NAD+ telah menjadi bidang penelitian penting terkait umur panjang karena hubungannya dengan penuaan seluler, metabolisme, serta hasil penelitian mengenai umur panjang yang diamati pada model hewan. Sebagian dari penelitian ini memiliki signifikansi ilmiah yang penting, terutama pada tingkat mekanistik dan praklinis. Namun, bukti yang menunjukkan bahwa NAD+ memengaruhi jalur-jalur yang terkait dengan penuaan pada hewan tidak sama dengan bukti bahwa suplementasi NAD+ dapat membalikkan proses penuaan pada manusia. Sepanjang artikel ini, kami mempertahankan perbedaan tersebut, serta membahas bagaimana puasa berkaitan dengan biologi NAD+, karena puasa dan pembatasan kalori termasuk di antara kondisi metabolik yang paling baik dikarakterisasi terkait perubahan pada jalur yang bergantung pada NAD+.
Mengapa kadar NAD+ menurun seiring bertambahnya usia?
Penurunan kadar NAD+ seiring bertambahnya usia merupakan salah satu temuan yang paling konsisten dilaporkan dalam bidang penelitian ini. Tingkat NAD+ yang lebih rendah telah diamati dalam darah dan berbagai jaringan seiring bertambahnya usia pada model hewan, dan semakin sering juga ditemukan dalam penelitian pada manusia [1]. Beberapa mekanisme yang saling terkait mungkin berkontribusi terhadap penurunan ini.
Salah satu mekanisme yang diusulkan melibatkan peningkatan konsumsi NAD+ oleh CD38. CD38 adalah enzim yang memecah NAD+, dan aktivitasnya tampaknya meningkat seiring bertambahnya usia. Hal ini mungkin sebagian disebabkan oleh penumpukan sel-sel senescent yang telah berhenti membelah, namun tetap aktif secara metabolik dan dapat berkontribusi pada sinyal peradangan, serta oleh peningkatan jumlah sel-sel imun yang mengekspresikan CD38.
Penelitian pada tikus yang tidak memiliki gen CD38 menunjukkan bahwa aktivitas CD38 berkontribusi secara signifikan terhadap penurunan kadar NAD+ seiring bertambahnya usia serta gangguan fungsi mitokondria yang menyertainya. Efek-efek ini tampaknya setidaknya sebagian melibatkan jalur yang terkait dengan enzim mitokondria SIRT3 yang bergantung pada NAD+ [2].
Mekanisme kedua berkaitan dengan akumulasi kerusakan DNA serta peningkatan konsumsi NAD+ oleh enzim PARP. Kerusakan DNA semakin menumpuk seiring waktu, dan protein PARP berperan dalam perbaikan DNA dengan menggunakan NAD+ sebagai substrat. Oleh karena itu, aktivitas perbaikan yang lebih tinggi dan lebih berkepanjangan dapat meningkatkan konsumsi NAD+ [1].
Perubahan terkait usia dalam sintesis NAD+ juga dapat berkontribusi terhadap proses ini. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa aktivitas jalur pemulihan NAD+, termasuk jalur yang diatur oleh enzim NAMPT, dapat menurun seiring bertambahnya usia pada beberapa jaringan. Jika hal ini terjadi, ketersediaan NAD+ dapat terbatasi dari dua sisi: akibat peningkatan konsumsi dan regenerasi yang lebih lemah [1].
Secara keseluruhan, mekanisme-mekanisme ini menggambarkan situasi biologis di mana sel-sel yang menua mungkin memproduksi atau memulihkan NAD+ dengan kurang efisien, sementara pada saat yang sama mengonsumsinya lebih banyak. Kombinasi tersebut mungkin dapat menjelaskan sebagian penurunan kadar NAD+ secara bertahap yang diamati seiring bertambahnya usia.
Apakah suplementasi NAD+ benar-benar dapat „membalikkan” beberapa penanda penuaan?
Istilah „pembalikan penuaan” perlu dipisahkan dari hasil penelitian yang lebih konkret dan dapat diukur.
