NAD+ ir kļuvis par nozīmīgu ilgmūžības pētniecības jomu, pateicoties tā saistībai ar šūnu novecošanos, metabolismu un dzīves ilguma rādītājiem, kas novēroti dzīvnieku modeļos. Daļai šo pētījumu ir liela zinātniskā nozīme, jo īpaši mehāniskā un preklīniskā līmenī. Tomēr pierādījumi tam, ka NAD+ ietekmē ar novecošanos saistītos ceļus dzīvniekiem, nav tas pats, kas pierādījumi tam, ka NAD+ uztura bagātinātāji aptur vai atgriež atpakaļ novecošanos cilvēkiem. Visā rakstā mēs saglabājam šo nošķiršanu, kā arī apspriežam, kā gavēnis iekļaujas NAD+ bioloģijā, jo gavēnis un kaloriju ierobežošana ir vieni no vislabāk raksturotajiem metaboliskajiem stāvokļiem, kas saistīti ar izmaiņām no NAD+ atkarīgajos ceļos.
Kāpēc NAD+ līmenis samazinās līdz ar vecumu?
Ar vecumu saistītais NAD+ līmeņa kritums ir viens no konsekventāk ziņotajiem rezultātiem šajā pētniecības jomā. Zemāks NAD+ līmenis ir novērots asinīs un daudzos audos līdz ar progresējošu vecumu dzīvnieku modeļos un arvien biežāk arī pētījumos ar cilvēkiem [1]. Šim kritumam var veicināt vairāki savstarpēji saistīti mehānismi.
Viens no ierosinātajiem mehānismiem ietver palielinātu NAD+ patēriņu, ko veic CD38. CD38 ir enzīms, kas noārda NAD+, un tā aktivitāte, šķiet, palielinās līdz ar vecumu. Tas daļēji varētu būt saistīts ar senescento jeb novecojušo šūnu uzkrāšanos, kuras ir pārstājušas dalīties, bet paliek metaboliski aktīvas un var veicināt iekaisuma signālu pārraidi, kā arī ar to imūnšūnu skaita pieaugumu, kuras uzrāda CD38 ekspresiju.
Pētījumi ar pelēm, kurām trūkst CD38 gēna, ir parādījuši, ka CD38 aktivitāte būtiski veicina ar vecumu saistīto NAD+ zudumu un tam pavadošos mitohondriju funkciju traucējumus. Šie efekti, šķiet, vismaz daļēji ietver ceļus, kas saistīti ar no NAD+ atkarīgo mitohondriju enzīmu SIRT3 [2].
Otrais mehānisms ir saistīts ar uzkrāto DNS bojājumu un palielinātu NAD+ patēriņu, ko veic PARP enzīmi. DNS bojājumi laika gaitā uzkrājas, un PARP olbaltumvielas piedalās DNS labošanā, izmantojot NAD+ kā substrātu. Līdz ar to lielāka un ilgstošāka labošanas aktivitāte var palielināt NAD+ patēriņu [1].
Šim procesam var veicināt arī ar vecumu saistītās izmaiņas NAD+ sintēzē. Daži pētījumi liecina, ka NAD+ glābšanas ceļa aktivitāte, tostarp ceļu, ko regulē NAMPT enzīms, var samazināties ar vecumu dažos audos. Ja tā notiek, NAD+ pieejamību var ierobežot no divām pusēm: ar lielāku patēriņu un vājāku regenerāciju [1].
Kopumā šie mehānismi raksturo bioloģisko situāciju, kurā novecojošās šūnas var mazāk efektīvi ražot vai atgūt NAD+, vienlaikus patērējot to vairāk. Šāda kombinācija var daļēji izskaidrot pakāpenisko NAD+ līmeņa kritumu, kas novērojams līdz ar vecumu.
Vai NAD+ piedevas patiešām var „atgriezt atpakaļ” dažus novecošanās marķierus?
Termins „novecošanās atgriešana” ir jānošķir no konkrētākiem un izmērāmākiem pētījumu rezultātiem.
