NAD+ sa stalo dôležitou oblasťou výskumu dlhovekosti kvôli svojim súvislostiam s bunkovým starnutím, metabolizmom a výsledkami dĺžky života zistenými na zvieracích modeloch. Časť tohto výskumu má významný vedecký význam, najmä na mechanistickej a predklinickej úrovni. Dôkazy naznačujúce, že NAD+ ovplyvňuje dráhy spojené so starnutím u zvierat, však nie sú to isté ako dôkazy, že suplementácia NAD+ zvracia starnutie u ľudí. V celom článku toto rozlíšenie zachovávame a taktiež rozoberáme, ako pôst zapadá do biológie NAD+, pretože pôst a obmedzenie príjmu kalórií patria medzi najlepšie opísané metabolické stavy spojené so zmenami v dráhach závislých od NAD+.
Prečo hladina NAD+ s vekom klesá?
Vekovo podmienený pokles hladiny NAD+ je jedným z najkonzistentnejšie uvádzaných zistení v tejto oblasti výskumu. Nižšie hladiny NAD+ sa pozorovali v krvi a mnohých tkanivách s postupujúcim vekom na zvieracích modeloch a čoraz častejšie aj v štúdiách na ľuďoch [1]. K tomuto poklesu môže prispievať niekoľko vzájomne prepojených mechanizmov.
Jeden z navrhovaných mechanizmov zahŕňa zvýšenú spotrebu NAD+ prostredníctvom CD38. CD38 je enzým, ktorý rozkladá NAD+, a zdá sa, že jeho aktivita s vekom rastie. To môže byť čiastočne spôsobené hromadením senescentných buniek, ktoré sa prestali deliť, ale zostávajú metabolicky aktívne a môžu prispievať k zápalovej signálnej dráhe, ako aj nárastom počtu imunitných buniek exprimujúcich CD38.
Výskum na myšiach bez génu CD38 ukázal, že aktivita CD38 významne prispieva k strate NAD+ súvisiacej s vekom a k s ňou spojeným poruchám mitochondriálnych funkcií. Zdá sa, že tieto účinky zahŕňajú, aspoň čiastočne, dráhy spojené s mitochondriálnym enzýmom SIRT3 závislým od NAD+ [2].
Druhý mechanizmus súvisí s kumulujúcim sa poškodením DNA a zvýšenou spotrebou NAD+ enzýmami PARP. Poškodenie DNA časom narastá a proteíny PARP sa zúčastňujú na oprave DNA, pričom využívajú NAD+ ako substrát. Väčšia a dlhšie trvajúca reparačná aktivita tak môže zvyšovať spotrebu NAD+ [1].
K tomuto procesu môžu prispievať aj vekom podmienené zmeny v syntéze NAD+. Niektoré štúdie naznačujú, že aktivita dráhy spätného získavania NAD+, vrátane dráh regulovaných enzýmom NAMPT, sa môže s vekom v niektorých tkanivách znižovať. Ak je to tak, dostupnosť NAD+ môže byť obmedzovaná z dvoch strán: väčšou spotrebou a slabšou regeneráciou [1].
Tieto mechanizmy spoločne opisujú biologickú situáciu, v ktorej starnúce bunky môžu produkovať alebo získavať NAD+ menej efektivne a zároveň ho viac spotrebúvať. Takáto kombinácia môže čiastočne vysvetľovať postupný pokles hladiny NAD+ pozorovaný s vekom.
Môže suplementácia NAD+ skutočne „zvrátiť” niektoré markery starnutia?
Termín „odvracanie starnutia” by sa mal oddeliť od konkrétnejších a merateľnejších výsledkov výskumu.
Široko chápané spomalenie či zvrátenie starnutia, teda biologické omladenie človeka vo viacerých orgánových systémoch a procesoch súvisiacich so starnutím, nebolo preukázané v kontrolovaných klinických štúdiách na ľuďoch. Žiadna publikovaná štúdia na ľuďoch nepreukázala, že suplementácia NAD+ zvráti starnutie ako celotelový jav.
Výskum zameraný na jednotlivé biomarkery a biologické procesy súvisiace so starnutím je zložitejší.
Výskum na zvieratách poskytol dôležité výsledky. V jednej vplyvnej štúdii na myšiach zvyšoval nikotínamidribozid hladinu NAD+ a aktivoval mitochondriálnu odpoveď na nesprávne zložené bielkoviny, čo je bunková dráha odpovede na stres. Liečba bola spojená aj so zlepšením funkcie mitochondrií a svalových kmeňových buniek, ako aj s predĺžením života liečených zvierat [3].
