Liposomaal NAD+ en opname: maakt de toedieningsmethode uit?

Liposomaal NAD+ behoort tot de duurstere en intens gepromote vormen op de markt van NAD+-gerelateerde supplementen. Producten in deze categorie worden onder andere aangeboden door Quicksilver Scientific, Cymbiotika, RHO, Renue by Science, Goldman Laboratories en andere merken.

Het belangrijkste marketingargument is een betere opname.

Het idee is dat het insluiten van NAD+ in een lipides Drager het molecuul kan beschermen tijdens de passage door het maagdarmkanaal en mogelijk de afgifte ervan kan verbeteren in vergelijking met standaard oraal NAD+.

Vanuit het oogpunt van formuleringstechnologie is dit een rationeel concept.

De belangrijkste vraag is echter of de liposomale afgiftemethode bij mensen daadwerkelijk een significant voordeel oplevert, dan wel of het slechts om een technologisch geavanceerder formuleringsconcept gaat.

In dit artikel leggen we uit waarom onveranderd oraal NAD+ te maken heeft met absorptieproblemen, wat het doel is van liposomale encapsulatie, hoe liposomaal NAD+ zich verhoudt tot standaard capsules en sublinguale producten, wat laboratoriumonderzoek momenteel aantoont en welke gegevens uit menselijk onderzoek nog ontbreken.

Waarom heeft oraal NAD+ een absorptieprobleem?

Onveranderd NAD+ is niet optimaal geschikt voor eenvoudige opname na orale toediening, omdat het een relatief groot, sterk geladen en in water oplosbaar molecuul is.

Deze eigenschappen vormen verschillende barrières die het molecuul moet overwinnen voordat het in de systemische circulatie terechtkomt.

De moleculaire massa van NAD+ bedraagt ongeveer 663 dalton. [1]

Zijn grootte en sterke negatieve lading bemoeilijken de passieve passage door het darmepitheel in vergelijking met veel kleinere en minder polaire verbindingen.

De darmwand fungeert als een selectieve barrière.

Kleinere stoffen met eigenschappen die beter vergelijkbaar zijn met celmembranen dringen er gewoonlijk gemakkelijker doorheen dan grote en sterk geladen moleculen, zoals NAD+.

Er is ook een tweede probleem.

Het maagdarmkanaal en de lever bevatten enzymen die NAD+ en daaraan gerelateerde moleculen actief afbreken als onderdeel van het normale nucleotide- en coenzymmetabolisme.

Dit betekent dat een oraal ingenomen NAD+-molecuul zowel de fysieke absorptiebarrières als de enzymatische afbraak moet overwinnen.

Zelfs kleinere voorlopers van NAD+, zoals nicotinamide-riboside (NR) en nicotinamide-mononucleotide (NMN), ondergaan aanzienlijke metabolische veranderingen tijdens de spijsvertering en het first-pass-effect in de lever, voordat ze in de systemische bloedsomloop terechtkomen. [1,2]

Onveranderd NAD+ komt terecht in dezelfde metabole omgeving, terwijl het tegelijkertijd een grotere moleculaire structuur en minder gunstige eigenschappen heeft voor passieve opname.

Deze combinatie helpt verklaren waarom de meeste klinische onderzoeken naar NAD+-supplementen zich richten op voorlopers en niet op ongewijzigd, oraal in te nemen NAD+.

NR en NMN zijn kleinere moleculen die, na te zijn geabsorbeerd, de biosyntheseroutes van NAD+ in het lichaam kunnen betreden.

Liposomaal NAD+ gebruikt een andere strategie.

In plaats van het toegediende molecuul te veranderen, zijn liposomale formuleringen bedoeld om de afgifte van onveranderd NAD+ te verbeteren door het te beschermen tijdens de passage door het maagdarmkanaal.

Wat houdt liposomale toediening eigenlijk in?

Een liposoom is een microscopische structuur die gevormd wordt door een dubbele lipidelaag.

Je kunt het je voorstellen als een klein blaasje dat uit lipiden bestaat en een inwendige ruimte omgeeft.

In water oplosbare stoffen, zoals NAD+, kunnen in theorie in deze ruimte worden opgesloten.

Dit soort toedieningstechnologie heeft daadwerkelijke farmaceutische toepassingen.

