotilla – joissa on käytetty radioaktiivisesti merkittyjä peptidiversioita sen kulun seuraamiseksi elimistössä. Suorat farmakokineettiset mittaukset ihmisillä ovat hyvin rajallisia.

Miten Semax imeytyy ja kuinka nopeasti se pääsee aivoihin?

Semax saavuttaa aivot poikkeuksellisen nopeasti nenän kautta annosteltuna. Rotilla tehdyissä tutkimuksissa, joissa käytettiin radioaktiivisesti merkittyä peptidiversiota, 50 mikrogramman annos kehonpainokiloa kohti nenän kautta annettuna mahdollisti Semaxin havaitsemisen aivokudoksessa jo 2 minuutin kuluttua [1]. Noin 80% aivoihin näin varhaisessa vaiheessa saapuneesta aineesta oli ehjää, alkuperäistä Semaxia, ei sen aineenvaihduntatuotteita [1]. Tämä vahvistaa, että itse emomolekyyli – eikä pelkästään sen hajoamistuotteet – pääsee aivoihin nopeasti ja merkittävissä määrissä.

Niin nopea pääsy aivoihin on mahdollista, koska nenä tarjoaa suoran reitin aivoihin hajureitin kautta – hajuaistista vastaavan hermoverkoston kautta. Tämä reitti ohittaa kokonaan verenkierron ja veri-aivoesteen, minkä ansiosta nenän kautta annettavat peptidit pääsevät aivokudokseen huomattavasti tehokkaammin kuin muilla antoreiteillä.

Semaxin biologisten vaikutusten nopeus vastaa tätä salamannopeaa tunkeutumista aivoihin. Muutokset neurotrofiinigeenien – aivosolujen kasvua ja selviytymistä tukevien proteiinien tuotannosta vastaavien geenien – aktiivisuudessa olivat havaittavissa rotan hippokampuksessa ja otsalohkossa jo 20 minuuttia kertaluonteisen nenän kautta annetun annoksen jälkeen [2]. Terveillä vapaaehtoisilla aivojen kuvantamistutkimukset lepotilan toiminnallisella magneettikuvauksella (fMRI) – tekniikalla, joka mittaa aivojen toimintaa verenkierron muutosten avulla – osoittivat mitattavia muutoksia aivoverkostojen toiminnassa jo 5 ja 20 minuutin kuluttua Semaxin nenän kautta annostelusta [3]. Tämä on suora todiste ihmisillä tehdyistä tutkimuksista, että Semax vaikuttaa keskushermostoon muutaman minuutin kuluessa nenän kautta annostelusta.

Mikä on Semaxin puoliintumisaika?

Semaxin puoliintumisaika muuttumattomana molekyylinä biologisissa nesteissä on suhteellisen lyhyt – kuten useimpien peptidien kohdalla – mutta sen biologisen aktiivisuuden kokonaiskesto ylittää tämän ajan huomattavasti. Puoliintumisaika on aika, jonka kuluttua puolet aineesta hajoaa tai poistuu elimistöstä.

Laboratoriotutkimuksissa, joissa analysoitiin Semaxin hajoamista rotan aivojen solukalvomateriaalin läsnä ollessa, ehjän molekyylin puoliintumisaika oli yli yksi tunti [4]. Tämä on selvästi pidempi kuin monien aivojen luonnollisten signaalipeptidien puoliintumisaika, jotka voivat hajoaa sekunneissa tai minuuteissa.

Tutkijat ovat tunnistaneet rottien verestä ja seerumista entsyymit, jotka vastaavat Semaxin hajoamisesta. Tärkeimpiä näistä ovat aminopeptidaasit – jotka ovat erityisen herkkiä bestatiiniksi kutsutulle yhdisteelle – sekä angiotensiinikonvertaasi (ACE) -entsyymi. Nämä entsyymit vastaavat suurimmasta osasta Semaxin hajoamisaktiivisuutta veressä [5]. Prosessi alkaa molekyylin N-terminaalista – aminohappoketjun alkupäästä – jossa kaksi ensimmäistä aminohappoa, metioniini ja glutamiini, irtoavat ensimmäisinä muodostaen välituotteita, jotka ovat itsekin biologisesti aktiivisia [5].