Tieto výsledky výrazne zvýšili záujem o prekurzory NAD+ v biológii starnutia. Pochádzajú však zo zvieracieho modelu. Takéto predĺženie života sa u ľudí nepreukázalo a štúdie využívajúce dĺžku ľudského života ako primárny ukazovateľ by si vyžadovali veľmi dlhé obdobia pozorovania.
Skoré štúdie na ľuďoch analyzovali konkrétnejšie biologické a klinické parametre. V štúdii I. fázy zahŕňajúcej osoby s Parkinsonovou chorobou, perorálny nikotínamid ribozid zvyšoval hladinu NAD+ v mozgu a bol spojený s malými klinickými zmenami a zmenami biomarkerov súvisiacich so zápalom a chorobnými procesmi [4].
Predstavuje to skorý signál z výskumu na ľuďoch v konkrétnej populácii s ochorením. Nemalo by sa to však interpretovať ako dôkaz celkového protistarnúceho účinku u zdravých jedincov. Išlo o štúdiu včasnej fázy, zameranú predovšetkým na bezpečnosť, realizovateľnosť, biologickú aktivitu a prieskumné klinické výsledky, a nie na preukázanie toho, že NR modifikuje proces starnutia alebo lieči ochorenie.
Najprespektívnejšie zhrnutie teda znie tak, že dopĺňanie NAD+ ovplyvňovalo viacero molekulárnych a bunkových procesov spojených so starnutím na zvieracích modeloch, zatiaľ čo skoré štúdie na ľuďoch preukázali biologické účinky v určitých situáciách. Široko chápané zrátenie starnutia u ľudí nebolo potvrdené.
Pôst a NAD+: o čom je vlastne tento vzťah?
Vzťah medzi pôstom a NAD+ má biologicky uveriteľné a pomerne dobre charakterizované mechanistické základy.
Jednou z dôležitých dráh je AMPK, teda proteínkináza aktivovaná AMP. AMPK funguje ako bunkový energetický senzor a stáva sa aktívnejšou, keď dostupnosť energie v bunke klesá, okrem iného počas hladovania a kalorického obmedzenia.
Aktivácia AMPK môže ovplyvniť NAMPT, dôležitý enzým záchrannej dráhy NAD+. Zvýšená aktivita NAMPT môže prispievať k zmenám v dostupnosti NAD+ a pomere NAD+/NADH, čo zase môže ovplyvniť enzýmy závislé od NAD+, ako je napríklad SIRT1 [1].
Vytvára to prepojenú metabolickú dráhu zahŕňajúcu bunkový energetický stav, AMPK signálnu dráhu, obnovu NAD+ a aktivitu sirtuínov. Štúdie na zvieratách týkajúce sa obmedzenia príjmu kalórií ukázali, že tieto metabolické adaptácie môžu pomôcť zachovať alebo modifikovať dráhy spojené s NAD+, ktoré sa inak s vekom menia [1].
Tento vzťah má teda silnejší mechanistický základ než mnohé zovšeobecnené tvrdenia, že určitý prvok životného štýlu „zvyšuje NAD+”.
Pri prenášaní týchto výsledkov na ľudí však zostávajú značné neistoty. Veľká časť podrobných mechanistických štúdií sa uskutočnila na zvieratách alebo bunkových modeloch. Štúdie na ľuďoch, ktoré priamo merajú zmeny NAD+ v krvi alebo tkanivách pred a po dôkladne kontrolovaných protokoloch hladovania, zostávajú obmedzené.
V dôsledku toho súčasné údaje neumožňujú určiť presnú dĺžku pôstu, jeho frekvenciu ani stupeň obmedzenia kalórií, ktoré by opakovane spôsobovali určitý nárast NAD+ u ľudí. Smer biologickej závislosti je pomerne dobre podložený, ale veľkosť, načasovanie a klinický význam tohto účinku u ľudí sú definované menej jasne.
Sirtuíny, reštrikcia kalórií a NAD+ — ako spolu súvisia?
Sirtuíny predstavujú dôležité mechanistické prepojenie medzi obmedzením kalórií, hladovaním a metabolizmom NAD+.
