Kuidas NAD+ organismis toimib? Mehhanismi selgitus

NAD+ keemilise määratluse mõistmine on alles algus. Praktilisem küsimus on: mida NAD+ tegelikult elusrakkudes teeb? See aitab transportida elektrone, toetab ainevahetuses ja rakkude taastumises osalevaid ensüüme ning taastub ja sünteesitakse pidevalt uuesti, kui rakud seda kasutavad.

Käesolevas artiklis selgitame samm-sammult NAD+ toimimismehhanismi, sealhulgas selle rolli koensüümina, NAD+ ja NADH vahelist seost, osalust ATP tootmises, seost sirtuinidega, NAD+ biosünteesi ning seda, mis võib juhtuda, kui NAD+ kättesaadavus väheneb.

1. NAD+ kui koensüüm – mida see tegelikult tähendab?

Mõisteid „ensüüm”, „kofaktor” ja „koensüüm” kasutatakse mõnikord sünonüümidena, kuid need tähistavad erinevaid asju. Nende erinevuste mõistmine aitab NAD+ rolli palju paremini selgitada.

Ensüümid on tavaliselt valgud, kuigi ka mõned RNA-molekulid võivad täita ensüümide funktsiooni. Nende ülesanne on katalüüsida, st kiirendada teatud keemilisi reaktsioone. NAD+ ei ole ensüüm, kuna see ei katalüüsi selliseid reaktsioone iseseisvalt.

Kofaktorid on mittevalgulised ained, mida teatud ensüümid vajavad oma nõuetekohaseks toimimiseks. Need võivad olla metallioonid, nagu tsink või magneesium, aga ka orgaanilised molekulid.

Koensüümid on kofaktorite eriliik. Need on orgaanilised, süsinikku sisaldavad abimolekulid, mis tekivad sageli vitamiinidest ja osalevad otseselt ensüümireaktsioonides. Nad võivad kanda elektrone, keemilisi rühmi või muid komponente ühest reaktsioonist teise. [1]

NAD+ kuulub just sellesse kolmandasse kategooriasse.

See on koensüüm, täpsemalt üks organismis elektrone edastavatest kõige olulisematest koensüümidest. NAD+ ei suuda iseseisvalt ainevahetusreaktsioone läbi viia, kuid sadadest ensüümidest sõltuvad just sellest. Kõige olulisemate hulka kuuluvad ensüümid, mida nimetatakse dehüdrogenaasideks. [1,2]

Kui NAD+-sõltuv dehüdrogenaasil ei ole piisavalt kättesaadavat NAD+'d, võib selle võime teostada antud reaktsiooni olla piiratud. Seetõttu sõltub rakkude ainevahetus mitte ainult asjakohaste ensüümide olemasolust, vaid ka nende toimimiseks vajalike koensüümide piisava kättesaadavuse tagamisest.

2. Kuidas NAD+ kannab elektrone redoksreaktsioonides?

NAD+ tuntumaim funktsioon on elektronide transport oksüdatsiooni- ja redutseerimisreaktsioonide käigus, mida nimetatakse ka redoksreaktsioonideks.

Kui toitaineid, nagu glükoos ja rasvhapped, lagundatakse, peavad dehüdrogenaasid sageli ühelt molekulilt elektrone vastu võtma ja need mujale üle kandma.

NAD+ võimaldab sellist ülekannet.

Reaktsiooni käigus võtab NAD+ vastu elektrone ja vesiniku ekvivalendi oma nikotinaamidringi kindlas kohas. Selle redutseerimisreaktsiooni tulemusena muundub NAD+ NADH-ks. [1,2]

Seda seost võib lihtsustada järgmiselt:

NAD+ → võtab vastu elektrone → NADH

NADH võib seejärel kanda kõrge energiaga elektrone edasi järgmisesse reaktsiooni. Energiaainevahetuses on üks nende kasutamise olulisemaid kohti mitokondriaalne elektronide transpordiahel.