Pembalikan penuaan dalam arti luas, yaitu peremajaan biologis manusia pada berbagai sistem organ dan proses yang berkaitan dengan penuaan, belum terbukti dalam uji klinis terkontrol pada manusia. Tidak ada penelitian yang dipublikasikan yang melibatkan manusia yang menunjukkan bahwa suplementasi NAD+ dapat membalikkan penuaan sebagai fenomena yang mencakup seluruh tubuh.
Penelitian mengenai biomarker tunggal dan proses biologis yang berkaitan dengan penuaan bersifat lebih kompleks.
Penelitian pada hewan telah memberikan hasil yang signifikan. Dalam sebuah penelitian berpengaruh pada tikus, nikotinamid ribosida meningkatkan kadar NAD+ dan mengaktifkan respons mitokondria terhadap protein yang terlipat secara abnormal, yaitu jalur respons seluler terhadap stres. Perawatan tersebut juga dikaitkan dengan peningkatan fungsi mitokondria dan sel punca otot, serta perpanjangan umur hewan yang diobati [3].
Hasil-hasil ini telah secara signifikan meningkatkan minat terhadap prekursor NAD+ dalam bidang biologi penuaan. Namun, hasil tersebut berasal dari model hewan. Perpanjangan umur semacam ini belum terbukti pada manusia, dan penelitian yang menggunakan umur manusia sebagai titik akhir akan membutuhkan periode pengamatan yang sangat lama.
Penelitian awal pada manusia menganalisis parameter biologis dan klinis yang lebih spesifik. Dalam uji klinis fase I yang melibatkan penderita penyakit Parkinson, nikotinamida ribosida yang dikonsumsi secara oral meningkatkan kadar NAD+ di otak dan dikaitkan dengan perubahan klinis ringan serta perubahan biomarker yang terkait dengan peradangan dan proses penyakit [4].
Hal ini merupakan sinyal awal dari penelitian pada manusia dalam populasi tertentu yang menderita penyakit tersebut. Namun, hal ini tidak boleh ditafsirkan sebagai bukti adanya efek anti-penuaan secara umum pada orang yang sehat. Penelitian ini merupakan penelitian tahap awal yang terutama berfokus pada keamanan, kelayakan, aktivitas biologis, dan hasil klinis eksploratif, bukan untuk membuktikan bahwa NR memodifikasi proses penuaan atau membalikkan penyakit.
Jadi, kesimpulan yang paling tepat adalah bahwa suplementasi NAD+ memengaruhi beberapa proses molekuler dan seluler yang terkait dengan penuaan pada model hewan, sementara penelitian awal pada manusia menunjukkan efek biologis dalam situasi tertentu. Pembalikan penuaan pada manusia dalam arti luas belum terbukti.
Puasa dan NAD+: seperti apa sebenarnya hubungan di antara keduanya?
Hubungan antara puasa dan NAD+ memiliki dasar mekanisme yang dapat dipertanggungjawabkan secara biologis dan relatif telah dikaji dengan baik.
Salah satu jalur penting adalah AMPK, yaitu protein kinase yang diaktifkan oleh AMP. AMPK berfungsi sebagai sensor energi seluler dan menjadi lebih aktif ketika ketersediaan energi dalam sel menurun, antara lain selama puasa dan pembatasan kalori.
Aktivasi AMPK dapat memengaruhi NAMPT, enzim penting dalam jalur pemulihan NAD+. Peningkatan aktivitas NAMPT dapat berkontribusi terhadap perubahan ketersediaan NAD+ dan rasio NAD+/NADH, yang pada gilirannya dapat memengaruhi enzim-enzim yang bergantung pada NAD+, seperti SIRT1 [1].
Hal ini membentuk jalur metabolik yang saling terkait, yang mencakup status energi sel, pensinyalan AMPK, pemulihan NAD+, serta aktivitas sirtuin. Penelitian pada hewan mengenai pembatasan kalori menunjukkan bahwa adaptasi metabolik ini dapat membantu mempertahankan atau memodifikasi jalur yang terkait dengan NAD+, yang jika tidak, akan berubah seiring bertambahnya usia [1].