Plaši saprotama novecošanas inversija jeb cilvēka bioloģiskā atjaunošanās daudzās orgānu sistēmās un ar novecošanu saistītos procesos nav pierādīta kontrolētos klīniskajos pētījumos ar cilvēkiem. Neviens publicēts pētījums, kurā piedalījušies cilvēki, nav pierādījis, ka NAD+ piedevu lietošana inversē novecošanu kā parādību, kas aptver visu organismu.
Pētījumi par atsevišķiem biomarkeriem un bioloģiskiem procesiem, kas saistīti ar novecošanu, ir sarežģītāki.
Pētījumi ar dzīvniekiem sniedza nozīmīgus rezultātus. Vienā ietekmīgā pētījumā ar pelēm nikotīnamīda ribozīds paaugstināja NAD+ līmeni un aktivizēja mitohondriālo atbildes reakciju uz nepareizi salocītiem olbaltumumiem jeb šūnu stresa atbildes ceļu. Ārstēšana bija saistīta arī ar mitohondriju un muskuļu cilmes šūnu funkciju uzlabošanos, kā arī ar ārstēto dzīvnieku dzīvildzes pagarināšanos [3].
Šie rezultāti ir ievērojami palielinājuši interesi par NAD+ prekursoriem novecošanas bioloģijā. Tomēr tie ir iegūti no dzīvnieku modeļa. Šāda veida dzīves ilguma pagarināšana nav pierādīta cilvēkiem, un pētījumos, kuros kā galapunkts tiek izmantots cilvēka mūža ilgums, būtu nepieciešami ļoti gari novērošanas periodi.
Agrīnos pētījumos ar cilvēkiem tika analizēti konkrētāki bioloģiskie un klīniskie parametri. I fāzes pētījumā, kurā piedalījās pacienti ar Parkinsona slimību, perorāli lietots nikotīnamīda ribozīds paaugstināja NAD+ līmeni smadzenēs un bija saistīts ar nelielām klīniskām izmaiņām, kā arī ar iekaisumu un slimības procesiem saistītu biomarkeru izmaiņām [4].
Tas ir agrs pētījuma signāls cilvēkiem ar konkrētu slimību populāciju. Tomēr to nevajadzētu interpretēt kā pierādījumu vispārējai pretnovecošanās iedarbībai veseliem cilvēkiem. Tas bija agrīnas fāzes pētījums, kas galvenokārt bija vērsts uz drošību, īstenojamību, bioloģisko aktivitāti un eksploratīvajiem klīniskajiem rezultātiem, nevis uz pierādīšanu, ka NR modificē novecošanas procesu vai izārstē slimību.
Visprecīzākais kopsavilkums ir tāds, ka NAD+ līmeņa paaugstināšana ietekmēja vairākus ar novecošanu saistītus molekulārus un šūnu procesus dzīvnieku modeļos, savukārt agrīnie pētījumi ar cilvēkiem uzrādīja bioloģisku ietekmi noteiktās situācijās. Plašākā nozīmē novecošanās inversija cilvēkiem nav apstiprināta.
Kas patiesībā ir šis savienojums: post un NAD+?
Saiknei starp gavēni un NAD+ ir bioloģiski ticams un salīdzinoši labi raksturots mehānisks pamats.
Viens no svarīgajiem ceļiem ir AMPK jeb AMP aktivētā olbaltumvielu kināze. AMPK darbojas kā šūnu enerģijas sensors un kļūst aktīvāka, kad enerģijas pieejamība šūnā samazinās, cita starpā gavēņa un kaloriju ierobežošanas laikā.
AMPK aktivācija var ietekmēt NAMPT, kas ir svarīgs NAD+ glābšanas ceļa enzīms. Paaugstināta NAMPT aktivitāte var veicināt izmaiņas NAD+ pieejamībā un NAD+/NADH attiecībā, kas savukārt var ietekmēt no NAD+ atkarīgos enzīmus, piemēram, SIRT1 [1].