On syytä korostaa selvästi yhtä keskeistä seikkaa: missään julkaistussa ihmisillä tehdyssä farmakokineettisessä tutkimuksessa ei ole määritetty Semaxin tarkkaa puoliintumisaikaa ihmisen plasmassa. Ei-asiantuntevissa internetlähteissä esitetyt arvot eivät perustu vertaisarvioituihin tieteellisiin tutkimuksiin, ja niihin on suhtauduttava varauksella. Julkaistu tieteellinen kirjallisuus vahvistaa sen, että ehjä molekyyli hajoaa suhteellisen nopeasti biologisissa nesteissä, sen tärkeimmät hajoamistuotteet säilyttävät oman biologisen aktiivisuutensa, ja Semaxin farmakologisen vaikutuksen kokonaiskesto on huomattavasti pidempi kuin mitä emomolekyylin hajoaminen yksinään antaisi olettaa.

Miten Semax metaboloituu?

Semax metaboloituu – hajoaa – pääasiassa vaiheittaisessa prosessissa, jossa entsyymit irrottavat aminohappoja yksi kerrallaan ketjun N-terminaalista päästä. Merkittävää on, että tämä hajoaminen ei tarkoita pelkästään Semaxin inaktivoitumista. Sen sijaan syntyy sarja pienempiä fragmentteja, joista jokainen säilyttää oman biologisen aktiivisuutensa.

Pääasiallinen aineenvaihduntareitti etenee seuraavasti: dipeptidyyliaminopeptidaaseiksi ja aminopeptidaaseiksi kutsutut entsyymit irrottavat ensin kaksi N-terminaalista aminohappoa – metioniinin ja glutamiinin – Semax-molekyylistä. Tällä tavoin muodostuu viiden aminohapon pätkä HFPGP (His-Phe-Pro-Gly-Pro), joka on hajoamisen tärkein välituote. HFPGP hajoaa tämän jälkeen edelleen kolmen aminohapon PGP-fragmentiksi (Pro-Gly-Pro), joka on tärkein lopullinen aineenvaihduntatuote [4], [6].

Radioaktiivisesti merkittyä Semaxia käyttämällä tehdyt tutkimukset vahvistivat, että HFPGP ja PGP ovat tärkeimmät hajoamistuotteet. Metaboliittien muodostumismalli vaihteli hieman glia-solujen – aivojen tukisolujen – ja neuronien välillä, mikä viittaa siihen, että eri solutyypit prosessoivat Semaxia hieman eri tavalla [6].

Vertailututkimukset, joissa selvitettiin aineen jakautumista rotan nenäkudoksessa, aivojen mikrosomifraktiossa ja veressä, osoittivat, että PGP:n C-terminaalinen fragmentti – molekyylin häntäosa – on huomattavasti vastustuskykyisempi entsymaattiselle hajoamiselle kuin ACTH:sta peräisin oleva N-terminaalinen fragmentti. Tämä tarkoittaa, että entsymaattinen hajoaminen tapahtuu pääasiassa molekyylin etuosasta, kun taas sen takaosa pysyy suhteellisen stabiilina [7].

Tutkijat tarkastelivat myös Semaxin muunnettuja versioita selvittääkseen, mikä tekee siitä alttiin aineenvaihdunnalliselle hajoamiselle. N-terminaalisen metioniinin korvaaminen alaniinilla, glysiinillä tai treoniinilla tuotti Semax-analogeja, jotka olivat entsyymien vaikutuksille alkuperäistä alttiimpia [8]. Lisäksi Semax-versio, jossa N-terminaalissa oli kemiallinen modifikaatio, jota kutsutaan asetyloinniksi – tunnetaan nimellä Ac-Semax – osoitti muuttunutta hajoamismallia ja muita biologisia ominaisuuksia, vaikka se ei parantanut solujen suojaa kuparin aiheuttamaa toksisuutta vastaan [9].

Synaktonin käsite on välttämätön, jotta voidaan ymmärtää, miksi Semaxin aineenvaihdunnalla on farmakologista merkitystä. Aineenvaihduntaketju Semaxista HFPGP:n kautta PGP:hen ei tarkoita pelkkää inaktivoitumista – se tuottaa sarjan biologisesti aktiivisia molekyylejä. Kukin näistä molekyyleistä sitoutuu päällekkäisiin, mutta erillisiin sitoutumiskohteisiin hermosolujen pinnalla [10]. Kaikista tutkituista hajoamistuotteista HFPGP – ensimmäinen ja tärkein hajoamistuote – osoitti voimakkainta kykyä kilpailla samoista sitoutumiskohdista kuin alkuperäinen Semax-molekyyli [10]. Tämä tarkoittaa, että kun Semax poistuu elimistöstä, sen ensimmäinen hajoamistuote ottaa tehokkaasti sen vaikutuksen haltuunsa, pidentäen näin farmakologisen vaikutuksen kokonaiskestoa.