Oleh karena itu, hubungan ini memiliki dasar mekanistik yang lebih kuat daripada banyak pernyataan umum yang menyatakan bahwa unsur gaya hidup tertentu „meningkatkan kadar NAD+”.
Namun, masih ada ketidakpastian yang signifikan saat menerapkan hasil-hasil ini pada manusia. Sebagian besar penelitian mekanistik terperinci dilakukan pada hewan atau dalam model seluler. Penelitian pada manusia yang secara langsung mengukur perubahan NAD+ dalam darah atau jaringan sebelum dan sesudah protokol puasa yang dikontrol secara ketat masih terbatas.
Akibatnya, data yang ada saat ini tidak memungkinkan untuk menentukan lamanya puasa, frekuensinya, maupun tingkat pembatasan kalori yang secara konsisten akan menyebabkan peningkatan NAD+ tertentu pada manusia. Arah hubungan biologis tersebut cukup didukung dengan baik, namun besaran, waktu, dan signifikansi klinis efek tersebut pada manusia masih kurang jelas.
Sirtuin, pembatasan kalori, dan NAD+ — bagaimana keterkaitannya?
Sirtuin merupakan penghubung mekanistik yang penting antara pembatasan kalori, puasa, dan metabolisme NAD+.
Sirtuin membutuhkan NAD+ sebagai substrat. Karena puasa dan pembatasan kalori dapat mengubah mekanisme seluler dalam mendeteksi energi serta rasio NAD+/NADH melalui jalur yang melibatkan AMPK dan NAMPT, kondisi metabolik tersebut juga dapat memengaruhi aktivitas sirtuin [1].
Hubungan ini merupakan salah satu alasan mengapa sirtuin telah diteliti secara intensif dalam bidang biologi pembatasan kalori. Pada banyak model hewan, pembatasan kalori dikaitkan dengan umur yang lebih panjang atau penundaan perkembangan beberapa perubahan yang terkait dengan penuaan. Sirtuin telah dianalisis sebagai salah satu kelompok mediator yang mungkin menghubungkan perubahan ketersediaan nutrisi dengan dampak selanjutnya terhadap fungsi mitokondria, ketahanan terhadap stres, metabolisme, dan regulasi gen.
Secara konseptual, hubungan ini dapat dirangkum sebagai berikut: pembatasan kalori memengaruhi metabolisme yang terkait dengan NAD+, yang pada gilirannya dapat memengaruhi aktivitas sirtuin yang bergantung pada NAD+. Namun, jalur ini tidak boleh ditafsirkan sebagai rangkaian linier sederhana, di mana satu intervensi secara otomatis memicu semua efek selanjutnya dari intervensi lainnya.
Suplementasi dengan prekursor NAD+ dapat meningkatkan ketersediaan substrat yang terkait dengan NAD+ dalam kondisi tertentu, namun hal ini tidak berarti bahwa hal tersebut dapat sepenuhnya mereplikasi kondisi fisiologis yang terkait dengan puasa atau pembatasan kalori.
Puasa memicu perubahan metabolik dan hormonal yang luas, termasuk insulin, glukagon, metabolisme asam lemak, produksi badan keton, AMPK, sinyal mTOR, deteksi nutrisi, serta jalur-jalur lainnya. Peningkatan kadar NAD+ melalui suplementasi hanya memengaruhi sebagian dari jaringan biologis yang lebih luas ini.
Oleh karena itu, suplementasi prekursor NAD+ dan puasa tidak boleh dianggap sebagai strategi yang dapat saling menggantikan. Mekanisme keduanya memang sebagian tumpang tindih, tetapi keduanya tidak setara secara biologis.
Bagaimana perbandingan NAD+ dengan senyawa lain yang dipromosikan dalam konteks umur panjang?