Tas veido savstarpēji saistītu metabolisko ceļu, kas ietver šūnas enerģētisko stāvokli, AMPK signālu pārvadu, NAD+ atjaunošanos un sirtuīnu aktivitāti. Pētījumi ar dzīvniekiem par kaloriju ierobežošanu ir parādījuši, ka šīs metaboliskās adaptācijas var palīdzēt saglabāt vai modificēt ar NAD+ saistītos ceļus, kas pretējā gadījumā mainās vecuma gaitā [1].
Šai sakarībai tāpēc ir spēcīgāks mehānisks pamats nekā daudziem vispārinātiem apgalvojumiem, ka noteikts dzīvesveida elements „palielina NAD+”.
Tomēr, pārnesot šos rezultātus uz cilvēkiem, saglabājas būtiska nenoteiktība. Liela daļa detalizēto mehānisko pētījumu ir veikta ar dzīvniekiem vai šūnu modeļos. Pētījumi ar cilvēkiem, kuros tieši mēra NAD+ izmaiņas asinīs vai audos pirms un pēc rūpīgi kontrolētiem gavēņa protokoliem, joprojām ir ierobežoti.
Tā rezultātā pašreizējie dati neļauj noteikt precīzu gavēņa ilgumu, tā biežumu vai kaloriju ierobežojuma pakāpi, kas cilvēkiem konsekventi izraisītu noteiktu NAD+ līmeņa paaugstināšanos. Bioloģiskās sakarības virziens ir diezgan labi pamatots, taču šī efekta apmērs, laiks un klīniskā nozīme cilvēkiem ir mazāk skaidri noteikta.
Sirtuīni, kaloriju ierobežošana un NAD+ — kā tie ir savstarpēji saistīti?
Sirtuīni ir svarīgs mehānisks savienojums starp kaloriju ierobežošanu, gavēni un NAD+ metabolismu.
Sirtuīniem ir nepieciešams NAD+ kā substrāts. Tā kā gavēnis un kaloriju ierobežošana var mainīt šūnu enerģijas noteikšanas mehānismus un NAD+/NADH attiecību, izmantojot ceļus, kuros iesaistīts AMPK un NAMPT, šie metaboliskie stāvokļi var ietekmēt arī sirtuīnu aktivitāti [1].
Šī saistība ir viens ᵢno iemesliem, kāpēc sirtuīni ir tikuši intensīvi pētīti kaloriju ierobežošanas bioloģijā. Daudzos dzīvnieku modeļos kaloriju ierobežošana ir saistīta ar ilgāku mūžu vai dažu ar vecumu saistītu izmaiņu attīstības aizkavēšanos. Sirtuīni tika analizēti kā viena no iespējamām mediatoru grupām, kas savieno izmainīto uzturvielu pieejamību ar turpmāko ietekmi uz mitohondriju funkcijām, izturību pret stresu, metabolismu un gēnu regulāciju.
Konceptuāli šo sakarību var apkopot šādi: kaloriju ierobežojums ietekmē ar NAD+ saistīto metabolismu, kas savukārt var ietekmēt no NAD+ atkarīgo sirtuīnu aktivitāti. Tomēr šo ceļu nevajadzētu interpretēt kā vienkāršu lineāru secību, kurā viena intervence automātiski atveido visus citas intervences turpmākos efektus.
NAD+ prekursoru suplementācija noteiktos apstākļos var palielināt ar NAD+ saistītu substrātu pieejamību, taču tas nenozīmē, ka tā atjauno visu fizioloģisko stāvokli, kas saistīts ar gavēni vai kaloriju ierobežošanu.
Badošanās izraisa plašas metaboliskas un hormonālas izmaiņas, kas ietver insulīnu, glikagonu, taukskābju metabolismu, ketonvielu veidošanos, AMPK, mTOR signālu ceļus, barības vielu noteikšanu un citus ceļus. NAD+ palielināšana ar uztura bagātinātāju palīdzību ietekmē tikai daļu no šī plašākā bioloģiskā tīkla.
Šī iemesla dēļ NAD+ prekursoru lietošanu un gavēni nevajadzētu uzskatīt par aizvietojamām stratēģijām. To mehānismi daļēji pārklājas, taču tie nav bioloģiski ekvivalenti.