Pärast elektronide edastamist oksüdeerub NADH uuesti NAD+-ks. Taastunud NAD+ võib seejärel osaleda järgmises ainevahetusreaktsioonis.

Nii tekib pidev tsükkel:

NAD+ → NADH → NAD+

Selle asemel, et neid kasutataks vaid üks kord, vahelduvad molekulid korduvalt oksüdeeritud ja redutseeritud vormi vahel.

Teadlased on välja töötanud spetsiaalsed eksperimentaalsed vahendid, mis võimaldavad neid redoksiprotsesse jälgida ja mõjutada teatud rakulistes piirkondades, sealhulgas tsütoplasmas ja mitokondrites. Need uuringud on näidanud, et rakulised probleemid võivad tuleneda mitte ainult NAD+ absoluutsest kogusest, vaid ka NAD+ ja NADH vahelise tasakaalu häiretest. [3]

Liiga vähendatud rakukeskkond võib näiteks kaasa aidata seisundile, mida nimetatakse vähendusstressiks.

See on üks põhjustest, miks NAD+’d kirjeldatakse sageli kui molekuli, mis asub ainevahetuse ristteel. Selle redoksitsükkel ühendab toitainete ainevahetust mitokondriaalse energia tootmisega, samas kui NAD+ ise osaleb ka eraldiseisvates signaalimis- ja rakkude taastumisprotsessides.

3. Millist rolli mängib NAD+ ATP ja rakuenergia tootmises?

NAD+ võime transportida elektrone on tihedalt seotud ATP tootmisega.

ATP ehk adenosiintrifosfaat on üks peamisi kasuliku keemilise energia vorme rakkudes.

NAD+ ja NADH osalevad mitmes omavahel seotud energiaainevahetuse etapis.

Glükolüüs

Glükolüüs toimub tsütoplasmas ja seisneb glükoosi lagundamises väiksemateks molekulideks.

Selle protsessi käigus võtab NAD+ vastu elektrone ja muutub NADH-ks. Glükolüüs toodab ka otseselt suhteliselt väikese koguse ATP-d.

Sidrunhappe tsükkel

Glükoosist, rasvhapetest ja teatavatest aminohapetest tekkivad saadused võivad siseneda mitokondriaalsesse ainevahetusse ja kasutada neid sidrunhappe tsüklis, mida tuntakse ka Krebsi tsükli või TCA-tsükli nime all.

Selles tsüklis tekib märkimisväärne hulk redutseeritud elektronikandjaid, eelkõige NADH-d.

Oksüdatiivne fosforüülimine

NADH poolt transporditud elektronid võivad seejärel siseneda mitokondriaalsesse elektronide transpordiahelasse.

NADH annab elektrone kompleksile I. Kui elektronid liiguvad hingamisahela kaudu, aitab vabanev energia pumbata protoneid läbi mitokondri sisemembraani.

Sel viisil tekib elektrokeemiline prootonigradient.

ATP-süntaas kasutab seejärel selles gradiendis kogunenud energiat ATP tootmiseks. [1,2]

Seega ei ole NAD+ otseselt rakuenergia. Tema võime vastu võtta ja transportida elektrone aitab aga rakkudel toitainetest kasulikku energiat saada ja lõpuks ATP-d toota.

Metabolismi jälgimisel põhinevad uuringud on samuti näidanud, et NAD+ ringluskiirus erineb kudede vahel märkimisväärselt. [4]

Sellel on bioloogiline põhjendus, kuna erinevatel kudedel on erinevad energiavajadused ja ainevahetuslikud omadused. Seetõttu ei pruugi NAD+ kättesaadavuse muutus põhjustada igas elundis ühesuguseid tagajärgi.

Kiire ainevahetusega kude võib reageerida teisiti kui kude, mille energiavajadus on märkimisväärselt väiksem.