Liposomale formuleringen worden gebruikt in bepaalde goedgekeurde geneesmiddelen, waaronder sommige antikankermedicijnen, waarbij de inkapseling de verdeling van het geneesmiddel kan beïnvloeden, de werkzame stof kan beschermen of bepaalde bijwerkingen kan beperken.

Het voorgestelde voordeel voor NAD+ is gebaseerd op hetzelfde algemene principe.

De lipidelaag moet het NAD+-molecuul beschermen tegen ongunstige omstandigheden in het maag-darmkanaal.

In theorie zou dit de afbraak door de maagomgeving en spijsverteringsenzymen kunnen beperken, voordat het molecuul de kans krijgt om te worden opgenomen.

Een tweede mogelijk voordeel is het effect op de opname door de cellen.

Celmembranen bestaan ook voor een groot deel uit lipidendubbellagen.

Omdat liposomen een vergelijkbare membraanstructuur hebben, kunnen ze op een andere manier met cellen interageren dan vrij, in water oplosbaar NAD+.

In theorie kunnen liposomen zich binden aan celmembranen of via andere transportmechanismen worden opgenomen, waardoor ze hun inhoud mogelijk effectiever kunnen afleveren.

Hierdoor is het concept van liposomaal NAD+ wetenschappelijk geloofwaardig.

Het verschilt ook van pogingen om ongewijzigd NAD+ passief via de huid te transporteren met behulp van een eenvoudige transdermale pleister.

Een biologisch plausibel afleveringsmechanisme is echter niet hetzelfde als een aangetoond klinisch voordeel.

Of liposomaal NAD+ daadwerkelijk beter werkt, moet nog worden aangetoond in farmacokinetische en klinische onderzoeken bij mensen.

Liposomaal NAD+ versus standaardcapsules en sublinguaal NAD+

Deze drie vormen maken gebruik van verschillende strategieën om de beschikbaarheid van NAD+ te beïnvloeden.

De tabel laat een belangrijk onderscheid zien.

Standaardcapsules hebben de sterkste bewijsbasis, maar dit betreft voornamelijk NR en NMN, en niet onveranderd NAD+.

Liposomale producten proberen een ander probleem op te lossen: de effectieve afgifte van onveranderd NAD+.

Blijkt uit onderzoek dat liposomaal NAD+ beter werkt?

Op dit moment is er onvoldoende peer-reviewed klinisch bewijs om te concluderen dat liposomaal NAD+ beter werkt dan standaard oraal NAD+, NR of NMN.

De theoretische onderbouwing voor het gebruik van liposomen is geloofwaardig.

Lipid-inkapsulatie kan een in water oplosbare stof beschermen, de stabiliteit ervan beïnvloeden en de manier veranderen waarop deze wisselwerking heeft met celmembranen.

Het vermoedelijke mechanisme betekent echter niet automatisch dat de biologische beschikbaarheid bij mensen groter is.

Het aantonen van een dergelijk voordeel zou farmacokinetische studies vereisen die NAD+ en de metabolieten daarvan meten in bloed, cellen of weefsels na vergelijkbare doseringen van verschillende formuleringen.

Gerandomiseerde klinische onderzoeken zouden niet alleen biomarkers moeten evalueren, maar ook zinvolle functionele uitkomsten.

Op basis van het huidige bewijs kan niet worden bevestigd dat liposomaal NAD+ het energieniveau, de fysieke conditie, de cognitieve functies, het metabolisme, biologische verouderingsparameters of andere gezondheidsindicatoren verbetert.

Wat blijkt uit laboratoriumonderzoek?

Aanvullende informatie wordt geleverd door onderzoek op celkweken.

In één studie werden liposomaal en niet-liposomaal NAD+ met elkaar vergeleken in gekweekte humane endotheelcellen en keratinocyten. [5]

De liposomale formulatie veroorzaakte sterkere effecten met betrekking tot bepaalde cellulaire markers die geassocieerd zijn met cellulaire veroudering.

Dit ondersteunt het concept dat lipideninkapseling kan veranderen hoe NAD+ met cellen wisselwerking aangaat.

Dit was echter een in-vitrostudie.

Celkweven reproduceren niet het volledige biologische proces dat plaatsvindt nadat een mens een product heeft ingeslikt.