Kā NAD+ izskatās salīdzinājumā ar citiem savienojumiem, kas tiek virzīti ilgmūžības kontekstā?
NAD+ prekursoru pieder pie vairākām savienojumu grupām, kuras bieži tiek apspriestas novecošanas un ilgmūžības pētījumos. Citas ir resveratrols, pterostilbēns, metformīns un rapamicīns, lai gan šīs vielas iedarbojas caur dažādiem bioloģiskiem ceļiem un tām ir ļoti atšķirīgs pierādījumu pamats un regulējuma konteksts.
Resveratrols un pterostilbēns bieži tiek apspriesti kopā ar NAD+ prekursoriem, jo visi šie savienojumi ir pētīti sirtuīnu bioloģijas kontekstā. NAD+ ir nepieciešams kā substrāts sirtuīniem, savukārt resveratrols un radniecīgie savienojumi ir pētīti saistībā ar to iespējamo ietekmi uz sirtuīnu signālceļiem.
Šī mehāniskā ceļu pārklāšanās ir veicinājusi interesi par NAD+ prekursoru kombinācijām ar saistītiem polifenoliem. Viens no piemēriem ir nikotīnamīda ribozīda un pterostilbēna kombinācija, kas tika analizēta pētījumos ar cilvēkiem [5]. Tomēr pati mehāniskā pamatojuma vai kombinācijas pētījuma esamība nepierāda, ka šādas kombinācijas pagarina mūžu vai nodrošina plašāku pretnovecošanās iedarbību cilvēkiem.
Citi savienojumi, ko parasti saista ar ilgmūžības pētījumiem, daļēji ietekmē citus ceļus. Metformīnu bieži apspriež AMPK un metabolās signālu pārneses kontekstā, savukārt rapamicīns darbojas galvenokārt, inhibējot mTOR. Šie ceļi var krustoties ar NAD+ bioloģiju un sirtuīniem, taču tos nevajadzētu uzskatīt par savstarpēji aizvietojamiem mehānismiem.
Salīdzinājumā ar daudziem savienojumiem, kas tiek apspriesti komerciālajā ilgmūžības kontekstā, perorālie NAD+ prekursoru savienojumi, piemēram, NR un NMN, ir uzkrājuši pieaugošu randomizētu, placebo kontrolētu pētījumu bāzi ar cilvēkiem, kas liecina, ka tie var paaugstināt NAD+ līmeni vai ar NAD+ saistītos metabolītus asinīs un kopumā ir labi tolerēti pētītajos īstermiņa un vidēja termiņa periodos [6].
Tomēr pierādījumi tam, ka šie savienojumi palielina NAD+ biomarkerus, nav pielīdzināmi pierādījumiem, ka tie pagarina dzīvi, novērš novecošanos vai nodrošina plašu pretnovecošanās iedarbību cilvēkiem.
Tas pats dalījums attiecas uz citiem ar ilgmūžību saistītiem savienojumiem. Nevienu no šeit apskatītajām vielām nevajadzētu raksturot kā tādu, kas, pamatojoties uz pašlaik pieejamajiem klīniskajiem pētījumiem, būtu galīgi pierādījusi cilvēka dzīves ilguma pagarināšanu.
Atsevišķa pētījumu joma ir mājdzīvnieki. Vienā randomizētā, kontrolētā pētījumā tika novērtēta jauna NAD+ prekuzora un senolītiska savienojuma kombinācija vecākiem suņiem ar viegliem līdz mēreniem cognitatīviem traucējumiem. Pētījumā tika uzrādīta statistiski nozīmīga saistība ar kognitīvo funkciju uzlabošanos, ko īpašnieki novērtēja galvenajā mērķa kritērijā, kā arī plašākām izmaiņām tādos parametros kā trauslums, aktivitāte un ziņotais apmierinātības līmenis, kas bija mazāk statistiski viennozīmīgas [7].