4. Milline on seos NAD+, sirtuinide ja vananemisuuringute vahel?

NAD+ täidab ka olulist funktsiooni, mis ei ole otseselt seotud elektronide transpordiga. See on hädavajalik substraat ensüümidele, mida nimetatakse sirtuinideks.

See seos on üks peamisi põhjusi, miks NAD+ on vananemise ja pikaealisuse uuringutes nii suur huvi äratanud.

Inimestel on teada seitse sirtuini, mida nimetatakse SIRT1–SIRT7. Need asuvad erinevates rakkude osades, sealhulgas raku tuumas, tsütoplasmas ja mitokondrites.

Sirtuinid osalevad järgmistes protsessides:

• geenide ekspressiooni reguleerimine;
• mitokondrite bioloogia;
• rakkude reaktsioon stressile;
• valgusfoorid;
• DNA parandamine;
• ainevahetuse reguleerimine. [5]

Paljud sirtuinide poolt katalüüsitavad reaktsioonid hõlmavad atsetüülrühmade eemaldamist valkudest, st protsessi, mida nimetatakse deatsetüülimiseks.

Erinevalt NAD+ rollist redoksireaktsioonides, kus NAD+ ja NADH vahelduvad oksüdeeritud ja redutseeritud vormide vahel, kasutavad sirtuinireaktsioonid NAD+ substraadina.

Üks arendatavatest toodetest on nikotinaamid.

See loob otsese biokeemilise seose raku NAD+ kättesaadavuse ja NAD+-sõltuvate sirtuinide aktiivsuse vahel. Kui NAD+ kogus on piisavalt väike, ei pruugi need ensüümid töötada tavapärase tõhususega. [5,6]

Erinevaid sirtuine on uuritud mitmesugustes bioloogilistes kontekstides.

SIRT1 on äratanud suurt huvi, kuna see osaleb ainevahetuse reguleerimises ja rakkude stressireaktsioonides. SIRT2-d on uuritud valkude atsetüülimise ja oksüdatiivse stressi bioloogia kontekstis. SIRT3 asub peamiselt mitokondrites ja seda on põhjalikult analüüsitud mitokondriaalse ainevahetuse, NAD+ ja vananemisega seotud protsesside uuringutes. [5–7]

Uuringud hõlmasid ka sirtuinide signaalradade ja CD38-i – ensüümi, mis suudab NAD+-d tarbida – vahelisi koostoimeid.

Selle valdkonna vastu huvi tekkimisele aitasid kaasa ka loomkatsed. Ühes mõjukas eksperimendis leiti, et NAD+ eelühend, nikotinaamid-ribosiid, mõjutas mitokondriaalseid stressireaktsiooni radu ning parandas eksperimentaalsetes mudelites teatavaid tüvirakkude ja eluea näitajaid. [8]

Seda mehhanismi ei tohiks siiski lihtsustada väitega, et NAD+ taseme tõus suurendab automaatselt sirtuinide aktiivsust ja pikendab seeläbi inimese eluiga.

NAD+ ja sirtuinide biokeemiline seos on hästi dokumenteeritud, kuid NAD+ taset tõstvate sekkumiste abil ei ole inimeste eluea pikenemist tõestatud.

5. Kuidas organism toodab NAD+?

Organism ei sõltu valmis NAD+ saamisest otse toidust. Selle asemel toodavad ja taastavad rakud seda pidevalt mitme biosünteesi teel.

Kaks eriti olulist mehhanismi on taaskasutusrada ja de novo süntees.

NAD+ taastumise rada

Taastumisprotsess on üks peamisi viise NAD+ taseme säilitamiseks paljudes kudedes.

Kui ensüümid, nagu sirtuinid ja PARP, tarbivad NAD+, võib üheks lagunemissaaduseks olla nikotinaamid.

Selle asemel, et nikotinaamiidi lihtsalt kõrvaldada, kasutavad rakud seda uuesti ära.

Enüüm NAMPT, st nikotinaamidfosforibosüültransferaas, muudab nikotinaamiidi nikotinaamidmononukleotüüdiks, mida tavaliselt nimetatakse NMN-iks.