Spijsvertering, darmabsorptie, levermetabolisme, circulatie, weefseldistributie en cellulaire opname vormen extra barrières die niet aanwezig zijn in het celkweekexperiment.

De laboratoriumresultaten ondersteunen dus de biologische geloofwaardigheid van dit concept.

Dit bewijst echter niet dat dezelfde effecten optreden in een levend menselijk organisme.

Welk bewijsmateriaal ontbreekt er nog?

Het belangrijkste ontbrekende bewijs is een voltooide, door vakgenoten beoordeelde vergelijkende head-to-headstudie bij mensen.

Onder de geïdentificeerde onderzoeken is geen publicatie gevonden waarin gelijkwaardige doseringen rechtstreeks met elkaar worden vergeleken:

• liposomaal NAD+;
• standaard niet-liposomaal NAD+;
• oraal NMN;
• orale NR.

Zonder een dergelijk onderzoek is het moeilijk vast te stellen welke toedieningsmethode de grootste toename van NAD+ in het bloed, de cellen of de weefsels veroorzaakt, per toegediende milligram.

Het is eveneens onbekend welke vorm het meest duurzame effect biedt.

Wat het belangrijkste is: er ontbreken sterke bewijzen die aantonen dat liposomaal NAD+ betere functionele gezondheidsresultaten oplevert dan standaardsupplementen of -precursors van NAD+.

Het huidige voorstel moet daarom beperkt blijven.

Liposomaal NAD+ heeft een biologisch plausibele onderbouwing en steun in celkweekonderzoek, maar de biologische beschikbaarheid, klinische werkzaamheid en superioriteit ten opzichte van beter bestudeerde orale NR of NMN zijn niet vastgesteld.

Welke merken bieden liposomaal NAD+ aan?

Er zijn een aantal merken die producten verkopen die worden aangeduid als liposomaal NAD+.

Hiertoe behoren Quicksilver Scientific, Cymbiotika, RHO, Renue by Science, Goldman Laboratories en andere fabrikanten.

De producten zijn verkrijgbaar in de vorm van vloeistoffen, capsules, druppels, zakjes of individuele porties.

Het feit dat de term „liposomaal” wordt gebruikt, betekent echter niet dat al deze producten gelijkwaardig zijn.

De kwaliteit van liposomale formulaties kan aanzienlijk variëren.

Belangrijke variabelen zijn onder meer:

• lipidensamenstelling;
• deeltjesgrootte;
• productietechniek;
• inkapselingsrendement;
• productstabiliteit;
• het percentage van het opgegeven NAD+ dat daadwerkelijk in liposomen is ingesloten.

Deze factoren kunnen van invloed zijn op het gedrag van een bepaalde formulering.

Resultaten met betrekking tot een specifieke laboratoriumformulering mogen niet automatisch worden doorgetrokken naar elk commercieel product dat is gelabeld als liposomaal NAD+.

De verschillende producten kunnen verschillen wat betreft de lipidesamenstelling, de deeltjesgrootte, de stabiliteit, de inkapselingsopbrengst en het werkelijke NAD+-gehalte.

Een soortgelijk probleem doet zich op grotere schaal voor bij NR- en NMN-supplementen.

In klinische onderzoeken wordt vaak gebruikgemaakt van een specifieke verbinding of formulering van onderzoekskwaliteit.

Consumentenproducten kunnen weliswaar dezelfde algemene ingrediënt bevatten, maar hoeven niet op identieke wijze te worden geproduceerd of gekarakteriseerd.

Waar moet je op letten bij het vergelijken van producten?

Een van de nuttige parameters is of de fabrikant daadwerkelijke gegevens over de grootte van de liposomale deeltjes verstrekt.

Het feit dat het woord „liposomaal” op het etiket staat, betekent nog niet dat er sprake is van een stabiel en goed gekarakteriseerd liposomaal systeem.

Een andere belangrijke parameter is de inkapselingsprestatie.

Hieruit blijkt welk deel van het actieve NAD+ zich daadwerkelijk in de liposomen bevindt en welk deel vrij in de omringende vloeistof achterblijft.

Ook onafhankelijke analytische onderzoeken kunnen nuttig zijn.

Een analysecertificaat, oftewel CoA, kan helpen bevestigen of de hoeveelheid NAD+ in het product overeenkomt met de waarde die op het etiket staat vermeld.