Mikä on Semaxin biologinen hyötyosuus eri antotavoilla?

Biologinen hyötyosuus määrittää, kuinka suuri osa annostellusta aineesta todella päätyy kohdealueelle aktiivisessa muodossa. Semaxin tapauksessa antotapa on ratkaisevan tärkeä – ei ainoastaan aivoihin päätyvän määrän kannalta, vaan myös sen suhteen, millaisia vaikutuksia aine aiheuttaa.

Nenäreitti – annostelu nenän kautta – on sekä kliinisesti vakiintunut että farmakokineettisesti tehokkain tapa toimittaa Semaxia aivoihin. Kuten edellä on kuvattu, tämä reitti kuljettaa Semaxin suoraan aivoihin hajuaistin kautta ohittaen verenkierron kokonaan.

Kontrolloiduissa tutkimuksissa tehdyt suorat farmakokineettiset vertailut nenän kautta annettavan ja ihonalaisen annostelun välillä ovat kirjallisuudessa vähäisiä. Käyttäytymis- ja farmakodynaamiset tutkimukset – joissa mitataan todellisia vaikutuksia eikä pitoisuuksia veressä – tarjoavat kuitenkin välillistä tietoa. Tutkimukset, joissa verrattiin intraperitoneaalista injektiota nenän kautta annettavaan annosteluun, osoittivat, että nenän kautta annostelu oli tehokkaampaa oppimisen parantamisessa muistitehtävissä, kun taas intraperitoneaalinen injektio oli tarpeen sellaisten kipua lievittävien vaikutusten aikaansaamiseksi, joita nenän kautta annostelu ei tuottanut [11].

Tämä antotavasta riippuva vaikutusten ero viittaa siihen, että molemmat menetelmät tuottavat erilaisia jakautumiskuvioita elimistössä. Nenän kautta annostelu edistää korkeita pitoisuuksia aivoissa, kun taas injektio tuottaa laajemman systeemisen jakautumisen, joka ulottuu myös ääreis kudoksiin ja aivojen ulkopuolisiin reseptoreihin [11]. Semaxin nenän kautta annostelun paremmat kognitiiviset vaikutukset verrattuna injektioon ovat yhdenmukaisia aivoihin tapahtuvan nopean tunkeutumisen kanssa, mikä vahvistetaan havaittavilla pitoisuuksilla aivoissa jo 2 minuutin kuluttua nenän kautta annostelusta [1].

Suun kautta annettuna – Semaxin nieltynä – sen imeytymistä ruoansulatuskanavasta ei ole tutkittu missään julkaistussa farmakokineettisessä tutkimuksessa. Koska peptidit hajoavat yleensä nopeasti ruoansulatusentsyymien vaikutuksesta mahassa ja suolistossa ennen kuin ne ehtivät imeytyä, Semaxin ehjän molekyylin biologinen hyötyosu suun kautta annosteltuna on todennäköisesti vähäinen ilman erityisiä suojaavia annostelujärjestelmiä. PGP:n C-terminaalinen fragmentti saattaa osoittaa jonkin verran kykyä selviytyä ruoansulatuksesta tämän peptidiluokan tunnetun stabiilisuuden vuoksi, mutta tätä ei ole suoraan vahvistettu julkaistuissa tutkimuksissa [12].

Kuinka kauan Semaxin vaikutukset kestävät?

Semaxin vaikutusten kesto vaihtelee huomattavasti mitattavan vaikutuksen mukaan. Se vaihtelee muutamasta tunnista, kun kyseessä ovat välittömät muutokset välittäjäaineiden aktiivisuudessa, muutamaan päivään tai jopa viikkoihin, kun kyseessä ovat neurotrofiinisignaloinnin välittämät vaikutukset ja geenien ilmentymisen muutokset.

Neurotransmitterivaikutusten osalta solunulkoiset 5-HIAA-pitoisuudet – serotoniinin hajoamistuote, joka heijastaa serotoniinijärjestelmän aktiivisuutta – pysyivät kohonneina noin 180% lähtötasosta 1–4 tuntia kertaluonteisen Semax-injektion jälkeen rotilla [13]. Tämä viittaa pysyvään neurokemialliseen vaikutukseen, joka jatkuu useita tunteja kertaluonteisen annoksen jälkeen.