NMN muundub seejärel NMNAT-ensüümide toimel NAD+-ks. [1,2]

Seda teekonda võib seega lihtsustada järgmiselt:

Nikotinaamid → NMN → NAD+

See ringlussevõtusüsteem aitab rakkudel NAD+ taset pärast selle kulumist pidevalt taastada.

Ka B3-vitamiiniga seotud ühendid võivad osaleda NAD+ biosünteesis omavahel seotud ainevahetusradade kaudu. Nende hulka kuuluvad niatsiin, nikotinaamid, nikotinaamiidribosiid (NR) ja NMN.

Need osalevad NAD+ ainevahetuses erinevates biokeemilistes etappides ning mitte kõik neist ei läbi täpselt sama muundumisprotsessi.

NAD+ de novo süntees

Organism võib NAD+ toota ka aminohappe trüptofaani baasil.

See protsess toimub künoureniiniraja kaudu.

Trüptofaan läbib mitu ainevahetusetappi, mille tulemusena tekib lõpuks kinoliinhape. Ensüüm QPRT, st kinoliinhappe fosforibosüültransferaas, aitab seejärel suunata seda ainevahetusrada NAD+ tootmise suunas. [9]

Tavatingimustes on sellel rajal täiskasvanutel NAD+ taseme pidevas säilitamises tavaliselt väiksem roll kui ringlusmehhanismidel.

See ei tähenda aga, et see oleks bioloogiliselt ebaoluline.

Uuringud, mis käsitlevad NAD+ de novo sünteesi eest vastutavate ensüümide geneetilisi defekte, on seostanud selle ainevahetustee tõsised häired kaasasündinud defektidega loomamudelites ning harvadel juhtudel ka inimestel. Need tulemused viitavad sellele, et NAD+ de novo sünteesi nõuetekohane toimimine võib olla eriti oluline embrüonaalse arengu ajal. [9,10]

Seega säilitab organism NAD+ vastastikku seotud süsteemide kaudu, mitte üheainsa allika abil.

Rakud suudavad nii taaskasutada NAD+ lagunemissaadusi kui ka sünteesida uut NAD+ toidust ja ainevahetusest pärinevatest eelainetest.

6. Mis juhtub, kui NAD+ tase langeb?

Kuna NAD+ osaleb energiaainevahetuses, DNA parandamises, redoksitasakaalus ja rakusignalisatsioonis, võib selle kättesaadavuse vähenemine potentsiaalselt mõjutada korraga mitut bioloogilist süsteemi.

Tagajärjed sõltuvad siiski kudede liigist, puuduse astmest, NAD+/NADH tasakaalust ning üldisest füsioloogilisest seisundist.

Energiaainevahetus

NAD+ kättesaadavuse vähenemine võib häirida reaktsioone, mis vajavad NAD+-d elektronide vastuvõtjana.

See võib lõppkokkuvõttes mõjutada mitokondriaalset ainevahetust ja rakkude energiatootmist.

Eksperimentaalsed uuringud näitavad siiski, et mõned kudedel on märkimisväärne võime selliseid muutusi leevendada. Seega ei pruugi NAD+ mõõdetav langus põhjustada füsioloogiliste funktsioonide kohest või proportsionaalset halvenemist. [4]

Südame-veresoonkonna bioloogia

Südame-veresoonkonna uuringutes analüüsitakse mitte ainult NADH või NAD+ absoluutset kontsentratsiooni, vaid ka nende vahelist tasakaalu.

NADH ja NAD+ suhte muutusi on seostatud mitokondriaalsete valkude regulatsiooni muutustega südamepuudulikkuse uuringutes, mis hõlmavad nii eksperimentaalseid mudeleid kui ka inimese südamekude. [11]

Need tähelepanekud viitavad seosele südame-veresoonkonna ainevahetusega, kuid ei tõenda, et NAD+ lisamine oleks südamepuudulikkuse ravimeetod.