Šim rezultātam ir translācijas nozīme, jo salīdzinoši nedaudzos kontrolētos pētījumos ir novērtētas ar NAD+ saistītas intervences tieši novecojošiem mājdzīvniekiem. Tomēr tas bija viens pētījums, kurā tika izmantota kombinēta intervence, nevis tikai NAD+, un uzlabojumi tika novēroti visās ārstēšanas grupās. Tāpēc pētnieki norādīja uz iespēju, ka daļu no ziņotajām izmaiņām varēja ietekmēt ar placebo līdzīgi efekti, īpašnieku cerības, palielināta uzmanība vai pati dalība pētījumā.
Ko var reāli sagaidīt un ko nē?
Pamatojoties uz pašreizējiem pierādījumiem, vairākus secinājumus var uzskatīt už samērā labi pamatotiem.
Šķiet, ka NAD+ līmenis ar vecumu samazinās daudzos audos un bioloģiskajos apstākļos, un ir ierosināti vairāki mehānismi, kas varētu izskaidrot šo samazināšanos, tostarp palielināta CD38 aktivitāte, lielāks NAD+ patēriņš DNS remonta laikā un iespējamas izmaiņas NAD+ sintēzes un rekuperācijas ceļos [1,2].
Badošanās un kaloriju ierobežošana ir arī bioloģiski ticami un salīdzinoši labi pamatoti saistīta ar NAD+ metabolismu, izmantojot ceļus, kas ietver AMPK, NAMPT, NAD+/NADH līdzsvaru un sirtuīnus [1].
Pētījumi ar cilvēkiem ir vairākkārt parādījuši, ka iekšķīgi lietojami NAD+ prekursorori, piemēram, NR un NMN, noteiktos pētījuma apstākļos var paaugstināt cirkulējošā NAD+ vai ar to saistīto metabolītu līmeni [6].
Pētījumi ar dzīvniekiem ir arī uzrādījuši izmaiņas mitohondriju funkcijā, cilmes šūnu aktivitātē, šūnu atbildes reakcijā uz stresu un dzīves ilgumā pēc NAD+ prekursoru ievadīšanas noteiktos modeļos [3]. Agrīni pētījumi ar cilvēkiem ir identificējuši NAD+ biomarkeru un pētniecisko klīnisko parametru izmaiņas noteiktās slimību populācijās [4].
Šie rezultāti nepierāda, ka NAD+ piedevu lietošana pagarina mūžu vai atgriež atpakaļ novecošanos cilvēkiem.
Pašreizējie dati arī nerāda, ka NAD+ prekursoru lietošana uztura bagātinātājos pagarinātu cilvēka dzīvi vai atjaunotu visus gavēņa vai kaloriju ierobežojuma fizioloģiskos efektus.
Līdzīgi, ar novecošanas bioloģiju saistīta biomarkera palielināšanās pati par sevi nepierāda veselīgas dzīves ilguma uzlabošanos, bioloģiskā vecuma samazināšanos, novecošanas palēnināšanos vai dzīves ilguma pagarināšanos.
Šī joma joprojām ir aktīvs un nozīmīgs zinātnisko pētījumu virziens, taču pašlaik spēcīgākie pierādījumi attiecas uz mehānismiem, biomarķieru izmaiņām un atsevišķiem eksperimentāliem rezultātiem, nevis uz plašu pretnovecošanās iedarbību uz cilvēkiem.
Ierobežojumi pašreizējiem pierādījumiem
- Spēcīgākie rezultāti, kas saista NAD+ papildināšanu ar dzīves ilguma pagarināšanu, mitohondriju funkciju uzlabošanos un izmaiņām novecošanās bioloģijā, galvenokārt nāk no pētījumiem ar dzīvniekiem, jo īpaši no peles modeļiem. Pētījumos ar cilvēkiem ir uzrādītas biomarkeru izmaiņas un drošības dati īstermiņā un vidējā termiņā, taču nav apstiprināta dzīves ilguma pagarināšanās vai visaptveroša pretnovecošanās iedarbība [3].
- Dzīvnieku mūža ilguma rezultātus nevar automātiski attiecināt uz cilvēkiem, jo sugām atšķiras vielmaiņa, dzīves ilgums, slimību attīstība, NAD+ bioloģija, devas un eksperimentālie apstākļi.