Prekursor NAD+ termasuk dalam beberapa kelompok senyawa yang sering dibahas dalam penelitian mengenai penuaan dan umur panjang. Yang lainnya adalah resveratrol, pterostilben, metformin, dan rapamycin, meskipun zat-zat ini bekerja melalui jalur biologis yang berbeda dan memiliki dasar bukti serta konteks regulasi yang sangat beragam.
Resveratrol dan pterostilben sering dibahas bersamaan dengan prekursor NAD+, karena semua senyawa tersebut telah diteliti dalam konteks biologi sirtuin. NAD+ diperlukan sebagai substrat bagi sirtuin, sedangkan resveratrol dan senyawa sejenisnya telah diteliti terkait kemungkinan pengaruhnya terhadap sinyalisasi yang berkaitan dengan sirtuin.
Tumpang tindih jalur-jalur ini secara mekanis telah memicu minat terhadap kombinasi prekursor NAD+ dengan polifenol terkait. Salah satu contohnya adalah kombinasi nikotinamida ribosida dengan pterostilben yang dianalisis dalam penelitian pada manusia [5]. Namun, keberadaan dasar mekanistik atau penelitian kombinasi tersebut saja tidak membuktikan bahwa kombinasi semacam itu memperpanjang usia atau memberikan efek anti-penuaan yang lebih luas pada manusia.
Senyawa lain yang umumnya dikaitkan dengan penelitian tentang umur panjang memengaruhi jalur-jalur lain secara parsial. Metformin sering dibahas dalam konteks AMPK dan pensinyalan metabolik, sedangkan rapamycin bekerja terutama dengan menghambat mTOR. Jalur-jalur ini mungkin bersinggungan dengan biologi NAD+ dan sirtuin, tetapi tidak boleh dianggap sebagai mekanisme yang dapat saling menggantikan.
Dibandingkan dengan banyak senyawa yang dibahas dalam konteks komersial terkait umur panjang, prekursor NAD+ yang dikonsumsi secara oral, seperti NR dan NMN, telah didukung oleh basis penelitian acak terkontrol plasebo pada manusia yang terus berkembang, yang menunjukkan bahwa senyawa-senyawa tersebut dapat meningkatkan kadar NAD+ atau metabolit yang terkait dengan NAD+ dalam darah, serta secara umum ditoleransi dengan baik selama periode penelitian jangka pendek dan menengah [6].
Namun, bukti bahwa senyawa-senyawa tersebut meningkatkan biomarker NAD+ tidak sama dengan bukti bahwa senyawa-senyawa tersebut memperpanjang umur, mencegah penuaan, atau memberikan efek anti-penuaan yang luas pada manusia.
Perbedaan yang sama juga berlaku untuk senyawa lain yang dikaitkan dengan umur panjang. Tak satu pun dari zat yang dibahas di sini dapat digambarkan sebagai zat yang secara pasti telah terbukti memperpanjang umur manusia berdasarkan penelitian klinis yang tersedia saat ini.
Hewan peliharaan merupakan bidang penelitian tersendiri. Dalam sebuah uji klinis acak terkontrol, dievaluasi kombinasi prekursor NAD+ baru dan senyawa senolitik pada anjing lanjut usia dengan gangguan kognitif ringan hingga sedang. Penelitian tersebut menunjukkan hubungan yang signifikan secara statistik dengan peningkatan fungsi kognitif yang dinilai oleh pemilik pada titik akhir utama, serta perubahan yang lebih luas pada parameter seperti kerentanan, aktivitas, dan tingkat kepuasan yang dilaporkan, yang secara statistik kurang jelas [7].
Hasil ini memiliki makna translasi, karena relatif sedikit penelitian terkontrol yang mengevaluasi intervensi terkait NAD+ secara khusus pada hewan peliharaan yang menua. Namun, ini merupakan penelitian tunggal yang menggunakan intervensi kombinasi, bukan NAD+ saja, dan perbaikan tercatat pada semua kelompok perlakuan. Para peneliti kemudian menunjukkan kemungkinan bahwa sebagian dari perubahan yang dilaporkan mungkin dipengaruhi oleh efek mirip plasebo, ekspektasi pemilik, perhatian yang meningkat, atau partisipasi dalam penelitian itu sendiri.