Neuroloogilised uuringud

NAD+ ainevahetus pakub suurt huvi ka neuroteaduses.

NAD+ kättesaadavuse vähenemist on katseliselt seostatud mitokondrite funktsioonihäirega ning neuropõletikuliste protsessidega, mis on olulised selliste haiguste puhul nagu Parkinsoni ja Alzheimeri tõbi.

Varastes kliinilistes uuringutes uuriti, kas NAD+ eelained võivad mõjutada NAD+ ainevahetust Parkinsoni tõvega inimeste ajus. Mõnedes uuringutes täheldati pärast eelainete manustamist mõõdetavaid muutusi NAD+ga seotud ainevahetuses ajus. [12,13]

Need tulemused on endiselt eksperimentaalsed ja neid ei tohiks tõlgendada tõendina selle kohta, et NAD+ taseme tõstmine ravib Parkinsoni tõbe, Alzheimeri tõbe või muid neuroloogilisi häireid.

DNA parandamine

PARP-d, st polü(ADP-riboosi) polümeraasid, moodustavad veel ühe olulise NAD+ tarbivate ensüümide rühma.

Mõned PARP-ensüümid aktiveeruvad vastusena DNA kahjustustele ja kasutavad NAD+ signaalimisel, mis on seotud parandusprotsessidega.

Kuna DNA-kahjustused kuhjuvad elu jooksul, võib PARP-i suurenenud aktiivsus kaasa tuua NAD+ suurema tarbimise.

See loob võimaluse konkurentsiks erinevate NAD+-sõltuvate süsteemide vahel. PARP, sirtuinid, CD38 ja muud NAD+-tarbivad ensüümid kasutavad lõppkokkuvõttes ära selle molekuli rakusiseseid varusid. [14]

Seega on teadlased esitanud hüpoteesi, et NAD+ suurenenud tarbimine võib kaasa aidata selle kättesaadavuse vanusega seotud vähenemisele.

Suur osa nendest mehhanistlikest tõenditest pärineb raku- ja loomkatsetest. Inimestel läbi viidud uuringud kinnitavad vananemise ja teatud haigusseisunditega seotud muutusi NAD+ ainevahetuses, kuid nende kliiniline tähtsus ja võimalus neid muutusi tagasi pöörata on endiselt uurimise objektiks.

7. Milline on seos NAD+ ja FAD vahel?

NAD+ ja FAD on olulised elektrone edastavad koensüümid, kuid need tekivad erinevatest vitamiiniprekursoritest ja osalevad rakkude ainevahetuses erineval viisil.

FAD tähistab flavinoadenosiini dinukleotiidi.

NAD+ on tihedalt seotud B3-vitamiini ainevahetusega, samas kui FAD tekib riboflaviinist, st B2-vitamiinist.

FAD võtab ainevahetusreaktsioonide käigus samuti elektrone vastu. Selle redutseeritud vorm on FADH2. [1,2]

Nii NADH kui ka FADH2 annavad lõpuks elektrone mitokondriaalsetele energia tootmise protsessidele, kuid need liituvad elektronide transpordiahelaga erinevates kohtades.

NADH annab elektrone peamiselt kompleksile I.

FADH2 edastab elektrone kompleks II kaudu.

Kuna FADH2 siseneb hingamisahelasse hilisemas etapis, aitavad selle elektronid tavaliselt kaasa väiksema arvu protonite pumpamisele ja seega väiksema ATP-koguse saamisele võrreldes elektronidega, mida NADH annab kompleksile I.

NAD+ ja FAD on seega rakkude bioenergeetika paralleelsed komponendid, mitte aga omavahel asendatavad molekulid.