- Saiknei starp gavēni, kaloriju ierobežojumu un NAD+ metabolismu ir mehānisks pamatojums, taču precīza devas un atbildes reakcijas attiecība cilvēkiem joprojām ir vāki definēta. Vēl nav zināms, cik ilgam un cik biežam gavēnim vai kādam kaloriju ierobežojuma pakāpeniskumam būtu jābūt, lai cilvēkiem izraisītu noteiktas NAD+ līmeņa izmaiņas [1].
- Pētījumi ar cilvēkiem, kuros tieši mēra NAD+ specifiskajos audos pirms un pēc standartizētiem gavēņa protokoliem, joprojām ir ierobežoti, tāpēc mehānistiskos secinājumus nevajadzētu pārvērst par precīziem ieteikumiem attiecībā uz gavēni.
- Klīnisko pētījumu dati par NAD+ prekursoriem attiecībā uz specifiskām slimībām, tostarp Parkinsona slimību, joprojām ir agrīnā stadijā, un tos nevajadzētu interpretēt kā pierādījumu plašai prevecināšanās vai slimības gaitu modificējošai iedarbībai [4].
- NAD+ līmeņa vai saistīto biomarkeru paaugstināšana automātiski nenozīmē bioloģiskā vecuma, veselīgā mūža ilguma, dzīves ilguma, fiziskās sagatavotības, kognitīvo funkciju vai slimību riska uzlabošanos.
- NAD+ prekursoru piedevu lietošanu nevajadzētu uzskatīt par bioloģiski līdzvērtīgu gavēnim vai kaloriju ierobežošanai, jo gavēnis izraisa daudzas metaboliskas, hormonālas un signālu maiņas, kas pārsniedz NAD+ metabolismu.
- Pierādījumi par tādiem savienojumu kombinācijām kā NR ar pterostilbēnu nepierāda, ka NAD+ prekursoru apvienošana ar resveratrolu vai citiem ar ilgmūžību saistītiem savienojumiem nodrošina piedevas vai spēcīgāku pretnovecošanās iedarbību [5].
- Salīdzinājumi ar metformīnu, rapamicīnu, resveratrolu vai citiem ar ilgmūžību saistītiem savienojumiem ir mehāniski un nav pierādījums tam, ka šie pasākumi sniedz līdzvērtīgus vai savstarpēji aizvietojamus efektus.
- Apspūstais pētījums par suņu cognitatīvajām funkcijām ir viens kontrolēts pētījums, kurā izmantota kombinēta intervence, nevis tikai NAD+. Uzlabojumi tika novēroti arī dažādās ārstēšanas grupās, kas apgrūtina specifiskā intervences efekta interpretāciju [7].
- Ilgtermiņa droguma un klīnisko rezultātu dati cilvēkiem joprojām ir ievērojami ierobežotāki nekā īstermiņa biomarkeru pētījumi, jo īpaši, ja NAD+ prekursori tiek lietoti gadiem ilgi, nevis nedēļām vai mēnešiem.
Atruna
Rakstam ir tikai izglītojošs un zinātniskos pētījumus apkopojošs raksturs. Tas nav uzskatāms par medicīnisku padomu cilvēkiem vai veterināru padomu dzīvniekiem.
NAD+, NAD+ prekursori, badada, kaloriju ierobežošana, resveratrols, pterostilbēns, metformīns, rapamicīns vai citi savienojumi, kas tiek apspriesti ilgmūžības kontekstā, nav jāuztver kā pārbaudītas novecošanās inversijas, cilvēka mūža pagarināšanas, slimību profilakses vai ārstēšanas metodes, ja vien nepastāv konkrēta apstiprināta indikācija un atbilstoši klīniskie pierādījumi.
NAD+ un tā prekursori nebūtu jāpasniedz kā FDA vai EMA apstiprinātas novecošanas ārstēšanas metodes vai kā terapijas, kurām ir pierādīts cilvēka mūža pagarinājums.