Apa yang secara realistis dapat diharapkan, dan apa yang tidak?
Berdasarkan bukti yang ada saat ini, beberapa kesimpulan dapat dianggap cukup beralasan.
Kadar NAD+ tampaknya menurun seiring bertambahnya usia di berbagai jaringan dan kondisi biologis, dan telah diusulkan beberapa mekanisme yang mungkin menjelaskan penurunan tersebut, termasuk peningkatan aktivitas CD38, peningkatan konsumsi NAD+ selama perbaikan DNA, serta kemungkinan perubahan pada sintesis dan jalur pemulihan NAD+ [1,2].
Puasa dan pembatasan asupan kalori juga memiliki hubungan yang dapat dipertanggungjawabkan secara biologis dan didukung oleh bukti yang cukup kuat dengan metabolisme NAD+ melalui jalur-jalur yang melibatkan AMPK, NAMPT, keseimbangan NAD+/NADH, dan sirtuin [1].
Penelitian pada manusia telah berulang kali menunjukkan bahwa prekursor NAD+ yang dikonsumsi secara oral, seperti NR dan NMN, dapat meningkatkan kadar NAD+ yang beredar dalam darah atau metabolit terkait dalam kondisi penelitian tertentu [6].
Penelitian pada hewan juga menunjukkan perubahan fungsi mitokondria, aktivitas sel punca, respons seluler terhadap stres, serta harapan hidup setelah pemberian prekursor NAD+ pada model-model tertentu [3]. Penelitian awal pada manusia telah mengidentifikasi perubahan biomarker NAD+ dan parameter klinis eksploratif pada populasi tertentu yang menderita penyakit [4].
Hasil-hasil ini tidak membuktikan bahwa suplementasi NAD+ dapat membalikkan proses penuaan pada manusia.
Data saat ini juga tidak menunjukkan bahwa suplementasi dengan prekursor NAD+ dapat memperpanjang umur manusia atau meniru semua efek fisiologis dari puasa atau pembatasan kalori.
Demikian pula, peningkatan biomarker yang terkait dengan biologi penuaan itu sendiri tidak membuktikan adanya peningkatan masa hidup yang sehat, penurunan usia biologis, perlambatan proses penuaan, maupun perpanjangan masa hidup.
Bidang ini tetap menjadi arah penelitian ilmiah yang aktif dan penting, namun saat ini bukti terkuat berkaitan dengan mekanisme, perubahan biomarker, serta hasil eksperimental tertentu, bukan efek anti-penuaan yang luas pada manusia.
Keterbatasan bukti yang ada saat ini
- Hasil paling kuat yang mengaitkan suplementasi NAD+ dengan perpanjangan usia, peningkatan fungsi mitokondria, dan perubahan dalam biologi penuaan sebagian besar berasal dari penelitian pada hewan, terutama pada model tikus. Penelitian pada manusia telah menunjukkan perubahan biomarker dan data keamanan dalam jangka pendek dan menengah, tetapi belum mengonfirmasi perpanjangan usia maupun efek anti-penuaan yang komprehensif [3].
- Hasil penelitian mengenai umur hewan tidak dapat secara otomatis diterapkan pada manusia, karena spesies-spesies tersebut berbeda dalam hal metabolisme, umur, perkembangan penyakit, biologi NAD+, dosis, dan kondisi eksperimental.
- Hubungan antara puasa, pembatasan kalori, dan metabolisme NAD+ didukung oleh mekanisme biologis, namun hubungan dosis-respons yang tepat pada manusia masih belum jelas. Belum diketahui berapa lama dan seberapa sering puasa, maupun seberapa besar pembatasan kalori yang diperlukan untuk memicu perubahan tertentu pada kadar NAD+ pada manusia [1].