Ook moet de exacte werkzame stof worden gecontroleerd.

Sommige producten die op grote schaal worden aangeprezen als liposomaal NAD+ kunnen in werkelijkheid een NAD+-voorloper bevatten, zoals NMN, in plaats van ongewijzigd NAD+.

Dit onderscheid is belangrijk omdat de bewijsbasis voor ongewijzigd NAD+, NMN en NR niet hetzelfde is.

Ook de transparantie van de productie is van belang.

Informatie over de herkomst van de grondstoffen, kwaliteitscontroleprocedures, stabiliteitsonderzoeken en productie volgens de normen voor goede fabricagepraktijken kan helpen om een goed gekarakteriseerde formulering te onderscheiden van een product dat voornamelijk op marketingtaal is gebaseerd.

Is liposomaal NAD+ de hogere prijs waard?

Liposomaal NAD+ is doorgaans duurder dan standaard NR of NMN voor orale inname.

De hogere prijs is deels te wijten aan de extra productiestappen die nodig zijn om het lipide-afgiftesysteem te ontwikkelen en te stabiliseren.

Het is echter niet duidelijk of dit prijsverschil wetenschappelijk onderbouwd is.

Waarom kan een hogere prijs gerechtvaardigd zijn?

Het concept van de levering is vanuit chemisch oogpunt logisch.

Ongebonden NAD+ is een groot, geladen, in water oplosbaar molecuul dat in het spijsverteringskanaal metabolische veranderingen ondergaat.

Door het in lipidestructuren in te kapselen, wordt een rationele poging ondernomen om een deel van deze problemen te beperken.

Onderzoek met celculturen wijst er ook op dat liposomaal NAD+ onder experimentele omstandigheden sterkere cellulaire effecten kan teweegbrengen dan NAD+ zonder liposomale formulering. [5]

Deze resultaten ondersteunen de biologische plausibiliteit van de formulering, maar bevestigen de biobeschikbaarheid of klinische voordelen bij mensen niet.

Waarom moet men voorzichtig zijn met een hogere prijs?

Direct onderzoek bij mensen naar liposomaal NAD+ blijft zeer beperkt.

Het ontbreekt aan adequaat ontworpen, door vakgenoten getoetste klinische studies die bevestigen dat deze formulering significante voordelen oplevert op het gebied van biomarkers, welzijn of functionele gezondheidsresultaten.

Er is evenmin een voltooid, peer-reviewed vergelijkend onderzoek waaruit blijkt dat liposomaal NAD+ het NAD+-niveau effectiever verhoogt dan NR of NMN.

Een dergelijke vergelijking is belangrijk omdat NR en NMN al een aanzienlijk grotere basis van gerandomiseerde menselijke studies hebben. [3,4]

Het ontbreken van directe vergelijkende gegevens betekent ook dat niet betrouwbaar kan worden berekend of liposomaal NAD+ een grotere stijging van NAD+ oplevert in verhouding tot het uitgegeven geld.

De kwaliteit van commerciële formuleringen kan ook variëren.

Twee producten hoeven niet op dezelfde manier te werken alleen omdat beide als liposomaal worden verkocht.

De conclusie op basis van het huidige bewijsmateriaal is relatief eenvoudig.

Als de prioriteit ligt bij het kiezen van een oraal NAD+-gerelateerd product met de grootste en meest volwassen menselijke onderzoeksbasis, zijn NR en NMN momenteel beter gedocumenteerd.

Als de interesse specifiek uitgaat naar het leveren van onveranderd NAD+ via een potentieel beschermend lipidesysteem, vormt liposomaal NAD+ een biologisch plausibel, maar nog steeds experimenteel concept.

Het moet niet worden beschreven als een methode met een bewezen biologische beschikbaarheid, klinische werkzaamheid of voordeel boven standaard NAD+-voorlopers.

Liposomaal NAD+: het bewijs in het kort

Veelgestelde vragen over liposomaal NAD+

Wat is liposomaal NAD+?

Liposomaal NAD+ is NAD+ ingekapseld in microscopische lipidenstructuren die liposomen worden genoemd.

Het doel van een dergelijke formulering is de bescherming van het molecuul tijdens de passage door het maagdarmkanaal en de mogelijke verbetering van de absorptie of afgifte aan cellen.