Gavēnis un kaloriju ierobežošana nav piemēroti ikvienam, un dažiem cilvēkiem tie var radīt papildu riskus. Grūtniecēm vai sievietēm, kas baro bērnu ar krūti, cilvēkiem ar cukura diabētu, tiem, kas lieto glikozes līmeni pazeminošus medikamentus, kuriem ir ēšanas traucējumi anamnēzē, nepietiekams svars, noteiktas hroniskas slimības vai kuri lieto zāles, kuru iedarbība ir atkarīga no pārtikas uzņemšanas, vajadzētu pārrunāt gavēni vai būtisku kaloriju ierobežošanu ar kvalificētu veselības aprūpes speciālistu.
Pirms jauna uztura bagātinātāja, gavēņa plāna, medikamenta vai citas iejaukšanās, kas ietekmē novecošanās procesus, lietošanas uzsākšanas jākonsultējas ar kvalificētu veselības aprūpes speciālistu. Jautājumi par mājdzīvniekiem jāapspriež ar kvalificētu veterinārārstu.
Atsauces
[1] Covarrubias, A. J., Perrone, R., Grozio, A., & Verdin, E. (2021). NAD+ metabolism and its roles in cellular processes during ageing. *Nature Reviews Molecular Cell Biology*, 22(2), 119–141. https://doi.org/10.1038/s41580-020-00313-x
[2] Camacho-Pereira, J., Tarragó, M. G., Chini, C. C. S., Nin, V., Escande, C., Warner, G. M., Puranik, A. S., Schoon, R. A., Reid, J. M., Galina, A., & Chini, E. N. (2016). CD38 dictates age-related NAD decline and mitochondrial dysfunction through a SIRT3-dependent mechanism. *Cell Metabolism*, 23(6), 1127–1139. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2016.05.006
[3] Zhang, H., Ryu, D., Wu, Y., Gariani, K., Wang, X., Luan, P., D’Amico, D., Ropelle, E. R., Lutolf, M. P., Aebersold, R., Schoonjans, K., Menzies, K. J., & Auwerx, J. (2016). NAD+ repletion improves mitochondrial and stem cell function and enhances life span in mice. *Science*, 352(6292), 1436–1443. https://doi.org/10.1126/science.aaf2693
[4] Brakedal, B., Dölle, C., Riemer, F., Ma, Y., Nido, G. S., Skeie, G. O., Craven, A. R., Schwarzlmüller, T., Brekke, N., Diab, J., Sverkeli, L., Skjeie, V., Varhaug, K., Tysnes, O.-B., Peng, S., Haugarvoll, K., Ziegler, M., Grüner, R., Eidelberg, D., & Tzoulis, C. (2022). Pētījums NADPARK: nicotinamide riboside piedevas randomizēts I fāzes klīniskais pētījums Parkinsona slimības gadījumā. *Cell Metabolism*, 34(3), 396–407.e6. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2022.02.001
[5] Dellinger, R. W., Santos, S. R., Morris, M., Evans, M., Alminana, D., Guarente, L., & Marcotulli, E. (2017). Repeat dose NRPT (nicotinamide riboside and pterostilbene) increases NAD+ levels in humans safely and sustainably: A randomized, double-blind, placebo-controlled study. *npj Aging and Mechanisms of Disease*, 3, 17. https://doi.org/10.1038/s41514-017-0016-9
[6] Yi, L., Maier, A. B., Tao, R., Lin, Z., Vaidya, A., Pendse, S., Thasma, S., Andhalkar, N., Avhad, G., & Kumbhar, V. (2022). The efficacy and safety of β-nicotinamide mononucleotide (NMN) supplementation in healthy middle-aged adults: A randomized, multicenter, double-blind, placebo-controlled, parallel-group, dose-dependent clinical trial. *GeroScience*, 45, 29–43. https://doi.org/10.1007/s11357-022-00705-1
[7] Simon, K. E., Russell, K., Mondino, A., Yang, C.-C., Case, B. C., Anderson, Z., Whitley, C., Griffith, E., Gruen, M. E., & Olby, N. J. (2024). A randomized, controlled clinical trial demonstrates improved owner-assessed cognitive function in senior dogs receiving a senolytic and NAD+ precursor combination. *Scientific Reports*, 14, 12399. https://doi.org/10.1038/s41598-024-63031-w