- Penelitian pada manusia yang secara langsung mengukur kadar NAD+ di jaringan tertentu sebelum dan sesudah menjalani protokol puasa yang terstandarisasi masih terbatas; oleh karena itu, kesimpulan mengenai mekanisme tersebut tidak boleh diartikan sebagai rekomendasi yang tepat mengenai puasa.
- Bukti dari penelitian pada manusia mengenai prekursor NAD+ dalam penyakit tertentu, termasuk penyakit Parkinson, masih berada pada tahap awal dan tidak boleh ditafsirkan sebagai bukti adanya efek anti-penuaan yang luas maupun efek yang memodifikasi perjalanan penyakit [4].
- Peningkatan kadar NAD+ atau biomarker terkait tidak secara otomatis berarti adanya perbaikan dalam hal usia biologis, masa hidup yang sehat, usia harapan hidup, kebugaran fisik, fungsi kognitif, maupun risiko penyakit.
- Suplementasi dengan prekursor NAD+ tidak boleh dianggap setara secara biologis dengan puasa atau pembatasan kalori, karena puasa memicu berbagai perubahan metabolik, hormonal, dan sinyal yang melampaui metabolisme NAD+.
- Bukti-bukti mengenai kombinasi, seperti NR dengan pterostilben, tidak membuktikan bahwa prekursor NAD+ yang dikombinasikan dengan resveratrol atau senyawa lain yang dikaitkan dengan umur panjang memberikan efek anti-penuaan yang bersifat aditif atau lebih kuat [5].
- Perbandingan dengan metformin, rapamycin, resveratrol, atau senyawa lain yang dikaitkan dengan umur panjang bersifat mekanistik dan tidak menjadi bukti bahwa intervensi-intervensi tersebut memberikan efek yang setara atau dapat saling menggantikan.
- Penelitian yang dibahas mengenai fungsi kognitif pada anjing ini merupakan penelitian terkontrol tunggal yang menggunakan intervensi gabungan, bukan NAD+ saja. Peningkatan juga tercatat pada berbagai kelompok perlakuan, sehingga mempersulit interpretasi efek spesifik dari intervensi tersebut [7].
- Data jangka panjang mengenai keamanan dan hasil klinis pada manusia masih jauh lebih terbatas dibandingkan dengan penelitian biomarker jangka pendek, terutama ketika prekursor NAD+ digunakan selama bertahun-tahun, bukan hanya selama beberapa minggu atau bulan.
Pernyataan Penafian
Artikel ini semata-mata bersifat edukatif dan merangkum hasil penelitian ilmiah. Artikel ini bukan merupakan saran medis bagi manusia maupun saran kedokteran hewan bagi hewan.
NAD+, prekursor NAD+, puasa, pembatasan kalori, resveratrol, pterostilben, metformin, rapamycin, maupun senyawa lain yang dibahas dalam konteks umur panjang tidak boleh ditafsirkan sebagai metode yang telah terbukti untuk membalikkan proses penuaan, memperpanjang umur manusia, mencegah penyakit, atau mengobati kondisi medis, kecuali jika terdapat indikasi yang telah disetujui secara spesifik dan bukti klinis yang memadai.
NAD+ dan prekursornya tidak boleh disajikan sebagai metode pengobatan penuaan yang telah disetujui oleh FDA atau EMA, maupun sebagai terapi yang telah terbukti dapat memperpanjang usia manusia.
Puasa dan pembatasan asupan kalori tidak cocok untuk semua orang dan dapat menimbulkan risiko tambahan pada beberapa orang. Wanita hamil atau yang sedang menyusui, penderita diabetes, mereka yang mengonsumsi obat penurun glukosa darah, mereka yang memiliki riwayat gangguan makan, kekurangan berat badan, beberapa penyakit kronis, atau mereka yang mengonsumsi obat-obatan yang efeknya bergantung pada asupan makanan, disarankan untuk mendiskusikan puasa atau pengurangan kalori yang signifikan dengan tenaga kesehatan yang berkualifikasi.