Neurotrofiinivaikutusten osalta – jotka liittyvät BDNF:ään ja NGF:ään, aivosolujen kasvua ja selviytymistä tukeviin proteiineihin – tilanne on dynaamisempi. BDNF-geenin aktiivisuudessa havaittiin muutoksia jo 20 minuuttia nenän kautta annetun annoksen jälkeen rotilla; muutokset saavuttivat merkitsevät tasot 90 minuutin kuluttua ja palasivat lähelle lähtötasoa noin 8 tuntia annostelun jälkeen hippokampuksessa. Otsalohko osoitti hieman erilaista ajallista mallia [2].

BDNF:n vaikutukset eivät kuitenkaan pääty, kun BDNF-pitoisuudet palautuvat lähtötasolle. BDNF vaikuttaa aktivoimalla reseptorinsa – TrkB:n – joka puolestaan käynnistää solun sisällä signaalinvälitysketjun. Nämä signaalinvälitysprosessit kestävät huomattavasti kauemmin kuin itse BDNF-pitoisuuksien nousu.

Iskeemisen aivohalvauksen saaneilla potilailla, joita hoidettiin Semaxilla, BDNF-pitoisuudet plasmassa pysyivät kohonneina koko tutkimuksen seuranta-ajan, mikä viittaa siihen, että toistuva annostelu aiheuttaa pysyvän neurotrofiinipitoisuuden nousun eikä sarjaa lyhytaikaisia huippuarvoja [14]. Aikaisemmassa venäläisessä kliinisessä kirjallisuudessa on myös raportoitu, että Semaxin vaikutukset kognitiivisiin toimintoihin ja alhaisen happipitoisuuden sietokykyyn ihmisillä säilyivät 20–24 tuntia yhden 0,0,015–0,050 mg/kg [15]. Tämä vaikutusaika ylittää huomattavasti sen, mitä voitaisiin odottaa veressä olevan muuttumattoman molekyylin farmakokinetiikan perusteella, ja se heijastaa neurotrofiinisia ja geneettisiä mekanismeja, jotka jatkuvat peptidin suorien reseptorivuorovaikutusten jälkeen.

Kertyykö Semax elimistöön säännöllisen käytön yhteydessä?

Missään julkaistussa tutkimuksessa ei ole suoraan selvitetty, kertyykö Semax kudoksiin tai altistuvatko sen reseptorit desensitisaatiolle – eli muuttuvatko ne ajan myötä vähemmän reaktiivisiksi – säännöllisen käytön yhteydessä. Saatavilla olevan näytön perusteella Semax ei kuitenkaan näytä aiheuttavan sellaista progressiivista kertymistä, jota havaitaan monien hitaasti eliminoituvien pienimolekyylisten lääkkeiden kohdalla.

Peptidinä Semax hajoaa nopeasti entsymaattisesti biologisissa nesteissä. Tämän hajoamisprofiilin vuoksi on farmakokineettisesti epätodennäköistä, että se kertyisi merkittävästi kudoksiin säännöllisen käytön yhteydessä. Rotilla 10–14 päivän ajan tehdyissä pitkäaikaisissa tutkimuksissa havaittiin pysyviä ja eteneviä käyttäytymisvaikutuksia – mukaan lukien ahdistuksen väheneminen ja masennuslääkkeiden kaltaiset vaikutukset – ilman merkkejä toleranssista tai vasteen heikkenemisestä ajan myötä. Kirjoittajat katsoivat näiden jatkuvien vaikutusten johtuvan serotoniinijärjestelmän progressiivisesta aktivoitumisesta ja BDNF:n pysyvästä noususta [16].

Aivohalvausta koskevissa kliinisissä tutkimuksissa Semaxin toistuva antaminen kahden kymmenen päivän hoitokuurin aikana piti BDNF:n pitoisuudet plasmassa koholla koko seuranta-ajan, mikä on sopusoinnussa pysyvän farmakologisen vaikutuksen kanssa, eikä reseptorien desensitisaatioon tai trofisen uupumukseen [14].