Waarom wordt NAD+ in liposomen geplaatst?

Onveranderd NAD+ is relatief groot, sterk geladen en oplosbaar in water.

Deze eigenschappen bemoeilijken een eenvoudige passieve absorptie door de darmen.

Liposomale insluiting is bedoeld om het molecuul te beschermen en de afgifte ervan mogelijk te verbeteren.

Wordt liposomaal NAD+ beter opgenomen?

Dit is niet bevestigd in goed ontworpen, peer-reviewed vergelijkende onderzoeken met mensen.

Lipidische inkapseling kan theoretisch NAD+ beschermen en de afgifte ervan beïnvloeden. Er ontbreken echter direct vergelijkende studies die een grotere biologische beschikbaarheid bevestigen dan in het geval van standaard NAD+, NR of NMN.

Is liposomaal NAD+ beter dan NMN?

Dit is niet aangetoond.

NMN heeft een grotere basis van gerandomiseerde menselijke onderzoeken die NAD+-gerelateerde biomarkers evalueren. [3]

Liposomaal NAD+ wordt ondersteund door mechanistische en laboratoriumonderzoeken, maar het klinische voordeel ervan ten opzichte van NMN is niet bevestigd.

Is liposomaal NAD+ beter dan NR?

Er is onvoldoende bewijs om een dergelijk voordeel te bevestigen.

NR is geëvalueerd in talrijke gerandomiseerde, placebo-gecontroleerde onderzoeken, terwijl directe klinische gegevens over liposomaal NAD+ aanzienlijk beperkter blijven. [4]

Verhoogt liposomaal NAD+ de energie?

Dit is niet aangetoond in betrouwbare klinische onderzoeken.

Een aannemelijk biologisch mechanisme of een effect dat wordt waargenomen in gekweekte cellen bevestigt niet automatisch meer energie, betere prestaties of een verbeter welzijn bij mensen.

Zijn alle merken liposomaal NAD+ hetzelfde?

Nee.

Liposomsamenstelling, deeltjesgrootte, insluitingsefficiëntie, stabiliteit, ingrediëntenkwaliteit en productieprocessen kunnen per merk verschillen.

Resultaten met betrekking tot één specifieke formulering kunnen niet automatisch worden doorgetrokken naar elk commercieel product.

Waar moet je op letten bij het kiezen van een product met liposomaal NAD+?

Nuttige informatie kan het volgende omvatten:

• de exacte werkzame stof;
• de aangegeven NAD+-inhoud;
• onafhankelijk laboratoriumonderzoek;
• analysecertificaat;
• gegevens over de liposomale deeltjesgrootte;
• inkapselingsrendement;
• stabiliteitsgegevens;
• transparante productienormen.

Alleen het woord „liposomaal” geeft erg weinig informatie over de daadwerkelijke kwaliteit van de formulering.

Beperkingen van het huidige bewijs

De belangrijkste beperking is het gebrek aan voldoende peer-reviewed klinische studies die specifiek liposomaal NAD+ evalueren.

De huidige onderbouwing is voornamelijk gebaseerd op de chemische eigenschappen van NAD+, algemene principes van liposomale formulering en laboratoriumexperimenten.

Een tweede beperking is het ontbreken van directe vergelijkingen.

Onder de geciteerde publicaties is er geen voltooid, peer-reviewed menselijk onderzoek dat liposomale NAD+ direct vergelijkt met NR, NMN of standaard niet-liposomale NAD+ bij gelijke doseringen en dezelfde farmacokinetische eindpunten.

Dit maakt het onmogelijk om definitieve conclusies te trekken over de relatieve biologische beschikbaarheid.

Ondersteunend mechanistisch bewijs omvat ook in-vitrostudies. [5]

Resultaten van celkweekstudies kunnen de biologische plausibiliteit van het mechanisme ondersteunen, maar reproduceren de spijsvertering, het levermetabolisme, de systemische circulatie, de weefseldistributie of de volledige menselijke fysiologie niet.

Een andere beperking zijn de verschillen tussen commerciële producten.

Resultaten met betrekking tot een specifieke laboratoriumformulering mogen niet automatisch worden gegeneraliseerd naar producten van Quicksilver Scientific, Cymbiotika, RHO, Renue by Science, Goldman Laboratories of andere merken, tenzij precies dat product onafhankelijk is getest.