Sebelum mulai mengonsumsi suplemen baru, menjalani program puasa, mengonsumsi obat, atau melakukan intervensi lain yang bertujuan memengaruhi proses penuaan, sebaiknya berkonsultasi terlebih dahulu dengan tenaga kesehatan yang berkualifikasi. Pertanyaan mengenai hewan peliharaan sebaiknya diajukan kepada dokter hewan yang berkualifikasi.
Referensi
[1] Covarrubias, A. J., Perrone, R., Grozio, A., & Verdin, E. (2021). Metabolisme NAD+ dan perannya dalam proses seluler selama penuaan. *Nature Reviews Molecular Cell Biology*, 22(2), 119–141. https://doi.org/10.1038/s41580-020-00313-x
[2] Camacho-Pereira, J., Tarragó, M. G., Chini, C. C. S., Nin, V., Escande, C., Warner, G. M., Puranik, A. S., Schoon, R. A., Reid, J. M., Galina, A., & Chini, E. N. (2016). CD38 menentukan penurunan kadar NAD terkait usia dan disfungsi mitokondria melalui mekanisme yang bergantung pada SIRT3. *Cell Metabolism*, 23(6), 1127–1139. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2016.05.006
[3] Zhang, H., Ryu, D., Wu, Y., Gariani, K., Wang, X., Luan, P., D’Amico, D., Ropelle, E. R., Lutolf, M. P., Aebersold, R., Schoonjans, K., Menzies, K. J., & Auwerx, J. (2016). Pengisian ulang NAD+ meningkatkan fungsi mitokondria dan sel punca serta memperpanjang usia hidup pada tikus. *Science*, 352(6292), 1436–1443. https://doi.org/10.1126/science.aaf2693
[4] Brakedal, B., Dölle, C., Riemer, F., Ma, Y., Nido, G. S., Skeie, G. O., Craven, A. R., Schwarzlmüller, T., Brekke, N., Diab, J., Sverkeli, L., Skjeie, V., Varhaug, K., Tysnes, O.-B., Peng, S., Haugarvoll, K., Ziegler, M., Grüner, R., Eidelberg, D., & Tzoulis, C. (2022). Studi NADPARK: Uji klinis acak fase I mengenai suplementasi nikotinamida ribosida pada penyakit Parkinson. *Cell Metabolism*, 34(3), 396–407.e6. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2022.02.001
[5] Dellinger, R. W., Santos, S. R., Morris, M., Evans, M., Alminana, D., Guarente, L., & Marcotulli, E. (2017). Pemberian NRPT (nikotinamida ribosida dan pterostilben) secara berulang meningkatkan kadar NAD+ pada manusia secara aman dan berkelanjutan: Sebuah studi acak, tersamar ganda, dan terkontrol plasebo. *npj Aging and Mechanisms of Disease*, 3, 17. https://doi.org/10.1038/s41514-017-0016-9
[6] Yi, L., Maier, A. B., Tao, R., Lin, Z., Vaidya, A., Pendse, S., Thasma, S., Andhalkar, N., Avhad, G., & Kumbhar, V. (2022). Efektivitas dan keamanan suplementasi β-nikotinamida mononukleotida (NMN) pada orang dewasa paruh baya yang sehat: Uji klinis acak, multisenter, tersamar ganda, terkontrol plasebo, kelompok paralel, dan bergantung pada dosis. *GeroScience*, 45, 29–43. https://doi.org/10.1007/s11357-022-00705-1
[7] Simon, K. E., Russell, K., Mondino, A., Yang, C.-C., Case, B. C., Anderson, Z., Whitley, C., Griffith, E., Gruen, M. E., & Olby, N. J. (2024). Sebuah uji klinis acak terkontrol menunjukkan peningkatan fungsi kognitif yang dinilai oleh pemilik pada anjing lanjut usia yang menerima kombinasi senolitik dan prekursor NAD+. *Scientific Reports*, 14, 12399. https://doi.org/10.1038/s41598-024-63031-w