Sirtuíny vyžadujú NAD+ ako substrát. Keďže hladovanie a obmedzenie príjmu kalórií môžu meniť bunkové mechanizmy snímania energie a pomer NAD+/NADH prostredníctvom dráh zahŕňajúcich AMPK a NAMPT, tieto metabolické stavy môžu ovplyvňovať aj aktivitu sirtuínov [1].
Táto závislosť je jedným z dôvodov, prečo sa sirtuíny intenzívne skúmali v biológii obmedzenia kalórií. V mnohých zvieracích modeloch sa obmedzenie kalórií spájalo s dlhším životom alebo oddialeným vývojom niektorých zmen súvisiacich s vekom. Sirtuíny sa analyzovali ako jedna z možných skupín mediátorov spájajúcich zmenenú dostupnosť živín s následným vplyvom na mitochondriálne funkcie, odolnosť voči stresu, metabolizmus a reguláciu génov.
Konceptuálne sa táto závislosť dá zhrnúť takto: obmedzenie kalórií ovplyvňuje metabolizmus spojený s NAD+, čo zase môže pôsobiť na aktivitu sirtuínov závislú od NAD+. Túto dráhu by však nemalo interpretovať ako jednoduchý lineárny sled, v ktorom jedna intervencia automaticky reprodukuje všetky následné účinky inej.
Suplementácia prekurzormi NAD+ môže za určitých podmienok zvyšovať dostupnosť substrátov spojených s NAD+, ale to neznamená, že obnovuje celý fyziologický stav spojený s hladovaním alebo obmedzením príjmu kalórií.
Pôst vyvoláva široké metabolické a hormonálne zmeny zahŕňajúce inzulín, glukagón, metabolizmus mastných kyselín, tvorbu ketolátok, AMPK, signalizáciu mTOR, detekciu živín a ďalšie dráhy. Zvýšenie NAD+ prostredníctvom doplnkov výživy ovplyvňuje iba časť tejto širšej biologickej siete.
Z tohto dôvodu by sa suplementácia prekurzormi NAD+ a pôst nemali považovať za zameniteľné stratégie. Ich mechanizmy sa čiastočne prekrývajú, ale nie sú biologicky rovnocenné.
Ako vychádza NAD+ v porovnaní s inými zlúčeninami propagovanými v kontexte dlhovekosti?
Prekurzory NAD+ patria do viacerých skupín zlúčenín často diskutovaných v sérii výskumov o starnutí a dlhovekosti. Ďalšími sú resveratrol, pterostilbén, metformín a rapamycín, hoci tieto látky pôsobia prostredníctvom rôznych biologických dráh a majú veľmi odlišné dôkazové základy a regulačný kontext.
Resveratrol a pterostilbén sa často spomínajú spolu s prekurzormi NAD+, pretože všetky tieto látky sa skúmali v kontexte biológie sirtuínov. NAD+ sa vyžaduje ako substrát pre sirtuíny, zatiaľ čo resveratrol a príbuzné zlúčeniny sa skúmali pre ich možný vplyv na signalizáciu súvisiacu so sirtuínmi.
Toto mechanistické prekrývanie sa dráh prispelo k záujmu o kombinácie prekurzorov NAD+ s príbuznými polyfenolmi. Jedným z príkladov je kombinácia nikotínamid ribozidu s pterostilbénerom, ktorá sa analyzovala v štúdiách na ľuďoch [5]. Samotná existencia mechanistického odôvodnenia alebo štúdie kombinácie však dokazuje, že takéto kombinácie predlžujú život alebo poskytujú širšie účinky proti starnutiu u ľudí.
Iné zlúčeniny bežne spájané s výskumom dlhovekosti ovplyvňujú čiastočne iné dráhy. Metformín sa často diskutuje v kontexte AMPK a metabolickej signalizácie, zatiaľ čo rapamycín pôsobí najmä prostredníctvom inhibície mTOR. Tieto dráhy sa môžu križovať s biológiou NAD+ a sirtuínov, ale nemali by sa považovať za zameniteľné mechanizmy.
V porovnaní s mnohými zlúčeninami diskutovanými v komerčnom kontexte dlhovekosti, perorálne prekursory NAD+, ako sú NR a NMN, zhromaždili rastúci základ randomizovaných, placebo kontrolovaných štúdií na ľuďoch, ktoré naznačujú, že môžu zvyšovať hladinu NAD+ alebo metabolitov súvisiacich s NAD+ v krvi a sú vo všeobecnosti dobre tolerované počas skúmaných krátkodobých a strednodobých období [6].