Nende seos on kasulik ka eksperimentaalsetes uuringutes. Teadlased saavad mõõta redutseeritud NAD(P)H-ga ja oksüdeeritud FAD-ga seotud loomulikku fluorestsentsi, et hinnata rakkude ja kudede ainevahetuse seisundit. Sellised optilised meetodid annavad teavet redoks-ainevahetuse muutuste kohta, ilma et ühtegi neist koensüümidest käsitletaks lihtsa, iseseisva markerina. [15]

NAD+ toimemehhanism lühidalt

Kõige olulisem on see, et NAD+ täidab rohkem kui ühte bioloogilist funktsiooni. Ainevahetuse käigus toimib see korduvalt kasutatava elektronikandjana ning samal ajal tarbitakse seda substraadina oluliste ensüümide poolt, mis vastutavad signaalimise ja taastumisprotsesside eest.

Praeguste tõendite piirangud

Suur osa üksikasjalikest teadmistest sirtuinide aktiivsuse, PARP-i ja teiste NAD+ tarbivate ensüümide vahelise konkurentsi ning NAD+ taaskasutusraja ja de novo sünteesi vahelise tasakaalu kohta pärineb rakukultuuride ja loomamudelite uuringutest. Endiselt uuritakse, mil määral need konkreetsed mehhanismid kajastuvad erinevates inimkudedes ja haigusseisundites. [5,6,9]

Seos NAD+ taseme languse ja südame-veresoonkonna või neuroloogiliste haiguste vahel on samuti keeruline. Mehhanistlikud seosed ei tähenda, et madal NAD+ tase oleks haiguse peamine põhjus ega seda, et NAD+ taseme terapeutiline tõstmine haiguse tagasi pööraks. Selliste mõjude kinnitamiseks on vaja suuremaid kontrollitud uuringuid inimestega. [11–13]

Eksperimentaalsed tulemused näitavad ka, et isegi NAD+ taseme märkimisväärne langus ei põhjusta alati nii suurt funktsiooni halvenemist, kui võiks eeldada. See viitab sellele, et kudedel võib olla ainevahetuslik reserv ning NAD+ kontsentratsioon üksi ei määra täielikult nende toimimist. [4]

Lõpuks pärinevad tõendid, mis viitavad NAD+ de novo sünteesi tähtsusele embrüonaalse arengu käigus, suures osas geneetilistest uuringutest ja loomamudelitest. Inimeste puhul piirduvad vastavad andmed peamiselt haruldaste kaasasündinud häiretega, mis puudutavad asjaomaseid ensüüme. [9,10]

Vastutusest loobumine

Käesolev artikkel on puhtalt hariduslik ja teaduslik-informatiivne. See ei kujuta endast meditsiinilist nõuannet, diagnoosi, ravijuhiseid, annustamisjuhiseid ega soovitusi NAD+, NR, NMN, niatsiini, nikotinaamiidi või muude NAD+ga seotud ühendite kasutamise kohta.

NAD+-alased uuringud hõlmavad nii hästi tuntud biokeemilisi mehhanisme kui ka rakkude, loomade ja inimestega läbi viidud uuringute tulemusi, mille tõendusmaterjali tase ja kvaliteet on erinevad. Muutusi NAD+ ainevahetuses, sirtuinide aktiivsuses, mitokondrite toimimises või muudes rakulistes protsessides ei tohi tõlgendada tõendina selle kohta, et NAD+ taseme tõstmine ennetab vananemist, südame-veresoonkonna haigusi, neuroloogilisi häireid, ainevahetushaigusi või muid terviseprobleeme, ega seda, et see neid ravib või pöörab tagasi.

NAD+ taseme tõstmisele suunatud meetmed ja nende pikaajalised kliinilised mõjud on endiselt aktiivsete uuringute teemaks. Mehhanistiliste uuringute tulemused ja mõõdetud NAD+ taseme tõus ei pruugi tingimata tähendada olulisi tervisele kasulikke mõjusid inimestel.