Tutkimuksessa tarkasteltiin myös fosfolipidinanopartikkeleihin perustuvaa Semax-formulaatiota – annostelujärjestelmää, jossa peptidi ympäröidään pienillä rasvamolekyyleillä sen suojaamiseksi hajoamiselta – strategiana entsymaattisen hajoamisen kestävyyden pidentämiseksi entisestään [17]. Tämä lähestymistapa voisi teoriassa muuttaa farmakokineettistä profiilia hidastamalla hajoamista ja pitämällä aktiivista Semaxia kudoksissa pidempään. Tästä formulaatiosta ei kuitenkaan ole toistaiseksi julkaistu mitään kliinisiä farmakokineettisiä tietoja.

Yleisesti ottaen, vaikka kumulatiivisuutta koskevien virallisten tutkimusten puuttuminen on tunnustettu rajoitus, saatavilla olevat toiminnalliset tiedot eivät viittaa progressiiviseen kumulatiivisuuteen tai toleranssin kehittymiseen lyhytaikaisessa säännöllisessä annostelussa.

Semaxin farmakokineettisten tutkimusten keskeiset rajoitukset

Semaxin farmakokineettisiä tietoja tulkittaessa on otettava huomioon muutamia merkittäviä rajoituksia.

Ensinnäkin käytännössä kaikki suorat farmakokineettiset mittaukset – mukaan lukien aivoihin tunkeutumisen nopeus, arvioidut puoliintumisajat ja metaboliittien tunnistaminen – perustuvat rotilla tehtyihin tutkimuksiin, joissa on käytetty radioaktiivisesti merkittyjä peptidejä. Näiden tulosten suora siirtäminen ihmisten farmakokinetiikkaan on erittäin epävarmaa, koska ihmiset ja rotat saattavat aineenvaihdunnassa käsitellä yhdisteitä eri tavoin.

Toiseksi missään julkaistussa ihmisillä tehdyssä farmakokineettisessä tutkimuksessa ei ole mitattu Semaxin pitoisuuksia veressä kontrolloiduissa olosuhteissa. Tämä tarkoittaa, että tarkat arvot puoliintumisajalle ihmisillä, biologisen hyötyosuuden prosenttiosuudelle ja jakautumistilavuudelle – joka mittaa, kuinka laajalle aine leviää kehon kudoksiin – ovat edelleen tuntemattomia.

Kolmanneksi, koska Semaxin hajoamistuotteet – HFPGP ja PGP – säilyttävät oman biologisen aktiivisuutensa, perinteiset farmakokineettiset arvioinnit, jotka perustuvat yksinomaan emomolekyylin pitoisuuksiin, aliarvioivat merkittävästi todellista biologista vaikutusaikaa. Pelkästään Semaxin pitoisuuden mittaaminen verestä antaa epätäydellisen kuvan farmakologisten vaikutusten todellisesta kestosta.

Neljänneksi, antoreitistä riippuvat erot Semaxin vaikutuksissa viittaavat siihen, että sen farmakokineettinen käyttäytyminen eroaa merkittävästi nenän kautta, intratekaalisesti ja ihonalaisesti annettuna. Näitä eroja ei ole vielä täysin kuvattu julkaistussa kirjallisuudessa.

Tulevat tutkimukset, joissa hyödynnetään nykyaikaisia analyysitekniikoita – kuten LC-MS/MS, erittäin herkkä menetelmä tiettyjen molekyylien mittaamiseen biologisissa nesteissä – ihmisillä eri antoreittien avulla, laajentaisivat merkittävästi tieteellistä ymmärrystä Semaxin farmakokinetiikasta.

Vastuuvapauslauseke

Tämän artikkelin tarkoitus on yksinomaan koulutuksellinen sekä tiedottava ja tieteellinen, eikä sitä tule tulkita lääketieteelliseksi neuvoksi, diagnoosiksi, hoitosuositukseksi tai väitteeksi Semaxin tehokkuudesta minkään sairauden hoidossa. Semax on edelleen tutkimuskäyttöön tarkoitettu yhdiste useimmissa maissa, mukaan lukien Yhdysvalloissa ja useimmissa Euroopan maissa, eikä sitä ole hyväksytty Yhdysvaltain elintarvike- ja lääkevirasto (FDA) eikä Euroopan lääkevirasto (EMA) ole hyväksynyt sitä minkään sairauden hoitoon. Se on hyväksytty ja sitä käytetään kliinisesti Venäjällä ja joissakin Itä-Euroopan maissa. Suurin osa tässä artikkelissa esitetyistä todisteista perustuu prekliinisiin eläinkokeisiin sekä rajoitettuun määrään ihmisillä tehtyjä kliinisiä tutkimuksia. Lisää hyvin suunniteltuja kliinisiä tutkimuksia tarvitaan, jotta Semaxin turvallisuus, tehokkuus, vaikutusmekanismit ja pitkäaikaisvaikutukset ihmisillä voidaan selvittää tarkemmin. Jokaisen, joka harkitsee minkä tahansa tutkimusvaiheessa olevan peptidin käyttöä, tulisi neuvotella pätevän terveydenhuollon ammattilaisen kanssa.