Dôkazy, že tieto zlúčeniny zvyšujú hladiny biomarkera NAD+, však nie sú rovnocenné s dôkazmi, že predlžujú život, zabraňujú starnutiu alebo poskytujú široké účinky proti starnutiu u ľudí.
Samotné toto rozlíšenie sa týka aj iných zlúčenín spájaných s dlhovekosťou. Žiadnu z tu diskutovaných látok by sme nemali opisovať tak, že na základe súčasných dostupných klinických štúdií definitívne preukázala predĺženie ľudského života.
Samostatnou oblasťou výskumu sú spoločenské zvieratá. V jednej randomizovanej kontrolovanej štúdii sa hodnotila kombinácia nového prekuzora NAD+ a senolytickej zlúčeniny u starších psov s miernymi až stredne závažnými kognitívnymi poruchami. V štúdii sa preukázala štatisticky významná súvislosť so zlepšením kognitívnych funkcií hodnotených majiteľmi v primárnom hodnotiacom ukazovateli, ako aj širšie zmeny v parametroch, ako sú krehkosť, aktivita and háslená úroveň spokojnosti, ktoré boli štatisticky menej jednoznačné [7].
Tento výsledok má translačný význam, pretože pomerne málo kontrolovaných štúdií hodnotilo intervencie súvisiace s NAD+ špecificky u starnúcich spoločenských zvierat. Išlo však o ojedinelú štúdiu, ktorá využívala kombinovanú intervenciu a nie samotný NAD+, pričom zlepšenie sa zaznamenalo vo všetkých liečených skupinách. Výskumníci preto naznačili možnosť, že časť uvádzaných zmien mohla byť ovplyvnená účinkami podobnými placebu, očakávaniami majiteľov, zvýšenou pozornosťou alebo samotnou účasťou na štúdii.
Čo možno realisticky očakávať a čo nie?
Na základe súčasných dôkazov možno niekoľko záverov považovať za pomerne dobre podložené.
Hladiny NAD+ sa zdajú byť v dôsledku starnutia znížené vo viacerých tkanivách a biologických stavoch, pričom sa navrhlo niekoľko mechanizmov, ktoré by mohli tento pokles vysvetľovať, vrátane zvýšenej aktivity CD38, väčšej spotreby NAD+ počas opravy DNA a možných zmien v syntéze a v záchranných dráhach NAD+ [1,2].
Pôst a kalorické obmedzenie majú taktiež biologicky dôveryhodný a pomerne dobre podložený vzťah k metabolizmu NAD+ prostredníctvom dráh zahŕňajúcich AMPK, NAMPT, rovnováhu NAD+/NADH a sirtuíny [1].
Štúdie na ľuďoch opakovane ukázali, že perorálne prekurzory NAD+, ako sú NR a NMN, môžu za určitých študijných podmienok zvyšovať hladinu cirkulujúceho NAD+ alebo príbuzných metabolitov [6].
Štúdie na zvieratách taktiež preukázali zmeny vo fungovaní mitochondrií, aktivite kmeňových buniek, bunkových odpovediach na stres a dĺžke života po podaní prekurzorov NAD+ v špecifických modeloch [3]. Skoré štúdie na ľuďoch identifikovali zmeny v biomarkeroch NAD+ a exploračných klinických parametroch v určitých populáciách s ochoreniami [4].
Tieto výsledky nedokazujú, že suplementácia NAD+ u ľudí zvráti starnutie.
Všeobecné údaje taktiež nepreukazujú, že suplementácia prekurzormi NAD+ predlžuje ľudský život ani že obnovuje všetky fyziologické účinky hladovania alebo obmedzenia príjmu kalórií.
Podobne zvýšenie biomarkera spojeného s biológiou starnutia samo osebe nedokazuje zlepšenie zdravého dožitia, zníženie biologického veku, spomalenie starnutia ani predĺženie prežitia.
Táto oblasť zostáva aktívnym a dôležitým smerom výskumu, ale v súčasnosti najsilniejsze dôkazy sa týkajú mechanizmov, zmien biomarkerov a vybraných experimentálnych výsledkov, a nie širokého protistarnúceho účinku u ľudí.