Viited

1. Yoshino, J., Baur, J. A. ja Imai, S. (2018). NAD+ vaheühendid: NMN-i ja NR-i bioloogia ja terapeutiline potentsiaal. Raku ainevahetus, 27(3), 513–528. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2017.11.002
2. Covarrubias, A. J., Perrone, R., Grozio, A. ja Verdin, E. (2021). NAD+ ainevahetus ja selle roll vananemise käigus toimuvates rakulistes protsessides. Nature Reviews: Molekulaar- ja rakubioloogia, 22(2), 119–141. https://doi.org/10.1038/s41580-020-00313-x
3. Titov, D. V. jt. (2016). Mitokondriaalse elektronide transpordiahela häire kompenseerimine NAD+/NADH suhte muutmise abil. Teadus, 352(6282), 231–235. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27124460/
4. Liu, L. jt. (2018). NAD sünteesi ja lagunemise voogude kvantitatiivne analüüs. Raku ainevahetus, 27(5), 1067–1080. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29685734/
5. Lemos, V. jt. (2017). NAD+-sõltuv deatsetülaas SIRT2 leevendab oksüdatiivset stressi ja mitokondriaalset düsfunktsiooni ning parandab insuliinitundlikkust hepatotsüütides. Inimese molekulaarne geneetika, 26(21), 4105–4117. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28973648/
6. Liu, G. jt. (2016). NAD-sõltuva valgu deatsetülaasi sirtuin-2 kadumine muudab mitokondriaalsete valkude atsetüülimist ja häirib mitofaagiat. Antioksüdandid ja redoks-signalisatsioon, 26(15), 849–863. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27460777/
7. Camacho-Pereira, J. jt. (2016). CD38 määrab vanusega seotud NAD-taseme languse ja mitokondriaalse düsfunktsiooni SIRT3-st sõltuva mehhanismi kaudu. Raku ainevahetus, 23(6), 1127–1139. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27304511/
8. Zhang, H. jt. (2016). NAD+ taseme taastamine parandab hiirte mitokondrite ja tüvirakkude funktsiooni ning pikendab nende eluiga. Teadus, 352(6292), 1436–1443. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27127236/
9. Szot, J. O. jt. (2020). NADSYN1-geeni biallelilised mutatsioonid põhjustavad mitme elundi defekte ja laiendavad kaasasündinud NAD-puudulikkuse häirete genotüübilist spektrit. American Journal of Human Genetics, 106(1), 129–136. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31883644/
10. Cuny, H. jt. (2020). Geeni ja keskkonna vastastikmõjud ning NAD+ puudus põhjustavad hiirtel kaasasündinud väärarenguid ja raseduse katkemist. Proceedings of the National Academy of Sciences. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32015132/
11. Lee, C. F. jt. (2016). NAD+ redoksitasakaalu normaliseerimine südamepuudulikkuse ravina. Tsirkulatsioon, 134(12), 883–894. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27489254/
12. Brakedal, B. jt. (2022). NADPARK-uuring: nikotiinamiid-ribosiidi lisandamise randomiseeritud I faasi uuring Parkinsoni tõve puhul. Raku ainevahetus, 34(3), 396–407. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35235774/
13. Hou, Y. jt. (2021). NAD+ lisamine vähendab Alzheimeri tõve transgeense hiiremudelis neuropõletikku ja rakkude vananemist cGAS-STING-i kaudu. Proceedings of the National Academy of Sciences, 118(37). https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34497121/
14. Koczor, C. A. jt. (2021). Aluspaari eemaldamise ja ühe ahela katkemise parandamise valkkompleksi moodustumise ja lagunemise ajalist dünaamikat mõjutab PARP/NAD+/SIRT6 telg. Cell Reports, 37(5), 109917. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34731617/
15. Wallrabe, H., Svindrych, Z., Alam, S. R. jt. (2018). Segmentatsioonipõhised rakuanalüüsid autofluorestsentsete NAD(P)H, FAD ja Trp redoksseisundite mõõtmiseks vähirakkudes FLIM-meetodil. Teaduslikud aruanded, 8, 79. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29311591/