De kwaliteit van de formulering kan ook variëren.

De grootte van liposomen, de lipidesamenstelling, de inkapselingsefficiëntie, de productstabiliteit en het daadwerkelijke NAD+-gehalte worden door fabrikanten niet altijd in dezelfde mate bekendgemaakt.

De rentabiliteit van deze leveringsmethode is eveneens niet vastgesteld.

Zonder adequaat ontworpen menselijk onderzoek is er geen sterk bewijs dat aantoont dat de hogere prijs van liposomaal NAD+ zich vertaalt in een proportioneel grotere biologische beschikbaarheid of betere klinische resultaten dan goedkopere orale NR of NMN.

De huidige bewijzen maken het dus mogelijk om liposomaal NAD+ te beschrijven als een biologisch plausibele afleveringsmethode die wordt ondersteund door laboratoriumgegevens, maar niet als een bevestigd alternatief dat beter is dan beter gevestigde orale NAD+-precursors.

Disclaimer

Het artikel heeft uitsluitend een educatief en wetenschappelijk-informatief karakter. Het vormt geen medisch advies, therapeutische aanbeveling, doseringsinstructie, productaanbeveling of goedkeuring voor liposomaal NAD+, standaard NAD+, NR, NMN of een van de genoemde commerciële merken.

Liposomaal NAD+ heeft een geloofwaardige mechanistische onderbouwing als afgiftemethode, maar er ontbreken voldoende door vakgenoten getoetste klinische bewijzen die de biobeschikbaarheid of de voordelen bij mensen bevestigen. Laboratoriumresultaten mogen niet worden geïnterpreteerd als bewijs van een betere opname, betere klinische resultaten, anti-verouderingseffecten of een grotere werkzaamheid in vergelijking met standaard NAD+-precursors.

NAD+ en aanverwante producten zijn niet goedgekeurd door de FDA of EMA voor de behandeling, preventie of genezing van ziekten. Merknamen worden uitsluitend vermeld om producten te beschrijven die op de markt verkrijgbaar zijn. De vermelding ervan houdt geen onafhankelijke klinische validatie, aanbeveling of gelijkwaardigheid in met enige specifieke liposomale formulering die in wetenschappelijk onderzoek wordt gebruikt.

Referenties

[1] Yoshino, J., Baur, J. A., & Imai, S. (2018). NAD+-intermediogenen: De biologie en het therapeutische potentieel van NMN en NR. Cell Metabolism, 27(3), 513–528. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2017.11.002

[2] Covarrubias, A. J., Perrone, R., Grozio, A., & Verdin, E. (2021). NAD+ stofwisseling en haar rollen in cellulaire processen tijdens veroudering. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 22(2), 119–141. https://doi.org/10.1038/s41580-020-00313-x

[3] Yi, L., Maier, A. B., Tao, R., Lin, Z., Vaidya, A., Pendse, S., Thasma, S., Andhalkar, N., Avhad, G., & Kumbhar, V. (2022). De werkzaamheid en veiligheid van β-nicotinamide-mononucleotide (NMN)-supplementatie bij gezonde van middelbare leeftijd zijnde volwassenen: Een gerandomiseerde, multicentrische, dubbelblinde, placebogecontroleerde, parallelgroep, dosering-afhankelijke klinische studie. GeroScience, 45, 29–43. https://doi.org/10.1007/s11357-022-00705-1

[4] Martens, C. R., Denman, B. A., Mazzo, M. R., Armstrong, M. L., Reisdorph, N., McQueen, M. B., Chonchol, M., & Seals, D. R. (2018). Chronische suppletie met nicotinamideriboside wordt goed verdragen en verhoogt NAD+ bij gezonde van middelbare leeftijd en oudere volwassenen. Nature Communications, 9, 1286. https://doi.org/10.1038/s41467-018-03421-7

[5] Ministrini, S., Liberale, L., Erle, H.-E., Percoco, G., Tfayli, A., Assi, A., Kapitonov, I., Greiner, I., & Camici, G. G. (2025). Een liposomale formulering versterkt de anti-senescentie-eigenschappen van nicotinamide-adenineminucleotide (NAD+) in endotheelcellen en keratinocyten. Huidige kwesties in de moleculaire biologie, 47(9), 722. https://doi.org/10.3390/cimb47090722