Obmedzenia súčasných dôkazov
- Najsilniejsze výsledky spájajúce dopĺňanie NAD+ s predĺžením života, zlepšením mitochondriálnych funkcií a zmenami v biológii starnutia pochádzajú najmä z výskumov na zvieratách, obzvlášť z myšacích modelov. Štúdie na ľuďoch preukázali zmeny biomarkerov a údaje o bezpečnosti v krátkodobom a strednodobom horizonte, ale nepotvrdili predĺženie života ani komplexný účinok proti starnutiu [3].
- Výsledky týkajúce sa dĺžky života zvierat sa nedajú automaticky prenášať na ľudí, pretože druhy sa líšia metabolizmom, dĺžkou života, vývojom chorôb, biológiou NAD+, dávkovaním a experimentálnymi podmienkami.
- Vzťah medzi pôstom, obmedzením príjmu kalórií a metabolizmom NAD+ má mechanistickú oporu, ale presná závislosť medzi dávkou a odpoveďou u ľudí zostáva slabo definovaná. Zatiaľ nie je známe, aký dlhý a aký častý pôst ani aký stupeň obmedzenia kalórií by bol potrebný na vyvolanie určitej zmeny hladiny NAD+ u ľudí [1].
- Výskum na ľuďoch priamo merajúci NAD+ v konkrétnych tkanivách pred a po štandardizovaných protokoloch hladovania zostáva obmedzený, preto by sa mechanistické záruky nemali premieňať na presné odporúčania týkajúce sa hladovania.
- Dôkazy z výskumov na ľuďoch týkajúce sa prekurzorov NAD+ pri špecifických ochoreaniach, vrátane Parkinsonovej choroby, zostávajú v počiatočnom štádiu a nemali by sa interpretovať ako dôkaz širokého účinku proti starnutiu alebo modifikujúceho priebeh ochorenia [4].
- Zvýšenie hladiny NAD+ alebo súvisiacich biomarkerov automaticky neznamená zlepšenie biologického veku, zdravého dožitia, dĺžky života, fyzickej zdatnosti, kognitívnych funkcií ani rizika ochorení.
- Suplementáciu prekurzormi NAD+ by sa nemalo považovať za biologicky rovnocennú s pôstom alebo obmedzením príjmu kalórií, pretože pôstom sa vyvoláva množstvo metabolických, hormonálnych a signálnych zmien presahujúcich rámec metabolizmu NAD+.
- Dôkazy týkajúce sa kombinácií, ako je NR s pterostilbénom, nepotvrdzujú, že prekurzory NAD+ skombinované s resveratrolom alebo inými zlúčeninami spájanými s dlhovekosťou poskytujú aditívne alebo silnejšie účinky proti starnutiu [5].
- Porovnania s metformínom, rapamycínom, resveratrolom alebo inými zlúčeninami spájanými s dlhovekosťou majú mechanistický charakter a nepredstavujú dôkaz, že tieto intervencie poskytujú rovnocenné alebo vzájomne zameniteľné účinky.
- Preberaná štúdia o kognitívnych funkciách u psov je jedinou kontrolovanou štúdiou využívajúcou kombinovanú intervenciu, a nie samotný NAD+. Zlepšenie sa zaznamenalo aj v rôznych liečebných skupinách, čo komplikuje interpretáciu špecifického účinku intervencie [7].
- Dlhodobé údaje o bezpečnosti a klinických výsledkoch u ľudí zostávajú výrazne obmedzenejšie ako krátkodobé štúdie biomarkerov, najmä keď sa prekurzory NAD+ používajú roky, a nie týždne alebo mesiace.
Zrieknutie sa zodpovednosti
Článok má výlučne vzdelávací charakter a zhrnutie vedeckých výskumov. Nepredstavuje lekársku radu pre ľudí ani veterinárnu radu pre zvieratá.
NAD+, prekursory NAD+, pôst, obmedzenie kalórií, resveratrol, pterostilbén, metformín, rapamycín ani iné zlúčeniny diskutované v kontexte dlhovekosti by sa nemali interpretovať ako overené metódy na zvrátenie starnutia, predĺženie ľudského života, prevenciu chorôb alebo liečbu ochorení, pokiaľ neexistuje konkrétna schválená indikácia a príslušné klinické dôkazy.
NAD+ a jeho prekursory by sa nemali prezentovať ako metódy liečby starnutia schválené úradmi FDA alebo EMA, ani ako terapie, pri ktorých sa preukázalo predĺženie ľudského života.