Viitteet

1. Shevchenko, K. V., Nagaev, I. Yu., Alfeeva, L. Yu., Andreeva, L. A., Kamenskiĭ, A. A., Levitskaia, N. G., Shevchenko, V. P., Grivennikov, I. A., & Miasoedov, N. F. (2006). Semaxin tunkeutumisen kinetiikka rotan aivoihin ja vereen intranasaalisen annostelun jälkeen. Bioorganicheskaya Khimiya, 32(1), 64–70. https://doi.org/10.1134/s1068162006010055
2. Shadrina, M., Kolomin, T., Agapova, T., Agniullin, Y., Shram, S., Slominsky, P., Lymborska, S., & Myasoedov, N. (2010). NGF- ja BDNF-geenien ilmentymisen ajallisen dynamiikan vertailu rotan hippokampuksessa, etuaivokuoressa ja verkkokalvossa Semaxin vaikutuksen alaisena. Journal of Molecular Neuroscience, 41(1), 30–35. https://doi.org/10.1007/s12031-009-9270-z
3. Lebedeva, I. S., Panikratova, Ya. R., Sokolov, O. Yu., Kupriyanov, D. A., Rumshiskaya, A. D., Kost, N. V., & Myasoedov, N. F. (2018). Semaxin vaikutukset aivojen oletusmoodiverkostoon. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 165(5), 653–656. https://doi.org/10.1007/s10517-018-4234-3
4. Dolotov, O. V., Zolotarev, Yu. A., Dorokhova, E. M., Andreeva, L. A., Alfeeva, L. Yu., Grivennikov, I. A., & Miasoedov, N. F. (2004). Semaxin, ACTH 4-10-heptapeptidin, sitoutuminen rotan etuaivojen basaalisten ytimien plasmamembraaneihin ja sen biologinen hajoaminen. Bioorganicheskaya Khimiya, 30(3), 241–246. https://doi.org/10.1023/b:rubi.0000030127.46845.f0
5. Potaman, V. N., Alfeeva, L. Y., Kamensky, A. A., Levitzkaya, N. G., & Nezavibatko, V. N. (1991). ACTH(4-10):n ja sen synteettisen analogin semaxin N-terminaalinen hajoaminen rotan veressä olevien entsyymien vaikutuksesta. Biochemical and Biophysical Research Communications, 176(2), 741–746. https://doi.org/10.1016/s0006-291x(05)80247-5
6. Zolotarev, Yu. A., Dadaian, A. K., Dolotov, O. V., Kozik, V. S., Kost, N. V., Sokolov, O. Yu., Dorokhova, E. M., Meshavkin, V. K., Inozemtseva, L. S., Gabaeva, M. V., Andreeva, L. A., Alfeeva, L. Yu., Pavlov, T. S., Badmaeva, K. E., Badmaeva, S. E., Bakaeva, Z. V., Kopylova, G. N., Samonina, G. E., Vas’kovskiĭ, B. V., Grivennikov, I. A., Zozulia, A. A., & Miasoedov, N. F. (2006). Tasaisesti tritiumilla merkityt peptidit ja niiden biologinen hajoaminen in vivo ja in vitro. Bioorganicheskaya Khimiya, 32(2), 183–191. PMID: 16637290 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16637290/
7. Shevchenko, K. V., V’iunova, T. V., Nagaev, I. Yu., Andreeva, L. A., & Miasoedov, N. F. (2013). Yksinkertaisten glyprolinien proteolyysi leusiiniaminopeptidaasin sekä nenän limasta, aivokalvoista ja rotan verestä peräisin olevien entsyymien avulla. Bioorganicheskaya Khimiya, 39(3), 320–325. https://doi.org/10.1134/s1068162013030151
8. Shevchenko, K. V., V’iunova, T. V., Nagaev, I. Yu., Andreeva, L. A., Alfeeva, L. Yu., & Miasoedov, N. F. (2011). Aminopeptidaasien aiheuttama semax-analogien proteolyysi, joissa on erilaisia N-terminaalisia aminohappoja. Bioorganicheskaya Khimiya, 37(4), 475–482. https://doi.org/10.1134/s1068162011040133