Pôst a obmedzenie príjmu kalórií nie sú vhodné pre každého a u niektorých ľudí môžu predstavovať dodatočné riziká. Tehotné alebo dojčiace ženy, osoby s cukrzycou, osoby užívajúce lieky na zníženie hladiny glukózy, osoby s poruchami príjmu potravy v anamnéze, s podváhou, niektorými chronickými ochoreniami alebo užívajúce lieky, ktorých účinok závisí od príjmu potravy, by mali prediskutovať pôst alebo výrazné obmedzenie kalórií s kvalifikovaným zdravotníckym pracovníkom.
Pred začatím užívania nového doplnku výživy, pôstneho režimu, lieku alebo iného zásahu, ktorý má ovplyvniť procesy súvisiace so starnutím, sa poraďte s kvalifikovaným zdravotníckym pracovníkom. Otázky týkajúce sa domácich zvierat konzultujte s kvalifikovaným veterinárnym lekárom.
Odkazy
[1] Covarrubias, A. J., Perrone, R., Grozio, A., & Verdin, E. (2021). NAD+ metabolism and its roles in cellular processes during ageing. *Nature Reviews Molecular Cell Biology*, 22(2), 119–141. https://doi.org/10.1038/s41580-020-00313-x
[2] Camacho-Pereira, J., Tarragó, M. G., Chini, C. C. S., Nin, V., Escande, C., Warner, G. M., Puranik, A. S., Schoon, R. A., Reid, J. M., Galina, A., & Chini, E. N. (2016). CD38 dictates age-related NAD decline and mitochondrial dysfunction through a SIRT3-dependent mechanism. *Cell Metabolism*, 23(6), 1127–1139. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2016.05.006
[3] Zhang, H., Ryu, D., Wu, Y., Gariani, K., Wang, X., Luan, P., D’Amico, D., Ropelle, E. R., Lutolf, M. P., Aebersold, R., Schoonjans, K., Menzies, K. J., & Auwerx, J. (2016). NAD+ repletion improves mitochondrial and stem cell function and enhances life span in mice. *Science*, 352(6292), 1436–1443. https://doi.org/10.1126/science.aaf2693
[4] Brakedal, B., Dölle, C., Riemer, F., Ma, Y., Nido, G. S., Skeie, G. O., Craven, A. R., Schwarzlmüller, T., Brekke, N., Diab, J., Sverkeli, L., Skjeie, V., Varhaug, K., Tysnes, O.-B., Peng, S., Haugarvoll, K., Ziegler, M., Grüner, R., Eidelberg, D., & Tzoulis, C. (2022). The NADPARK study: A randomized phase I trial of nicotinamide riboside supplementation in Parkinson’s disease. *Cell Metabolism*, 34(3), 396–407.e6. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2022.02.001
[5] Dellinger, R. W., Santos, S. R., Morris, M., Evans, M., Alminana, D., Guarente, L., & Marcotulli, E. (2017). Opakovaná dávka NRPT (nikotínamid ribozid a pterostilbén) bezpečne a udržateľne zvyšuje hladiny NAD+ u ľudí: Randomizovaná, dvojito zaslepená štúdia kontrolovaná placebom. *npj Aging and Mechanisms of Disease*, 3, 17. https://doi.org/10.1038/s41514-017-0016-9
[6] Yi, L., Maier, A. B., Tao, R., Lin, Z., Vaidya, A., Pendse, S., Thasma, S., Andhalkar, N., Avhad, G., & Kumbhar, V. (2022). Účinnosť a bezpečnosť užívania doplnkov β-nikotínamid mononukleotidu (NMN) u zdravých ľudí v strednom veku: Randomizovaná, multicentrická, dvojito zaslepená, placebo kontrolovaná, paralelne usporiadaná klinická štúdia závislá od dávky. *GeroScience*, 45, 29–43. https://doi.org/10.1007/s11357-022-00705-1
[7] Simon, K. E., Russell, K., Mondino, A., Yang, C.-C., Case, B. C., Anderson, Z., Whitley, C., Griffith, E., Gruen, M. E., & Olby, N. J. (2024). A randomized, controlled clinical trial demonstrates improved owner-assessed cognitive function in senior dogs receiving a senolytic and NAD+ precursor combination. *Scientific Reports*, 14, 12399. https://doi.org/10.1038/s41598-024-63031-w