9. Magrì, A., Tabbì, G., Giuffrida, A., Pappalardo, G., Satriano, C., Naletova, I., Nicoletti, V. G., & Attanasio, F. (2016). ACTH(4-10):n synteettisen analogin Semaxin N-terminaalisen asetyloinnin vaikutus kupari(II):n ja sinkki(II):n koordinaatioon sekä biologisiin ominaisuuksiin. Journal of Inorganic Biochemistry, 164, 59–69. https://doi.org/10.1016/j.jinorgbio.2016.08.013
10. Vyunova, T. V., Andreeva, L. A., Shevchenko, K. V. ja Myasoedov, N. F. (2017). Synaktoni ja synteettisten ja luonnollisten kortikotropiinien yksilöllinen aktiivisuus. Journal of Molecular Recognition, 30(5). https://doi.org/10.1002/jmr.2597
11. Manchenko, D. M., Glazova, N. Yu., Levitskaia, N. G., Andreeva, L. A., Kamenskiĭ, A. A., & Miasoedov, N. F. (2010). Semaxin nootrooppiset ja kipua lievittävät vaikutukset eri antoreittien jälkeen. I.M. Sechenovin niminen Venäjän fysiologinen lehti, 96(10), 1014–1023. PMID: 21268834
12. Ashmarin, I. P., Samonina, G. E., Lyapina, L. A., Kamenskii, A. A., Levitskaya, N. G., Grivennikov, I. A., Dolotov, O. V., Andreeva, L. A., & Myasoedov, N. F. (2005). Luonnolliset ja hybridi- („kimeeriset”) stabiilit säätelevät glyproliinipeptidit. Patofysiologia, 11(4), 179–185. https://doi.org/10.1016/j.pathophys.2004.10.001
13. Eremin, K. O., Kudrin, V. S., Saransaari, P., Oja, S. S., Grivennikov, I. A., Myasoedov, N. F., & Rayevsky, K. S. (2005). Semax, ACTH(4-10)-analogi, jolla on nootrooppisia ominaisuuksia, aktivoi dopamiinergisiä ja serotoniinergisiä aivojärjestelmiä jyrsijöillä. Neurochemical Research, 30(12), 1493–1500. https://doi.org/10.1007/s11064-005-8826-8
14. Gusev, E. I., Martynov, M. Yu., Kostenko, E. V., Petrova, L. V., & Bobyreva, S. N. (2018). Semaxin teho iskeemisen aivohalvauksen eri vaiheissa olevien potilaiden hoidossa. S.S. Korsakovin nimikkokirja ”Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii”, 118(3), 61–68. https://doi.org/10.17116/jnevro20181183261-68
15. Ashmarin, I. P., Nezavibat’ko, V. N., Miasoedov, N. F., Kamenskiĭ, A. A., Grivennikov, I. A., Ponomareva-Stepnaia, M. A., Andreeva, L. A., Kaplan, A. Ia., Koshelev, V. B., & Riasina, T. V. (1997). Nootrooppinen adrenokortikotropiinin analogi 4-10-semax (15 vuoden kokemus sen kehittämisestä ja tutkimuksesta). I. P. Pavlovin niminen korkeamman hermoston toiminnan lehti, 47(2), 420–430. PMID: 9173745
16. Vilenskiĭ, D. A., Levitskaia, N. G., Andreeva, L. A., Alfeeva, L. Yu., Kamenskiĭ, A. A., & Miasoedov, N. F. (2007). Kroonisen Semax-annostelun vaikutukset valkoisten rottien tutkimusaktiivisuuteen ja tunne-elämän reaktioihin. I.M. Sechenovin niminen Venäjän fysiologinen lehti, 93(6), 661–669. PMID: 17850024
17. Shevchenko, K. V., Khrapko, A. P., Schwets, V. I., & Myasoyedov, N. F. (2009). Fosfolipidinanopartikkelien käyttö Semax-resistenssin lisäämiseksi erilaisissa proteolyyttisissä biologisissa väliaineissa. Biological Sciences -lehti, 429, 505–507. https://doi.org/10.1134/s0012496609060076